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文档简介
1、 第十四章中药及其制剂分析安徽中医学院 药物分析教研室.本 章 内 容1了解中药制剂的分类及中药制剂分析的特点2熟习中药制剂分析的普通程序3掌握中药制剂常用的定量分析方法.第一节 概 述一、定 义 中药制剂是根据药典、制剂规范和其它规定的处方,将中药的原料药物加工制成具有一定规格,可以直接用于防病、治病的药品。留意:中药制剂必需是以中医药根底实际和用药原那么为指点制成的一方或复方制剂。中药的成方制剂又称为中成药.同物异名 同名异物虎杖的异名中有红药子、黄药子、土黄连、竹节参、大黄等异名, 170余个异名,其运用涉及全国19个民族, 18个省70多个市县区虎杖二、中药制剂分析的特点 中药市场混乱
2、1.同物异名景象严重: 川芎的“抚芎、“台芎、“西芎; 肉豆蔻的“玉果、“肉果; 栀子的“山枝、“枝子; 厚朴的“厚皮、重皮、川朴、川根朴、紫油朴.生长环境、贮藏条件采收季节及部位差别黄芪 黄芩苷含量:栽培野生 GAP 中药材消费质量管理规范中药材质量的不稳定性2.益母草 水苏碱 营养期含量最高 益母草碱 营养期含量最低女贞子 10-12月果实成熟后采收丹皮酚 3年生10月采集含量最高 .不同部位三七总皂苷的含量. 按照中医实际的组方原那么君、臣、佐、使,选取起主要治疗作用的药物建立含量测定工程。同时也应思索对贵重药、毒性药的质量控制。成分复杂且大多数有效成分尚不非常清楚3.以中医药实际为指点
3、原那么,评价中药制剂质量.四中药制剂工艺及辅料的特殊性1、制剂工艺不同,有效成分的量也不同例 三黄泻心汤干浸膏制剂工艺不同,有效成分的量也不同4.有效成分与浓缩枯燥方法的关系(%) 常压 减压 逆浸透 成 分 浓缩 浓缩 喷雾大黄酸葡萄糖苷 41.1 51.6 96.8小檗碱 34.5 37.5 94.5黄连碱 6.3 12.0 93.7黄岑苷 77.4 77.6 98.5.剂型繁多,辅料干扰大5.丸、散、片、锭、合、酒、酊、膏、露、茶、栓、颗粒、糖浆等蜡丸 蜂蜡 蜜丸 蜂蜜糊剂 糯米粉、黄米粉 曲剂 发酵胶剂 豆油、黄酒、冰糖 针对不同的剂型,采用相应的方法进展分别纯化后测定. 杂质来源包括
4、:药材中非药用部位、泥砂、重金属、残留农药及霉变、虫蛀、走油等产生的杂质。中药制剂杂质来源的多途径性6. 成分复杂,而且大多数中药的有效成分尚不非常清楚。中药药效的发扬是多种成分协同作用的结果,因此应从整体上来控制中药的质量。中药制剂有效成分的非单一性 7.中药制剂的分类二、中国药典2000年版一部二十六种丸剂 胶剂 膏药 颗粒剂 滴眼剂散剂 合剂 露剂 糖浆剂 软膏剂片剂 酒剂 茶剂 滴丸剂 注射剂锭剂 酊剂 搽剂 胶囊剂 滴鼻剂栓剂 巴布膏剂 橡胶膏剂 气雾剂喷雾剂 煎膏剂膏滋流浸膏剂与浸膏剂.一液体制剂用药材提取物制备的液体制剂合剂、糖浆剂、酒剂、茶剂、酊剂 滴鼻剂、滴眼剂、露剂、搽剂等
5、无植物组织与细胞,故无显微鉴别.1、合剂与口服液单剂量合剂也可称为“口服液合剂系指药材用水或其他溶剂,采用适宜方法提取,经浓缩制成的内服液体制剂pH微生物限制装量相对密度普通检查工程.2、酒剂与酊剂酒剂酊剂药材用蒸馏酒提取制成的廓清液体制剂药物用规定浓度的乙醇提取或溶解而制成的廓清液体制剂普通检查工程甲醇量检查GC总固体微生物限制含乙醇量GC装量.二半固体制剂软膏装量微生物限制检查工程常用基质 油脂性、水溶性 乳剂型乳膏剂药物、药材细粉、药材提取物与适量基质混合制成的半固体外用制剂. 药材提取液的浓缩液三半流体制剂煎膏剂(膏滋)流浸膏剂与浸膏剂半流体或固体无植物组织与细胞,故无显微鉴别.药材用
6、水煎煮、去渣浓缩后,加炼蜜或糖制成的半流体制剂1、煎膏剂(膏滋) 相对密度不溶物 装量微生物限制检查工程应无焦臭、异味,无糖结晶析出.2、流浸膏剂与浸膏剂半/固药材用适宜的溶剂提取,蒸去部分或全部溶剂,调整浓度至规定规范而制成的制剂装量微生物限制检查工程1ml流 浸膏 1g 原药材1g 浸膏 2 5g 原药材.消费提取溶剂大多为水或稀醇检测时普通需经有机提取后分析对于流浸膏,有的测总固体量以控制其质量有效成分不明或无定量方法的,可 测一定溶剂的浸出物含量 有效成清楚确且有适当方法 ,测定有效成分的含量.四固体制剂 药材提取物、药材粉末加赋形剂、制备而成丸剂、胶剂、颗粒剂、散剂、片剂、胶囊剂、锭
7、剂、胶剂、茶剂、栓剂有植物组织与细胞,可做显微鉴别.1、 丸剂 指药材细粉或药材提取物加适宜的黏合剂或其他辅料制成球形或类球形制剂,分为蜜丸、水丸、水蜜丸、糊丸、浓缩丸、蜡丸、微丸等检查工程水分、分量差别(按丸或分量)装量差别(按一次剂量分装的)溶散时限、微生物限制.装量差别(按一次剂量分装的)水分、分量差别(按丸或分量)溶散时限微生物限制检查工程.水分规定大蜜丸、小蜜丸、浓缩蜜丸 15.0%水蜜丸、浓缩水蜜丸 12.0%水丸、糊丸、浓缩水丸 9.0%装量差别高低溶散时限6丸,照崩解时限检查法.分量差别第一法按丸服用每次最高丸数或每 丸1.5g,10份高低高低第二法按分量服每份10丸,10份
8、高 低.2、 散剂 一种或多种药材混合制成的粉末状制剂,分内服和外用散剂 检查工程均匀度水分装量差别微生物限制.均匀度取供试品适量置光滑纸上,平铺约5cm2,将其外表压平,在亮处察看,应呈现均匀的色泽,无花纹、色斑水分9.0%.3、颗粒剂 药材提取物与适宜辅料或药材细粉制成的颗粒状制剂,分为可溶性颗粒剂、混悬性颗粒剂、泡腾性颗粒剂 检查工程粒度 水分 溶化性装量差别 微生物限制.粒度 1号筛4号筛8%(左右悄然往返3分钟)溶化性装量差别单剂量包装 同丸剂多剂量包装 最低装量检查法(附录 C) 平均装量标示装量 每个装量限量% .4、 片剂 药材提取物加药材细粉或药材细粉与适宜辅料混匀压制而成的
9、园片状或异形片状的制剂,分为浸膏片、半浸膏片和全粉片检查工程分量差别崩解时限微生物限制原粉片30浸膏片1h薄膜衣片1h.5、胶囊剂硬胶囊剂软胶囊剂肠溶胶囊剂 检查工程水分装量差别崩解时限微生物限制.第二节 中药制剂分析的普通程序 含量测定检查鉴别取样提取纯化.供试品溶液的制备一、一提取方法1、萃取法 利用溶质在两种互不相溶的溶剂中溶解度的不同,使物质从一种溶剂转移到另一种溶剂中,将测定组分提取出来的方法.用于皂苷类正丁醇氯仿乙醚、石油醚醋酸乙酯1萃取溶剂的选择.用于生物碱类用于黄酮类用于挥发油.2水相pH的选择酸性成分 比其pKa低12个pH单位 比其pKa高12个pH单位 碱性成分.3仪器和
10、提取次数4酒剂和酊剂先挥去乙醇5防止和消除乳化分液漏斗鉴别1次含量测定 3 4次.2、冷浸法 样品置溶剂里,室温下浸泡一段时间的提取方法适宜易溶出的组分适宜遇热不稳定的药物 费时8 24小时特点适用范围适宜植物性粉末不宜动物性粉末.亲脂性 亲水性石油醚 苯 氯仿 乙醚 乙酸乙酯 丙酮 乙醇 甲醇 水.3、回流提取法 样品置有机溶剂中加热回流的提取方法加快溶出速度,省时适宜受热稳定的药物适宜较难溶出的组分特点仪器普通回流安装经过改换溶剂,使提取更完全.4、延续回流提取法 样品置有机溶剂中加热,蒸发的溶剂经冷凝流回样品管的提取方法节省溶剂,提高提取效率适宜受热稳定的药物费时特点仪器索氏提取器.5、
11、水蒸气蒸馏法 适用于具挥发性的可随水蒸气蒸出的组分的测定麻黄碱、槟榔碱、丹皮酚、挥发油.6、超声提取法 超声波振荡器超声波清洗器 简便 省时 提取率高 利用超声波的助溶作用进展提取原理 超声波在液体中以疏密相间的方式向物体辐射,出现“空化景象气泡的构成、产生及破裂景象,构成超越1000个大气压的冲击力.二纯化方法1、萃取法 利用药物与杂质溶解性能的不同进展分别例生物碱盐氨水H2O.2、柱色谱法1保管测定组分在柱上,洗去杂 质,再用适当溶剂洗下组分2保管杂质于柱上常用固定相硅胶氧化铝大孔吸附树脂.鉴别实验二、鉴定有临床疗效的知成分黄连 小檗碱抗菌消炎 麻黄 麻黄碱支气管哮喘乌头 乌头碱毒性洋地黄
12、 强心苷强心延胡索 延胡索乙素镇痛.一显微鉴别含生药粉制剂丸剂、片剂、胶囊剂、散剂快速,简便,覆盖面大 选择原那么1、应选有专属性的特征进展鉴别2、多来源的药材应选择共有的特征进展 鉴别.1、水牛角浓缩粉2、麝香3、珍珠4、朱砂5、雄黄6、黄连7、栀子8、郁金9、黄芩安宫牛黄丸.二化学鉴别抗干扰才干差显色、荧光例 二妙丸中苍术的鉴别苍术酮苍术炔.三色谱鉴别TLC法运用最多 Rf、颜色、荧光GC法 适用于含挥发性成分 的药物 HPLC法常与含量测定同时进 行.阴、阳对照法阳性对照 将要鉴别的药材按制剂 工艺处置,再按鉴别方 法提取的溶液阴性对照 把制剂中要鉴别的药材 除去,用剩下的各味药 按制剂
13、工艺处置,再按 鉴别方法提取的溶液 .薄层板的选择 硅胶G板可加0.3% 0.5% CMC-Na 多用 氧化铝板 常用于生物碱类药物 聚酰胺板 常用于黄酮类及酚类 药物 纤维素板 常用于氨基酸类药物 .1、中药指纹图谱的定义运用现代分析技术对中药化学信息以图形图像的方式进展表征并加以描画。现代分析技术:包括光谱、波谱、色谱、核磁共振、X射线衍射及各种技术的联用。四中药指纹图谱.2. 指纹图谱研讨的直接目的 1 对中药质量控制的补充和提高。2 控制中间体、废品的一致性,减少批间差别 一个理想的指纹图谱不仅能到达定性鉴别的目的,色谱图中大部分药谱理应到达基线分别,对大部分成分应可进展定量分析。 在
14、没有对照品的情况下,也可以知规范品针对其他未知或无规范品的色谱峰进展定量。.控制中间体、废品的一致性,减少批间差别 中药消费的原资料,因土壤、气候等环境要素及采收加工的不同,实践运用时不能保证药材质量的稳定,经加工提获得到的中间体,每个批次在成分含量、成分组成及各成分比例方面都不能坚持一致。 .3. 指纹图谱的运用.雅莲云莲味莲雅莲云莲.IIIIII诃 子小诃子大诃子绒毛诃子.人参须根人参主根.不同产地高良姜的气相指纹图谱.中药指纹图谱目前存在的问题:1、指纹图谱与药理作用的相关性模糊,无法从指纹图谱中解析某一段峰所代表的药理作用.2、指纹图谱与化学成分的对应关系不确定:不同的指纹图谱可以表示
15、样品之间的差别,但是,一样的指纹图谱与规范指纹图谱相符并不一定表示彼此具有一样的化学组分,样品的指纹图谱与规范指纹图谱相符并不一定表示样品与规范相符.杂质检查三、水分总灰分和酸不溶性灰分重金属砷盐残留农药 主要工程.杂质来源及检查意义水分 结块、霉变或有效成分水解灰分 控制药物本身及泥土、沙石 等无机杂质砷盐 剧毒,常由除草剂、杀虫剂 或化肥引入重金属 环境污染和运用农药引入 残留农药 有毒.烘干法不含或少含挥发性成分甲苯法 含挥发性成分减压枯燥法含挥发性成分贵重药 GC法一水分测定法.酸不溶性灰分的测定总灰分的测定二总灰分和酸不溶性灰分的测定.WHO规定植物药铅10ppm镉0.3ppm干法破
16、坏湿法破坏硫代乙酰胺法三重金属的测定.干法破坏ChP湿法破坏USP(调到中性).碱融法破坏湿法破坏碱融法H+四砷盐的测定.五残留农药的测定1、总氯量的测定2、总磷量的测定3、GC法.测定工程的选定原那么1 首选君药及贵重药、剧毒药建立 含量测定方法2 其次思索臣药及其他味药3 有效成清楚确的,可选有效成分4 成分类别清楚的,可测某一类总 成分的含量.5 检测成分应归属某单一药味6 检测成分应与中医用药的功能主 治相近7 确无法含量测定的,可测定浸出 物含量化学分析法色谱法常用定量方法分光光度法.一化学分析法分量分析法 容量分析法特点 A、准确度、精细度高 B、抗干扰才干差例.二分光光度法UV法
17、 比色法特点 A、灵敏度高 B、简便、快速 C、精细度稍低 D、干扰多 .三TLCS法 测定薄层板上斑点对单色光的吸收或反射的强度而进展定量的方法特点 A、分别效果好 B、适用于无法用UV、HPLC 法测定的组分 C、准确度、精细度低于HPLC.2000年版中国药典2000年版薄层扫描法种类 种类数量 TLCS数量 占总数%534药材 20 3.74458成药 32 6.99978总数 52 10.73.1、 选择测定条件1薄层色谱条件分别好 不拖尾2检测方法吸收测定法荧光测定法反射法透射法3扫描方式 单波长双波长线性扫描法锯齿扫描法外标法内标法.四HPLC法RP - HPLC色谱柱 ODS流
18、动相 甲醇 - 水PIC 反离子 氢氧化四丁基铵色谱柱 ODSRP - PIC 反离子 烷基磺酸盐 无机阴离子外标法和内标法.2000年版中国药典2000年版HPLC法种类 种类数量 HPLC数量 占总数%534药材 54 10.11458成药 48 10.48978总数 102 20.59.运用实例-小青龙合剂处方 麻黄125g 桂枝125g 白芍125g 干姜125 五味子125g 细辛62g 甘草(蜜炙) 法半夏188gNOTES:合剂是在传统汤剂根底上改良后的一种新剂型生物碱桂皮醛芍药甙挥发油三萜皂甙.运用实例-小青龙合剂 制法 以上八味,细辛、桂枝提取挥发油,蒸馏后的水溶液另器搜集,
19、药渣与白芍、麻黄、五味子、甘草加水煎煮至味尽,合并煎液,滤过,滤液和蒸馏后的水溶液合并,浓缩至约1000ml。法半夏、甘姜照流浸膏剂项下渗漉法,用70%乙醇作溶剂,浸渍24小时后进展渗漉,漉液浓缩,与上述药液合并,静置,滤过,滤液浓缩至1000ml,参与苯甲酸钠3g与细辛、桂枝挥发油,搅匀,即得。.性状 本品为棕黑色的液体;气微香,味甜、微辛。功能与主治 解表化饮,止咳平喘。用于风寒水饮,恶寒发热,无汗,喘咳痰稀。用法与用量 口服,一次10-20ml,一日3次,用时摇匀。.方药分析:君 麻黄发汗为君臣 桂枝解表为臣佐 甘草恐发汗太过, 佐以甘草缓 之使 白芍、干姜、细辛、法半夏、五 味子几药合
20、力共为使。可外发汗,内行水,散表里之邪。.汉代张仲景小青龙汤近代由重庆桐君阁中药厂该汤剂为合剂本方治疗伤寒表不解,心下有水气,干呕,发热而咳。近代也用于慢性支气管炎,支气管哮喘、肺气肿,均见咳、喘、痰白清稀者。.供试品溶液与阴性对照液的制备: 取合剂10 ml,石油醚分3次萃取,合并石油醚萃取液油层,浓缩至1ml,为供试品溶液A; 水层用Na2CO3调PH11-12,用氯仿萃取,合并氯仿萃取液,回收氯仿至干,残渣用1ml甲醇溶解,为供试品溶液B;NOTES:阴性对照液如上法同步进展。.1. 桂皮醛的鉴别 取供试品液A、阴性对照液、桂皮醛对照液1ug/ml15ul,点于同一硅胶G板上,环己烷-乙
21、酸乙酯17:3展开,晾干,喷2,4二硝基苯肼乙醇T.S,供试品A与对照品在相应位置上显一样的橙色斑点,而阴性对照液无此斑点。.2. 细辛挥发油的鉴别 取供试品液A、阴性对照液、细辛挥发油对照液1:10乙醚液5ul,点于同一硅胶G板上,环己烷展开,晾干,喷10%香草醛浓硫酸T.S,加热至显色,供试品A与对照品在相应位置上显一样的粉红色斑点,而阴性对照液无此斑点。.3. 麻黄碱的鉴别 取供试品液B,阴性对照液,麻黄碱对照品液1mg/ml各5ul,点于同一硅胶G,氯仿-甲醇-浓氨水20:5:0.5展开,晾干,喷茚三酮T.S,加热至斑点显色,供试品B与对照品在相应位置上显一样的蓝紫色斑点,而阴性对照液
22、无此斑点。. 取合剂5ml,上聚酰胺柱,DW洗脱,洗脱液水浴浓缩至干,用1ml甲醇溶解,为供试品溶液C; 聚酰胺柱再用95%乙醇洗脱,弃取洗脱液,用3M氨乙醇液洗脱,搜集洗脱液水浴蒸干, 1ml甲醇溶解,为供试品溶液D。.4. 芍药甙的鉴别 取供试品液C、阴性对照液、芍药甙对照液1mg/ml10ul,点于同一硅胶G板上,氯仿-乙酸乙酯-甲醇-冰醋酸-甲酸8:1:2:0.04展开,晾干,喷10%硫酸乙醇液,加热至显色,供试品C与对照品在相应位置上显一样的紫色斑点,而阴性对照液无此斑点。 .5. 甘草酸的鉴别 取供试品液D、阴性对照液、甘草酸铵对照液2mg/ml2ul,点于同一硅胶G板上,乙酸乙酯
23、-甲酸-冰醋酸-蒸馏水30:2:2:4展开,晾干,喷10%硫酸乙醇液,加热至显色,UV灯365nm察看,供试品D与对照品在相应位置上显一样的紫色斑点,而阴性对照液无此斑点。.含量测定HPLC法测定芍药甙的含量仪器与色谱条件 BECKMAN 332型高效液相色谱仪163型可变波长紫外检测仪,220nm427型记录及数据处置仪色谱柱为YWGC18流动相乙腈-水15:85.规范曲线制备 精细称取芍药甙5.08mg,溶于水至50ml量瓶中,定容,分别汲取0.50、1.00、1.50、2.00ml于10ml量瓶中定容。回收率测定 精细汲取除去白芍制成的合剂即阴性对照液0.3ml与适量芍药甙对照品液,经过
24、0.5g聚酰胺柱,用水洗脱至50ml量瓶中至刻度,依前述条件测定,平均回收率为99.42%,RSD为0.23%n=3。.样品测定 取自制小青龙合剂摇匀,用滤纸过滤,精细汲取0.3ml滤液经过聚酰胺柱,以不同回收率测定条件进展测定。. 分析实例万氏牛黄清心丸处方 牛黄10g 朱砂60g 黄连200g 黄芩120g 栀子120g 郁金80g.分析实例万氏牛黄清心丸制法以上六味,除牛黄外,朱砂水飞或粉碎成极细粉;其他黄连等四味粉碎成细粉;将牛黄研细,与上述粉末配研,过筛,混匀。每100g粉末加炼蜜100-200g制成大蜜丸,即得。古方为糊丸,亦有水丸.性状本品为红棕色至棕褐色的大蜜丸;气特异,味甜、
25、微涩、苦。功能主治清热解毒,镇惊安神。用于热邪内闭,焦躁不安,神昏谵语,小儿高热惊厥。.方药分析 本方来源于明.痘疹世医心法 ,本方为清心开窍剂,主治热邪内陷心包所致窍闭神昏症。 方中牛黄,清心解毒,豁痰开窍为君药;黄连、黄芩、栀子清热泻火,为臣药;朱砂清心,重镇安神,郁金行气开窍共为佐使药,合用以奏透邪泻热,开窍安神之效。.方药分析牛黄清热解毒药,主含胆酸类成分。黄连清热燥湿药,主要为小檗碱。黄芩清热燥湿药,主要为黄酮类。栀子清热泻火药,主含栀子甙。朱砂安神药,主含硫化汞HgS。郁金活血去瘀药,主含挥发油。 .鉴别 显微鉴别郁金糊化淀粉团块几乎无色。栀子种皮石细胞。黄芩纤维淡黄色,梭形,厚壁
26、,孔沟细。黄连纤维鲜黄色,壁稍厚,纹孔明显。朱砂不规那么块状物或颗粒状物,暗红棕色、鲜红色或棕黄色。.郁金糊化淀粉团块栀子种皮石细胞黄芩纤维黄连纤维朱砂不规那么块状物或颗粒状物,暗红棕色、鲜红色或棕黄色. 化学鉴别1. 朱砂的鉴别 取本品3g,加水适量,研匀,反复洗去悬浮物,可得少量朱红色沉淀,取出,参与盐酸1ml及铜片少量,加热煮沸,铜片由黄色变为雪白色。 HgS+2HCl+CuCuCl2+Hg+H2S NOTES:在酸性条件下,朱砂与铜片发生置换反响析出金属汞,在铜片外表构成雪白色汞齐。.2. 人工牛黄的鉴别 取本品,剪碎,加硅藻土0.6g,研匀,加氯仿10ml、冰醋酸0.5ml,加热回流
27、30min,放冷,滤过,滤液蒸干,残渣加乙醇2ml使溶解,滤过,滤液作为供试品溶液。 胆酸和猪去氧胆酸加乙醇制成1ml含1mg的混合溶液,作为对照品溶液。.TLC法 CMC-Na,硅胶G展开剂 醋酸乙酯-正己烷-醋酸-甲醇 32:6:1:1显色剂 10%磷钼酸乙醇液, 1100C,10min.人工牛黄供试品牛黄空白猪去氧胆酸胆酸.3. 黄芩的鉴别 供试品溶液的制备:取本品3g,剪碎,加硅藻土0.5g,研匀,加甲醇20ml,加热回流1hr,放冷,滤过,滤液作为供试品溶液。 对照品溶液的制备:黄芩甙对照品加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液。.TLC法 CMC-Na,硅胶G 4%醋酸钠
28、展开剂 醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水 5:3:1:1显色剂 2%三氯化铁乙醇液使斑点更为集中-OH与Fe+3络合.黄芩甙供试品黄芩空白.4. 栀子的鉴别 供试品溶液的制备:取本品3g,加乙醚15ml,研磨,弃去乙醚。残渣挥干乙醚,加醋酸乙酯30ml,加热回流1hr,放冷,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇3ml溶解,滤过,滤液作为供试品溶液。 对照品溶液的制备:栀子甙对照品加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液。.TLC法 CMC-Na,硅胶G展开剂 醋酸乙酯-丙酮-甲酸-水 10 : 7 : 2 : 0.5显色剂 10%硫酸乙醇 1050C, 10min.栀子甙供试品栀子空白.5. 黄连的鉴别 供试品溶液的制备:取含量测定项下剩余的盐酸-甲醇提取液4ml,水浴蒸干,残渣加甲醇溶解,使成1ml作为供试品溶液。. 对照药材溶液的制备:黄连对照药材50mg,加甲醇10ml,回流加热15m
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