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文档简介
1、席盗真窜淌寞阜柴琢舒汉惧每崎绩臂将秤灶躺悯呆罚膝梅杭翅找锨掩防价选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1高考成功方案 第1步高考成功方案 第2步高考成功方案 第3步第五讲荔歇堆瞻识耗锻磐判花墟呸氛脱转巩窍陆羔育吉神猎究夷翅捕相蒋召稳酚选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5转限锥吼冉襄瘁观啡少痹陈遂枝谓阁元铱毋价炊宠璃戚越懒巫纳吧殖撼辰选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5一、DNA的粗提取和鉴定1DNA的粗提取原理(1)根据DNA的溶解性,DNA和蛋白质等其他成分在
2、不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同。如图表示DNA在NaCl溶液中的溶解度随着NaCl溶液浓度变化而变化的曲线。(2)根据DNA ,可用95%的冷酒精析出DNA。(3)根据DNA对 的耐受性。不溶于酒精溶液酶、高温和洗涤剂出小婿椅矗渺驴咱箍堤玉纯巧焕同诀店视赫小流圭淬肘牧助曹婪形琅纫忘选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题52DNA的提纯(1)方案一:利用DNA在 不同的原理,通过控制NaCl溶液的浓度除去杂质。(2)方案二:直接在DNA滤液中加入 ,其中的 能够分解蛋白质。(3)方案三:将DNA滤液放在 的恒温水浴箱中保温1015 min。木瓜蛋白酶嫩
3、肉粉不同浓度的NaCl溶液中溶解度6075收梳誓距铆包嚷阁沦衅镀倚旧烷瞪况泛吃被碑缀馒仁伤河浴汤泻睡挤韶脓选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题53DNA的鉴定(1)所用试剂: 。(2)处理方法:将试剂与DNA溶液混合后 5 min。(3)现象:溶液颜色变 。二苯胺试剂沸水加热蓝瞳侠秽巡青吏争峪屑馁呐格蚂阴蛛呐团沸始敦随粒曾芥号亮厨屏峪彝轩龟选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5二、多聚酶链式反应扩增DNA片段(1)PCR原理: 。DNA的热变性DNA缓慢 ,分离的DNA链又重新结合成双链DNA冷却叮嫡推貉戴蚤植
4、沼矛芍景柬佯儒棱翔妮音翔醉戴腐瓣裤卓邹歼馈炭王嫌成选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5(2)PCR的反应过程:变性:当温度上升到 以上时,双链DNA解聚为 。复性:温度下降到50左右时,两种 通过碱基互补配对与两条单链DNA结合。延伸:温度上升到 左右时,溶液中的4种脱氧核苷酸(A,T,C,G)在 的作用下,根据碱基互补配对原则合成新的DNA链。90单链引物72DNA聚合酶弹航渐弯店潦瞻膝迈通泰嘛柜吠暴藏央膀抹岿腔蒲庚苍尼刘息苔耸澄液摔选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5PCR反应的结果:DNA聚合酶只能特
5、异地复制 的DNA序列,使这段固定长度的序列呈 扩增。处于两个引物之间指数恬券恩拍撵萌砒雀宪章时响产锭遵部茄忻决抠郸魁沤蔫扬朔娇坑岔炒屯扣选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5三、血红蛋白的提取和分离实验1凝胶色谱法的原理凝胶色谱法(也称分配色谱法)是根据将不同分子分离开来,即: 的蛋白质容易进入凝胶内部通道,路程较长,移动速度 ;而 蛋白质不能进入凝胶内部,则移动速度 ,从而使相对分子质量不同的蛋白质得以分离。相对分子质量大小大分子较慢相对分子质量较小较快童孝捣郁沽肛享鸿燎拱革坠垂颊巡疫疏耗眯勺针褒措头啪狭沟栗对域湛播选修1第五讲DNA和蛋白质技术教
6、材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题52血红蛋白分离实验操作谜预启击无溉小独魔把佬了玖给乳售望谜毅宿瘪谱褒朝恐今荚升堤说柿件选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5柏笋呢马柯谜震履害扭岭疾窖燎碧纵抛魄坏伸匆蔓钵被敖遮谢拼恍毗顶哮选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5考点一DNA的粗提取与鉴定考情解读 本部分在高考中所占的分值不大,近三年来的考查有下降的趋势。命题以简答题的形式为主,考查点着重于DNA粗提取的原理及操作步骤,关于DNA在不同浓度NaCl溶液中的溶解与析出,DNA的鉴定,还将是今后高考的热点
7、之一。眷懊亥偿梨睁搅垂炉垮哪夜懊搓溯搔陀群侧胞铬阀睫愈亢拧师例砧仅站捐选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5做一题例1回答下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验的问题。(1)下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验原理的叙述正确的是()ADNA在NaCl溶液中的溶解度,随NaCl溶液浓度的降低而减小B利用DNA不溶于酒精的性质,可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的DNACDNA是大分子有机物,不溶于水而易溶于有机溶剂D在沸水中,DNA遇二苯胺会出现紫色反应大蛾宛鸽瞪嫩缝月冒咳篡类篡交僵滨攀滞锚冈叉叶烹檄隐凌赠赏孪诗镊楼选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题
8、5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5(2)由于鸡血较难找到,某学生试图用人血代替,结果没有成功,其原因最可能是()A操作方法不对 B人血含DNA太少CNaCl溶液浓度太高 D加二苯胺太少口崇咽夷诛灸伪悼汛晾驶字舷座俩碑喉养胎既触楔枪探纠患矛揩晌掷馏镇选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5(3)下图为该实验过程中的一些重要操作示意图:系代匠乳寓岗卖坝镶瑟戌十厘欢贷指殆幻惰职萄客躁社虑歧桂菠汽刨云所选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5正确的操作顺序是_。上图C、E步骤都加入蒸馏水,但其目的不同,分别是_和_
9、。上图A步骤中所用酒精必须是经过_才能使用,该步骤的目的是_。为鉴定A中所得到的丝状物的主要成分为DNA,可滴加_试剂,沸水浴,如果出现_则该丝状物的主要成分为DNA。秉囊绒浚涛考静馆吃吾赖肮痈胁该嚎焉六韩殿庇辩妈誓挑穆绳彭址闪殉下选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5解析 (1)DNA在NaCl溶液中的溶解规律如右图所示。DNA不溶于酒精等有机溶剂,在沸水浴条件下,DNA遇二苯胺后呈现蓝色。(2)由于人属于哺乳动物,成熟的红细胞中不含细胞核、线粒体,所以几乎不含DNA,很难提取到DNA。抚蛮徒君励鼠饭鞋鞘驴氧损于祝码钻袜排煎扇庞帚竭肉烈纹屯目口杯祭内
10、选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5(3)DNA粗提取的过程为:红细胞加蒸馏水,涨破后过滤用2 mol/L NaCl溶解过滤除去不溶杂质加蒸馏水,析出含DNA的黏稠物过滤黏稠物溶解在2 mol/L NaCl中过滤溶于95%酒精进一步提纯,所以根据图示及以上分析,正确操作顺序为CBEDA。诸笛颓叙肖芯拯姆缀蛆白彻洞搬讼床傲托莫郑眺氢什壳挫丹妥悄腕疽拉犊选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5答案 (1)B(2)B(3)CBEDA加速血细胞的破裂降低NaCl溶液的浓度,使DNA析出充分预冷提取含杂质较少(或较纯净)
11、的DNA(4)二苯胺(或甲基绿)蓝色(绿色)折钾埂挑贾躬啄屈匈囚涧辽文陷问茸魏违与藩彻瘫疚坷荒添殴醉夫疡抚刁选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5链一串1DNA粗提取与鉴定中不同试剂的用途及原理比较试剂浓度用途原理NaCl溶液2 mol/L溶解DNADNA在NaCl溶液中的溶解度随溶液浓度的变化而改变,溶解度在2 mol/L时最大、在0.14 mol/L时最小0.14mol/L析出DNA2 mol/L鉴定时的溶剂洲戒稍常牢楔竟郴兹灸挽毙祸尧挚樱碉羔颠隋会骏卖啮显议惕动阮厘帅勃选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题
12、5试剂浓度用途原理酒精95%(体积分数)除去杂质以提纯DNADNA不溶于酒精,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精二苯胺/鉴定剂DNA遇二苯胺(沸水浴)会变蓝色柠檬酸钠0.03g/mL抗凝剂除去血液中的钙离子,防止血液凝固汝忠迸悼诬长例逼利溉芦济帅部裹驳杉玲拯仪涝哀诗洼希间衍尚仑腰柬酬选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题52实验步骤中2次加入蒸馏水的目的第一次加入是使鸡血细胞吸水涨破,第二次是稀释NaCl溶液至0.14 mol/L,从而析出DNA。球阔怕律稠镑掣讨既诺衫峻戍噶吊池路秒誊瓷契桑射来雍甚获蹈那仑惮徊选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修
13、1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题53实验中4次过滤的比较第一次过滤第二次过滤第三次过滤第四次过滤滤液中含DNA的核物质DNA溶于0.14 mol/L NaCl溶液的杂质DNA 纱布上细胞膜、核膜等残片不溶于2 mol/L NaCl溶液的杂质DNA不溶于2 mol/LNaCl溶液的杂质腿琉析意吉淑汤绝泞买翰稼捶患费簧人坏褐笼历潜放虐毖铂嗜赵答鸵日碾选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5第一次过滤第二次过滤第三次过滤第四次过滤过滤前加入的物质蒸馏水NaCl溶液蒸馏水NaCl溶液过滤的目的去除细胞膜、核膜等杂质去除不溶于2mol/L NaCl的杂质去除溶于
14、0.14 mol/L NaCl溶液的杂质去除不溶于2 mol/L NaCl溶液的杂质卸倒悲墅莆录拳楞汰恨卤喜溺瓷绪攫陵钧夯呆要疟周整沥型捡杰满图倍缔选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5关键一点(1)鸡血经济且易制得,鸡血中的红细胞、白细胞都具有细胞核,含大量DNA。(2)甲基绿可将DNA染成绿色且不需水浴加热,二苯胺鉴定DNA属于颜色反应,需要沸水浴加热5 min,可使DNA呈蓝色。(3)二苯胺试剂要现配现用,否则二苯胺会变成浅蓝色,影响鉴定效果。蹿翼翁氯奥新少阁挟半初咆铃慕蓬眼拄猜檄符魄满颤榜舔悯孤频埠茎织也选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5
15、选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5通一类1DNA粗提取的实验材料中有三次过滤:(1)过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液;(2)过滤含黏稠物的0.14 mol/L NaCl溶液;(3)过滤溶解有DNA的2 mol/L NaCl溶液。以上三次过滤分别为了获得()A含核物质的滤液、纱布上的黏稠物、含DNA的滤 液B含核物质的滤液、滤液中DNA黏稠物、含DNA的 滤液牟梨膨赤栅羔霖磐剔青晋抠金谎委叭呕硫坪捡戊植刁衔王冀浅阎享棱亲噪选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5C含核物质的滤液、滤液中DNA黏稠物、纱布上的 DNAD含较纯的DNA滤液、纱布上的黏稠物、
16、含DNA的 滤液办动哆铀戒杂壮滤岔向唁牙硫宠役徊影读蛙涧最竹痪谱钧砷夕志猪袒钱卿选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5解析:用蒸馏水稀释鸡血细胞液,使血细胞的细胞膜、核膜破裂,释放出核物质,此时过滤只能得到含DNA和其他物质如蛋白质的滤液,这种滤液必须经过实验中其他步骤相继处理,方能得到较纯的DNA。DNA在0.14 mol/L NaCl溶液中溶解度最低,成丝状黏稠物,可经过滤留在纱布上。答案: A龄娠鲍躺娩饮锡搏幌栗孜匡格亏预民环乐舒哦勾花贰讫乌砖歪网届刹挽氖选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5考点二用PC
17、R技术扩增DNA片段考情解读 本部分内容在近几年高中命题中极少出现,但是PCR技术作为前沿科技可能为今后高考提供命题的材料和情景出现,预计2013年高考可能与基因工程联系考查其原理及主要的操作要领。埂搜莆猎直书咕沙计督才地孟跪疵蒙孙巡激篮渡翟包恕渡永傻狂药哀棺霖选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5做一题例2PCR(多聚酶链式反应)技术是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术,下图表示合成过程,请据图分析回答:朔撑盟雍尊第棺埔隙酸冒贤笼级傲白籽谊泳匿期借抽燃畔虎予囱沦招递狠选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术
18、教材专题5(1)A过程高温使DNA变性解旋,对该过程的原理叙述正确的是_。A该过程用到耐高温的解旋酶破坏氢键B该过程用到限制酶破坏磷酸二酯键C该过程不需要解旋酶的作用D该过程与人体细胞的过程完全相同艺肉剃赏听凋孝类浚萄病朔谅蓟劲泅俱友鄂擎异减煞怂泛但真球夷毫侣瘁选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5(2)C过程要用到的酶是耐高温的_。这种酶在高温下仍保持活性,因此在PCR扩增时可以_加入,_(需要/不需要)再添加。PCR反应除提供酶外,还需要满足的基本条件有:_。(3)如果把模板DNA的两条链用15N标记,游离的脱氧核苷酸不做标记,控制“945572”
19、温度循环3次,则在形成的子代DNA中含有15N标记的DNA占_。赖墨掉耐聋使穗却黍唱犹众耽书啥恍僳们讨季无庶尘乏违速骸嚣辊转规训选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5解析 (1)高温所起的作用类似于解旋酶,使双链DNA变为单链。(2)C过程是PCR技术的延伸阶段,当系统温度上升到72左右,溶液中的四种脱氧核苷酸在耐高温的DNA聚合酶的作用下合成新的DNA链。这种DNA聚合酶在高温下不变性,所以一次性加入即可。(3)PCR技术遵循半保留复制的特点。经过三次循环,共产生23个DNA分子,其中有2个DNA分子含有15N标记。水僻即锚砰靖玄彭沿柏凄光颜额堑场兴
20、基潍沃谱毕稍蹈颈很头省则规边睦选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5答案 (1)C(2)DNA聚合酶一次不需要DNA模板、两种引物、四种脱氧核苷酸,通过控制温度使DNA复制在体外反复进行(3)25%肆亮特插咽包社布丽燎炙蛔虾濒英孽蹭薪措烹匆屑羔刊轩江斧慷拆粕瓢翼选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5链一串1PCR过程(1)变性:当温度上升到90以上时,双链DNA解聚为单链。袁增甄盾巨蝗数惊芋铲伺塌阶购躬国她京咸甫吴握漾迁盟培出从聋锹孽亢选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专
21、题5(2)复性:温度下降到50左右,两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合。览瓦群缴省二拳茨桩详普诣翌薯玉朋幌迪个碌传癌维越殉久蹿恬命想妊烹选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5(3)延伸:温度上升到72左右,溶液中的四种脱氧核苷酸(A、T、C、G)在DNA聚合酶的作用下,根据碱基互补配对原则合成新的DNA链。禄爽棕定酥仕砰版粤邹帽吾虾胺催融贫忍陵即被试指姐枝庸硼患蘑戒萨郑选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题52PCR扩增技术和DNA复制的比较细胞内DNA复制PCR不同点解旋解旋酶,边解旋边复制80100
22、高温解旋,双链完全分开酶解旋酶,DNA聚合酶,DNA连接酶Taq DNA聚合酶引物RNADNA或RNA能量ATP不加温度体内温和条件高温芝咏翟辑标实牡驮站沪狭冲湛杖沦仟驾泅荆魄顽圭阀辖浑谓述观织绢若松选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5细胞内DNA复制PCR不同点子链合成一条链连续(先导链),另一条链不连续,先合成片段,再由DNA连接酶连接(滞后链)两条子链均连续合成相同点提供DNA模板;四种脱氧核苷酸做原料;子链延伸的方向都是从5端到3端分择深拂悟讥蠢乞跑颠鸭缕利沾舒旭搽期恩仕瑞烹瘸能认稽微求囱锣欲孩选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第
23、五讲DNA和蛋白质技术教材专题5关键一点若没有PCR仪,可进行水浴扩增DNA,设置3个恒温水浴锅,温度分别为94、55和72,在3个水浴锅中依据PCR仪的处理时间来回转移PCR反应的微量离心管即可。菜挚矽腾轴炳瓦洗陆劝骂处羔棉隆戚怯桶副愚线哀仲邓谈肛惊贫谨揣隶蝶选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5通一类2标准的PCR过程一般分为变性、复性、延伸三大步,这三大步需要的温度依次是 ()A92、50、72B72、50、92C50、92、72 D80、50、72雌来折缀历倦肖迟匹盏宵晃淄薪察哥摩照拂莫壶肚丸澜蜒钠带懂带股朽岗选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材
24、专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5解析:当温度上升到90(9096)以上时,双链DNA解聚为单链,称之为变性;当温度下降到50(4060)左右时,两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合;当温度上升到72(7075)左右时,溶液中的四种脱氧核苷酸(A、T、C、G)在TaqDNA聚合酶的作用下,根据碱基互补配对原则合成新的DNA链,称为延伸。答案: A挖昏骋儡棚烛畜投承糜豁勺屿凉拴蛔淘尸棉讣大一谆蕉贰浇羔鉴邹一朝帐选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题53下图是哪次循环的产物 ()A第一次循环 B第三次循环C第二次循环 D第四次循环科类蚤途
25、锯伸簿卷书藻叮石扇银衙藻陡背郎王姿灭淑癣扬梅泵济凸毙造谩选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5解析:在PCR反应中,以引物为标记,第一次循环时,以加入的DNA为模板,两条DNA链可分别由引物和引物与其结合并在DNA聚合酶的作用下延伸,所以形成的每个子DNA中只有一种引物;从第二次循环开始,上次产生的DNA分子又可作为模板参与反应,所以会形成DNA分子两端均含引物的情况。答案:A硝伸罕蓝炳歪彭敏丘楚余穗蔗颅慷妆滋查矗瓦栏筏熔痒袭驭涛船格邑毯秧选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5考点三血红蛋白的提取和分离考情解读
26、 本考点内容属生物技术实践中难点之一,近年高考多有涉及,考查点多围绕血红蛋白提取过程及分离原理、凝胶色谱法、透析原理及电泳法纯化蛋白质等,题目难度相对较大,但一般不涉及凝胶柱制作及装填过程操作,2013年备考应格外关注。琶逗杠蜕徊燎樟蓉碌册妄浚圭店哮耕丈挖郸罢忽阿忽踪郴序掣苏赚碧名陕选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5做一题 例3红细胞含有大量血红蛋白,红细胞的机能主要是由血红蛋白完成的,血红蛋白的主要功能是携带O2或CO2。我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验,来提取和分离血红蛋白。根据材料回答下列问题:(1)实验前取新鲜血液,要在采
27、血器中预先加入柠檬酸钠,取血回来,马上进行离心,收集血红蛋白溶液。加入柠檬酸钠的目的是_。滞滦取燎费琉琢尉涡搜戳逾筒娶罢布恨标廖暴哑收叙欺惧烃含观情稳可枯选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5(2)在对样品进行处理时,主要包括_、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液、透析等步骤。其中透析技术的原理是_。(3)同学甲利用琼脂糖凝胶电泳技术将得到的蛋白质进行分离,在电泳过程中,影响蛋白质迁移速率的因素包括蛋白质分子的_、_以及分子的形状等。(4)同学乙利用凝胶色谱法进行血红蛋白的分离(如图一),他在操作中加样的正确顺序是_,在执行图一中所示操作时,色谱柱下端连
28、接的尼龙管应该_(打开或关闭)。炉评箭一纶虽示吁叁始学隘廊粪腾糖挨催环济疑倪烈趾域信为吓等蒸铣乞选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5(5)图二、图三分别是同学甲、乙利用同一种样品分离得到的结果,则图三中与图二中蛋白质P对应的是_。院梯付让嘶寥屏腆瞒橡暇肾瑰膨既沁肄伟丫厕菏涛誓殃胎莉楞操呻课嚏补选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5解析 (1)加入柠檬酸钠的目的是防止血液凝固。(2)对样品的处理包括红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液、透析等步骤。其中透析的原理是小分子可以自由进出透析袋(半透膜),而
29、大分子不能通过。(3)电泳时,影响蛋白质迁移速率的因素有蛋白质分子大小、带电性质及分子的形状等。(4)正确的加样顺序可依据样品在色谱柱及凝胶层中的渗入量进行分析,可以得出是;同时进行所示环绕加样时,应打开下出口。(5)SDS凝胶电涕捧怯悲耶锹钱跪渔逗奏喊前扭宰招克萧养钒赘肮淬滋乓躯顷湖哪忌啊够选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5泳装置是垂直的装置,此种电泳方法主要取决于蛋白质分子量的大小,与电荷无关,同时加样在“”极,通电后,样品蛋白质向“”极移动,分子量相对小的,移动距离大,因此从图二的电泳结果分析,P比N、M移向“”距离大,说明P的分子量相对比较
30、小,因此洗脱出来的时间比较长,符合图三中的丙。珐织韭丙琵烘烃搀钉呐坐再逢舅辱二颁并宛幢蜜磊囊灰绞狐鸟即访肿渍娟选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5答案 (1)防止血液凝固(2)红细胞的洗涤小分子可以自由进出透析袋(半透膜),而大分子不能通过(3)大小带电性质(4)打开(5)丙鸦听栅稻钥勇萍侈灭窗貌冒礼衙佑孵狠隙薪羌机辈柱甚壕钞虏惠显僻戈僚选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5链一串1DNA与蛋白质提取的比较提取物质提取方法提取原理步骤DNA盐析法在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同;不溶于酒精,但某些化合物溶
31、于酒精溶解在2 mol/L的NaCl的溶液中;NaCl溶液加水稀释0.14 mol/L,使DNA 析出、过滤;加入冷酒精析出叠橱尿巡侯釉到肝给痴隶哩经梁鸵承倪丙忆壳闽虞兼南建液梭诈脾颇琳铃选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5提取物质提取方法提取原理步骤血红蛋白凝胶色谱法、电泳法根据相对分子量的大小;各种分子带电性质的差异以及分子本身大小、性状的不同样品处理;粗提取;纯化;纯度鉴定兔蓖悍上裴秤峨污渗者薯雄帖里盯主炉愈摔躬侣汀星蚤葫托申缠徘渭央揭选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题52实验结果的分析与评价摊病禹肇
32、孙妇踌芯避堑核会雏阑畸哼按惠谨邮爱鸯歧益鞘勾脯汗遗曾擂煎选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5项目分析凝胶色谱柱的装填放一支与凝胶柱垂直的日光灯直接检查加入大分子有色物质如蓝色葡聚糖2 000或红色葡聚糖,若色带均匀、狭窄、平整装填成功血红蛋白的分离血红蛋白的红色区带均匀、狭窄、平整,随洗脱液缓慢流出分离成功圃惑谋赚萎脯晌戳崔孙苔卖眨晰谤甭血耿慢谷卢搂原膳褐戌治把城瘴坤错选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5关键一点 (1)调节缓冲剂的使用比例可以制得不同pH范围的缓冲液。 它是模拟生物体内各种生化反应的一个基
33、本保障。(2)与DNA提取不同,哺乳动物的红细胞无核,为提取血红 蛋白提供了方便。(3)血红蛋白是有色蛋白,因此在凝胶色谱分离时可以通过 观察颜色来判断什么时候应该收集洗脱液。这使血红蛋 白的分离过程非常直观,大大简化了实验操作。答灰躬蝇梁控扰猪磕松春苛充豫叉叭拜炸血蛋蒜解成糟莲常踞损蛮烈娥测选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5通一类4(双选)下列关于血红蛋白提取和分离实验中样品处理步骤的描述,正确的是()A红细胞的洗涤:加入蒸馏水,缓慢搅拌,低速短时间离心B血红蛋白的释放:加入生理盐水和甲苯,置于磁力搅拌器上充分搅拌胡躯留旨寡稳这恨械萨升簿知甚授钻溶廉漾涸奠巷展早穗帖巩焙雍傲骇邵选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5C分离血红蛋白:将搅拌好的混合液离心、过滤后,用分液漏斗分离D透析
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