实验二影响酶促反应因素

1、关于实验二影响酶促反应的因素第一张，PPT共十七页，创作于2022年6月一、实验目的1通过实验，观察温度、pH值、激活剂与抑制剂对酶促反应速度的影响。2能运用所学的生化知识对实验结果进行正确的分析。第二张，PPT共十七页，创作于2022年6月二、实验原理利用淀粉及其水解产物的颜色反应，来比较唾液淀粉酶在不同条件下催化淀粉水解的程度，从而判断温度、pH、激动剂和抑制剂对酶的活性影响。淀粉糊精麦芽糖和葡萄糖蓝色碘紫色红色无色无色碘碘第三张，PPT共十七页，创作于2022年6月二、实验原理 在低温时，酶活性降低，酶促反应速度较慢，甚至停止；随着温度升高，酶的活性恢复，反应速度加快；当达到最适温度时，

2、酶的活性最大，酶促反应速度达到最大。人体内大多数的酶的最适温度在37左右。温度过高，酶变性失活，酶促反应速度下降，甚至停止。每种酶都有最适的pH值，在最适pH值时，酶的活性最大，酶促反应速度最快；偏离酶的最适pH均可引起酶蛋白变性而降低或失去活性。唾液淀粉酶的最适pH值为6.8。氯离子对唾液淀粉酶有激活作用；铜离子对唾液淀粉酶有抑制作用。第四张，PPT共十七页，创作于2022年6月三、实验材料1.1%淀粉溶液 取可溶性淀粉1g, 加5ml蒸馏水, 调成糊状, 再加80ml蒸馏水, 加热并不断搅拌, 使其充分溶解, 放冷, 最后用蒸馏水稀释至100ml。2.pH3.0缓冲液 取0.2mmol/L

3、Na2HPO4溶液205ml，0.1mol/L柠檬酸溶液795ml, 混合即成.3.pH6.8缓冲液 取0.2mmol/LNa2HPO4溶液772ml，0.1mol/L柠檬酸溶液228ml, 混合即成.4.pH8.0缓冲液 取0.2mmol/LNa2HPO4溶液972ml，0.1mol/L柠檬酸溶液28ml混合即成.第五张，PPT共十七页，创作于2022年6月5.0.9%NaCl溶液 6.1% CuSO4溶液7.碘液 9.试管架 11.试管夹 12.滴管 13.白瓷板 14.恒温水浴箱 15.电炉 16.烧杯第六张，PPT共十七页，创作于2022年6月【注意事项】1.注意实验器材的干净，避免杂

4、质影响反应结果2.各管反应时间应严格控制，保证一致。第七张，PPT共十七页，创作于2022年6月四、实验方法稀释唾液制备 用水漱口，含蒸馏水咀嚼2分钟后，把唾液吐进烧杯中备用。（注：唾液淀粉酶活性具有个体差异，按下述各实验方法进行实验，有部分同学可能失败，可重新操作，但在重做过程中，要根据第一次实验结果改变稀释唾液的用量，反应太慢，则增加稀释唾液用量，如果反应太快，则减少稀释唾液的用量）煮沸唾液的制备 取上述唾液约5ml，放入沸水中煮沸5分钟，取出备用。第八张，PPT共十七页，创作于2022年6月（一）温度对酶促反应速度的影响管 号 123缓冲液（pH6.8）20滴20滴20滴1%淀粉溶液10

5、滴10滴10滴把三支管溶液摇匀，然后分别放至相应的温度中水浴预温预温温度 0 37 37预温5分钟后取出，继续向各管加入相应唾液稀释唾液10滴10滴 煮沸唾液10滴把三支管摇匀，然后分别放至相应的温度中水浴10分钟，加碘2滴水浴温度 03737结果与分析第九张，PPT共十七页，创作于2022年6月取白瓷板一块，向各凹分别加1滴碘液，每隔半分钟用滴管或玻棒从2号管取溶液1滴，加到已加有碘液的小凹中，观察颜色变化，直至与碘不呈色时（即只显棕黄色时），向各管加碘液1滴，摇匀观察颜色变化(切记勿摇动)。摇匀再观察。第十张，PPT共十七页，创作于2022年6月（二）pH对酶促反应速度的影响管号1231%

6、淀粉溶液10滴10滴10滴pH5.0缓冲液10滴pH6.8缓冲液10滴pH8.0缓冲液10滴稀释唾液5滴5滴5滴把三支管摇匀，然后放至 37水浴10分钟，加碘2滴摇匀结果与分析第十一张，PPT共十七页，创作于2022年6月将各管混匀，放进37水浴箱中保温。取白瓷板一块，向各凹分别加1滴碘液，每隔半分钟用滴管或玻棒从2号管取溶液1滴，加到已加有碘液的小凹中，观察颜色变化，直至与碘不呈色时（即只显棕黄色时），向各管加碘液1滴，摇匀观察颜色变化。第十二张，PPT共十七页，创作于2022年6月（三）激活剂与抑制剂对酶促反应速度的影响管号12341%淀粉溶液10滴10滴10滴10滴pH6.8缓冲液10滴

7、10滴10滴10滴蒸馏水2滴氯化钠溶液2滴CuSO4溶液2滴Na2SO4溶液2滴稀释唾液5滴5滴5滴5滴把三支管摇匀，然后放至 37水浴10分钟，加碘2滴摇匀结果与分析第十三张，PPT共十七页，创作于2022年6月将各管摇匀，放进37水浴箱中保温。取白瓷板一块，向各凹分别加1滴碘液，每隔半分钟用滴管或玻棒从2号管取溶液1滴，加到已加有碘液的小凹中，观察颜色变化，直至与碘不呈色时（即只显棕黄色时），向各管加碘液1滴，摇匀，观察各管颜色变化。 激活剂与抑制剂第十四张，PPT共十七页，创作于2022年6月激活剂与抑制剂五、思考题1. 什么是酶的最适温度？2. 什么是酶的最适pH?3. 激活剂与抑制剂对酶活性影 响实验中设置第四管的作用 是什么？4. 什么是酶的特异性？第十五张，PPT共十七页，创作于2022年6月（四） 酶的专一性对酶促反应的影响。加入物1号管2号管3号管PH值6.8缓冲液20滴20滴20滴1%的淀粉10滴10滴1%的蔗糖10滴煮沸唾液5滴 稀释唾液5滴