人教版高考生物一轮复习【选修三现代生物技术专题】

1、专题1基因工程一、基因工程的概念及优点定义按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新 的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型等；原理操作水平优点(1)与杂交育种相比：克服了的障碍。(2)与诱变育种相比：改造生物的遗传性状。二、基因工程的基本工具1.限制性核酸内切酶(简称):(1)来源：主要是从生物中分离纯化出来的。(2)作用：识别特定的 并切开相应两个核甘酸之间的(3)结果：产生 或平末端。2. DNA连接醐：在两个核甘酸之间形成磷酸二酯键以连接两段DNA片段。种类来源特点_DNA连接酶只能“缝合”具有的双链DNA片段T.DNA连接酶既可以“缝合

2、”双链DNA片段互补的；又可以“缝合”双链DNA片段的；3.载体：(1)种类：、入噬菌体的衍生物、等。通常使用的是.(2)质粒特点：(有特殊的质粒特点 能自我复制I有一个至多个三、基因工程的基本操作程序.目的基因的获取：(1)目的基因；主要是指编码蛋白质的。(2)目的基因的获取：获取方法从基因文库中获取 利用PCF?技术扩增 人工合成X.基因文库定义将含有某种生物不同基因的许多DNA片段，导入受体菌的群体中储存，各 个受体菌分别含有这种生物的不同的基因。基因组文库包含了一种生物的的基因文库；cDNA文库只包含了 一种生物的的基因文库；PCR技术全称多聚酶链式反应；条件模板、四种游离的脱氧核甘酸

3、、能量、等；过程变性（9095） f 复性（5560） f 延伸（7075）人工合成 目的基因化学合成法己知核甘酸序列的较小基因，直接利用DNA合成仪用化学方法合成；逆转录法mRNA逆转录酶.单链DNA 睥.双链DNA (目的基因).基因表达载体的构建一一基因工程的核心：(1)基因表达载体组成的元件：、启动子、终止子、(2)构建目的：使目的基因在 中稳定存在，并且可以遗传给下一代。使 能够表达和发挥作用。(3)构建:运我体目的基因同种限 制薛切 利* 产生相同的 黏性末软或平 末端一I 产 生相同 的黏性未结或平 末嫡重组DNA分子3.将目的基因导入受体细胞:导入植物细胞受体细胞植物体细胞导入

4、方法；(通常采用)； ；导入动物细胞受体细胞；(通常采用)导入方法导入微生物细胞受体细胞原核细胞；导入方法先用处理细胞f使细胞处于一与重组表达载体DNA分子混合一感受态细胞吸收重组DNA分子；4.目的基因的检测与鉴定:类型检测内容方法分子水平检测转基因生物的DNA上是否插入rDNA分子杂交技术（DNA和DNA之间）目的基因是否转录出了分子杂交技术（DNA和mRNA之间）目的基因是否翻译成抗原一抗体杂交技术个体水平鉴定抗虫或抗病接种实验，以确定是否有抗性以及抗性的程度四、基因工程的应用.植物基因工程：主要用于提高农作物的，以及改良和利用植物 等方面.动物基因工程：主要应用于动物品种改良、建立、等

5、方面。.基因工程药物：来源于转基因的.基因治疗：把导入病人体内，使该基因的 发挥功能。五、蛋白质工程.流程图：写出流程图中字母代表的含义：A. B. C. D. E.结果：改造了现有蛋白质或制造出.应用：主要集中应用于对 进行改造，改良生物性状。【核心主干答案】一、基因重组 DNA分子水平远缘杂交的不亲和定向二、1.限制酶原核核甘酸序列磷酸二酯键黏性末端.大肠杆菌大肠杆菌黏性末端 T“噬菌体黏性末端平末端.质粒动植物病毒质粒标记基因限制酶切割位点三、1.基因全部基因部分基因 引物对 Taq酶.目的基因标记基因 受体细胞中目的基因.农杆菌转化法基因枪法花粉管通道法受精卵显微注射技术转化法 Ca感

6、受态.目的基因 mRNA 蛋白质四、抗逆能力农作物的品质生产药物生物反应器器官移植工程菌正常基因表达产物 五、转录翻译分子设计多肽链预期功能一种新的蛋白质蛋白质的功能1.与DNA分子相关的酶的比较：作用底物作用部位形成产物限制酶DNA分子磷酸二酯键黏性末端或平末端DNA连接酶DNA片段磷酸二酯键重组DNA分子DNA聚合醉脱氧核甘酸磷酸二酯键子代DNADNA解旋酶DNA分子碱基对间的氢键解旋成脱氧核甘酸单链DNA水解酶DNA分子磷酸二酯键游离的脱氧核甘酸2.启动子、终止子与起始密码子、终止密码子的区别:启动子起始密码子终止子终止密码子位置位于DNA上位于mRNA上位于DNA上位于mRNA上本质一

7、段具有特殊结 构的DNA片段三个相邻的碱基一段具有特殊结 构的DNA片段三个相邻的碱基作用驱动转录过程启动翻译过程终止转录过程终止翻译过程（限制性核（DMA ）酸丙切酶J连接切J基因进入受体细胞的载体J基 因 工 程DNA重组技术的基本日真J基因工】程的基本操作基因工 程的应 .用4.荧光素前及其合成基因在生物研究中有着广泛的利用。(1)荧光素酶基因常被用作基因工程中的标记基因，其作用是将 筛选出来。(2)下表为4种限制酶的识别序列和酶切位点，下图为含有荧光素酶基因的DNA片段及其具有的限制酶切 点。若需利用酶切法(只用一种酶)获得荧光素酶基因，最应选择的限制酶是。Msp IBamY IMbo

8、lSma I荧光素酶基因(3)可将具有上述荧光素酶基因的载体导入动物细胞的技术中，应用最多的、最有效的是 o 经一系列步骤，将所获得的胚胎早期培养一段时间后，再移植到雌性动物的 或子宫内，使其 发育成为具有新性状的动物。(4)荧光素酶在ATP的参与下，可使荧光素发出荧光。生物学研究中常利用“荧光素-荧光素酶发光法”来 测定样品中ATP的含量。某研究小组对“测定ATP含量时所需荧光素酶溶液的最佳浓度”进行了探究。【实验材料】lX10*mol/L的ATP标准液、缓冲溶液、70 mg/L荧光素溶液(过量)、浓度分别为10、20、30、40、50、60、70的荧光素酶溶液(单位：mg/L)。4发光强度

9、(* RLU)【实验结果】见图。14.d e f g【实验分析与结论】12 -S 实验过程：；为使结果更加科学准确，应增设一组 作为对照。除题 6- a4 -2 () 10 20 30 40 50 60 70荧光素酶浓度(mg/L) 目己涉及的之外，还需要严格控制的无关变量有(至少写出一个)。实验结果：由图可知，点所对应的荧光素酶浓度为最佳浓度。答案：(1)含有目的基因的细胞(2)Msp 1(3)显微注射技术输卵管(4)0 mg/L荧光素酶溶液温度(反应时间)d专题2细胞工程核心主干一、细胞工程的概念理解项目内容原理方法和操作水平或细胞器水平目的改变细胞内的或获得细胞产品特点定向性：按照人的意

10、愿广泛性：克服了的障碍类型和动物细胞工程二、植物细胞工程.植物细胞的全能性(1)概念：具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞，都具有。(2)物质基础：细胞内含有本物种全部的.(3)体内细胞全能性不表达的原因：基因在特定的时间和空间条件下,形成不同的组织、器官。.植物组织培养技术(1)原理：o(2)概念理解：培养对象：离体的,培养条件：、人工配制的培养基、相关等培养结果：产生、丛芽，最终形成(3)操作流程:外植体脱分化再分化不获，愈伤组织-3无生长发育胚肤体或从芽完整植株.植物体细胞杂交技术(D概念：将 的植物体细胞，在一定条件下融合成,并把杂种细胞培育成 的技术。(2)操作流程：过程a为去除获

11、得具有活力的原生质体，用到的酶是过程b是原生质体的融合，其原理是。诱导b融合的两种方法：a.物理法包括 等；b.化学法一般用 作为诱导剂。过程C是原生质体融合后再生出 OC过程之后用到 技术，其原理是 O(4)意义：-.植物细胞工程的实际应用(1)植物繁殖新途径：、作物脱毒、.(2)作物新品种的培育：育种、的利用。(3)细胞产物的工厂化生产：细胞产物有蛋白质、脂肪、糖类、香料和生物碱等。三、动物细胞工程动物胚胎吊 或幼龄动 物的纽织细胞株 -细胞系10代少、50代少、不死“细胞 细胞一细胞传代培养.动物细胞培养 (1)操作流程：会微成、细胞贴壁、分板单个细胞 悬浮液 生长 培养 原代培养注：剪

12、碎、胰蛋白醉处理；加入培养液；出现接触抑制，用胰蛋白悔处理;(2)培养条件：无菌、无毒的环境：对_和所有培养用具进行无菌处理，添加 ，定期更换培养液以营养：除正常的有机和无机营养外，加入 等一些天然成分。适宜的温度和pH：温度为(哺乳动物)，pH为 o气体环境：含95%空气加 的混合气体，其中后者的作用是。(3)应用：生物制品的生产，检测,医学研究。.动物体细胞核移植技术(D概念：将动物一个细胞的 移入一个已经去掉细胞核的 中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为。过程:(B羊)细胞佟少卜/含养至戒U中期通迂显赧掾作除去堂田的核白妗母羊(A 等 )分离手匕滕细月包供侔细广，培养

13、细胞洋亥注入去核的即用/田胆中董细细胞 产期在/合培养 早期麻胎刃台移彳弋学省军(C年)克隆羊(3)原理：.(4)应用前景：加速家畜 进程，促进优良畜群繁育。保护。生产医用蛋白。作为异种移植的。用于组织器官的。存在的问题：非常低。克隆动物存在健康问题，表现出。存在克隆动物食品的问题。(6)克隆动物：用 方法得到的动物。.动物细胞融合(1)原理：o融合方法：聚乙二醇(PEG)、电激等。(3)意义：突破了的局限，使成为可能，也为制造开辟J新途径。.单克隆抗体制备过程:注射特定的抗原蛋白骨髓瘤 细胞B淋巴细胞杂交细胞第I次筛选：筛选出体外培养/体内培养从培养液中提取筛选第2次筛选：筛选出的杂交瘤细胞

14、从小鼠月复水 中提取AA 丫人单克隆抗体2?杂交瘤细胞(2)优点：特异性强、,可大量制备。(3)用途：作为,用于治疗疾病和【核心主干答案】一、细胞生物学分子生物学细胞遗传物质远缘杂交的不亲和植物细胞工程 二、1.全能性遗传物质选择性表达.植物细胞具有全能性植物器官、组织、细胞无菌植物激素胚状体.不同种杂种细胞新的植物体细胞壁纤维素酶和果胶酶细胞膜具有流动性离心、 振动、电刺激 PEG 细胞壁植物组织培养植物细胞具有全能性克服了远缘杂交的不亲和障碍.微型繁殖人工种子单倍体突变体药物三、1.培养液 抗生素 清除代谢产物 血清36.5 + 0.57. 2-7. 45%CO2调节Ph,维持pH的稳定有

15、毒物质.细胞核卵母细胞动物个体动物细胞核具有全能性遗传改良濒危物种供体移植 成功率遗传和生理缺性安全性核移植.细胞膜具有流动性灭活的病毒有性杂交方法远缘杂交单克隆抗体.杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞灵敏度高诊断试剂运载药物动物细胞融合与植物体细胞杂交的异同:比较项目细胞融合的原理细胞融合的方法诱导手段用途植物体细 胞杂交细胞膜的流动性用纤维素酶、果胶酶去除细 胞壁后诱导原生质体融合离心、电刺激、振动、PEG诱导克服远源杂交不 亲和，获得杂种 植株动物细胞 融合细胞膜的流动性用胰蛋白酶使细胞分散后 诱导细胞融合除植物细胞杂交手段 外，还有用灭活病毒诱 导制备单克隆抗体.下

16、图是科学家利用小鼠成纤维细胞获得单克隆抗体的示意图。据图回答:H1N1抗原 I(1)获取转录因子基因需要的工具酶是,因成纤维细胞较小，过程将目的基因 导入小鼠成纤维细胞时常用的载体是。(2)过程称为,在此过程中，成纤维细胞在转录因子基因的作用下，转化为iPS胚性 细胞，在体外培养条件下，iPS胚性细胞能不断进行。(3)过程为动物细胞融合，此过程常用、灭活的病毒、电刺激等诱导细胞融合，融 合后的Y细胞具有 的特性。(4)对杂种细胞丫进行 和 后，才能筛选出能产生特异性抗体的杂种细胞。答案：(1)限制酶动物病毒(2)动物细胞培养 细胞增殖(细胞分裂)(3)聚乙二醇(PEG)既能大量增殖，又能产生单

17、一抗体(4)克隆化培养(抗原-)抗体检测.阅读材料，完成下列问题：植物组织培养技术应用范围很广。科学家通过植株组织培养方法，诱导离体的植物组织形成具有生根发芽 能力的胚状结构(胚状体)，然后将胚状体包埋在一个能提供营养的胶质中，便成了所谓的“人工种子”。 我国科学家利用组织培养技术已成功地在烟草、水稻、小麦和玉米等植物上诱导出胚状体，世界各国正着 手于将人工种子推向商品化。(1)通过试管培养植物组织，获得胚状体要经过、过程。(2)用于植物组织培养的培养基中除植物激素、蔗糖和维生素等有机物外，还应有,且操作过程应在 条件下进行。(3)若胚状结构在试管中继续培养，则可培养出完整的植株幼苗，这体现了

18、植物细胞的。 答案：(D脱分化 再分化 (2)无机盐 无菌 (3)全能性.选取A、B植株的细胞进行如下图操作，请回答：(D实现图中的过程最常用的方法是。过程为诱导原生质体融合，所用的诱导方法有，融合完成的标志是；若细胞A内含a条染色体，细胞B内含b条染色体，则“杂种细胞”内含 条染色体；若A、B植株采用常规杂交育种方法成功的话，得到的后代含 条染色体，必须用 来处理幼苗，才能得到可育的杂种植株，其中含有 条染色体。这两种方法相比，体细胞杂交方法的优点是：。(4)如果原生质体A为小鼠的浆细胞，原生质体B为小鼠的骨髓瘤细胞，诱导二者融合时，独特的方法是 用 处理。答案：(1)酶解法离心、振动、电刺

19、激、PEG产生出新的细胞壁(3)a+b(a+b) /2秋水仙素a+b克服了远缘杂交的不亲和障碍(4)灭活的病毒.下图表示胡萝卜的韧皮部细胞通过无菌操作接入试管后，在一定的条件下，形成试管苗的培育过程，据 图回答下列问题：韧皮 部细 胞培养基(1)要促进细胞分裂生长，培养基中应有营养物质和激素。营养物质包括 和小分子有机物，激素包括细胞分裂素和 两类植物激素。此过程依据的原理是和B阶段主要进行的分裂方式是, B阶段除了细胞分裂外，还进行细胞 等。(3)此过程要无菌操作，主要是指对 进行灭菌消毒。B阶段需要光照，原因是。(4)试管苗的根细胞没有叶绿素，而叶的叶肉细胞具有叶绿素，这是基因 的结果。答

20、案：(1)水、无机盐 生长素植物细胞具有全能性有丝分裂 分化培养基再分化过程中合成叶绿素需要光照(4)选择性表达专题3胚胎工程栈心主干一、体内受精和早期胚胎发育.体内受精：精子和卵子的发生：精 子 的 发 生场所时间初情期f生殖机能衰退过程第一阶段：精原细胞的形成有丝分裂；第二阶段：精子细胞的形成减数分裂；第三阶段：精子细胞变形成精子；变形细胞核;高尔基体:中心体;线粒体:其它物质;卵 子 的 发 生场所时间胎儿时期和初情期后过程卵泡的形成和在卵巢内的储备，是在出生前(胎儿时期)完成；减数第一次分裂在排卵前后完成；减数第二次分裂在精子和卵子结合的过程中完成：(2)受精的场所：雌性动物的 内。(

21、3)受精的过程。受精前的准备阶段。a.精子获能：正常情况下在雌性动物的 内完成。b.卵子的准备：发育到,才具备与精子受精的能力。受精阶段。a.获能的精子穿越 和 ob.精子外膜与 融合，精子入卵。c.精、卵细胞经过一系列变化分别形成.d_充分发育后融合，完成受精。.早期胚胎发育；卵裂期桑根胚一 一原肠胚。二、体外受精和早期胚胎培养.体外受精：(1)的采集和培养。从雌性动物的 或 中采集卵母细胞；(2)精子的采集和 。采集精子的方法：、;j放入人工配制的 中获能处理，,:放在一定浓度的 或钙离子栽体A23187溶液中受精：可以在或 中完成受精过程；2.胚胎的早期培养:培养体外受精后，将受精卵移入

22、中继续培养，检查受精状况和发育能力；培养液成分AA、核甘酸、无机盐、有机盐、维生素、激素和等；胚胎去向受体移植,冷冻保存移植时间牛、羊一般培养到或阶段才移植；小鼠、家兔在更早的阶段移植；.人在816个细胞阶段移植；三、胚胎工程的应用及前景1.胚胎移植：定义是指将雌性动物体内的早期胚胎，或者通过体外受精及其它方式得到的早期胚胎，移植到的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术；地位胚胎移植是胚胎工程的;意义生理学基础移入：排卵后，的生理变化是相同的。收集：早期胚胎处于。存活：受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生遗传性：供体胚胎可与受体子宫建立正常的联系，但移入受体的供体胚胎的不受任何影响。

23、基本程序对供、受体的选择和处理：处理：用激素进行处理；配种或进行人工授精：处理：用进行处理；胚胎的收集、检查、培养或保存：用将冲洗出来；胚胎的移植：a.方法, 、b.移植后的检查：对受体母牛进行是否的检查；2.胚胎分割:定义指采用机械方法将切割成2等份、4等份或8等份等，经过移植获得同卵双胎或多胎的技术；定位属于繁殖或克隆的方法之一：时期选择发育良好、形态正常的或注：胚胎分割时，要注意，否则会1取DNA外帆压力IJ金/b叼耿；3.胚胎干细胞（ES / EK细胞）:来源来源于：或;形态特征功能特性具有;应用可用于治疗人类疾病；培育移植用的人造组织器官；是研究体外细胞分化的理想材料：a.胚胎干细胞

24、在上，或在加入的培养液中，能维持状态；b.培养液中加入,可以诱导胚胎干细胞向不同类型的组织细胞分化；【核心主干答案】一、1.睾丸中的曲细精管精子头的主要部分头部的顶体精子的尾线粒体鞘原生质滴卵巢 输卵管生殖道内减数第二次分裂中期放射冠透明带卵细胞膜雌雄原核 雌雄原核.受精卵 囊胚二、1.卵母细胞卵巢 输卵管获能假阴道法手握法电刺激法培养法获能液化学诱导法肝素获能液专用受精溶液.发育培养液血清桑根胚囊胚三、1.同种且生理状态相同最后一道工序充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力生殖器官游离状态 免疫排斥反应生理和组织遗传特性同期发情促性腺激素超数排卵冲卵装置早期胚胎 手术法非手术法妊娠.早期胚胎无性桑根

25、胚囊胚将内细胞团均等分割影响分割后胚胎的恢复和进一步的发育 滋养层细胞.早期胚胎原始性腺细胞体积小、细胞核大、核仁明显发育的全能性饲养层细胞抑制因子不分化分化诱导因子专题4生物技术的安全性和伦理问题核心主干1.对转基因生物安全性的争论:存在安全性 的原因对基因的结构、基因间的相互作用及基因的调控机制等了解有限；转移的基因，不少是异种生物的基因；外源基因插入宿主基因组的部位往往是随机的；食物安全：（反对“实质性等同”、滞后效应、过敏原、营养成分改变）安全性问题生物安全：（对生物多样性的影响）环境安全：（对生态系统稳定性的影响）2.关注生物技术的伦理问题克隆人a.中国政府的态度：禁止生殖性克隆，不

26、反对治疗性克隆； b.四不原则：不赞成、不允许、不支持、不接受；试管婴儿应注意防止有人滥用设计试管婴儿技术；基因检测基因筛检可能给受检者在诸多方面带来难以承受的歧视和心理压力：3.禁止生物武器_韶江苗 盥疽赶苗a.双泅困帆及困、灰IBJI困生物武器的种类0.两理人化讷母、切物殂讷母困击打的土去C.王化母刑宙田济咸存需甑开U策后后书a.荃囚里犯UJXXJ内国里组沏L唇酒每、制型丽两母我国的态度不发展、不生产、不储存，并反对生物武器及其技术和设备的扩散；查爆豆科期胚胎工程知识网络图:K理论A子的发 与获能J精子采集-舄我能体内受精应用卵母细胞 的采集与 培养体 夕卜精受 精 卵卵子的、生与准胚月台

27、发育卵裂早 期氏Y 胚月台移植）月口 培（ 胚胎干细月优）G 式管动物技术）典班刑伸i.回答以下关于基因工程和胚胎工程的相关问题：（1）基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以 新的遗传特性。利用基因工程等技术培育转基因生物时，基因工程的四个步骤如下：第一步：目的基因的获取。获取方法有 （写出两种即可）。第二步：基因表达载体的构建。该步骤常用的工具酶是。完整的重组载体应 具备 种特殊DNA片段。第三步：将目的基因导入受体细胞。若受体细胞为动物的，则常用的方法是显微 注射法；若受体细胞为微生物细胞，则用 处理细胞，使其处于感受态，然后在一定温度下

28、将重组表达载体与缓冲液混合完成转化。第四步：o(2)胚胎工程主要是对哺乳动物的胚胎进行某种人为的工程技术操作，然后让它继续发育，获得人们所需 要的成体动物的新技术。体外受精：对精子进行获能处理的方法有 o获能的精子与成熟的卵子需在 中完成受精作用。早期胚胎的发育：受精卵不断增殖的过程，细胞分化最先出现在 期。胚胎移植：适合移植的胚胎是 0答案：(1)从基因文库中获取、利用PCR技术扩增、人工合成限制酶和DNA连接酶 5 受精卵 Ca24目的基因的检测与鉴定(2)培养法和化学诱导法获能溶液或受精溶液囊胚桑根胚或囊胚.人的血清白蛋白有着广泛的药用价值，科学家通过培育乳腺生物反应器生产人血清白蛋白，

29、流程如下:能够在乳汁中提 取人血清白蛋白(1)在基因工程中，被称为。若因数量少而不能满足生产需要，常利用 技术进行扩增。(2)应该取自 (填“雄性”或“雌性”)荷斯坦奶牛，由到的过程中，需将用 处理后进行培养。(3)从到的过程中,用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞，原因是； 作为受体细胞的卵母细胞需培养至 期：形成时常通过 (物理方法)进行激活，使其完成分裂和发育进程。(4)培养至后，可通过 技术获得多个，从而提高胚胎的利用率。胚胎移植的实质是。答案：(1)目的基因 PCR(2)雌性胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)(3)传代10代以内的细胞一般能保持二倍体核型MH中(或减数第二次分裂中

30、期)电脉冲(或电刺激)(4)胚胎分割早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移.下面是有关胚胎工程的相关问题，请回答：(1)胚胎工程技术包含的内容很丰富，目前在生产中应用较多的是家畜的、和 体外 技术。(2)哺乳动物的体外受精主要包括、和受精等几个主要步骤。(3)精子与卵子在体外受精后，应将受精卵移入 中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力。(4)胚胎干细胞是研究体外细胞分化的理想材料，它除了能从早期胚胎中分离外，还可以从 获得。胚胎干细胞在饲养层细胞上，或在添加抑制因子的培养液中，能够维持 的状态。答案：(1)胚胎移植胚胎分割生产胚胎(2)卵母细胞的采集(和培养)精子的采集和获能(精子

31、的获取)(3)发育培养液(4)原始性腺 不分化 4. Ragz基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag?基因缺失小鼠进 行基因治疗。其技术流程如图：分离、培养ES细胞覆ES细胞(1)步骤中，在核移植前应去除卵母细胞的。(2)步骤中，重组胚胎培养到 期时，可从其内细胞团分离出ES细胞。(3)步骤中，需要构建含有Rag?基因的表达载体。可以根据Rag?基因的 设计引物，利用PCR技术扩增Ragz基因片段。用HindlH和Pst I限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag?基因片段。为 将该片段直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有 酶的酶切位点。(4)为检

32、测Rag?基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的,用抗Rag?蛋白的抗体 进行杂交实验。答案：(1)细胞核 (2)囊胚(3)核昔酸序列 HindHI和PstI (4)蛋白质专题5 生态工程楂心上于.建设目的：遵循自然界 的规律，充分发挥资源的生产潜力，防止，达到 和 的同步发展。.特点：、多效益、的工程体系。.基本原理：(1)物质循环再生原理：物质在生态系统中、分层分级利用。(2)物种多样性原理：物种繁多而复杂的生态系统具有较高的 o(3)协调与平衡原理：处理好生物与环境的协调与平衡，需要考虑.(4)整体性原理：进行生态工程建设时，不但要考虑 的规律，还要考虑到 等系统的影响力。(5)系统

33、学和工程学原理。系统的结构决定功能原理：生态工程通过，达到改善系统功能的目的。系统整体性原理：系统各组分之间要有适当的,完成能量、物质、信息等的转换和流通，实现 大于各部分之和的效果。.生态经济：(1)原则：二(2)结果：使一个系统产出的污染物，能够成为本系统或者另一个系统的。(3)目的：实现 o(4)实现循环经济最重要的手段之一：。【核心主干答案】.物质循环环境污染经济效益生态效益.少消耗可持续.循环往复抵抗力稳定性环境承载力自然生态系统经济和社会改变和优化结构 比例关系 总体功能.循环经济生产原料废弃物的资源化生态工程.实施生态农业(1)意义：实现了物质和能量的多级利用，提高了能量的利用率

34、；(2)遵循的原理：物质循环再生原理、物种多样性原理；.除草、消灭害虫等的意义：调整能量流动关系，使能量流向对人类最有益的部分;.能量的传递效率不可改变；能量的利用效率可以改变；.回答下面生物工程的有关问题：(1)基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤，其中的核心步骤是。 若要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的 中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的 上。植物组织培养的主要原理是植物细胞具有，具体过程是在 和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织或细胞培养在人工配制的培养基上，给予适宜的条件，诱导其经过 产生愈伤组织等，最终形成完整的植株。(3)在哺乳动物的核转移实验中，通过一定的措施将受体细胞激活，使其进行细胞分裂和发育，当胚胎发 育到 阶段时，将胚胎移入受体(代孕)动物体内.(4)生态工程是实现循环经济最重耍的手段之一，请写出它遵循的基本原理