天津科技大学微生物各章总结

1、绪论微生物是一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称。包括原核类的细菌、放线菌、蓝细菌、支原体、立克次氏体、衣原体：属干真核类的真菌（酵母菌、霉菌和蕈菌）、原生动物和显微藻类：以及属干非细胞类的病毒、亚病毒（类病毒、拟病毒、朊病毒）。特点为个体微小、构造简单、进化地位低。微生物的五大共性：体积小面积大（最根本的）、吸收多转化快、生长旺繁殖快、适应强易变异、分布广种类多。列文虎克：微生物学的先驱者，自制单式显微镜第一个观察到了微生物。巴斯德：微生物学奠基人，其贡献有：彻底否定了“自然发生”学说。免疫学预防接种。证实发酵是由微生物引起的。科赫：细菌学奠基人科赫学派发明了微生物纯种分离技术第一章G+和

2、G菌细胞壁构造成分的异同及肽聚糖单体的异同答：G+菌的细胞壁主要成分为肽聚糖和膦壁酸（细胞壁为单层）膦壁酸按成分可分为核糖醇膦壁酸和甘油膦壁酸。肽聚糖由肽和聚糖两部分组成。肽分为四肽尾和肽桥G+菌的四肽尾为L-Ala_D-Glu_L-Lys_D-Ala肽桥的变化很多因此决定了肽聚糖的多样性聚糖有N-乙酸葡糖胺和N-乙酰胞壁酸由0-1,4-糖苷键连接组成G菌的细胞壁为内外两层，外膜分为脂多糖（LPS）磷脂外膜蛋白LPS分为O-特异侧链类脂A和核心多糖组成外膜蛋白分为孔蛋白和脂蛋白内层为肽聚糖G的肽聚糖与阳性菌大体相同仅甲肽聚糖四肽尾的第四个氨基酸的羧基和乙肽聚糖的第三个氨基酸的氨基相连构成肽桥第

3、三个氨基酸为m-DAP革兰氏染色机制请同学们阅读书18页缺壁细胞自发突变：L型细菌自然界长期进化：支原体人工去壁：原生质体球状体细胞质部分由干靠判断知识点太多太碎请同学们自行看书菌毛（性菌毛）结合第七章总结的接合相关内容糖被糖被分为荚膜微荚膜菌胶团粘液层有糖被的菌会长出大型透明蛋清状的菌落用负染色可以观察到芽孢抗热抗化学药物抗辐射了解渗透皮层膨胀学说放线菌放线菌分为气生菌丝营养菌丝孢子丝（用干菌种鉴定）蓝细菌静息孢子（休眠体）异型胞（固氮）10.支原体没有细胞壁衣原体分为始体和原体立克次氏体严格寄生第二章细菌，放线菌，酵母菌，霉菌的细胞壁组成及原生质体的制备细菌的细胞壁主要是由肽聚糖组成，此外

4、还有少量的蛋白质和脂质；放线菌的细胞壁组成和细菌一样；酵母菌的细胞壁主要由酵母纤维素组成，它是三明治状，外层为甘露聚糖内层为葡聚糖，中间夹着一层蛋白质；霉菌的细胞壁最外层由无定形葡萄糖组成，接着为糖蛋白组成的嵌埋在蛋白质基质层中的粗糙网，再下层为蛋白质层，最内层为放射状排列的几丁质微纤维丝组成。细菌和放线菌的原生质体是用溶菌酶处理细胞而得到；酵母菌使用蜗牛消化酶来制备原生质体；霉菌用纤维素酶和几丁质酶来制备原生质体。拉丁文解释主要几个Staphylococcusaureus（金黄色葡萄球菌）Escherichiacoli（大肠埃希氏菌）Streptomyces（链霉菌属）Aspergillus

5、niger（黑曲霉）Clostridiumbctulinum（肉毒梭菌）Nocardia（诺卡氏菌属）Streptococcuspneumoniae（肺炎链球菌）Bacillussubtilis（枯草芽抱杆菌）Saccharomycescerevisiae（酿酒酵母）Bacillusmagaterium（巨大芽抱杆菌）Bacillusthuringiensis（苏云金芽抱杆菌）Saccharomycodesludwiqii（路德类酵母）Schizosaccharomycesoctosponcs（八抱裂殖酵母）代表种的用途枯草芽抱杆菌：可生产枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肽、B族维生素以及

6、中性蛋白酶。可用于饲料添加剂、水产养殖水质净化。大肠杆菌：大肠菌群数常作为饮水或食物的卫生学标准，对磺胺类、链霉素、氯霉素的等敏感。在基因工程中可用于外源基因的表达宿主菌，质粒可用于外源基因载体。双歧杆菌：双歧杆菌在母乳喂养儿肠道内大量存在，对婴幼儿有许多好处，如营养、免疫及抗感染作用，维护肠道正常细菌菌群平衡，是肠道益生菌。并且还具有抗过敏、抗肿瘤、调整肠道功能及改善营养的作用等。在临床上，双歧杆菌具有调整肠道功能紊乱作用。可以预防腹泻，减少便秘，即双向调节。这种调节能起到预防和治疗各种肠道疾病的效果。链霉菌：因许多种是抗生素的产生菌而且产生抗生素的种类最多而著名。黑曲霉：是制酱、酿酒、制醋

7、的主要菌种。是生产酶制剂（蛋白酶、淀粉酶、果胶酶）的菌种。生产有机酸（如柠檬酸、葡萄糖酸等）。农业上用作生产糖化饲料的菌种。可用来测定锰、铜、钼、锌等微量元素和作为霉腐试验菌。干酪成熟中污染会使干酪表面变黑、变质，对奶油也会产生变色。黑根霉：常利用它的糖化作用，比如甜酒曲中的主要菌种就是黑根霉!毛霉：毛霉的用途很广，常出现在酒药中，能糖化淀粉并能生成少量乙醇，产生蛋白酶，有分解大豆蛋白的能力，我国多用来做豆腐乳、豆豉。许多毛霉能产生草酸、乳酸、琥珀酸及甘油等，有的毛霉能产生脂肪酶、果胶酶、凝乳酶等。常用的毛霉主要有鲁氏毛霉和总状毛霉。腐生，广泛分布于迺曲、植物残体、腐败有机物、动物粪便和土壤中

8、。有重要工业应用,如利用其淀粉酶制曲、酿酒：利用其蛋白酶以酿制腐乳、豆豉等。青霉:青霉对人类非常重要，在工业上,它可用于生产柠檬酸，延胡索酸,葡萄糖酸等有机酸和酶制剂:非常名贵的娄克馥干酪,丹麦青干酪都是用青霉酿制而成的;最著名的抗生素青霉素就是从青霉的某些品系中提取而来,它是最早发现，最先提纯,临床上应用最早的抗生素;近期发现的另一重要抗生素灰黄霉素，是由灰黄青霉产生的,是抑制诸如脚癣之类的真菌性皮肤病的最好抗生素.保加利亚乳杆菌：乳酸发酵工业生产最常用的乳酸菌是保加利亚乳杆菌、耆热链球菌、干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌、双歧杆菌等。发酵乳糖、分解乳蛋白、产生香气。4霉菌分类鉴定菌属特点应用代表种根

9、霉属多核单细胞，菌丝无隔，有匍匐枝、假根，产抱子囊抱子糖化菌，产酒精、有机酸，能转化甾族化合物黑根霉（面包霉）米根霉华根霉毛霉属（黑霉）多核单细胞，菌丝无隔，无假根、匍匐枝，产抱子囊抱子和接合抱子药酒，糖化淀粉，产蛋白酶，做豆腐乳，豆豉，产有机酸，转化甾族化合物高大毛霉鲁氏毛霉总状毛霉犁头霉属多核单细胞，菌丝有隔，有匍匐枝假根，产抱子囊抱子和接合抱子常为生产菌的污染菌青霉属菌丝有隔，大部分呈蓝绿色，产分生抱子，帚状枝，无足细胞青霉素生产，干酪加工，有机酸生产灰绿青霉灰黄青霉产黄青霉木霉属菌丝有隔，菌落呈不同程度绿色，分支繁复，产分生抱子纤维素酶重要生产菌，大型真菌寄生菌康氏木霉绿色木霉曲霉属有

10、足细胞，菌丝有隔，菌落颜色多变，产子囊抱子和分生抱子酿酒，制醋，生产各种酶制剂，糖化饲料黄曲霉黑曲霉四大类微生物繁殖方式细菌：对称二分裂：绝大多数不等二分裂：柄细菌属三分裂：绿色硫细菌复分裂：蛭弧菌放线菌：多数放线菌借以形成各种抱子进行繁殖，仅少数种类以基内菌丝分裂形成抱子状细胞进行繁殖，在液体培养时菌丝片段也可繁殖。放线菌抱子形成方式为横割分裂，以两种途径进行细胞膜内陷，再由外向内逐渐收缩，最后形成一完整横割膜，从而把抱子丝分割成许多分生抱子。细胞壁和膜同时内陷，再逐步向内缢缩，最终将抱子丝缢裂成一串分生抱子。分生抱子：最常见，链霉菌属借抱子无鞭毛：抱囊链霉菌属*包囊抱子5I有鞭毛：游动放线

11、菌属基内菌丝断裂：诺卡氏菌属借菌丝Y任何菌丝片段：多种放线菌酵母菌芽殖：各属酵母菌都存在裂殖：裂殖酵母中存在L节抱子酵母菌繁殖方式产无性抱子掷抱子l厚垣抱子l有性（产子囊抱子）：酵母属、接合酵母属霉菌通过产有性抱子和无性抱子来繁殖（游动抱子：壶菌包囊抱子：根霉、毛霉分生抱子：曲霉、青霉节抱子：白地霉厚垣抱子：总状毛霉芽抱子：假丝酵母掷抱子：掷抱酵母广卵抱子：德氏腐霉接合抱子：根霉、毛霉有性抱子担抱子：蘑菇L子囊抱子：脉抱菌。红曲霉丝状真菌、放线菌菌丝体及抱子萌发观察法：小室培养又称载片培养真菌的载片培养法不仅可克服水浸片制片的困难，还可使对菌丝分枝和抱子着生状态的观察图5-1真菌的载片培养1培

12、养皿；2.U形玻棒；3滤纸；4载玻片；5盖玻片；6固体培养基获得更满意的效果。取直径7cm左右圆形滤纸一张，铺放于一个直径9cm的平皿底部（图5-1）,上放一U形玻棒，其上再平放一张干净的载玻片与一张盖玻片，盖好平皿盖进行灭菌。挑取真菌抱子接入盛有灭菌水的试管中，摇振试管制成抱子悬液备用。用灭菌滴管吸取灭菌后融化的真菌固体培养基少许，滴于上述灭菌平皿内的载玻片中央，并以接种环将抱子悬液接种在培养基四周，加上盖玻片，并轻轻压贴一下。为防止培养过程中培养基干燥，可在滤纸上滴加灭菌20甘油液34ml,然后盖上平皿盖，即成所谓湿室载片培养。放在适宜温度（多数真菌为2030C）的培养箱内培养，定期取出在

13、低倍镜下观察，可以看到抱子萌发、发芽管的长出、菌丝的生长、无隔菌丝中抱子囊柄与抱子囊抱子形成的过程、有隔菌丝上足细胞生长、锁状联合的发生、抱子着生状态等。第三章1、非细胞生物包括疹病毒、亚病毒。亚病毒包括类病毒、拟病毒、阮病毒。（填空）2、病毒的七个特点：0个体微小，在电子显微镜下才能看见。Q无细胞结构，仅为核酸包以蛋白质外壳的病毒粒子。每一种病毒只含有一种核酸，DNA或者RNA。既无产能酶系，又无蛋白质和核酸合成酶系，只能利用宿主细胞内现成的代谢系统来合成自身的核酸和蛋白质组分，因此只能在活细胞内专性寄生。独特的繁殖方式，病毒不存在个体生长和二分裂等细胞繁殖方式，仅通过核酸复制和蛋白质合成、

14、然后装配的方式进行增值。在离体条件下能以无生命大分子的状态存在，并保持其侵染性。对大多数抗生素不敏感，但是对干扰素敏感。（简答）3、病毒的基本成分是蛋白质和核酸。核心和衣壳构成核衣壳。有些病毒核衣壳外面还有包膜，是病毒感染性和专一性的结构基础。还有一些包膜外面生有刺突。（填空）4、病毒对称结构：1螺旋对称，例烟草花叶病毒。2二十面体对称例动物腺病毒。3复合对称例大肠杆菌T偶数噬菌体。（填空）5、噬菌体一般为双链DNA,植物病毒一般为单链RNA。噬菌体分为嗜细菌体、噬放线菌体、噬蓝细菌体。（填空）6、大肠杆菌T偶数噬菌体以5-羟甲基胞嘧啶代替胞嘧啶。（填空）7、温和型噬菌体的存在形式：游离态、整

15、合态、营养态。（填空）8、烈性噬菌体的复制过程：吸附、侵入、增殖、成熟、裂解。缺壁细胞不能被噬菌体吸附。增殖包括核酸的复制和蛋白质的生物合成。（判断）9、一步生长曲线：感染时间为横坐标，病毒滴度为纵坐标。分为潜伏期、裂解期、平稳期。三个特征参数潜伏期、裂解期、裂解量。裂解量等于噬菌体粒子数除以细菌数。潜伏期包括隐晦期和胞内积累期。（填空）10、测定病毒滴度方法：双层平板法计数单位体积样品内形成噬菌斑数量。预先分别配制2%和1%的琼脂的底层培养基和上层培养基，底层培养基在培养皿上浇一层平板，待凝固后，再把预先融化并冷却到45度以下，加有较浓的敏感宿主和一定体积待测噬菌体样品的上层培养基，在试管中

16、摇匀后，立即倒在培养基上铺平待凝，然后在37度下保温。一般经过十小时即可计数。（简答题）11、类病毒无蛋白质外壳，只有相对分子质量较低的ssRNA,能自我复制，不需辅助病毒。此RNA不能编码蛋白质。拟病毒是包裹在真病毒里的有缺陷的类病毒，此真病毒又称辅助病毒，拟病毒本身又称卫星病毒，拟病毒的复制必须依赖辅助病毒的协助。阮病毒不含核酸，无免疫原性、抗逆性强。（填空）12、污染噬菌体的表现？如何防治？（简答）表现：发酵周期延长、发酵液变清、发酵产物不易形成以及将发酵液接种于敏感菌平板上会出现噬菌斑等现象。防治：绝不使用污染或有污染嫌疑的菌种，并经常轮换生产菌种。严格保持环境卫生。各种非生产菌液及时

17、灭活。生产设备定期清洗、灭菌。严格操守守则。13、设计实验检验菌为溶源菌。检验某菌落是否是溶源菌的方法，是将少量溶源菌与大量的敏感性指示菌相混合，然后与琼脂培养基混匀后倒一个平板，经培养后溶源菌就一一长成菌落。由于溶源菌在细胞分裂过程中有极少数个体引起自发裂解，其释放的噬菌体可不断侵染溶源菌菌落周围的指示菌菌苔，于是就形成了一个个中央有溶源菌的小菌落，四周有透明圈围着的这种独特噬菌斑。第四章1微生物的六大营养要素：碳源、氮源、能源、无机盐、生长因子、水、2微生物的碳源谱类型元素水平化合物水平培养基原料水平有机碳CHONX*复杂蛋白质、核酸等牛肉膏、蛋白胨、花生饼粉等CHON多数氨基酸、简单蛋白

18、质等一般氨基酸、明胶等CHO糖、有机酸、醇、脂类等葡萄糖、蔗糖、各种淀粉、糖蜜等CH烃类天然气、石油及其不同馏份等无机碳CCOCO2CO2COXNaHCJCaCQ等NaHCO3、CaCO3、白垩等微生物的碳源谱虽广，但异养微生物在元素水平上的最适碳源则是“CHO”型。在糖类中，单糖优先于双糖和多糖，己糖优于戊糖，葡萄糖，果糖优于甘露糖、半乳糖；在多糖中，淀粉明显优于纤维素或几丁质等纯多糖，纯多糖则优于琼脂等杂多糖。生长因子：氨基酸、维生素、碱基和卟啉及其衍生物在配制微生物培养基时，对大量元素来说，只要加入相应化学试剂即可，但其中首选的应是K2HPO4、MgSO4因为他们可同时提供4种需要量最大

19、的元素。5微生物的营养类型根据碳源，能源和电子供体的不同可以将微生物分为光能无机自养型、光能有机异养型、化能无机自养型、化能有机异样型四种营养型。主要通过微生物的电子供体、能源和碳源的不同进行划分营养类型氢供体碳源能源举例光能无机自养型无机物CO2光能蓝细菌、紫硫细菌、绿硫细菌、藻类光能有机异养型有机物CO2及简单有机物光能红螺菌科的细菌（及紫色无硫细菌）化能无机自养型无机物CO2无机物硝化细菌、硫化细菌、铁细菌、氢细菌、硫磺细菌等化能有机异样型有机物有机物有机物绝大多数细菌和全部真菌6营养物质进入细胞的方式不通过膜上载体蛋白：单纯扩散运送方式：|不耗能：促进扩散L通过膜上载体蛋白：运送前后溶

20、质分子不变：主动运送耗能：I运送前后溶质分子改变：基团移位7选用和设计培养基的原则和方法：目的明确、营养协调、理化适宜、经济节约8培养基的种类（一）按对培养基成分的了解分类天然培养基、组合培养基、半组合培养基（二）按培养基外观的物理状态做分类液体培养基、固体培养基、半固体培养基、脱水培养基（三）按培养基对微生物的功能做分类选择培养基（利用分离对象对某种营养物的特殊“嗜好”的原理，专门在培养基中加入该营养物，从而把它制成一种加富性选择培养基：利用分离对象对某种制菌物质所特有的抗性，在筛选的培养基中加入这种制菌物质，而这种培养基实为抑制性培养基。）鉴别性培养基（最常见的伊红美蓝乳糖培养基EMB）真

21、题鉴别培养基？利用伊红美蓝培养基EMB培养大肠杆菌和沙门氏菌时，菌落会出现何种现象？为什么？一类在成分中加有能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂，从而达到只需用肉眼辨别颜色就能方便的从近似菌落中找出目的菌菌落的培养基。在菌落上呈现深紫色，并在反射光下看到绿色金属闪光的菌落为大肠杆菌，菌落呈无色的为沙门氏菌。10真题产高产蛋白酶的枯草芽抱杆菌第五章1底物脱氢的四条途径：EMP途径、HMP途径、ED途径、TCA途径2ED途径的特点是：具有一特征性反应一DPG裂解为丙酮酸和3-甘油醛：存在一特征性酶一KDPG醛缩酶：其终产物2分子丙酮酸的来历的不同，其一由KDPG直接裂解形成，另一则由3-磷

22、酸甘油醛经EMP途经转化而来：产能效率低ED途径是少数EMP途经不完整的细菌所特有的利用葡萄糖的替代途径。本途径中所产生的丙酮酸对运动发酵单胞菌，这类未好氧菌来说，可脱羧成乙醛，乙醛又可进一步被NADH2还原为乙醇。这种经ED途径发酵生产乙醇的方法成为细菌酒精发酵，他与酵母菌通过EMP途径形成乙醇的机制不同。这种发酵方法的优点：代谢速率高，产物转化率高，菌体生成少，代谢副产物少，发酵温度较高，以及不必定期供氧等。缺点;生长PH较高，较易染杂菌，并且对乙醇的耐受力较酵母菌低。生物氧化的类型：呼吸、无氧呼吸、发酵无氧呼吸又分硝酸盐呼吸（反硝化作用）、硫酸盐呼吸、硫呼吸、铁呼吸、碳酸盐呼吸、延胡索酸

23、呼吸7由EMP途径中丙酮酸出发的发酵;同性酒精发酵、同性乳酸发酵、丙酸发酵、混合酸发酵、2，3-丁二醇发酵、丁酸型发酵8MR甲基红试验原理：多数细菌能分解葡萄糖，但分解葡萄糖的途径和产物不完全相同。例如大肠杆菌和产气肠杆菌能分解葡萄糖产生丙酮酸，若继续代谢还能生成其它有机酸和醛、醇等化合物，其中，大肠杆菌所产生的酸能使培养液的pH降到4.2或更低，可使甲基红指示剂变成红色，并至少持续4d之久。因此，甲基红实验是测定细菌利用葡萄糖产酸能力的强弱。但这些微生物可将产生的酸进一步代谢，在4天或更长时间内生成中性化合物，不具有使甲基红变红的能力。因此进行此项实验时，观察时间显得很重要。肠道杆菌生长在3

24、7r以下4天观察为宜，其他细菌也可参照同样时间。方法与步骤：取缓冲葡萄糖蛋白胨水培养基试管三支，于其上分别做好培养基名称和试验菌种、空白样等标记，然后无菌操作将试验菌种接入相应的试管中，连同空白对照置36C1C恒温箱中培养24d后进行观察和记录结果。结果与讨论：在实验试管和空白管中各加入甲基红试剂5至6滴，呈红色者为甲基红试剂阳性，呈橘红色者为弱阳性，橘黄色为阴性。V.P试验乙酰甲基甲醇试验原理：产期肠杆菌利用葡萄糖产生丙酮酸后，可进一步使一部分丙酮酸脱羧生成中性的乙酰甲基甲醇。乙酰甲基甲醇在强碱环境中，能被空气中的氧气氧化，生成双乙酰，双乙酰与蛋白胨中的精氨酸的胍基作用生成红色化合物,此即为

25、V-P实验阳性。当在试管中加入萘酚时，可促进反应的进行。如果某细菌在4天期间MR和V-P反应均为阳性，可延长培养时间，以确定生成的酸是否能转化成乙酰甲基甲醇。对于一些发酵迟缓的微生物可能实验结果均为阴性，也可延长培养时间，以判断微生物是否能利用葡萄糖产生大量酸。对于一种微生物，MR试验阳性，V-P反应一定为阴性，反之亦然。结果与讨论：在上述三支试管中分别按培养液一半的量加入6%萘酚酒精液，摇匀，再按培养液1/3的量加入40%氢氧化钾溶液，充分摇匀，观察结果，呈现红色者为V-P试验阳性，不呈现红者，为阴性，后者还应在36C1C下培养4h再进行观察判定。9通过HMP途经的发酵-异型乳酸发酵硝化细菌

26、分为亚硝化细菌或氨氧化细菌，硝化细菌或亚硝酸氧化细菌生物固氮是指大气中的分子氮通过微生物固氮酶的催化而还原成氨的过程，生物界中只有原核生物才具有固氮能力。生物固氮反应的六要素：ATP的供应、还原力【H】及其传递载体、固氮酶、还原产物-N2、镁离子、严格的厌氧微环境12好氧菌固氮的抗氧保护机制：呼吸保护、构象保护13微生物结构大分子-肽聚糖的生物合成书上138页14高产酪氨酸菌株的选育书上145页生长测定方法：a直接法：用计数板(例：血球计数板)光学显微镜下直接观察，十分常用，但是得到的数目是包括死细胞在内的总菌数b间接法：是一种活菌计数法。活菌指示剂TTC,使菌落成玫瑰色。【必】单细胞微生物的

27、典型生长曲线：a根据微生物的生长速率常数,典型生长曲线粗分为延滞期、指数期、稳定期和衰亡期。b延滞期(停滞期、调整期、适应期)特点：1生长速率为零2细胞形态变大或增长,许多杆菌可长成丝状3细胞内的RNA尤其是rRNA的含量增高，原生质呈嗜碱性4合成代谢十分活跃5对外界不良条件反应敏感。c影响延滞期的因素：1接种龄2接种量3培养基成分d指数期(对数期)特点：1生长速率常数R最大，代时或原生质增加一倍所需的倍增时间最短2细胞进行平衡生长3酶系活跃，代谢旺盛e指数期三个参数：1繁殖代数nn=3.322(lgx2-lgx1)2生长速率常数RR=n/(t2-t1)3代时GG=1/R=(t2-t1)/nf

28、影响指数期微生物代时长短的因素：1菌种，例：大肠杆菌12.5-17min,枯草芽抱26-32min,金黄色葡萄球菌27-30min2营养成分3营养物浓度4培养温度g指数期微生物是代谢生理等研究的良好材料，是增殖噬菌体的最适宿主。h稳定期特点：生长速率常数R等于零，菌体产量达到了最高点，而且菌体产量与营养物质的消耗间呈现出有规律的比例关系。生长产量常数Y(生长得率)Y=(x-x0)/(C0-C)=(x-x0)/CI稳定期，细胞内开始积聚糖原、异染颗粒和脂肪等内含物，芽抱杆菌则开始形成芽抱，生成次生代谢物。j稳定期到来的原因：1营养物尤其是生长限制因子的耗尽2营养物的比例失调，例如C/N比不合适3

29、酸、醇、毒素或H2O2等有害代谢产物的累积4pH、氧化还原势等物理化学条件越来越不适宜等k衰亡期中，有的微生物因蛋白水解酶活力的增强而发生自溶3连续培养a按控制方式分装置控制对象丄卄氓甘培养基培养基流速生长速率产物应用范围恒浊器菌体密度(内控制)无限制生长因子不恒定最高速率大量菌体与菌体相平行的代谢产物生产为主恒化器培养基流速(外控制)有限制生长因子恒定低于不同生长速率的菌体实验室为主b按培养器级数分：单级连续培养器和多级连续培养器c连续发酵优点：1高效2自控3产品质量稳定4节约了大量动力、人力、水和蒸气d连续发酵缺点：1菌种易退化2易污染杂菌3营养物的利用率一般低于单批培养。e连续培养广泛用

30、于酵母菌单细胞蛋白的生产4同步培养方法：a环境条件诱导法氯霉素抑制细菌蛋白质的合成；细菌芽孢诱导发芽；藻类细胞的光照、黑暗控制；用EDTA或离子载体处理酵母菌等b机械筛选法过滤法、密度梯度梯度离心法、膜洗脱法温度对微生物的影响：a生长温度三基点：最低生长温度、最适生长温度、最高生长温度6影响微生物生长的主要因素：温度，氧气，pH,水活度，渗透压等7氧气对微生物的毒害机制：超氧化物歧化酶学说，凡严格厌氧菌就无SOD活力，一般也无过氧化氢酶活力，所有具色素系统的好养菌都有SOD何过氧化氢酶，耐养性厌氧菌不含细胞色素系统，但具有SOD活力而无过氧化氢酶活力。SOD的功能是保护好养菌免受超氧化物阴离子

31、自由基的毒害，从而提出了缺乏SOD的微生物必然只能进行专性厌氧生活的学说。8高温灭菌的种类：干热灭菌和湿热灭菌。湿热灭菌：例巴氏消毒法，低温维持法63C30min,高温瞬时法，72C保持15s9抗代谢类药物磺胺类药物与正常代谢物一起共同竞争酶的活性中心，从而使微生物正常代谢所需的重要物质无法正常合成。作用机制：磺胺的结构与细菌的一种生长因子对氨基苯甲酸高度相似，故是它的代谢类似物，因此两者间会发生竞争拮抗作用。10抗生素青霉素和红霉素主要抗G+细菌；链霉素和新霉素以抗G-细菌为主，也抗结核分支杆菌；庆大霉素、万古霉素和头抱霉素兼抗G+和G-细菌；氯霉素、四环素等能同时抗G+和G-细菌以及立克次

32、氏体和衣原体，故成光谱性抗生素。11大题：从微生物营养要素外界条件，如何优化培养基和培养条件？答：a影响要素有碳源、氮源、能源、生长因子、无机盐、水。1找到最适的碳源谱，加多少，以及碳源的浓度。2最适氮源谱，以及根据不同微生物所加的氮源浓度3生长因子也需要根据微生物的种类，进行适量的添加。b影响外界的培养条件有：pH，温度，氧气，等。c用正交分析法，选出最适的培养基，根据生物统计学方法进行计算，优化培养基，以及培养条件。12大题：设计实验方案，双歧杆菌高密度培养？答：由于双歧杆菌属于厌氧菌，所以我们要在厌氧的环境下进行培养。首先要优化培养基，优化培养条件，对于培养基要注意双歧杆菌的6类生长要素

33、，选好每类生长要素的最适值，其次，还需要注意影响培养的条件，主要有pH，温度，氧气等。进行正交试验，通过生物统计学方法优选最适合双歧杆菌培养的培养基及培养环境。要使双歧杆菌进行高密度培养，则需要进行连续培养，连续培养首先要注意营养给予的充分，即C源、N源等。pH要适合生长，适当的加酸或碱来调节pH值，其次溶氧也是能否使双歧杆菌高密度培养的一个重要因素，一般在培养基加还原剂。13大题：测定微生物生长方法的优缺点？第七章1.核酸是DNA的转化实验：细菌的转化实验，噬菌体转化实验，植物病毒重建实验。2.证明基因突变的自发性和不对称性的实验证明：变量实验，涂布试验，影印平板法。3质粒作为载体的特点：（

34、1）体积小，便于DNA的分离操作（2）呈环状，使其在化学分离过程中能保持性能稳定（3）核基因组控制的独立复制起点（4）拷贝数多，使外源DNA可很快扩增（5）存在抗药性基因等选择性标记，便于含质粒的检出和选择。4质粒的类型：严谨性质粒和松弛型质粒。质粒的种类：接合性质粒、抗药性质粒、产细菌素和抗生素质粒、具生理功能质粒、产毒质粒。5质粒的检测方法：质粒的分离与鉴定，质粒的分离一般可包括细胞的裂解、蛋白质和RNA的去除以及设法使质粒DNA与染色体DNA相分离等步骤，经分离后的质粒，可用电镜、琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶电泳来鉴定（或利用密度梯度离心法）。6抗性质粒：？7基因突变的类型，规律：L营养缺陷型（株）厂选择型突变抗性突变型（株）条件致死突变型（株）基因突变的类型Yj形态突变型（株）j非选择型突变抗原突变型（株）,产量突变型（株）规律：（机制）碱基置换：转换、颠换移码突变：缺失、添加畸变：缺失、添加、易位、倒位自发突变8营养缺陷型的筛选方法：一般要经过诱变、淘汰野生型、检出和鉴定营养缺陷型4个环节。（1）诱变剂处理：与一般诱变剂处理相同（2）淘汰野生型：在诱变后存活的个体中