U3000戴安液相色谱仪操作规程

1、1.5接通电源，检查插座上各插孔的指示灯是否显示正常。1.6准备好超声过的流动相和流路冲洗溶剂。2开机2.1撤下设备停用卡，换上设备运行卡。2.2换上A、B、C、D管路的溶剂：A、B、D管路为溶剂管路，可以放置流动相，C管路为洗进样针管路。一般A路放甲醇，B路为纯化水，C路放5%甲醇水，D路放流动相。C管路在运行样品时用5%甲醇水清洗进样针，做完样品用纯甲醇灌满，C管路中软管为冲洗泵头管路，并随仪器开机工作。2.3运行检査：从上至下打开仪器各部件开关，待机器自检，核实无异常。2.4开启仪器工作站：打开电脑，双击电脑桌面上仪器图标，显示工作站主界面；2.5脱气操作：在工作站主界面上，点击泵：XP

2、G-3X00（RS,SD），将旁通阀开关逆时针旋转一圈（自动进样器上），冲洗顺序为B-C-D-A,每个管路冲洗5分钟，每个管路脱气前，需先设参数为100%，再依次点击冲洗-忽略警告执行，每个管路冲洗时间均在自动进样器显示屏上显示（注意：D管路冲洗完成后，需将D管路设置为0,点击开始冲洗，方可冲洗A管路）。冲洗排气完成后关闭旁通阀。2.6清洗进样器在WPS-3000SL项下启动栏中依次点灌注注射器、清洗缓冲环、外部清洗针。注意：外部清洗针运行完毕后，点击进样阀栏中到进样位置。2.7升流速：在XPG-3X00（RS,SD）界面，在流速/压力栏中填写所需的流速（注意：流速设定要02个单位逐步到所设定

3、的流速，待柱压稳定后，再增加流量）。28设柱温箱温度在TCC-3x00项下温度控制栏中设所需温度，点击回车。29点紫外灯在VWD-3x00（RS）项下信号栏中输入所需波长，在命令栏中点击紫外灯（切记点一下）注意：待温度稳定510分钟后再开灯以上各项必须点击各项下的模块连接栏中连接才能执行命令。待紫外灯点亮后可在xPG-3x00（RS,SD）项下流速/压力栏中输入所需流速开始平衡，平衡时间约30分钟。210看基线点击监视基线即可看到当时状态。3单针进样进样停止进样待基线稳定30分钟后,点击WPS-3000SL项下进样键，开始单针进样（只能看到出峰时间软件不记录数据，系统适应性可在序列表单独进一针

4、中看到）4仪器方法建立键，选中j-F?.仗器方法点创建，选中仪器方法，出现运行时间迅）谙指定方法的运行时间：20.000对话框，点击下一步，在栏中填写样品运行时间，点击下一濬剂名称步在栏中填写所需管路比例，点击下一步在指定色谙團中半煌高处盘窄期望煌的煌宽:OHi55s返回迢）下一歩區）取消帮助譚速ml/min1.000|Tooo|I:栏中填写流速，点下一步，点下一步，点下一步，点下一步，在漏仪器方法向导-uv（VTO-3100）:趣道采集il道曲）:序号趣道液长nm采集打开min采集关团min1J0UV_VIS_1删二L牙妲运ft.停止运行数据采集推荐值：100.0Hi推荐值：0.01s检杳方

5、法对话框内，填写所需波长，峰宽一栏填写0.05，点下一步，点完成。点，点击3完成序列表的建立。如果需更改采集时间：点数据栏中显示队列，在下方双击“仪器方法”-点“离线工作”一在“总览”中改“运行时间”点Pump点流速梯度改时间保存。5、创建处理方法歹ChroaeleanConsole、刨建021520100214201202西阿J(西林胶比对20120503伐有关物虫20120503辛伐慚丁2O12D5S辛傥慟丁有天初庚20120509辛伐如丁有夫物U2012051&FW素KFrdllhodH?r*dithod(i)BkTrdltthod(2)He*frodlethodO)9e?rdlthod

6、(4)?rdlthod6)VoTrdlthodft)Mcv?rdtthodCr)bFrdUthdCB)HefrdlthdS)?rdlthd(10)Prdlthd(11)冈真色林育关物IS对#芸89楚&方:去tUSJUVFRKOJ4E邻本二R20100C17邻丢二肢建盘方沫牛竇上豪片2012022120216磁刑20】20220賁型修改日II处理方底2012-2-1S11:32处理方法2012-2-K1129处&方谡201?-2-29153S处9；i2012-5-TISC6处理方w2012-5-321.452012-5-T18.42进霆方挂2012-5-917.10处JI方崔2012-5-161

7、9.32处劲，送2012-5-32248处35方洋2012-2-1616.22处劝;去2012-5-4625灶劝怯2012-5-48M处理方崔2012-5-T15.59处聂方法2012-5-T16:042012-5-T16:(M奴劲怯2012-5-T1605处3方法2012-5-T16:05处理方法2012-S-T1606处耀方法2012-5-1643处&方;去2012-S-fl17:10处&方法201J-2-MISSL劭法2012-2-IT1251方摆201J-S-241547处劭摆2012-2-M10592012-2-IT9:47处理方彥2012-2-IT1335处五床201-2-211?

8、0B处!#方法2012-2-81T.S8方战2012-2-201414注釋eWorfdknrs文件熹虫理方確祓a定工A曲ClirMlCwuo】功V3O0C#fWUS-未命各-中S3:上&创連|文件也)編辑迢亡I文件夹购)ffi序列-拋仪器方法(X.-返回到数据界面点击_处理方法创建处理方法创建it理方法姜创建处理方法，诣打开现有的方法或从目标选择处理方法模板。，点击处理方法迥.Y报告模板田新連1亍寧勺进样查询仗慣光谱库y观图设置HjVi：irkfli：i,i,i,.S电子报告(D.出现对话框三錐定性BEf三维定量啡选择二维定量点击下一步，创建处理方法选择名称提供一平合适的名称井廿配新的处理方法

9、到序列或单平进样口返回完成（I）在名称一栏中填与样品名称，点完成。6、序列表的建立点击2012序列，然后点击下图创建|文件迢编辑亡1文件夹迢悽序列:丿仪新建一于序列|一处理方法（1）.-|报告模板（）.胡进样查询姒帕光谙库3观图设置迪HjVorktlow.1g电子报告（1）.选择序列，出现对话框:F新建序列向导X选择仪器选择序列将要运行的仗器9农器选挥乎线仪器:DTOIEXU3000_01所选仪器g)：|U300001点击U3000-01,点下一-步进样配置进样名称的格式(T)：#n样品数：进样次数(I):开始位置:进样量(jQ):RA110.0001.1351.99RAI.B50.001.1

10、00.000R1填写所需的条件，点击下一_lb步方法选挥应用到预览(A)仗器方法(X):处理方法(I):浏览T浏览Tctcrum:/diorLex/U3000_01/_役器方法/非诺JU特胶囊.itletmethchrom:/dionex/U3000_01/_处理方法/非诺贝特胶囊.procmeth在浏览中选择所需要的仪器方法、处理方法，点下一步，点完成。保存序列名称吐类型修改日期注释A20120504辛也他汀片序列2012-5-1015:0620120504辛也他汀片亞序列2012-5-1010:0920120504辛伐他汀片.序列2012-5-716:29520120504辛伐他汀片.序列

11、2012-5-817:45520120507辛伐他汀有.序列2012-5-717:4420120509辛伐他汀有.序列2012-5-119:25R20120516褪黑素序列2012-5-178:175j阿真西林有关物质序列2012-2-1617:06F测试序列2012-2-1513:32为丰诺贝特IK囊序列2012-5-2418:13牛苗上洁片20120221序列2012-2-2210:22牛萤上洁片ZSj牛黄上洁片样20120222序列2012-2-229:40牛萤上洁片2.旳染发剂20120216序列2012-2-2014:09軒骨齐il?ni2n?n彌I:ni!l-?l-!Tl17:Fl

12、V对象名称：查找：叵玄12序列y4O4丨通道C):|7对象类型：T在对象名称栏中填写样品名称，点保存。禅Cobra向导X序列表出现:非诺贝特胶囊新建|卜开始卜:Studio吕打印k一向上予插入行F它筛选分组k社查找下一于F7TUVVIS卜I名称类型级别位置进样量収仪器方法处理方迭1呪HririE2无1ARA210.000i非诺贝特胶囊i非诺贝特胶囊_un-tK-tK未未未知RA3KA4RA510.000非诺贝特胶囊石：議菲诺页蔣应匿非诺贝特胶囊10.000?非诺贝特胶囊”击奁重区蕭帀就前进捽非诺贝特胶囊在名称栏中填写所做样品名称，类型栏中填写校准标准品（对照品）或未知（样品），级别栏对照品选0

13、1级别，位置栏中填写样品瓶的位置。样品重量及稀释倍数依次填写好，填写完毕后，点击U3000-01.onDIONEX，出现对话框点序列添加添加需运行的序列“就绪检查”检查成功后f点“开始”f出现“忽略警告”f点“是”开始序列表的运行。或直接点击键（此时未进行就绪检查），开始序列表的运行。如果需要运行两个序列需建一个溶剂过度方法进行过度和平衡。7、处理数据Cubra向导7.1方法一：在序列里选择所要处理的数据双击，点击处理键，点击对话框：键，出现以下邊职消缩放积分峰面积配置1远样再:虑塌陷烽在色诸團开贻建隠藏负辱口设置色谱煌积分的色谱图区域口单击色谱图井在要积分的区域拖动鼠标口W.020.022.

14、525.0o使用自动范围（Q选中积分区域，点下一步直到完成。Sm：=q-tFe：ikE点击键，进一步选择所选峰。点击运行组份表向导，点击下一步直到完成。到报告设计器中查看结果。7.2方法二双击图谱在数据处理界面点击校准和处理方法进入界面，在色谱图下方点击“检测”，运行cobra向导执行检测参数的优化，选中要积分的峰，依次进行积分区域、基线噪声（可选择较平滑的一段）、平滑度、最小峰面积、通道和进样类型进行选择直至完成。接着点击“组分表”运行组分表向导，自动检测组分，依次进行时间范围、筛选、复核选择，在复核项界面输入组分名称，在“窗口”栏下方区域双击数字出现窗口设定保留时间正负5%,选相对值，选最

15、接近的峰，点击完成。在组分表中“级别”栏下输入对照品浓度，在“浓度单位”栏下输入单位。在标准品方法”栏下输入外标法。在校准类型”栏下选择线性、1阶、强制过原点。保存。点击所选峰出现校准曲线。点击结果出现检测结果。然后到报告设计器中查看结果。8、打印报告点击.报告设计盟软件自动生成报告格式,厲fi属打印区域分页符3设置打印区域解除打印区域迅）15）J有数据。一（注意：如果打印结果打不出来时，选页面布局键，选择解除打印区域）。在“样品量”栏下数字框中双击出现对话框可修改计算公式。9、备份点击所选文件夹，点右键发送到，选择路径，命名保存。10、导出点击所选文件点右键，点导出（注意不能重名，否则被覆盖

16、），选择路径、格式、内容，命名保存。导出的文件不可还原。11、关机11.1关氘灯在VWD-3x00（RS）项，命令栏中点击紫外灯（切记点一下）氘灯关闭。11.2让样品流动相继续运行20分钟，接着用B、C、A路分别冲洗10分钟，降低流速到0（注意：流速设定要0.2个单位逐步到所设定的流速，待柱压稳定后，再减少流量）。11.3关柱温。11.4在WPS-3000SL项下启动栏中依次点灌注注射器、清洗缓冲环、外部清洗针。之后关泵。11.5流动相中含有盐，至少用水冲洗1小时，再用甲醇冲。11.6关机前所有管路必须充满甲醇。11.7或者在序列中添加“等度关机方法”进行智能关机。11.8依次从下向上关电源。并闭电脑。最后关总电源。12、安全及操作注意事项12.1流动相冲洗用的水，必须是重蒸水或2次蒸馏水，并用微孔滤膜过滤，而且要定期更换，防止长细菌堵塞仪器管路。建议每周至少更换两次。12.2操作有机溶剂时一律戴一次性手套。12.3流动相中有盐或酸时，在流动相冲洗前后一定要用水冲洗流路，防止柱效下降、堵塞或柱塌陷。12.4仪器使用前后一定要用甲醇或乙腈冲洗流路，平衡色谱柱，赶走管路中的杂质和水分。12.5流动相禁止使用氯仿、三氯（代）苯、亚甲基氯、四氢咲喃、甲苯等；慎重使用四氯化碳、乙醚、异丙醚