不同给药方法对线虫药物吸收效率的影响

1、不同给药方法对线虫药物吸收效率的影响DrugAbsorptionEfficiencyinCaenorhbditiselegansDeliveredbyDifferentMethodsShan-QingZhenglr2jAi-JunDing12,Guo-PingU3TGui-ShengWu4rHuai-RcngLuq1SldteKeyLaburdi-i口ryofPhyiochemistiy日ndPtmlinWesIQirid,.KurrningIratilLrleerfhinew;AcademyerfSdenc口Kuirning.Yu.rn.ai,Qiino.UnkefsityChlnweAca

2、demyof$dencffis晒町gChina.3Thekejrlaboratoryoftenaiilcs;BefjhgHosptai&e&JmgInEfltuceflfGeriJirtcSiWirst7ofH&alih,Bejing.CMnaKeyLatxifaic*yofAnimalModels,and)HumanDseasjeMechantsms;ChineseAcatiennofSciences弘vunnanProvinceKuuvnmgInsirtuceo*Zoology,Kinming.YunnaixChrna秀丽隐杆线虫在许多研究领域被大量用作的模型生物，并经常伴随着不同的给药方

3、式将药物传递给线虫的方法因研究的不同而不同，因此很难比较研究结果。研究者用五种常用的低水溶性白藜芦醇和水溶性5-氟-2-脱氧尿苷(FUDR)为阳性化合物对线虫的药物吸收效率进行了评价。白藜芦醇和FUDR在线虫体内的浓度逐渐增加，在12小时至一天内达到最高，然后缓慢下降。同时，药物浓度越高，代谢率越高。在同一时间点，喂食死菌的线虫体内的药物浓度高于活菌。结果表明，活菌培养基中的药物浓度比死菌培养基中的药物浓度下降快得多，在12小时内达到原来浓度的一半左右。结论：低水溶性白藜芦醇与水溶性FUDR具有相同的吸收代谢模式。线虫的药物代谢率与剂量和时间有关。NGMdeadmethod和liquidgro

4、wingmethod在线虫中达到了最佳的吸收效率。线虫体内的药物浓度与小鼠相当，为从线虫到哺乳动物的剂量转化提供了一座桥梁。分别是：LBmediummethod:将白藜芦醇原液用含有OP5O大肠杆菌的LB液体培养基稀释成最终浓度为100uM，1.5mL的菌液涂布在100mmNGM板。(最常用的！)NGMlivemethod：白藜芦醇原液用NGM(灭菌后低于65C)稀释至100uM的浓度，然后将NGM倒入空培养皿中作为线虫的载体，并将活OP50涂布在NGM板的表面(65C30min)。NGMdeadmethod：白藜芦醇原液用NGM（灭菌后低于65C）稀释至100uM的浓度，然后将NGM倒入空培

5、养皿中作为线虫的载体，并将死菌OP50涂布在NGM板的表面（65C30min）。（4）spotdeadmethod:在NGM平板表面涂1.5mL的100uM白藜芦醇，然后覆盖死菌。（5）liquidgrowingmethod：同期化N2成虫设为第1天，在含有35mLS培养基的50mL离心管中培养，白藜芦醇在S培养基中的浓度为100uM，死菌加入S培养基中作为食物。五种处理方法中FUDR的最终浓度为50uM。这里就是已经概况绝大部分，下面是细节。不看也无所谓，看了又收费。文章题目已经有了，可以自己下载罗怀荣教授的文章。高效液相色谱法测定线虫体内白藜芦醇和FUDR浓度的验证标准白藜芦醇和FUDR的

6、保留时间分别为7.2和5.2分钟（图略）。接着做了，线虫体内高效液相色谱法检测白藜芦醇和FUDR的重复性和稳定性，白藜芦醇和FUDR的HPLC检测精度研究（图略）。说明方法可行性。（简单的说就是，按上述五种方法给药，然后线虫冷M9冲洗三次，收集，风干，称重，重悬，超声破碎，离心取上清，0.45um过滤，上样、检测。）药物吸收效率的五种给药方法用五种给药方法，分别在10分钟、30分钟、1小时、3小时、6小时、12小时、第1天、第2天、第4天、第7天、第14天和第20天的时间点检测了给药线虫中白藜芦醇和FUDR的浓度。白藜芦醇和FUDR在线虫中的浓度随着时间的推移而稳步积累，并在第一天达到最高，然

7、后逐渐下降。（这里应该不存在所谓的转板情况，没看到）在整个处理过程中，白藜芦醇和FUDR在线虫中的吸收率从高到低依次为NGMdeadliquidgrowingspotdeadtheNGMliveLBmediummethod因此，线虫的最佳吸收效率是NGMdeadoODDOOOOD7CJ佛504CIA020L010min30minIhr3hr6hr12hrday1jy2day4d：jy7ky14day20CiiLturiBETimeNGMdeadmethod*LiquidgrowingmethodSpDtdeadmethodNGMlivemelhodTJBmediummethod010minJ|

8、byfivedeliveringmethods(LLg/gl.TheconcerttrauionofdiugsinivormsivaspresEfiitedasjig/g.ThefigurBshovi&dtheavengeoftfrireerepeatedexperimentsforeachmethod.ThedetJsofdasasummarizedInTable-SiandS2.1NGMdeadmethod-LiquidgrowingmethodSpSdeadmethodNGMlivemethodI.Bmediunimethod为了探讨吸收效率与药物剂量的关系，用药物50、100、150u

9、m三个浓度，给药7天后，比较了NGMdead和liquidgrowing的吸收效率。白藜芦醇和FUDR在线虫中的代谢为了测定线虫体内白藜芦醇和FUDR的代谢，白藜芦醇和FUDR的浓度从400um到12.5um不等，给药6小时，在多个时间点测定。相邻时间间隔之间的斜率表示代谢速率。白藜芦醇和FUDR具有相同的代谢物模式。随着时间的推移，代谢速率逐渐增加，在812小时的时间间隔内达到最高，且随着降低给药浓度降低而降低。oooooooWOOOOOQDOK5-296307418520-634443333222HIM/S=rSlIUOUII二OUEK器H亠200pM100pMTOpM25pM12.5nM

10、Ihr2hrJhT4hr6hr$hr12hr16hrTimeIhr2hr3hr4hr6hrhr12lir16hrTime-400pM*200pMIOOiM50pM-25mM12.5代谢率一般为剂量应答，较高浓度的药物在同一时间间隔内具有较高的代谢率。活的大肠杆菌OP50降低了LBmediummethod和theNGMlive的总药物浓度。研究者怀疑活的OP50大肠杆菌会代谢药物，降低培养基中的总药物浓度，为了验证这个假设，研究者测定了白藜芦醇和FUDR在LBmediummethod、NGMlivemethod、NGMdeadmethod的浓度。随着时间的推移，含有死菌的培养基中的药物浓度缓慢降

11、解。然而，与活菌孵育12小时的培养基中药物浓度仅为原浓度的一半。活菌培养基中的药物浓度比死菌下降快得多。以上结果表明，活菌可以代谢药物，降低线虫对药物吸收率。一一一-O5050502211m)l=PRUJJ-IT1J1.K雷+-NCMdeadmethodNGMhvenifilifidLBniediummetlxidr1fOJhr1hr3hr6hrCulturinglime12hr42086-1-1?=r.=E启p岂u启一工NGM血adnielliud-NGMliveinutliodLBmediuiumethod0.5lu11m3血6hr12luCulluiinuTitiu?结论：HPLC法测定线虫体内药物的浓度是有效的。白藜芦醇和FUDR用NGMdeadmethod和liquidgrowingmethod对线虫的吸收效率最好。spotdeadmethod能以较少的总药物量达到相当大的吸收效率。活菌能够消化部分药物，导致药物吸收效率降低。低水溶性白藜芦醇和水溶性FUDR在线虫中具有相同的钟形积累模式和相同的代谢模式。线虫体内的药物浓度与小鼠相当，为从线虫到哺乳动物的剂量转换提供了桥梁。（我也不知道从哪里的出来的结论）这份结果可能有助于研究者根据药理学动力学选择合适的线虫给药的方法，以及理解研究之间的一些