理化生实验复习课件

1、实验与探究 第1页，共46页。考试说明对实验与探究能力的要求（1）能独立完成“生物知识内容表”所列的生物实验，包括理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，并能综合运用这些实验涉及的方法和技能。（2）具备验证简单生物学事实的能力，并能对实验现象和结果进行解释、分析和处理。（3）具有对一些生物学问题进行初步探究的能力，包括运用观察、实验与调查，假说演绎、建立模型与系统分析等科学研究方法。（4）能对一些简单的实验方案做出恰当的评价和修订。第2页，共46页。一、课本中的实验每一个实验的目的、原理、方法和步骤了如指掌。并能够应用相关的原理，对其他实验进行设计和拓展。第3页，共46页。考纲

2、要求的实验（1）观察DNA和RNA在细胞中的分布（2）检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白质 （3）用显微镜观察多种多样的细胞 （4）用高倍镜观察线粒体和叶绿体 （5）通过模拟实验探究膜的透性 （6）观察植物细胞的质壁分离和复原 （7）探究影响酶活性的因素 （8）叶绿体色素的提取和分离 （9）探究酵母菌的呼吸方式 必修1选修1：（20）DNA的粗提取与鉴定第4页，共46页。网 络 构 建第5页，共46页。第一类：显微镜观察类实验（7个）用显微镜观察多种多样的细胞（1-P7）观察DNA、RNA在细胞中的分布（1-P26)观察线粒体和叶绿体(1-P47)观察植物细胞的质壁分离和复原(1-P61)第6

3、页，共46页。镜筒压片夹载物台遮光器与光圈反光镜镜座镜柱镜臂细准焦螺旋粗准焦螺旋物镜目镜显微镜的结构：（一）使用高倍显微镜观察几种细胞（1-P7）第7页，共46页。显微镜的使用2、取镜安放3、对光4、放置玻片标本5、观察6、高倍显微镜的使用1、显微镜的构造（1）使用顺序：先低倍后高倍（2）放大倍数：（3）目镜、物镜镜头长度与放大倍数关系：（4）成像特点：低倍镜/高倍镜 （5）物象移动方向与装片移动方向关系（包括顺逆时针问题）（6）视野光线亮度的调整与切片颜色、厚度的关系（7）污染物位置的判断若在低倍镜下看不到细胞，不可改用高倍物镜继续观察。第8页，共46页。注意：1）正确使用低倍镜：取镜对光安

4、放装片下降镜筒调焦。下降镜筒时，必须双眼注视物镜和装片的距离，以免压坏装片和碰坏物镜。2）正确使用高倍镜：将低倍镜下看到的物像移到视野中央转动转换器，换用高倍物镜调整光圈和反光镜，使视野亮度适宜调节细准焦螺旋，直至物像清晰。第9页，共46页。（二）观察DNA 、RNA在细胞中的分布(1-p26)实验原理：染色剂染色颜色 主要存在部位 DNA RNA吡罗红甲基绿红色绿色主要在细胞核，线粒体、叶绿体含少量主要在细胞质甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同。第10页，共46页。取口腔上皮细胞制片(将载玻片烘干） 水解 冲洗涂片 染色 观察（先低倍镜再高倍镜/选择染色均匀、色泽浅的区域）

5、方法步骤（8%的HCl，_）人口腔上皮细胞DNA、RNA分布洋葱鳞片叶内表皮细胞DNA、RNA分布（蒸馏水）（0.9%的NaCl）能改变细胞膜的通透性，同时使DNA与蛋白质分离第11页，共46页。（三）观察线粒体和叶绿体(1-p7)一、实验原理 1.高等绿色植物的叶绿体存在于细胞质基质中，叶绿体一般是 色的，扁平的 形或 形，可以用高倍显微镜观察它的形态和分布。 2._染液是专一性的染线粒体的_染料。可以使活细胞的线粒体呈现 色，而细胞质几乎为无色。绿蓝绿球椭球健那绿活细胞第12页，共46页。二、方法步骤与注意事项 观察叶绿体装片：取材：（叶片薄且叶绿体大，数目少）制片：载玻片中央滴一滴清水，

6、将叶片放入，加上盖玻片，制成临时装片（临时装片随时保持有水状态）观察：先 倍镜找到叶片细胞后高倍镜观察叶绿体（形态和分布）（光强度的变化与叶绿体的位置关系）绘图：用铅笔画一个叶绿体形态和分布情况清楚的叶肉细胞_或_或_低藓类小叶黑藻叶波菜叶稍带叶肉的下表皮 第13页，共46页。黑藻细胞的叶绿体第14页，共46页。 1、原理：细胞液浓度细胞外溶液浓度时，细胞吸水； 细胞液浓度细胞外溶液浓度时，细胞失水 细胞壁与原生质层的伸缩能力不同。 2、条件：细胞内外溶液 3、材料：紫色_ （具紫色大液泡）， 质量浓度0.3g/mL的蔗糖溶液（糖液浓度不能过高），清水等。 4、步骤：制片观察盖玻片一側滴蔗糖溶

7、液,另一側用吸水纸吸引观察（液泡由_） 盖玻片一側滴清水, 另一側用吸水纸吸引观察（质壁分离复原） 5、结论：（略） 6、应用：可以用于测定细胞液的浓度 可以用于判断细胞的死活 (四）观察植物细胞的质壁分离与复原(1-P61) _浓度差，活细胞，大液泡洋葱鳞片叶外表皮细胞大到小,颜色由浅变深,原生质层与细胞壁分离第15页，共46页。细胞 清水蔗糖溶液（液泡）渗入渗出（低浓度）（高浓度）细胞液（较高浓度）观察植物的质壁分离与复原1第16页，共46页。正常细胞初始质壁分离显著质壁分离观察植物的质壁分离与复原2第17页，共46页。考点1 观察类实验1.实验归类实验名称细胞的状态染色剂生物材料观察DN

8、A、RNA在细胞中的分布死细胞甲基绿吡罗红人的口腔上皮细胞观察线粒体活细胞健那绿观察多种多样的细胞活或死细胞无(无需染色)酵母菌细胞、水绵细胞、叶的保卫细胞、鱼的红细胞等观察叶绿体活细胞藓类的叶(或菠菜叶、黑藻叶)观察植物细胞的质壁分离与复原活细胞紫色洋葱鳞片叶表皮细胞第18页，共46页。2显微镜相关的知识 (1)观察：高倍镜使用要诀先低后高，找移转调说明：(1)以上实验除了“观察植物细胞的质壁分离与复原”使用低倍镜即可外，其余均需使用高倍镜。(2)鉴定类实验中的“脂肪的切片法鉴定”、探究性实验中的“培养液中酵母菌种群数量的动态变化”都需用显微镜观察。第19页，共46页。(2)放大倍数与镜头长

9、度及细胞数目的关系归纳物像放大倍数目镜的放大倍数物镜的放大倍数。目镜越短，放大倍数越大；物镜越短，放大倍数越小，与玻片距离越远。低倍镜下视野中：细胞数多、细胞体积小、视野明亮。高倍镜下视野中：细胞数少、细胞体积大、视野较暗。放大倍数的变化与视野中的细胞数量变化的关系：第一种情况：一行细胞数量的变化，可根据放大倍数与视野成反比的规律计算。第二种情况：圆形视野范围内细胞数量的变化，可根据看到的实物范围与放大倍数的平方成反比的规律计算。第20页，共46页。注意取材问题(1)观察DNA、RNA在细胞中的分布不能选用哺乳动物成熟的红细胞(无细胞核，也就几乎不含DNA、RNA)；(2)不能用观察叶绿体的材

10、料来观察线粒体(叶绿体中的色素颜色会掩盖健那绿染色后的颜色变化)；(3)观察叶绿体时，若选用菠菜叶则取稍带些叶肉的下表皮(靠近下表皮的叶肉细胞中的叶绿体较大而数目较少)；(4)观察植物细胞的质壁分离与复原应选取成熟的植物细胞(含有大的液泡)。第21页，共46页。第二类：物质的分离、（粗）提取及鉴定实验(3个）检测生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质(1-p18)叶绿体色素的提取和分离(1-p97)DNA的粗提取与鉴定（选1-p54)第22页，共46页。实验原理某些化学试剂能使生物组织中的有机物产生特定的颜色反应鉴定成分还原糖脂肪蛋白质实验材料苹果、梨花生种子豆浆或蛋清实验药品0.1g/mLNaOH,

11、0.05g/mLCuSO4苏丹染液0.1g/mLNaOH,0.01g/mLCuSO4实验现象实验步骤制备样液斐林试剂 观察（淡蓝色 棕色砖红色）徒手切片苏丹染色制作装片显微镜观察制备样液双缩尿A试剂 双缩尿B试剂 振荡观察(八)检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质（1-p18)斐林试剂苏丹染液双缩脲试剂砖红色（Cu2O）橘黄色紫色水浴加热50%酒精去浮色第23页，共46页。生物组织中脂肪的鉴定第24页，共46页。实验原理1.提取：叶绿体中色素溶解于_中2.分离：色素在_中的溶解度不同实验材料新鲜的绿色叶片实验药品无水乙醇：二氧化硅：碳酸钙：层析液：实验步骤1.取材 2.研磨3.制备滤液 4.准备

12、滤纸5.画滤液细线 6.层析色素观察7.分离的色素 实验结果滤纸条从上到下： (九)叶绿体色素的提取和分离(1-p97)无水乙醇层析液分离色素防止叶绿素被破坏溶解色素研磨充分橙黄色黄色蓝绿色黄绿色第25页，共46页。捕获光能的色素类胡萝卜素叶绿素胡萝卜素叶黄素叶绿素a叶绿素b(占1/4)(占3/4)第26页，共46页。胡萝卜 素叶绿素b叶绿素a叶黄素第27页，共46页。实验原理1.NaCl溶液浓度为0.14mol/L时，DNA溶解度最低，可使DNA析出2.DNA不溶于酒精，可用于提取DNA；3.DNA遇二苯胺(沸水浴)能被染成蓝色以鉴定DNA 实验材料鸡血细胞、蛙血细胞实验药品0.1g/ml的

13、柠檬酸钠、95%的酒精、2mol/L的NaCl、二苯胺实验现象实验步骤1.制备鸡血细胞液2.提取血细胞的核物质3.溶解DNA4.析出DNA5.提纯DNA6.再溶解DNA2mol/LNaCl溶液7.鉴定DNA 实验：DNA的粗提取与鉴定（选1-p54)DNA遇二苯胺沸水浴呈蓝色柠檬酸钠蒸馏水2mol/LNaCl溶液0.14mol/LNaCl溶液95酒精二苯胺加热鉴定第28页，共46页。注意问题(1)有关蛋白质的鉴定若用蛋清进行蛋白质鉴定时，需将鸡蛋清用水稀释，通常是0.5 mL蛋白液加入5 mL水，搅拌均匀。如果蛋白液稀释程度不够，与双缩脲试剂发生反应后会粘固在试管的内壁上，使反应不容易彻底，并

14、且试管也不容易刷洗干净。鉴定蛋白质时，向样液中加入2 mL双缩脲试剂A摇匀，再向样液中加入34滴双缩脲试剂B摇匀。其中双缩脲试剂B不能过量，因为过量的双缩脲试剂B会与试剂A反应，使溶液呈蓝色，从而掩盖生成的紫色。第29页，共46页。(2)叶绿体中色素的提取和分离区分色素提取和分离的原理：色素提取的原理无水乙醇提取法；色素分离的原理纸层析法。注意事项：a.滤液细线要画得细且直，以防止色素带重叠而影响分离效果；待滤液干燥后要再画一两次，目的是积累更多的色素，使分离后的色素带明显。b.分离色素时，层析液不能没及滤液细线，以防止色素溶解于层析液中而无法分离。第30页，共46页。第三类实验：探究类实验（

15、7个）通过模拟实验探究膜的透性探究影响酶活性的因素（1-p83)探究酵母菌的呼吸方式（1-p91)第31页，共46页。 （十一）通过模拟实验探究膜的透性结果及分析 A烧杯中的蒸馏水变蓝色，说明长颈漏斗中的铜离子可通过玻璃纸进入烧杯内的蒸馏水中。B漏斗中的液面上升 (上升或下降或不变), B烧杯中的蒸馏水没有变红，说明水可以通过玻璃纸向漏斗内扩散，而漏斗中的蔗糖和红墨水的染料分子不能透过玻璃纸。第32页，共46页。实验原理2H2O2 O2 +2H2O，生物体内的过氧化氢酶能催化这一分解过程实验材料药品动物的新鲜的肝脏、3% H2O2溶液、3.5%FeCl3溶液实验步骤和现象3% H2O2溶液+3

16、.5%FeCl3溶液气泡小、产生的速度慢3% H2O2溶液+新鲜的肝脏提取液气泡大、产生的速度快实验结论酶具有高效性1、比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率（十二）探究影响酶活性的因素（高效性、专一性、温度、pH）第33页，共46页。实验原理淀粉、蔗糖是非还原性糖斐林试剂可检验可原性糖淀粉酶能将淀粉水解成还原性糖实验材料药品2%的新鲜淀粉酶溶液、3%淀粉溶液、3%蔗糖溶液、斐林试剂(碘液)实验步骤和现象3%淀粉溶液+2%的新鲜淀粉酶溶液+斐林试剂(碘液) 砖红色沉淀（不变蓝）3%蔗糖溶液+2%的新鲜淀粉酶溶液+斐林试剂无砖红色沉淀3%淀粉溶液蔗糖酶溶液碘液变蓝实验结论酶具有专一性2、探索淀粉酶对

17、淀粉和蔗糖的作用第34页，共46页。实验原理淀粉遇碘后形成蓝紫色复合物实验材料药品2%新鲜淀粉酶溶液、3%淀粉溶液、碘液、热水、冰块实验步骤和现象淀粉液（支）和淀粉酶溶液（支）分别在三个不同温度下保温混合相同温度下的淀粉液与淀粉酶溶液维持各自的温度5分钟（3支混合溶液试管）3支混合溶液试管中分别加入12滴碘液摇匀，观察颜色蓝紫色的现象实验结论酶的催化活性受温度的影响3、温度或pH对酶活性的影响第35页，共46页。1.实验原理（1）酵母菌是单细胞真菌属于兼性厌氧菌。（2） CO2的检测 CO2使澄清石灰水变浑浊 CO2使溴麝香草酚蓝(BTB)水溶液由蓝变绿再变黄（3）酒精的检测 橙色的重酪酸钾溶

18、液在酸性条件下与酒精发生反应，变成灰绿色。（十三）探究酵母菌的呼吸方式(1-p91)第36页，共46页。（十三）探究酵母菌的呼吸方式(1-p91)2.实验过程第37页，共46页。实验名称自变量因变量无关变量通过模拟实验探究膜的透性半透膜两侧溶液的浓度差漏斗玻璃管液面的上升高度半透膜的种类、开始时的液面、温度等条件探究温度对淀粉酶活性的影响不同温度(至少三种)酶的活性(加碘液后溶液颜色的变化)pH、底物量、酶量、试管的洁净程度、反应时间、操作程序等探究pH对过氧化氢酶活性的影响不同pH(至少三种)酶的活性(气泡的数量或带火星的卫生香燃烧的猛烈程度)温度、底物量、酶量、试管的洁净程度、反应时间、操

19、作程序等探究酵母菌的呼吸方式氧气的有无CO2生成量(澄清石灰水的混浊程度等)；酒精的产生(重铬酸钾检测)葡萄糖溶液、石灰水的量、温度、pH、锥形瓶的洁净程度、连接导管的大小等考点3探究类实验第38页，共46页。注意问题(1)探究温度(pH)对酶活性的影响时，必须在达到预设的温度(pH)的条件下，再让反应底物与酶接触，避免在未达到预设的温度(pH)时反应底物已与酶接触发生反应，影响实验结果。(2)探究酵母菌的呼吸方式时：新配制的质量分数为5%的葡萄糖溶液先加热煮沸(杀死里面的微生物、除去溶液中的氧气)，等冷却(防止高温杀死酵母菌)后再将食用酵母菌加入；酵母菌培养液应封口放置一段时间后，待酵母菌将

20、瓶内的氧气消耗完，再连通盛有澄清石灰水的锥形瓶，以保证检测到的一定是酵母菌无氧呼吸产生的CO2使澄清的石灰水变混浊。第39页，共46页。1)明确实验目的和实验原理2)分析实验用具与材料用途并进行预处理3)遵循单因素变量原则、对照原则和等量原则、平行重复原则等4)实验步骤一般可三步走： 第一，将材料和器具编号分组； 第二，进行实验，即实验组和对照组的设置； 第三，观察并记录结果指标5)全面预期实验结果：一般来说，验证性的实验，结论就只有一个；探究性实验，则要将可能的预期都列出来。6)语言表述要简明、准确，一般宜采用分段叙述的方式，有时也可以用图表加以说明，尽可能让人一目了然。4 、实验设计题的解题策略第40页，共46页。归纳总结一：曲线图的绘制（定量曲线）（1）建标