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文档简介
1、课题1 大肠杆菌的培养与分离第一部分 微生物的利用课题背景如何保持培养物纯净呢?资料: 19世纪中期,关系到法国经济命脉的酿造业曾一度遭受毁灭性的打击。在生产过程中,出现了葡萄酒变酸、变味的怪事。经过一番研究,法国科学家巴斯德发现,导致生产失败的根源在于发酵物中混入了杂菌。由此人们认识到保持培养物纯净的重要性。杀菌:杀死内外所有微生物,包括芽孢和孢子高压蒸汽灭菌:121 100KPa 15-30min(培养基)合成培养基:分离、鉴定微生物经过一番研究,法国科学家巴斯德发现,导致生产失败的根源在于发酵物中混入了杂菌。固体培养基:微生物的分离、鉴定、计数结晶紫中性红胆盐琼脂固体培养基:微生物的分离
2、、鉴定、计数课题1 大肠杆菌的培养与分离月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤固体培养基:微生物的分离、鉴定、计数接种针灼烧灭菌 平板划线倒平板时应在酒精灯附近操作将培养皿倒置放在培养箱内,于36培养24h。结晶紫中性红胆盐琼脂为什么培养皿在培养箱内要倒置呢?H2O 定溶1000 mL资料卡无菌技术:1.消毒与杀菌 消毒:消除表面或内部的部分微生物 杀菌:杀死内外所有微生物,包括芽孢和孢子2.常用方法巴氏消毒法:牛奶化学药剂:双手、水源灼烧灭菌:接种环等(金属)干热灭菌:160-170 1-2h (玻璃器皿、金属)高压蒸汽灭菌:121 100KPa 15-30min(培养基)紫外线消毒法:30min(空气中
3、的微生物)酒精灯火焰附近操作;超净工作台上操作。接种针灼烧灭菌 平板划线回忆有关细胞的元素组成、分子组成的知识,想一想微生物应该生活在什么环境中呢?(1)你能归纳培养基的配制流程吗?如何保持培养物纯净呢?H2O 定溶1000 mL第一部分 微生物的利用经过一番研究,法国科学家巴斯德发现,导致生产失败的根源在于发酵物中混入了杂菌。半固体培养基:观察微生物运动经过一番研究,法国科学家巴斯德发现,导致生产失败的根源在于发酵物中混入了杂菌。液体培养基:菌种培养或工业生产(1)每四人一组,每组均需完成两种方法;紫外线消毒法:30min(空气中的微生物)半固体培养基:观察微生物运动1ml 与生长有关平板划
4、线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌(2)组内成员可任选一种分离方法。温故知新 回忆有关细胞的元素组成、分子组成的知识,想一想微生物应该生活在什么环境中呢?培养基组成葡萄糖 10g蛋白质 5gNaCl 15gH2O 定溶1000 mL主要营养物质 碳源 氮源 无机盐氢元素、氧元素 维生素 0.1ml 与生长有关大肠杆菌的分离纯化新课探讨阅读教材P16-17,回答问题:(1)你能归纳培养基的配制流程吗?(2)配置培养基是应该注意什么?结晶紫中性红胆盐琼脂配制培养基的过程:计算 称量 溶化(溶解)灭菌倒平板注意:1.培养基冷却至50左右倒平板2.倒平板时应在酒精灯附近操作资料卡培养基的分类:1.物理性
5、质 液体培养基:菌种培养或工业生产 半固体培养基:观察微生物运动 固体培养基:微生物的分离、鉴定、计数 2.组成成分 合成培养基:分离、鉴定微生物 天然培养基:生产3.用途: 选择培养基:缺某种物质或多加某种物质 鉴别培养基:加指示剂或化学药品资料卡月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LST)资料卡配置培养基:溶化(溶解) 分装资料卡倒平板:资料卡倒平板:资料卡接种:接种针灼烧灭菌 平板划线资料卡大肠杆菌的纯化方法:稀释涂布平板法 平板划线法大肠杆菌的分离纯化学生活动1.平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌要求: (1)每四人一组,每组均需完成两种方法; (2)组内成员可任选一种分离方法。2.培养 将培养皿倒置放在培养箱内,于36培养24h。结晶紫中性红胆盐琼脂课题1 大肠杆菌的培养与分离作业布置思考: 1.为什么
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