肿瘤分子生物学2课件

1、1存在于细胞内有自主增殖能力的遗传单位。 编码有生物学功能的多肽或RNA序列的核酸序列（一般是DNA序列）。包括DNA编码区和多种调节“元件”。2 癌基因：简单讲所有被引进正常细胞后能使其转化为肿瘤的基因。 肿瘤抑制基因：突变或缺失而功能失活后使正常细胞 转化为肿瘤的基因。 调整基因：这是一种能控制肿瘤细胞在体内扩散的基因，其作用方式是阻止恶性细胞的转移、入侵正常组织，或削弱恶性细胞抗拒免疫系统的能力。3历史： 1911年Peyton Rous，从鸡发现Rous肉瘤病毒(RSV)。 RSV属逆转录病毒（RNA病毒）。含病毒基因V-src。基因组中含有原癌基因： 1983年发现V-sis存在于猿

2、猴肉瘤病毒SSV中的癌基因，它 的产物和人的一个正常基因PDGF相似。 SSV(无转化能力) “劫持”PDGF基因 感染宿主细胞 改头换面的PDGF大量表达 细胞不断生长4致癌因素： 病毒 化学 物理DNA转染：证明非病毒引起的肿瘤也含有癌基因。 如：ras什么是癌基因（oncogene）： 人类基因组中存在着一类能促进细胞分裂并有潜在致癌作用的基因称为原癌基因(proto-oncogenes)。某些原癌基因在环境因子的作用下，发生突变、DNA重排、促进子插入、DNA扩增或调控序列的改变而被激活成为癌基因。5Transformed Cells or Tumor TissueHigh Molec

3、ular Weight DNACalcium Phosphate-DNA PrecipitateNormal Cells2ad Cycle2nd CycleHybridization to Human Repeat SequencesFocltumor6、原癌基因Protooncogenes必要条件： 1与细胞生长有关 可促进生长 2潜在致癌性特定条件下： 原癌基因Proto-Oncogene 化学致癌物、病毒、放射线等 突变Mutation “激活”Activation 重排Rearrangement 过量表达Over-expression 癌基因Oncogene 扩增Amplificati

4、on 3个体生长、发育所必需 “看家基因”House Keeper Genes 进化上高度保守性 4仅在特定组织中具有潜在的致癌性 促进生长的功能 7原 癌 基 因基 因高表达 （1）异常表达（2）abl妊娠中期胚胎、睪丸、脾、胸腺慢性髓细胞白血病erbA erbB胚胎鳞细胞癌、胶质母细胞瘤fes骨髓髓性、淋巴性白血病fms巨噬细胞、胎盘乳腺癌、肾癌fos羊膜、绒毛膜、成熟巨噬细胞、GF刺激后的细胞绒毛膜癌mos睪丸、卵细胞浆细胞瘤myb卵黄囊、骨髓、胸腺髓性、淋巴性白血病myc普遍存在B细胞淋巴瘤、早幼粒白血病raf 普遍存在多种肿瘤ras普遍存在多种肿瘤rel脾脏ros肾脏sis血小板骨肉

5、瘤ski软骨、肌肉、皮肤src脾脏、巨噬细胞、大脑脑肿瘤yes肾脏（1）大多数研究使用实验动物，主要小鼠。 （2）实验材料为人体肿瘤或肿瘤细胞系。8二、原癌基因活化的几种主要机制1逆转录病毒转导Transduction via retrovirusesLTRLTRLTRLTRLTRLTRViral RNAPackagingOf rotrovirusgog pol envgag pol env gog pol envProtooncogene “captured”from host cell genomeReplication DefectionRetrovirus without oncoge

6、neReplication CompotontA92控制元件插入Controling element insertion CBLTRCellular proto-oncogenehost DNAtranscriptionLTRLTRtranscriptiontranscriotionCellular proto-oncogenehost DNAEnhancereffect逆转录病毒感染细胞后，病毒DNA插入宿主细胞染色体DNA（插入突变）103点突变Point mutation 典型实例ras癌基因：p21 ras密码子12，61是突变“热点”。 膀胱癌、肺癌、乳腺癌和神经母细胞瘤 甲状腺癌R

7、ET基因突变RET mutation 综合症 1 1114Ecto Tm Cyto 错义（e.g. codon 609） MEN2A/FMTC错义（e.g. codon 918） MEN2B无义缺失、框架移动 Hirschsprung病错义(e.g. codon 620) Hirschsprung病 及/或 MEN2A114染色体移位Chromosomal translocation 不同染色体的一部分合并，造成基因重排、表达增加。 Burkitt淋巴瘤：chromosome 8q(c-myc) 14.2.22 c-myc 活化 慢性髓细胞性白血病(CML)：chromosome 9大部位(c

8、-abl) chromosom22一段，c-abl基因活化q349535322q11.2ablder 9Phabl9q3422q11.222q11.29q34Der (22)DNA RNA Protein12 5基因扩增 染色体一定区域DNA的许多次复制造成大量拷贝 (1) 均匀染色区(Homogeneously staining region, HSR)：被复制的DNA 串联排列在染色体的同一位置。 (2) 双微染色体(Double minute chromosomes)：被复制的DNA呈细小 成对的染色体样结构。 在人的各种神经系统肿瘤的HSRs和双微体均发现N-myc基因。 Tumor

9、OncogeneAmplification Rcf.Small-cell lung cancer c-myc Up to 8OX 67 N-myc Up to 50X 66 L-myc Up to 20X 266Nenroblastomas N-myc Up to 250X 295Glioblastomas c-crbB1(EGFR) Up to 50X 296Mammary carcinoma c-crbB2(HER2) Up to 30X 71.72 c-myc Up to 50X 297 Cyclin D1 Up to 30X 20113 原癌基因种类甚多，它们表达产物的功能涉及细胞信号

10、传递系统的各个层次，根据产物的分类。I 生长因子sis PDGF int-2 FGF-3FGF-5int-1II 受体及非受体型酪氨酸蛋白激酶src膜相关、非受体型yes膜相关、非受体型LCK膜相关、非受体型abl膜相关、非受体型fgr/bcr非受体型ros膜相关受体erb B膜相关受体(EGF受体、膜外部分断裂)neu 膜相关受体(EGF受体相关)fms 膜相关受体(CSF-1受体、突变)met 膜相关受体(HGF受体相关)kit干细胞受体，部分断裂sea膜相关受体ret受体样，部分断裂III 模相关G蛋白H-ras模相关，GTP结合，GTPaso活性K-ras模相关，GTP结合，GTPas

11、o活性N-ras模相关，GTP结合，GTPaso活性gsp Gs 活化突变体gip Gs 活化突变体IV 受体：无蛋白激酶活性mas血管紧张素受体V 胞质丝氨酸苏氨酸蛋白激酶raf/milpim-lmos Cytostatic 因子cotAkt三、癌基因分类：14VI 胞质调控因子crk SH-2/SH 3VII 核反式调控因子mycN-mycL-mycmyblylp53 p53突变体(Dominant oncogenio)fos 与c-jun结合(AP1)jun 为AP1的一部分erb A v-erb A为癌基因 c-erb A为T3受体rel v-rel为癌基因 c-rel (与NF-1

12、b同源)ets 1/2vayskievi-1gli-1mafpbxhox-2, 4VIII 其他dbl 断裂的胞质细胞骨架蛋白bcl-2 膜信号传递15growth factorsGTPase proteinsguanine nucleotideExchange proteinscytoplasmicMembrane associatedTyrosine kinasesgrowth factorreceptorsnuclear transcription factorscytoplasmic serineThreonine kinases16四、基因产物的功能： 1细胞外：生长因子（GF） P

13、DGF (sis) TGF IGF II 2细胞膜： 膜外表面 TPK类GF受体 EGF R (erb B) erbB与EGF R高度同源 EGF R 受到磷酸化修饰的蛋白，具有酪氨酸激酶活性，无适当配体时产生连续增生信号。 CSF I R ( c-fms) IGF I R 其它GF受体 1718PTK(Proto-oncogene)Viral oncogene*(viral oncoprotein)Oncogenic alterationTumour/cancer types (only the most frequent,Mainly human types are described)E

14、GFR/ErbB1(c-erbB)V-erbB fromAEV (p68/74abB)V-erbB:Truncated EGFR PTKC-erb:Overexpression (amplification)Extracellular domain deletionsv-ErbB: fibrosarcomasc-ErbB: mammary carcinoma, glioblastoma multiforme,Cvarian, non-small-cell lung and lther cancersErbB2/HER2/NeuOverexpression (amplification)No r

15、ecurrent human mutations (Val664glu in rodents)Mammary, ovarian, gastric, non-small-cell lung and colon cancerErbB3/HER3Overexpression; constitutive tyrosine phosphoylation(heterodimer with ErbB2)Mammary carcinomaErbB4/HER4Overexpression Mammary carcinoma, granulasa cell tumoursIGF-1ROverexpression

16、(expression required for in vitro transformation by many oncogenes and DNA viruses)Cervical and other carcinomas, sarcomasPDGF-Overexpression (amplification)Glioma, glioblastoma, ovarian carcinomaPDGFR-Tel-PDGR- (t(5;12) translocation fusing Ets-like Tel with PDGFR- PTK domain)OverexpressionTel-PDGF

17、R-: chronic myelomonocytic leukaemiaPDGFR-: gliomaCSF-1R(c-fms)V-fms fromFesV (p170gag-fms)v-fms:Truncated CSF-1R PTK with mutant C-terminal tailConstitutively activec-fms:GOF point mutationsOverexpression v-fms: jeline sarcomasc-fims: acute and chronic myelomonocytic leukaemias, monocytic tumours,

18、malignant histiocytosis, endometrial cancer, gliomaKit/SCFR(c-kit)V-kit fromFeSV(p80gag-kit)v-kit:Truncated Kit/SCFR PTK with mutant C-terminal tailConstitutively activec-kit:GOF point mutations and small deletionsOverexpressionV-kit: feline fibrosarcomasC-kit: malignant gastrointestinal stromal tum

19、ours, acute myeloid leukaemias, myelodysplastic syndromes, mast-cell leukaemia/systemic mastocytosis, seminomas/dysgerminomas, small-cell lung cancer and other carcinomas1920膜内侧 TRK（非受体型） src族磷酸化蛋白质，Mr 60KD. 自身 其他蛋白质 类脂物 分子磷酸化 G蛋白ras族 Ha-ras, Ki-ras, N-ras ras GAP GTPase ras蛋白 腺苷环化酶调节物21actinCIP4DNA

20、FABDFERMkinaseKinase-likePHSH2SH3Actin-binding domainBtk motifCdc42-bindingCIP4 homology domainDNA-binging domainFocal adhosion-binding domainIntogcyin-binding domainPIK domainPscodo PIK domainPlockstrin homology domainSrc homology-2 domainSic homology-3 domainSH2kinaseSH3DNAactinSH2kinaseSH3FERMKin

21、ase-likekinasekinaseSH3SH3SH2kinasekinaseFERMFABDkinaseCIP4SH2SH3kinaseSH2SH3SH2kinaseSH2SH2kinasePHSRCABLJAKACKCSKFAKFESFRKTECSYKFGR,FYN,SRC,YES1,BLK,HCK,LCK,LYNBAL,ARGJAK1, JAK2, JAK3, TYK2ACK1, ACK2CSK, MATK/CTKFAK, FESFA, PYK2BRK,FRK, SRMSBMX,BTK,ITK,TEC,TXXSYK, ZAP7022PTK(Proto-oncogene)Viral o

22、ncogene*(viral oncoprotein)Oncogenic alterationTumour/cancer types (only the most frequent,Mainly human types are described)ROS(c-ros)v-ros fromavianUR2 SV(p68gag-ros)v-ros:Truncated Ros PTK domain. Constitutively activec-ros:OverexpressionRare truncations/point mutations?v-ros: avian fibrosarcomasC

23、-ros: glioblastomas, astrocytomasAlkNPM-Alk (t(2;5) nucleophosmin fused to Alk PTK domain)lg-Alk (t(2;22) lg fused to Alk PTK domain) Other sporadic fusions with tropomyosin, etc.Non-Hodgkin lymphomas, CD30+ and CD30- anaplastic large-cell lymphomaSrc(c-src)v-src fromRSV(pp60v-src)v-src:C-teminal tr

24、uncation and point mutations (increased kinase activity)c-src:C-terminal truncation (increased kinase activity)Overexpression and/or increased kinase activitypp60v-sre:avian sarcomasc-Src truncation: colon cancerc-Src overexpression: mammary and pancreatic cancers.neuroblastomas, othersAbl(c-abl)V-a

25、bl fromAbelson MLV(p160gag-abl)or fromP1-FeSVv-abl:N-terminal (SH3) truncation ot AblFusions: p190Bcr-Abl, (t(9;22)m-bcr); p210bct-Abl, (t(9;22) M-bcr); p230bcr-Abl, (t(9;22)-bcr). M-, m-and -bcr: 3 breakpoint cluster regions in BCR. The chimaeric mRNA usually starts with exon a2 of ABL, it never in

26、cludes exon 1a or 1b. Tel-Abl (t(12;22)N-terminal (H-L-Hregion of Tel fused with Abl exon 2ap160gag-abl: murine acute leukaemiasp190Bct-Abl: 50% of Ph+ acute lymphocytic leukaemias, rarely chronic myelomonocytic leukaemiasp210Bcr-Abl: chronic myeloid leukaemias, 30% of Ph+ acute lymphocytic leukaemi

27、asp230Bcr-Abl: some Ph+ chronic neutrophilic leukaemiasTel-Abl: rare cases of acute lymphocytic leukaemiasExamples of dominant protein-tyrosine kinase oncogenes23243细胞质： serine/threonine PK Akt c-Akt： Akt 8逆转录病毒转化癌基因的细胞同源物 c-Akt和PKB由同一个基因编码 Akt组成：中心激酶活性区，活化底物为丝氨酸苏氨酸， N端含pH domain，调节脂蛋白，蛋白蛋白 相互作用，C端疏

28、水区富含脯氨酸。PH Domain Kinase Domain TailcDNA全长2707bp 编码480氨基酸PH ( Pleckstrin Homology)25264细胞核 Transactivators反式活化因子 反式活化因子具有特异的DNA结合区 螺旋转角螺旋（HTH） 结合区特征 锌指（ZF） 亮氨酸拉链（LZ） 螺旋环螺旋（HLH） C-myc(N-myc,L-myc)：DNA结合区属：HLH(螺旋环螺旋)，同时有LZ 结构，myc蛋白与DNA结合需另一个反式因子形成 complex. C-myb：细胞周期依赖基因，G1期水平高。 C-fos：产物Fos，5560KD胞核磷蛋

29、白。 C-jun：产物Jun，39KD。 异二聚体AP1，多聚体型反式因子，经由LZ而与DNA结合(促进子/增强子)起正 调控作用。FosJunRB，p53反式因子，通过蛋白蛋白结合。27什么是抑癌基因： 抑癌基因有时也叫抗癌基因，是指一大类可以抑制细胞分裂。并有抑制癌变作用的基因。抑癌基因失活机制： Knudsons两次打击论 1. 二个等位基因中的一个缺失（LOH） 对癌易感的引起遗传综合症的基因突变 2. 另一个等位基因突变 如：RB-1 化学致癌物、病毒等引起体细胞中的基因突变 3. 基因5端CPG岛胞嘧啶（C-5）高度甲基化，抑制抑癌基因的转录抑癌基因存在的证据: (1) 1969年

30、细胞融合 (2) Rb-1基因的发现28mutMemutmutMeMeMeMeMutationMethylationFirsthitLOH MethylationLOH MethylationSecondhitSecondhitMutation Mutation Methylation Bialielic + + + + LOH methylation LOH methytaoon2930ACACACACTranscriptionMethylationMeMeCP2 bindingMeCP2MeCP2MeCP2MeCP2MeCP2MeCP2MeCP2MeCP2MeCP231Co-repress

31、or anddeacetylase bindingMeCP2MeCP2MeCP2MeCP2MeCP2MeCP2MeCP2MeCP2Co-Repressor DeacetylaseCo-Repressor DeacetylaseCo-Repressor DeacetylaseCo-Repressor DeacetylaseHistone deacetylation andChromatin compactionMeCP2MeCP2MeCP2Co-Repressor DeacetylaseCo-Repressor DeacetylaseMeCP2No transcriptionAcetylatio

32、nmethylation32Pathways of tumour-suppressor gene inactivationGeneTumour typeMechanisms of inactivationDocumentation of double hitsLOHMutationmethylationHomozygousdeletionMutation+ LOHMethylation + LOHMutation +methylationbiallelicnmethylationRB1retinoblastomayesyesyesrareyesyesyes?TP53commontumoursy

33、esyesnorareyesnononoVHLrenal cancersyesyesyesrareyesyesyes?CDKN2AHaematologic malignanciesyesnoyesyesyesyesyesyesCDKN2Bmelanoma and other tumoursyesyesyesyes?yesyesyesMLH1colorectal canceryesyesyes?yes?yesyesAPCcolorectal canceryesyesyes?yes?33细胞遗传学研究：确定癌患者组成性染色体改变DNA连锁分析：对有遗传生癌倾向的基因定位杂合性缺失（LOH)或等位基

34、因丢失所有这些策略都要用定点克隆方法，从染色体区段确定和分离肿瘤抑癌基因。341. 与细胞生长有关，可抑制细胞分裂。2. 潜在抑癌3. 特定条件下：化学致癌物、病毒等 失活： Mutation Deletion Protein产物病毒蛋白结合 其它4. 同属House Keeper 抑癌基因也有相对的组织特异性（个别除外）抗癌基因Antioncogenes351. 在该肿瘤的相应正常组织中表达2. 在该肿瘤中存在缺陷： DNA水平 mRNA表达 蛋白产物3. 导入该基因后，肿瘤细胞生长受抑（部分）正常细胞 增殖 分化 死亡 程序性死亡Programmed DeathApoptosis Gene

35、 抑癌基因抗Antiapoptosis Gene: 可能是癌基因凋亡基因Apoptosis gene36Cancer syndromeGenePrincipal TumorsProtein Product LocalizationMode of ActionRetinoblastomaRB1Retinoblastoma. OsteosarcomaNucleusTranscriptonal regulator/ factorLi-Fraumcnip53Sarcomas. breast and brain tumorsNucleusTranscripton factorFamilial adcno

36、matous polyposisAPCAdenomatous polyps. colon cancerCytoplasm?Regulates -catenin functionWilms tumorWT-1NephroblastomaNucleusTranseription factorNeuofibromatosis type 1NF-1Neurofibromas. sarcomas. GliomasCytoplasmp21ras-GTPase activatorFamilial melanoma and pancreatic cancerp16Melanoma, pancreatic ca

37、ncer. ?otherNucleusCyclin-dependent kinase inhibitorFamilial breast cancer BRCA1BRCA2Breast and ovarian cancerBreast and ?other?NucleusUnknownUnkownUnknownTumor Suppressor Genes Associated With a Cancer Syndrome37Presumed/Candidate Tumor Suppressor Genes not yet Associated with a Cancer SyndromeDPC4

38、Pancreatic, and some others, including colonCytoplasmTGF- signalingE-cadherinGastric, brcast, endometrial. Ovarian, othersTrans-membraneCell-cell, adhesion-cateninProstate. Lung, ?othersCytoplasm (juxta-membrane)Cytoskeletal linker protein DCCColorectal, brain, neuroblastoma. ?othersTrans-membrane?N

39、etrin receptorTGF-II RColorectal. ?othersTransmembrane Receptor for TGF- signaling38跨膜受体：PTCH基因 DCC基因胞浆调节或结构蛋白：NF1 PTEN APC NF2等转录因子或转录调节因子：p53 WT1 RB1 VHL等细胞周期因子：p16 p21 p15等DNA损伤修复蛋白：MSH2 MLH1 PMS2 ATM BRCA1 BRCA2等391跨膜受体Transmembrane receptors PTCH基因位置9q22.3，Hedgehog信号传递分子的跨膜受体。 原发肿瘤：基底细胞皮肤癌 DCC基

40、因(Deleted in Colorectal Carcimma gene)产物位于细胞胞膜与神经细胞粘附因子同源。 点突变 结肠癌中 LOH 70%结直肠癌, 5%腺瘤. mRNA表达下降或消失2胞浆内调节结构蛋白 NF1基因17q11.2，60Kb，mRNA11-13Kb产物2,485a.a.蛋白，其中350a.a.序列具有GTPase活性，对ras p21蛋白专一性作用。 原发肿瘤：神经纤维瘤 AML，脑瘤 NF2基因22q12.2产物功能：使胞膜蛋白与细胞骨架(Cytoskeleton)连接(?)，细胞骨架相关因子。 原发肿瘤：视神经癌 膜脊膜瘤 相关肿瘤：神经胶质母细胞瘤 室管膜瘤4

41、0PTEN ( phosphate and tension homology deleted on chromosome 10, PTEN) 又称为MMACI(mutated in multiple advanted cancer1) 和TEPI(TGF-regulated and epithelial cell-enriched phosphatase)PTEN：10q23.3 9个外显子 编码403个氨基酸 拮抗酪氨酸激酶、磷酸化酶活性而抑制肿瘤发生、发展。 使Ip3的第3位磷酸、去磷酸化抑制胰岛素诱导的磷酸肌醇 3激酶活性，Ip3是胰岛素调节细胞生长信号通路中的重要 的第二信使。PI 3

42、.4.5 P3 PI - 4.5 P2PTEN41等位基因缺失： 纯合性丢失：胶质母细胞瘤，前列腺癌等有15% 。 基因突变：缺失突变，错义突变，无义突变，mRNA剪接突变， 突变一般在等位基因杂合性缺失基础上发生。 胶质母细胞瘤、子宫膜癌：突变率可达30-40%。 前列腺细胞株：突变75100% 甲基化：前列腺癌，晚期明显。 (cwden病（CD），BZS(Bannayan-Zonana或Bannayan-Ruvalcabu) 80%存在LOH和基因突变。42APC基因- 5q21、60kb、蛋白产物Mr.300kD。功 能：调节细胞内-链蛋白（catenin）；微管结合。原发肿瘤：结直肠癌

43、。相关肿瘤：结直肠腺癌、十二指肠、胃癌、A. 正常细胞中APC调节-链蛋白水平。 B. 癌细胞中APC突变造成-cat累积， Tcf-4转录激活。核Fcf-4Target genes-catDSHAPCGSK3FrizzledWNTE-cad核Fcf-4Target genesFrizzledWNTDSHGSK3-cat-cat43E-cadherin 细胞-细胞粘附分子-catenin -链蛋白GSK3糖原合成酶激酶3Tcf-4 T细胞因子4WNT 侧翼蛋白（Wingless）Frizzled 卷发受体DSH 乱发蛋白（Dishevelled）Fcf-4Target enes-catDSHA

44、PCGSK3FrizzledWNTE-cad-cat癌细胞中-cat点突变抑制-cat蛋白磷酸化, 不能降解,造成Tcf-4靶基因活化443.转录因子或转录调节因子RB1基因-13q14.3,200kb,27exons,4.8kbmRNA。表达产物核蛋白110kD,磷酸化RB1蛋白110-112kD。DNA结合、反式活化因子 主要通过蛋白-蛋白结合形式磷酸化-去磷酸化 依赖细胞周期阶段和细胞分化阶段变化原发肿瘤：视网膜母细胞瘤（两个等位基因的缺失或失活）相关肿瘤：骨肉瘤、小细胞肺癌、乳腺癌、膀胱癌Cyclin Acdk2Cyclin Dcdk4Cyclin Ecdk2E2FPPPPPE2FRb

45、Rb+Ser780 Ser796 Thr373 Ser249/252Ser870/811G1 SRestriction PointDNASynthesisRB1-0 结合SV40TE1AHPV745位于11P13DNA： 50KD 编码3Kb，mRNA，245个氨基酸WTI产物：4个ZF结构抑 制： IGF II PDGF A链的转录作用有关肿瘤： Wilms tumor、WAGR综合症。 WTI蛋白与DNA特定序列结合，可抑制EGR1与DNA结合，即抑制EGR对转录的激活作用，从而抑制细胞生长。461. 17p2. 357aa MW53 KD3. 核内（Transactivator)调节细胞

46、周期，可与其它蛋白结合。4. 野生型：抑癌基因突变型 (1) 失活：显性抑制或显性阴性(Dominant Negative)，隐性癌基因 (recessive gene)。失活的产物与野生型产物结合抑制野生 型产物的功能。 (2) 显性致癌：少数突变型癌基因 一个等位基因的某种突变可致癌。 称：Dominant Oncogene 471. p53: 是一种TA，它可辩认一段特定DNA序列。P：嘌呤 Py：嘧啶 AT PPPC GPyPyPy TAp53: DNA-binding & cis-element ofMCK: Muscle creatione kinaseGADD45: Growth

47、 arrest DNA Damage Inducidle GeneMDM-2: Mouse Double Minute Oncogenic 30% soft part tumorsWAF 1(p21): Inactivated in brain, Lung intestinal cancer cell linesRBp53 p53蛋白中央核心区结合特定的DNA序列，N未端序列有转录活化的功能，C未端可使p53蛋白自身形成二聚体或四聚体。482. p53: 蛋白蛋白结合 MDM-2 MDM-2 p53 activity HPV E6 HBV X:3. p53通过DNA修复酶进行DNA修复或凋亡，

48、维持基因组可塑性和基因组稳定性。HBX / p53 1. HBX Binding with p53 Wt.249S, 273H but not p53 135Y 2.p53p53p53HBXNo transciription49p53HBXERCC3Transcription For DNA Repairp53ERCC3INACTIVATION of p53p53GeneMutationAllelic LossGerm Linemutationp53proteinCytoplasmicSequestrationCellularProteinMDM2 (p97)Tumor virusProtei

49、nSV40 T AgAd. EIBHPV. E6HBV XBindingBlock50IncreasedExpressionCell Cycle Arrestin G1ApoptosisDNA RepairCell divisionWUTANTp53Loss ofCell Cycle Arrestin G1GenomicInstabilityCell divisionWith AccumulatedDNA DAMAGEWILD TYPEp53Differentiation第一途径：p53直接作用于细胞周期51第二途径：p53调节p21p53p21CDK2p21CDK2CYCLIN DCYCLI

50、N EDNA SynthesisCell division p21: CDKs INHIBITOR Block CDK/cyclin actiyity Cell arrest at G1CDKs: CYCLIN DEPENDENT KINASESp53WAF1524. 细胞周期因子p16基因9p21，8.5Kb，3 exons， p16蛋白，MW 15.8KD 功 能： p16蛋白为细胞周期素依赖激酶CDK4及CDK6抑制物，通过结合CDK4或CDK6而抑制Cyclin D-CDK4/CDK6复合物，阻止细胞分裂、增生、突变型p16蛋白无此抑制活性，细胞分裂失控，导致癌变。主要几种Cyclin

51、-CDK细胞周期复合物Cell cycle stagecyclin-CDK complexesinhibiforsp15p16p18p21p27G1cyclinD-CDK4/CDK6G1 / ScyclinE-CDK2ScyclinA-CDK2G2 / McyclinB-CDK2535. DNA损伤修复Nucleotide Excision RepaiTwo Steps: 1. Damaged Base Removalr Glycosylaste糖基化酶 2. Excision of oligonucteotide (ss) carrying the lesion.Prokaryote ( 1

52、213nt )Eukaryote ( 2729nt )*+8 -5*+24 -554XP A: Damage recogniton Factor XPF/ERCC1 complex Binding to HSSB (RPC replication protein binting to lesion siteXP B:XP D: TF II H contain 8 svbunits Transcription Factor DNA Repair DNA Replication related TF II H unwound Helix XPG. XPF enter couplingXP FXP

53、GPCNARPCPOL Pol LigaseNuclease excision at 53(Proliferating Cell Nuclear Antigen)Catalyze removint the repairing enzyme.Fill the “gag” repairedHelicase Subunit of TF II H55HumanYeastXP FRAD 1XP:Xeroderma Pigmentosum着色性干皮病ERCC：(Excision Repair Cross Complementing gene)XP GRAD 2XP DRAD 3XP CRAD 4XP ARAD 10ERCC1RAD 14XP BRAD 25Exinuclease56Diseses Related to DNA RepairXPXeroderma PigmentosumCSCockayne SyndromeTTDTricho thiodysplasiaSkin cancer +Skin photo-sensitivity + Scaly S