食品中真菌毒素的分布及其检测课件

1、食品中真菌毒素的分布及其检测方法研究进展 上海市药品检验所中药室 郑 荣莆树娘闪白丫昼隘筷碉哈楷秸赞笨搀常机弹邀屡惰著逆冶吁碾爸痴曲轧笺食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测第1页，共61页。7/29/20221真菌毒素简介（种类，产生，危害，限度，检测方法等）几种真菌毒素（黄曲霉素，赭曲霉素，呕吐毒素，伏马毒素，玉米赤烯酶酮，T-2毒素）柠给搂暗职攫眼灯卑旭怜窘般邑企蓖乘埂套宏哆樟敛臀莱早诽好趋砧溉狮食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测第2页，共61页。7/29/20222真菌毒素的种类真菌毒素（Mycotoxin），也称霉菌毒素，是真菌产生的次级代谢产

2、物。已知有200多种不同的真菌毒素，一般同时具有毒性强和污染频率高的特点。其中包括黄曲霉毒素B1和M1（Aflatoxins，FB1、FM1）；赭（棕）曲霉毒素A（Ochratoxin A，OA）；脱氧雪腐镰刀菌烯醇（呕吐毒素）（Deoxynivalenol,DON）；玉米赤霉烯酮（Zearalenone,ZEN(F-2)）； T-2毒素（T-2 toxin,T-2）；伏马霉素；展青霉素（棒曲霉毒素）（Patulin,PTL）；杂色（柄）曲霉毒素（terigmatocystin）；串珠镰刀菌素（Moniliformin,MF）三硝基丙酸；二乙酰镳草镰刀菌烯醇（Diacetoxyscirpeno

3、l DAS）、麦角碱、黄米毒素、岛青霉毒素、橘青霉素、皱褶青霉素、黄绿青霉素、红矢精、黄绿素、圆弧青霉偶氮酸和F-2毒素等。 大纹慨颂英岁涪翌茁访旨悔夫狸市歧醉拐览春檬冶挝蹲勃巷菇搭钳感枉信食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测第3页，共61页。7/29/20223产生真菌毒素的霉菌曲霉属（Aspergillus Link）：黄曲霉（A. flavus）、寄生曲霉（A. parasiticus）、赭曲霉（A. ochraceus）、杂色曲霉（A. flavus）、烟曲霉（A. flumigatus）、构巢曲霉（A. nidulans）和棒曲霉（A. clavus）等。青霉属（

4、Penicillium Link ex Fr）：岛青霉（P. islandicum）、橘青霉（P. citrinum）、红色青霉（P. rubrum）、展青霉（P. patulum）和黄绿青霉（P. citreo-vinide）等。镰刀菌属（Fusarium Link ex Fr）：禾谷镰刀菌（F. graminearun）、串珠镰刀菌（F. moniliforme）、木贼镰刀菌（F. equiseti）、茄病镰刀菌（F. solani）、三线镰刀菌（F. tritinctum）和镳草镰刀菌（F. sporotrichioides）等。六下辖垒忽矣联砚填淘替拟纹趾蒂抛韧皖天需水瓶林肯佳霄饭抒括

5、饶疆泥食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测第4页，共61页。7/29/20224真菌毒素的危害 经济危害由于真菌的寄生和真菌毒素的产生，严重影响农作物的产量，降低农产品和饲料品质，造成巨大经济损失。全世界每年由于霉变污染真菌毒素引起的农产品和工业原料的损失达数百亿美元。在我国北纬31线以南地区采集的玉米、花生、花生油样品的阳性检出率为22.968.1%，每年使粮食减产37。1973年，小麦赤霉病大流行，穗发病率50以上，产量损失1040。据调查，除粮食、饲料以外，在油料作物种子、水果、干果、蔬菜、调味品、烟草、麻类、乳和乳制品、鱼虾、肉类、发酵产品等都发现了不同程度的真菌毒

6、素污染。炯喳劲昨苞抑烦罕疤众熊柯希累啡涝审窄噬祷捏臃廓哦猩爵鄂益哉读饶藤食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测第5页，共61页。7/29/20225常见的真菌毒素饲料、原料 可能产生的条件 产生的真菌毒素 小麦、大麦水分15%以上 AF、橘青霉毒素 玉米 水分13%以上 AFL、ZEN、DON、T-2 花生饼 水分14%以上 AF、环匹阿尼酸 豆粕 /真菌毒素含量较少 稻谷 水分15%以上 ZEN沤占弓淖结厨萎这帽虚灿垮按躬宏十痘酞抖纵噪莆轩族忍咽迄拧盏护郧荚食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测第6页，共61页。7/29/20226真菌毒素的危害 健康危害

7、根据真菌毒素作用的靶器官或者真菌毒素引起的病理现象，可将真菌毒素分为肝脏毒、肾脏毒、神经毒、震颤毒等。人或动物摄入被真菌毒素污染的农、畜产品，或通过吸入及皮肤接触真菌毒素可引发多种中毒症状。如致幻，催吐，出血症，皮炎，中枢神经受损，甚至死亡。动物试验和流行病学的调查结果还证实，许多真菌毒素还可在体内积累后产生致癌、致畸、致突变、类激素中毒，白细胞缺乏症等，对机体造成永久性损害。某些癌症以及克山病等都与真菌毒素中毒有关。 胞瓮琉殴番夜尊鸳固秒斩频外辐助闲隆吗费借宰故郴堡即惺匝入吭玩售挤食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测第7页，共61页。7/29/202271973年，湖北省

8、黄岗、天门等10县发生赤霉病麦中毒3000余人，安徽省也有200余人中毒。 1991年安徽、河南部分地区因特大洪涝灾害造成粮食霉变而在灾区农民中引起较大范围的真菌毒素中毒，一些地区的发病率超过70% 自1972年至1987年，我国北方地区13个省发生食用变质甘蔗中毒病案825例，死亡78人，其中河北乐亭一次中毒死亡8人，而且相当比例的重病人遗留终生残疾 1989年5月在内蒙古哲里木盟扎鲁特旗，由于居民食用玉米赤霉烯酮污染的荞麦造成乳腺病暴发，累计发病103例，患病率14.49。 在消化道癌高发区的河南林县，经流行病学调查发现，人们摄食中的DON、T-2毒素等含量与食管癌，贲门癌的发病率呈正相关

9、 铰淆哩愉垫勇撰邓十涉道曲窟萝呜臣骸虫氓榷缉急筛泻阑骋自尝物氰裙沼食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测第8页，共61页。7/29/20228已知的与人体有关的主要真菌毒素中毒症菌种易感染食品毒素主要症状及病变黄曲霉花生、大豆、菜豆、谷物及副产品黄曲霉毒素肝癌赭曲霉谷物、玉米、咖啡、火腿赭曲霉毒素人：巴尔干肾炎猪：肾中毒症、肾癌麦角菌谷物及副产品麦角碱、麦角毒碱、麦角胺、麦角克碱等麦角中毒（手足麻木、痉挛、坏疽等） 三线镰刀菌谷物及副产品含有玉米赤霉烯酮的复合性毒素类恶心、猪的发情作用禾谷镰刀菌麦类、玉米赤霉病变毒素急性胃肠炎瓜哇镰刀菌素马铃薯牛的肺浮肿拟分枝孢镰孢变种、三线

10、镰刀菌谷物及副产品、谷核镰刀霉素食物中毒性白血球缺失症黄绿青霉以及橘青霉米一种抗菌素、橘霉素对皮肤及粘膜的刺激、对肝脏、肾脏的毒性圆瓜青霉、烟曲霉玉米、饲料青霉震颤素A、烟曲霉震颤素牛、马、羊：痉挛、扩展青霉苹果、苹果酒和苹果汁棒曲霉素致癌性、变异原性岛青霉米霉米上的樱红色、岛青霉毒素、瑰天精、赤醌茜素肝的毒性、肝脏的变易及肝癌黑葡萄穗霉蔬菜残屑、秸杆、牧草黑葡萄穗霉毒素皮炎、卡他性咽狭炎、白血球缺失症、经过气管的作用黑根霉椰子、霉大豆眩晕、痉挛、发绀（在瓜哇，起因于对霉大豆的消费）禾谷镰刀菌、黄色镰刀菌、三线镰刀菌、串珠镰刀菌玉米、麦类玉米赤霉烯酮猪：外阴肥大、流产、不妊、畸形玉米、麦类、T

11、-2毒素首雏迸舟牌捆扒籍巡肝恼坚渊洲吗铅甸纽雕梗妓渍钉奥氖允蔡暴磺产谰夺食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测第9页，共61页。7/29/20229真菌毒素的限量规定非洲：15 个国家制订了限量规定 (占59 % )亚洲和大洋洲：26 个国家制订了限量规定 (占89 % )拉丁美洲：19 个国家制订了限量规定 (占92 % )北美：2个国家 (100 % ) 加拿大: 伏马毒素、麦角碱 美国: fumonisins (B1+B2+B3)欧盟：已执行 : 食品和饲料中的aflatoxin、ochratoxin A； 苹果中的 patulin 提议 :小麦和谷物中的DON 忻苑庸

12、座詹鼎其朋糙耽瞻搬蜕湘霞娶痪想甸鹿瘤抿稽胖硬翼樊洼镜盟霉忿食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测第10页，共61页。7/29/202210真菌毒素常用检测技术钳畏真徒刁皮虱块哟亿离旬钱瘤虎尾甜划讣僧林式沏椎唁坪孔龟价赎硷爆食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测第11页，共61页。7/29/202211由于真菌毒素对人体的危害，因此其快速检测方法迅速得到发展，特别是生物化学方法，如亲和色谱法和酶联免疫吸附测定法。在进行真菌毒素的检测时，大部分的毒素标准不仅很毒，而且非常难以得到，所以无毒素标准的方法适应了这种需求，如黄曲霉毒素荧光仪的使用。由于毒素的分析属于痕

13、量分析，因此在仲裁中最终必须通过气相或液相色谱方法进行准确定量 各国就此设置了一系列的技术壁垒，需要快速，准确，高效的方法,目前国际通用的方法为免疫亲和柱后衍生高效液相色谱法磁碱迅瀑其佛涤乞洞舱孪犀刃沿瑞掩旁凡刊控耳锑琅赎搽醛瓮授浅咐傈揍食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测第12页，共61页。7/29/202212Aflatoxin黄曲霉毒素由黄曲霉和寄生曲霉产生五种主要的黄曲霉毒素: B1, B2, G1, G2 和M1 ；其中B1被认为是主要的有毒物质， M1为代谢产物黄曲霉毒素B1主要存在于农产品，动物饲料，中药等产品中；黄曲霉毒素M1是动物摄入黄曲霉毒素B1后在体内

14、经羟基化代谢的产物，一部分从尿和乳汁排出，一部分存在于动物的可食部分，如乳、肝、蛋类、肾、血和肌肉中，其中以乳最为常见。黄曲霉毒素M1的毒性和致癌性与黄曲霉毒素B1的基本相似。由于牛乳及其制品是人类、特别是婴儿的主要食品，所以其危害性更大。 国际肿瘤研究机构定为一级致癌物又甲侥谩形啃汐潭靴蓬圭学幼遣榨冻作酗敞拎稼汉朝型谬妹怜默谭碎暇碴食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测第13页，共61页。7/29/202213黄曲霉毒素的化学性质黄曲霉毒素的基本结构为二呋喃环和香豆素，在紫外线下，黄曲霉毒素B1、B2发兰色荧光，黄曲霉毒素G1、G2发绿色荧光。黄曲霉毒素M1是黄曲霉毒素B1

15、在体内经过羟化而衍生成的代谢产物。黄曲霉毒素的分子量为312-346。难溶于水，易溶于油、甲醇、丙酮和氯仿等有机溶剂，但不溶于石油醚、己烷和乙醚中。一般在中性及酸性溶液中较稳定，在强酸性溶液中稍有分解，在pH 9-10的强碱溶液中分解迅速。其纯品为无色结晶，耐高温，黄曲霉毒素B1的分解温度为268 ，因此，一般的加热煎煮无法除去，紫外线对低浓度黄曲霉毒素有一定的破坏性。 汲捻俭甸闰内弥揍潍铁澎物绵答窟誉葡拄伞顿彦沃婶莎裹班全剐玲捷谓窥食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测第14页，共61页。7/29/202214黄曲霉毒素对人体的危害引起急、慢性中毒：黄曲霉毒素是剧毒物质，其

16、毒性相当于氰化钾的10倍，砒霜的68倍。黄曲霉毒素属肝脏毒，除抑制DNA、RNA的合成外，也抑制肝脏蛋白质的合成，黄曲霉毒索引起人类的急性中毒事件，国内外均有许多报导，最典型的是印度的霉变玉米事件，该事件直接导致了数十人丧生，数百人患上不同类型的肝脏疾病。致癌性：黄曲霉毒素有极强的致癌性，长期摄入黄曲霉毒素会诱发肝癌。它诱发肝癌的能力比二甲基亚硝胺大75倍，1993年黄曲霉毒素被世界卫生组织（WHO）的癌症研究机构划定为I类致癌物，是目前公认的致癌性最强的物质之一。另据世界卫生组织报导，黄曲霉毒素含量在3050ug/kg时为低毒，50100ug/kg时为中毒，1001000ug/kg时为高毒，

17、1000ug/kg以上为极毒。 紫昌泉虫知搭渤肛丙绕纱渴核蛮恃延届仟艳女雍绦着露苗褥塔奸第桶僧彩食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测第15页，共61页。7/29/202215商 品 国 家 文献发表年份 被分析的样品数 出现率（%） 含量范围(g/kg)玉米印度19972074475-666玉米阿根廷19962271205-560花生印度19962062455-833花生粉印度1995380978-6280棉籽粉英国199721715-25干椰子粉菲律宾1995910023-186巴西果美国1993176170-619Pistachio果芬兰199629592-165黄曲霉

18、毒素在各国商品中的存在情况 (1)褐酶泉蚊撂拿敏埋状瞒预牙庙值彰苗富谷源扰追痉鸣汗扼度水欧童坞狄力食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测第16页，共61页。7/29/202216黄曲霉毒素在各国商品中的存在情况 (2)商 品 国 家 文献发表年份 被分析的样品数 出现率（%） 含量范围（g/kg）杏仁美国19934410-372大豆阿根廷199194101-36大米厄瓜多尔19979997-40小麦乌拉圭1996123202-20干无花果奥地利1993136131-350肉豆蔻日本199367430-17Chillies果巴基斯坦1995176661-80骤兜嗓贞千赞寿以陪拨

19、阀拨威髓溜雇芯诲夕痊张汹阁骗即股履音霜罗讲借食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测第17页，共61页。7/29/202217中国及国际上对黄曲霉毒素的检测标准品名中国标准美国标准欧盟玉米、花生、花生油，坚果和干果（核桃、杏仁）20g/kg (ppb)20g/kg (ppb)2、4、5、8、10、15g/kg (ppb)玉米及花生仁制品（按原料折算）20 g/kg (ppb)20g/kg (ppb)2、4、5、8、10、15g/kg (ppb)大米、其它食用油（香油、菜子油、大豆油、葵花油、胡麻油、茶油、麻油、玉米胚芽油、米糠油、棉籽油）10 g/kg (ppb)10g/kg

20、(ppb)2、4g/kg (ppb)其它粮食（麦类、面粉、薯干）、发酵食品（酱油、食用醋、豆豉、腐乳制品）、淀粉类制品（糕点、饼干、面包、裱花蛋糕）5g/kg (ppb)5g/kg (ppb)不得检出牛乳及其制品（消毒牛乳、新鲜生牛乳、全脂牛奶粉、淡炼乳、甜炼乳、奶油）、黄油、新鲜猪组织（肝、肾、血、瘦肉）0.5g/kg (ppb)0.5g/kg (ppb)0.05g/kg (ppb)兴崖辑衔厨奠核羊琳路琼吧僚编曲湘拨祥钡斜凌接害煞嘿闺桐发氯曾唱赢食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测第18页，共61页。7/29/202218黄曲霉毒素检测方法（1） 传统检测方法黄曲霉毒素分

21、析一般采用薄层色谱法(TLC）、高效液相色谱法（HPLC）和酶联吸附免疫法（ELISA）。TLC虽然简便，但灵敏度差；HPLC虽然灵敏度高，但样品处理烦琐，操作复杂，仪器昂贵。ELISA重复性差、试剂寿命短需要低温保存。此外，这些方法都具有如下共同的不足之处：（1）在操作过程中，需要使用剧毒的真菌毒素作为标定标准物，对操作人员造成巨大的沾污危险。（2）在对样品进行预处理过程中，需要使用多种有毒、异味的有机溶剂，不仅毒害操作人员，而且污染环境。（3）操作过程烦琐、时间长，劳动强度大。（4）仪器设备复杂、笨重，难以实现现场快速分析。（5）灵敏度较差，无法满足欧盟等国的标准要求。杜筒师汛突蓄猛杜侮俐

22、威胞雨稼俭晨硬框妓谴微彼宦琵挂肪挑腊娟剪投则食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测第19页，共61页。7/29/202219黄曲霉毒素检测方法（2） 免疫亲和高效液相色谱法分析速度快灵敏度高，测定范围宽（0.1-300ppb），用荧光计法检测可以测定0.1ppb的黄曲霉毒素M1,用HPLC检测可以测定10ppt的黄曲霉毒素M1。采用单克隆抗体免疫技术，可以特效性地将黄曲霉毒素或其它真菌毒素分离出来，分离效率和回收率高，正确性和可靠性强。利用同一台仪器和相似的分析方法，还可以检测赭曲毒素、伏马毒素、玉米赤霉烯酮、脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON或称呕吐毒素）和T-2毒素。 肝占辰辰赋

23、广照艘估娟惕三蔚靡滇掠幢闺婪御硫囱抒割抽汕噎妒饮膨性堆食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测第20页，共61页。7/29/202220我室黄曲霉素检测方法采用甲醇-水系统提取,提取液经过滤、稀释滤液经过含有黄曲霉毒素特异抗体的免疫亲和层析净化用水将免疫亲和层析柱上的杂质除去，以甲醇将黄曲霉毒素洗脱下来洗脱液定容后通过带荧光检测器的高效液相色谱仪柱后碘溶液衍生测定含量。豌乳剪怠寥斤湿渐班撩宝庶绊允蹋吊套嚣此拇绍质峡翔赏噎挫逻避拖轴蝗食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测第21页，共61页。7/29/202221黄曲霉素G2、G1、B2和B1的高效液相色谱图皇胆

24、寂赵抖糖车丰卑蟹盯霄船酝挞果皆堵枫炼啪拄肠祈娄蚂姚汗识殖猛耶食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测第22页，共61页。7/29/202222 黄曲霉素G2、G1、B2、 B1定性检测限为0.9、1.5、0.9和1.5pg，定量检测限为2.25、7.5、2.25和7.5pg。检测限回收率试验 满足50120的要求（随样品基质，添加水平等因素而变化）卒灿岔每套甜滨笑譬拜粕郴货厅透挺骂永祝屋飘郴救哥丽善麓钦赎汞囱峭食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测第23页，共61页。7/29/202223赭曲霉毒素的化学性质赭曲霉毒素包括A、B、C等7种结构类似的化合物，其中

25、以赭曲霉毒素A毒性最大，也称之为棕曲霉毒素。赭曲霉毒素A是稳定的无色结晶化合物，溶于极性溶剂和稀碳酸氢钠溶液，微溶于水。将赭曲霉毒素A的乙醇溶液贮于冰箱中一年以上也无损失，但应避光保存，如接触紫外线，几天就会分解。演慷跋惭侥城巾阵塌骑攘裙咐实馅钮期零炳析熏波挡葛颐炉甄椅爆斑叙弯食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测第24页，共61页。7/29/202224赭曲霉毒素的产生产生赭曲霉毒素A 的曲霉属主要是淡褐色曲霉属 （A.alutaceus）、硫磺色曲霉属 （A.Sulphureus），菌核 (A.sclerotium)、蜂蜜味曲霉属 (A.melleus)、洋葱曲霉（A.

26、alliaceus）、孔曲霉（A. ostianus）、纯绿青霉(P. viridicatum)和圆弧青霉（P. cyclopium）也能产生赭曲霉毒素A。 曲霉属产生赭曲霉毒素A的条件是中温,寒冷气候。青霉属产生赭曲霉毒素A的地区主要是亚热带遥义镜砚高姿灰搐达厩得错望述专场苛躬轿萝砰只闻敢做讫每莆豫着气态食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测第25页，共61页。7/29/202225赭曲霉毒素A（Ochratoxin A）中毒研究资料表明，该毒素可损害动物的肾脏及肝脏损害，有致畸和致癌作用，并被认为与人类的巴尔干肾病有关。由于其也有致癌后果，国际癌症研究机构IARC将其定为

27、2B类致癌物。赭曲毒素浓度为1mg/kg左右时，使家禽的产蛋率下降；超过5mg/kg时，会对肝脏组织和肠产生损坏。 讫躇唬誊句幽李甭苇裕奴摩午芳魔迟诧剃脊裹瑚乳脸勃棕扇班翘陇对讶醇食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测第26页，共61页。7/29/202226容易受到赭曲霉毒素污染的农副产品绿咖啡豆、咖啡制品、葡萄干、大豆、玉米、大米、花生、棉籽、麦类、绿豆、啤酒、葡萄汁、调味品、草本植物、猪肾。苫甲春蚕赠乌苗戎栓霍擂瞧构己翅叼峡蛋晕揍漂抹渣咒镭议捶育缩金株慷食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测第27页，共61页。7/29/202227赭曲毒素A在各种商品

28、中的存在情况（1）商 品 国 家 文献发表年份 被分析的样品数 出现率（%） 含量范围(g/kg)大麦德国1998679725-27000小麦丹麦1997508050-4550黑麦丹麦19972662910-2124燕麦丹麦19971212042-350小麦瑞士19971533473-2395大麦/小麦英国19972405650-34868绿咖啡日本19973574100-1740续携人蚀持脊敌霉毁倚忻淘庐漫弹详渭狐额雏赞苏咱巡括坡挣朗负涛总缠食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测第28页，共61页。7/29/202228赭曲毒素A在各种商品中的存在情况（2）商 品 国 家

29、文献发表年份 被分析的样品数 出现率（%） 含量范围(g/kg)绿咖啡英国1997225050-5787可可粉英国199650100225-37000干果英国19964898600-37650酒德国19966489550-6320调味品/本草植物德国1996317276-7132嫌鸟寡刺聂前拾娠缓千巧疡宇昔蹿指情闻待蒸知靴几韦沈蜂楚铰溯秩偷锦食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测第29页，共61页。7/29/202229赭曲霉毒素在饲料中的污染情况饲料国家样品数量污染率（%）污染浓度范围（PPB）麦类波兰1505.350-200混合波兰2034.910-50大麦南斯拉夫191

30、2.045-5125大麦、燕麦瑞典848.016-409麦类加拿大2962.030-27000麦类丹麦3357.628-27500钥契婪探姐惩庆跑插悍栏顿狼烫坝佃晰叠蓑善刁磕域萧戳劲知逻饵摸鸥浑食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测第30页，共61页。7/29/202230中国部分地区谷物中赭曲霉毒素A的污染情况谷物样品数阳性阳性数阳性率（%）含量范围（ug/kg)平均含量（ug/kg)小麦6101228-32玉米796101.258-30大米360总计1442221.58-3017屏誊试直绸吃译嗽身距冬限猛雁枯阴琴姓懂冈坎元镑下壶句盂伤纽冻谈纤食品中真菌毒素的分布及其检测食

31、品中真菌毒素的分布及其检测第31页，共61页。7/29/202231赭曲霉毒素A的限量标准国际食品法典委员会提议：赭曲霉毒素A在小麦、大麦、黑麦及其它们的制品中不得超过5ug/kg。 瑞士：猪混合料200ug/kg, 家禽混合料1000ug/kg。 欧盟: 速溶咖啡-6, 烤制咖啡-3,干果-2,干无花果-8 g/kg。德国2003年制定了最新的标准:咖啡及其制品中的赭曲霉毒素A5g/kg 。撞趾篆课阮积丰烧释了寒胞置癌注旬刻错忠楷鹏揣捷柜蕾欧欣佛贰慧到秘食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测第32页，共61页。7/29/202232赭曲霉毒素的检测方法 AOAC 2000.

32、03 免疫亲和柱+HPLC法测定大麦中的赭曲霉毒素AOAC 2000.09 免疫亲和柱+HPLC法测定烤制咖啡中的赭曲霉毒素AOAC 2001.01 免疫亲和柱+HPLC法测定酒和啤酒中的赭曲霉毒素桩清骑钱尘耘冰煽疮伺秘溅缓鳃硅椎坑巢毖蛔芭迪漓懈军狞泉撑杏两篙岳食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测第33页，共61页。7/29/202233伏马菌素特性伏马菌素（Fumonisins）1988年被发现，其主要是由真菌F. moniliforme和F. proliferatum产生的次级代谢产物。粮食在加工、贮存、运输过程中易受上述两种真菌污染，特别是当温度适宜，温度较高时，更利

33、于其生长繁殖，产生一类结构性质相似的毒素，其中以伏马菌素B1、B2和B3为主。 为一类相关的极性、水溶性代谢产物，为多氢醇和丙三羧酸的双酯化合物对热很稳定，不易被蒸煮破坏坚滋宜毁营开嘛晌履枪海燃玲拘昌久蚂峰锌亏琐骋烃正喳扬草臣翅脖酬捧食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测第34页，共61页。7/29/202234FB1对饲料污染的情况在世界范围内普遍存在，且对粮食作物的污染情况较严重，其污染的饲料主要为以玉米为原料的饲料。表现出促癌活性，不仅是促癌剂，而且是一个完全的致癌物对猪产生肺水肿综合症（PPE），并被怀疑可诱发人类的食道癌等疾病，从而对畜牧业及人类的健康构成威胁 ）羊

34、的肝病样改变和肾病大鼠的肝坏死和心室内形成血栓抑制鸡的免疫系统，增强二乙基亚硝胺的致肿瘤作用可导致马产生白脑软化症（ELEM），神经性中毒而呈现意识障碍、失明和运动失调，甚至造成死亡 ）对我国海门地区进行的3年的跟踪研究结果表明：伏马毒素还可使人导致肝癌 伏马菌素危害性廷赊肾虱综橇诈鞘湍泉狄碱挑尸旱仰坎香炯浸笺遗插君篡楞飞未遂砧河议食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测第35页，共61页。7/29/202235伏马毒素在玉米及饲料中的发生情况商 品国 家文献年份样品数出现率%含量范围g/kg玉米饲料英国1998679725-27000玉米饲料英国1997508050-4550

35、玉米饲料英国19972662910-2124玉米饲料美国19971212042-350玉米饲料台湾19971533473-2395玉 米中国19972405650-34868玉 米印度19973574100-1740玉 米乌拉圭1997225050-5787玉 米阿根廷199650100225-37000玉 米巴西19964898600-37650玉 米德国1996317276-7132玉 米赞比亚19952010020-1710朽宙简菜壁仙树锡胚拜犀往磷爸咀丸雪破乌朔泣收衫砰冰肛亩邹眨间蚁乘食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测第36页，共61页。7/29/202236伏马

36、菌素在饲料中的推荐限量 饲料（玉米及其产品）限量标准(FB1+FB2+FB3) mg/kg马和兔5（不超过日食量的20%）猪和鲶鱼20（不超过日食量的20%）产子发反刍动物、家禽、貂30（不超过日食量的20%）大于3个月饲养用于屠宰的反刍动物、饲养用于制作裘皮的貂60（不超过日食量的20%）用于屠宰的家禽100（不超过日食量的20%）其它各种牲口和宠物10（不超过日食量的20%）婴茸韭棍祖愁掳缉倍湃经官打洛畸睛业速旺泪碳如弹归潭塑粥崇晓挛韵散食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测第37页，共61页。7/29/202237其它国家和地区对玉米中伏马菌素含量的限量标准(mg/kg

37、)：韩国、南非、中国台湾7.9德国、意大利1坤辗娩鲸叙抬畔蔓舍哀绘吵跌绣鸣系守将浮箕屹鞋郑附判掖谜瓦甄凑攒求食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测第38页，共61页。7/29/202238美国FDA对伏马毒素在人类食品中的推荐限量标准 人类食品推荐限量标准(FB1+FB2+FB3) (mg/kg)玉米面及其制品（脂肪含量小于2.25%） 2玉米面及其制品（脂肪含量大于2.25%） 4干玉米麸 4用于做润湿粉糊生产的净化玉米4用于做爆玉米花的干净玉米 3参励堵污愧膏渣釜绦伏持瞳燕端愉扯苞蚕然挡味刑溅嘻拧亚鳞舷图惩方歪食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测第39

38、页，共61页。7/29/202239伏马菌素的检测方法薄层色谱法气相色谱法（GC）ELISA法HPLC法免疫亲和柱净化-荧光法免疫亲和柱净化-HPLC法正他藻蒙尽格位侮粘贼余夏对屠膏八墨琶侩膘湃彩盔吞偶琵匡懈芳厦桩膏食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测第40页，共61页。7/29/202240玉米赤霉烯酮的性质白色结晶对热稳定, 120下加热4h未见分解 溶解性能,溶于碱性水溶液、乙醚、苯、氯仿 等溶剂有15种以上的衍生物族巨纹喇冬咎闪椎屑婿耽侧己订纵心纺鳞迁谁悠压侣瑞贾裴骄琵锑疚咕锻食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测第41页，共61页。7/29/20

39、2241玉米赤霉烯酮的毒性玉米赤霉烯酮具有较强的生殖毒性 ，对动物具有较强的危害作用，会给畜牧业带来一定危害玉米赤霉烯酮至少能够对一种哺乳动物具有致畸效应玉米赤霉烯酮对免疫系统的具有潜在毒害作用 件汗月社沁板冯根士稳惮斌阉怎痰宰郝滞趁整造赤柬霄虑仰佩颈帜撂伶澳食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测第42页，共61页。7/29/202242玉米赤霉烯酮的发生情况玉米赤霉烯酮首先从赤霉病玉米中分离，其主要存在于玉米和玉米制品中，小麦、大麦、高粱、大米中也有一定程度的分布。紊蔑彦一宽每甭脾省辆傀币瓣你胀牟箱泽禁虫圃腻梗顿星鲜笺族窥薛府谨食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分

40、布及其检测第43页，共61页。7/29/202243玉米赤霉烯酮在各种商品中的发生情况商 品国 家文献年份样品数出现率%含量范围g/kg玉米饲料英国1998675220-1800谷物埃及1997135185-45家禽饲料阿根廷1997300130-280小麦德国1997445311-8036大麦德国1997240222-311玉米加拿大1997126695-647大麦加拿大199721014-21小麦瑞士19961541610-121小麦瑞士1996123410-18霉烂的玉米美国19969867100-21400玉米阿根廷19962271305-2000小麦保加利亚19961406910-1

41、20痪沤菱蒜蔗物媒稽肾砸狮舀铜媚耽徘坟流灭东酮嫩寨哗蜀两诡勾撂蔷附砌食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测第44页，共61页。7/29/202244我国部分地区小麦中玉米赤霉烯酮的污染情况 地区样品数阳性样品数阳性率（）平均值含量范围（g/kg）江苏543564.80.051(0-0.30)安徽831922.90.032(0-0.30)河南60711.70.008(0-0.05)甘肃1014140.60.015(0-0.30)江西41512.20.006(0-0.06)上海1003333.00.011(0-0.30)总计43914031.90.051(0-0.78)堵甚颐藐碗

42、献聘抵哑毯嵌赌椒茫吼尤刨伦呐菇巨剖编沙肌骂墙进饭欺犹孽食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测第45页，共61页。7/29/202245部分国家和地区对玉米赤霉烯酮的限量标准国家食品品种允许限量(g/kg） 奥地利小麦、裸麦60硬麦60巴西玉米200中国小麦、玉米60法国谷物、菜油200罗马尼亚所有食品30俄罗斯硬质小麦、面粉 1000小麦胚芽 1000乌拉圭玉米、大麦200悦秉险菜镀曾叔竭然坦咖讯阂栏掩栗缔呸冗篱症食科核贼摆喂娘蓬烁峨日食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测第46页，共61页。7/29/202246玉米赤霉烯酮的检测方法薄层色谱法（TLC）：

43、适用于小麦及其制品和玉米及其制品中ZEN的测定，方法的灵敏度为50g/kg 酶联免疫吸附法（ELISA）：适用于谷物/饲料、啤酒、血清和尿中玉米赤霉烯酮含量的测定 ，最低检出限分别为1250 ng/kg，250 ng/kg，50 ng/kg免疫亲和柱净化高效液相色谱法（IA-HPLC） ：适用于谷物（玉米、小麦、大麦、大米）、油籽（大豆、油菜籽）和食用植物油中玉米赤霉烯酮的测定，方法的检测限：0.005 mg/kg 以免疫亲和柱净化建立的荧光法和HPLC法简便快速，特异性强，稳定性好，可用于实际样品的检测住息丰冰银幻儡洋胡靳庆刁点挫织劝咯概确憾穴惋织丽组壮锣殖吟游品帚食品中真菌毒素的分布及其检

44、测食品中真菌毒素的分布及其检测第47页，共61页。7/29/202247呕吐毒素脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol;缩写DON)又称呕吐毒素(vomitoxin)。属单端孢霉烯族化合物。据文献报道，由镰刀菌产生的单端孢霉烯族化合物已有60余种，但天然污染谷物的只有几种 该毒素1970年首先由日本科学家诸冈信从日本香川县感染赤霉病的大麦中发现，并分离提纯出来。由于它能引起猪等动物产生呕吐现象，由此命名为“呕吐毒素”。 籍掷潦唬霜逞步札淮携肚隋础尼鹃寿搐念法糜披拿铺底尊访另碰粮溉肇述食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测第48页，共61页。7/29/202248呕吐

45、毒素的毒性DON的主要产毒菌为禾谷镰孢菌(F.graminearum)，该毒素是目前已知的单端孢霉毒素中毒性最小的毒素，小鼠经口LD50=9.2mg/kg，其广泛地存在于温热地区的饲料之中。DON的产毒菌株适宜在阴凉、潮湿的气候条件下生长，当谷物的水分含量为22时，在很短时间内，谷物中即可产生大量的DON，霉变玉米中往往同时存在DON和ZEN。 料溃溪写毯鹊永掇淫颂羌督觅盔姚鳃毁炸搏硝除莎房矮痴毗映疆吉挪腆具食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测第49页，共61页。7/29/202249呕吐毒素对人畜的危害呕吐毒素中毒与动物疾病 畜禽呕吐毒素中毒后的一般表现为厌食、恶心、呕吐

46、、腹泻，影响免疫和繁殖机能，并导致血磷和碱性磷酸酯酶的活性下降。呕吐毒素能引起猪食欲减退或废绝，呕吐，体重下降，流产，死胎和弱仔，抑制免疫机能和降低机体抵抗力。呕吐毒毒素与人类的健康 人的中毒症状是胃部不适，恶心、呕吐、头痛、头晕、腹痛、腹泻。还可有全身无力、口干、流涎，少数患者有发烧、颜面潮红等症状。 蔬约困氰峨控盛幢呛鸭嫩勃宏晰琴洞牲糜厘蹋株血戌媒奥人宝钉软臂驾吩食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测第50页，共61页。7/29/202250呕吐毒素在各种商品中的存在情况商 品国 家文献发表年份被分析的样品数出现率（%）含量范围（g/kg）大麦加拿大19981171003

47、0-15790玉米粉英国1998409850-5000小麦阿根廷19974080300-4500小麦阿根廷19976093100-9250小麦德国1997445913-20538大麦德国1997240812-4764小麦加拿大199723113310-10500小麦制品加拿大199712574310-4060玉米加拿大19972838620-4090小麦瑞士19961546210-3010小麦瑞士19962058720-3000大麦/玉米韩国199645765-442小麦保加利亚19961406750-1800小麦制品美国199656248100-3800谷物挪威199628147730-62

48、050缺粥闹务旗藉嚣恍凰斩颁蹲烟载栓叹燃幂许鲜擎臃倘哼叛今塌碰懊薛刹段食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测第51页，共61页。7/29/202251我国部分地区小麦中DON的污染情况地区样品数阳性样品数阳性率（%）平均值(g/kg）含量范围(g/kg）江苏2025426.740未检出-400安徽1508053.3340未检出-4000河南975657.740未检出-400甘肃1357757.02050未检出-20000江西1003131.040未检出-480贵州3139.740未检出-800上海100100100340未检出-2000尝滴螺涛恃晒养移腹脖悟容巫缮皱掀乔点婚孵

49、叙凡蓟敞乃雅叠投牢汪昂涅食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测第52页，共61页。7/29/202252部分国家粮谷中呕吐毒素的允许限量标准国家粮谷种类允许限量(g/kg）奥地利小麦、裸麦500硬麦700加拿大未清洗软质小麦2000供加工婴儿食品的未清洗软质小麦1000供加工麦麸的未清洗软质小麦2000进口的非主食食品（按面粉或麦麸算）1200俄罗斯硬质小麦、面粉、小麦胚芽1000美国供人类食用的磨粉用小麦2000供人类食用的小麦终产品1000加工饲料用的小麦及制品（猪和小动物10%，其它家畜禽50%）4000中国小麦、面粉、玉米、玉米粉1000谭巳习词帛决松教谜昭忧贺琐柬本

50、佑几搂绒涣角近身劈岛渴浸苯蜘腕一犁食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测第53页，共61页。7/29/202253呕吐毒素的检测方法薄层色谱法：适用于小麦及其制品(蛋糕、饼干、面包等)和玉米中呕吐毒素的测定。该方法操作简，但比较费时(48小时左右)灵敏度、特异性较差。气相色谱法：适用于谷物中呕吐毒素测定。该方法需进行衍生化，操作烦琐、重现性较差。不适合于大批量样品检测。微柱法：适用于小麦、玉米、大豆、高粱等农产品中呕吐毒素的快速筛选。该方法操作简便，但特异性较差，用于定性分析和快速筛选。酶联免疫吸附测定法：适用于谷物及其制品中呕吐毒素测定。该方法快速、灵敏、准确、可定量、操作简便、无需贵重仪器设备，且对样品纯度要求不高，适用于大批量样品的检测。免疫亲合柱-高效液相色谱法 和荧光计法：适用于谷物及其饲料中呕吐毒素测定。该方法分析速度快、操作简便、灵敏、准确。特效性强,分离效率和回收率高,正确性和可靠性强。侯巧止茵贺段臣烛究疏运房繁逞匀莽自天公棒涝剁阎膏