生化基础知识课件

1、1生化基础知识斯光明2临床生物化学和生物化学检验研究健康和疾病时的生物化学过程，测定体液或组织的成分以提供对疾病的诊断、治疗和预防有用信息的一门学科。现在还包括研究治疗效果的检测。研究领域广泛，与临床医学、计算机等联系密切。3生物化学的研究领域之一机体代谢稳定态：生物机体是一个开放的稳态系统，它的成分随膳食、运动和生物节律性等因素影响而处于动态平衡状态。某些物质易于交换，而另一些物质可能以贮存形式为主。物质在细胞内同时进行合成代谢和分解代谢，通过进入和排出间的动态平衡维持各成分的恒定，保证机体处于健康状态。4生物化学的研究领域之二机体稳定态紊乱所引起疾病的生物化学改变。原因很多：1创伤或入侵因

2、子的破坏，包括病原微生物、病毒和毒素2重要酶的遗传缺陷3一种或多种营养物质如氨基酸、维生素或矿物质的缺乏4血液供应障碍5氧气供应不足6代谢产物堆积7细胞识别某些信号的缺陷8恶性疾病9调节系统紊乱5举例说明糖尿病主要紊乱是胰岛素活性不足，葡萄糖不断从肝细胞中释放但不能顺利进入肌细胞进行分解代谢。葡萄糖进入血浆的速率大于离开速率，血糖浓度升高。健康人尿液中排泄的白蛋白量很少，由于肾小球的滤过作用和肾小管的重吸收作用处于平衡状态。肾病综合征时肾小球滤过的白蛋白量增多，远超过肾小管的重吸收能力，出现明显的白蛋白尿。由于机体合成白蛋白能力有限，最终引起血浆白蛋白降低。6临床生化发展的3个阶段1910-1

3、930年：方法学有重要进展。包括静脉穿刺技术，目视比色计的应用。1930-1950年：40年代对疾病生化知识的积累。钾钠分析、光电比色计的应用。许多复杂实验室从基础研究学科转到临床实验室，如层析、电泳、同位素技术等。1950年以后：自动生化分析仪问世，极大提高了工作效率，同时临床医生对实验室工作的依赖性迅速增加，申请的检验项目的种类、数量和频率猛增。7检验科生化室的功能分析体液中各种成分的组成和浓度。某种物质的浓度明显异常，提示什么地方出现了障碍。血浆中某种物质的浓度升高原因很多，如摄入过多、合成增加、细胞过多破坏、利用不充分、排泄障碍或严重脱水等。疾病早期阶段，症状模糊，血液成分的变化很小。

4、此时，要求实验操作有较高的精密度和有效的质量控制（以后的将作专题讲解）来确保结果的准确性。8生化反应原理9生化反应原理生化分析仪是临床诊断常用的重要仪器。它是通过对血液和其他体液的分析来测定各种生化指标，如胆固醇、葡萄糖、淀粉酶等。同时结合其他临床资料进行综合分析，帮助临床医生诊断疾病，并可鉴别并发因子以及决定以后治疗的基准等。如何检测：利用光学。10许多化学物质具有颜色（如高锰酸钾溶液），有些无色的化合物也可以和显色剂作用而生成有色物质。事实证明，当有色溶液的浓度改变时，颜色的深浅也随着改变。因此，可以通过比较溶液颜色深浅来确定有色溶液的浓度，对溶液中所含的物质进行定量分析。11物理学告诉我

5、们，光具有波动和微粒两种性质，称光的波粒二象性。光是一种电磁波，可以用振动频率（）、波长（） 、速度（c） 、周期（T）来描述它。在辐射能量时，光是以单个的、一份一份的能量（E=h ）的形式辐射的。式中h是普朗克常量。同样光被吸收时，其能量也是一份一份被吸收的。不同波长的光子具有不同的能量。波长越短，即频率越高，能量越大。12各种色光的近似波长范围波长范围颜色10001-1000000远红外线2501-10001中红外线761-2500近红外线621-760红591-620橙561-590黄501-560绿481-500青431-480蓝401-430紫191-400普通紫外线1-191真空紫

6、外线13光的互补及有色溶液的显色原理我们日常所见的白光是混合而成的复合光。若把两种颜色的光按一定比例混合，能够得到白光的话，这两种颜色的光就称为互补色。14黄橙红紫蓝青蓝青绿白光互补色光示意图15物质颜色与光的吸收、透过、反射有关。透明物质的颜色就是它透过光波的颜色。不透明物质的颜色是其反射光波的颜色。有色溶液对光的吸收是有选择性的。实践证明，溶液所呈现的颜色是它的主要吸收光的互补色。16举例说明一束白光通过高锰酸钾溶液时，（绿）光大部分被吸收，其他的光透过溶液。透过的光中除（紫）色外其他颜色的光两两互补，所以高锰酸钾溶液呈（紫）色。17对于任何一种有色溶液，在某一特定波长下会有一个最大吸收值

7、。浓度不同的同一种溶液，其吸收光谱的形状和最大吸收波长是一样的。即不同的物质都具有特定的吸收光谱。由于有色溶液对光的吸收有原则性，在进行比色测定时，要用只能被有色溶液吸收的光，也就是说要用单色光。（以后讲到的滤光片就是起这个作用）18波长选择19当一束平行光照射到均匀的溶液时，光的一部分被吸收（I a),一部分反射Ir，一部分透过It。假设入射光的强度为Io，那么Io= I a+ Ir+ It实际比色分析时，所有比色皿都是同质料、同规格的，因此Ir定值。比色分析中，常把透过光的强度占入射光的强度的百分比It / Io ）%称为透过率。20色比分析理论：朗伯比尔定律A= lg I0/I = a

8、b c A ： 吸光度 a：摩尔消光系数（物理常数） I ： 出射光强度 b：光径 I0 ： 入射光强度 c：吸光物质在溶液中的浓度从上述公式中可以看出：吸光物质在溶液中的浓度（C）与吸光度（A）成正比。溶液的浓度越大，所吸收的光的量也越大。21仪器反应原理22一、原 理单色器（Lambert-Beer）朗伯-比尔定律比色皿检测器放大显示光源A=KbcA：吸光度 c：物质浓度 K：吸收系数 b：液层厚度 吸光度与该物质在特定波长下的溶液厚度与浓度变化成正比23光源：常用的是卤素灯。最好的是贝克曼仪器的氙灯。单色器：即滤光片。常用干涉滤光片。比色皿：常用石英。要有良好的透光性和较强的耐腐蚀性。光

9、电检测器：将光能转化为电能。应具有灵敏度高，响应速度快，产生的电信号易于检测和放大，噪音低等特点。24常用的范围：200 800 nm紫外光区：200400 nm可见光区：400760 nm生化检验中常用的吸收光谱范围25常用波长最常用的吸收波长有：340、380、405、410、505、546、570、600、660、700、800nm 等。26常用波长使用340nm波长的项目：HCY、ALT、AST、HBDH、LDH、CK、CKMB、CO2 （CD127） IgA/M、C3、C4使用380nm波长的项目：CO2（CD116）使用405nm波长的项目：ALP、GGT、 CO2 （Gcell）

10、使用450nm波长的项目：TBIL、DBIL（钒酸盐氧化法）使用505nm波长的项目：TBIL、DBIL（重氮法）使用546nm波长的项目：TG、CHO、GLU、CRE（酶）使用570nm波长的项目：CysC、BMG、ASO、h-CRP使用600nm波长的项目：HDL、LDL使用700nm波长的项目：HbA1c、PGI、PGII、IgG27二、生化分析仪结构示意图b：后分光（现在）a、前分光（过去）光栅检测器光源计算机反应池比色池反射镜反射镜狭缝比色池反应池光源计算机检测器光栅28后分光的优点：可同时选用双波长进行测定，大大降低了躁声；通过双波长可以有效地抑制混浊、溶血、黄疸对实验测定的影响；

11、双波长可有效地补偿由于电源变动造成的影响；使生化分析仪器多项目同时测定变为现实。29自动生化分析仪器的基本构成样本/试剂系统：自动液面探针（增加速度和减少污染）；防堵塞功能；防碰撞保护功能搅拌和冲洗系统：恒温系统：反应盘：光路系统：全息光栅操作系统：30三、分 类样品+试剂1、流动式混 合计 算检 测流动比色池排 出 特点：样品试剂在同一管道中，在流动中进行。2、分立式试剂样品排 出检 测计 算独立反应比色杯 特点：样品、试剂分别进入某个项目的独立比色杯内，完成测试。31离心式分析仪：将样本和试剂放在特制的圆盘上，圆盘装在离心机上作为转头。受离心力作用而相互混合。反应速度快。缺点同一时间只能做

12、同一项目测定。干式生化：价格昂贵，适合急诊。32试剂反应原理33比色法（仪器上一般设置为终点法）酶法；连续监测法（速率法）免疫比浊法34化学试剂盒常用的反应原理比色法 由单纯的化学物质参与反应，呈色，在一定波长下比色。例如总蛋白的双缩脲比色法、白蛋白的溴钾酚绿法。酶法 由特异性的酶来催化反应，在一定波长下比色。例如甘油三酯由甘油激酶和过氧化物酶来催化反应；尿素有脲酶来催化反应进行。 免疫比浊法 抗体（Ab）与可溶性抗原（Ag）反应，形成一定结构的免疫复合物，成为悬浮于反应溶液中的微粒。这种在沉淀反应中形成的微粒具有特殊的光学性质。35终点法被测物质（反应底物）在化学反应过程中完全被消耗或转换，

13、即反应达到平衡（终点），通过测定产物（反应生成物）的多少来定量测定被测底物的含量。反应曲线图如下： 361. 终点法 举例：血糖（Glu）测定原理：葡萄糖+O2+H2O 葡萄糖酸+H2O2H2O2+4-AA+酚 醌亚胺+4H2O醌亚胺在480550nm有吸收峰PODGOD反应曲线单试剂t双试剂t样品加入后一段时间后吸光度达到最大而且不再变化，说明反应完成，这样的项目为终点法。372.速率法举例：谷丙转氨酶（ALT）测定原理：L-丙氨酸+-酮戊二酸 丙酮酸+L-谷氨酸丙酮酸+NADP+H L-乳酸+NAD+NADH在340nm波长下吸收峰下降ALTLDH反应进行时的某特定时间间隙内，进行一系列测

14、定记录。在某时间间隔内有效测定其吸光度变化速率是分析浓度的函数。特别是在测定时间间隙内，记录下表现出反应中最佳线性部分的吸光度读数。38反应曲线单试剂At双试剂At双试剂At393. 免疫比浊反应原理透射比浊法：是根据抗原、抗体结合形成的抗原抗体复合物能引起液体介质出现浊度的原理。当抗体过量存在时，与抗原形成复合物。颗粒增强免疫比浊法：选择一种大小适中，均匀一致的胶乳颗粒，吸附或交联抗体后，透过光减少，这种减少与胶乳凝集成正比。反应曲线At40反应过程：抗体：病原体产生的蛋白质。抗原：机体体液免疫反应的产物，是一种特性的蛋白。复合物（不溶）抗原抗体平衡复合物（溶解）抗原抗体抗体过量：复合物（溶

15、解）抗体抗原抗原过量：前带现象：当抗原过量，抗体不足反应超限导致沉淀增加，浊度下降的现象41举例：载脂蛋白AI(APOAI)测定原理：血清中的APOA与试剂中的特异性抗人APOA抗体相结合，形成不溶性免疫复合物，使反应液产生混浊，在340nm波长下检测混浊程度（透射比浊）。试剂组成：A厂家B厂家聚乙二醇4%（表面活性剂）表面活性剂Tris/HCl缓冲液15mmol/LTris缓冲液抗人APOA-抗体血清106mmol/L抗人APO-A抗体血清校正液 每批定值（多点定标）校正液 每批定值（多点定标）此试剂最关键的成份是抗血清的纯度亲和力及效价表面活性剂的作用是有助于APOA抗原位点暴露充分与抗体

16、作用，并有缩短反应时间的作用。免疫比浊反应曲线特点近似抛物线，最低值偏高，最高值偏低。42谢 谢 诸 位 ！11醉翁亭记 1反复朗读并背诵课文，培养文言语感。2结合注释疏通文义，了解文本内容，掌握文本写作思路。3把握文章的艺术特色，理解虚词在文中的作用。4体会作者的思想感情，理解作者的政治理想。一、导入新课范仲淹因参与改革被贬，于庆历六年写下岳阳楼记，寄托自己“先天下之忧而忧，后天下之乐而乐”的政治理想。实际上，这次改革，受到贬谪的除了范仲淹和滕子京之外，还有范仲淹改革的另一位支持者北宋大文学家、史学家欧阳修。他于庆历五年被贬谪到滁州，也就是今天的安徽省滁州市。也是在此期间，欧阳修在滁州留下了

17、不逊于岳阳楼记的千古名篇醉翁亭记。接下来就让我们一起来学习这篇课文吧！【教学提示】结合前文教学，有利于学生把握本文写作背景，进而加深学生对作品含义的理解。二、教学新课目标导学一：认识作者，了解作品背景作者简介：欧阳修(10071072)，字永叔，自号醉翁，晚年又号“六一居士”。吉州永丰(今属江西)人，因吉州原属庐陵郡，因此他又以“庐陵欧阳修”自居。谥号文忠，世称欧阳文忠公。北宋政治家、文学家、史学家，与韩愈、柳宗元、王安石、苏洵、苏轼、苏辙、曾巩合称“唐宋八大家”。后人又将其与韩愈、柳宗元和苏轼合称“千古文章四大家”。关于“醉翁”与“六一居士”：初谪滁山，自号醉翁。既老而衰且病，将退休于颍水之

18、上，则又更号六一居士。客有问曰：“六一何谓也？”居士曰：“吾家藏书一万卷，集录三代以来金石遗文一千卷，有琴一张，有棋一局，而常置酒一壶。”客曰：“是为五一尔，奈何？”居士曰：“以吾一翁，老于此五物之间，岂不为六一乎？”写作背景：宋仁宗庆历五年(1045年)，参知政事范仲淹等人遭谗离职，欧阳修上书替他们分辩，被贬到滁州做了两年知州。到任以后，他内心抑郁，但还能发挥“宽简而不扰”的作风，取得了某些政绩。醉翁亭记就是在这个时期写就的。目标导学二：朗读文章，通文顺字1初读文章，结合工具书梳理文章字词。2朗读文章，划分文章节奏，标出节奏划分有疑难的语句。节奏划分示例环滁/皆山也。其/西南诸峰，林壑/尤美

19、，望之/蔚然而深秀者，琅琊也。山行/六七里，渐闻/水声潺潺，而泻出于/两峰之间者，酿泉也。峰回/路转，有亭/翼然临于泉上者，醉翁亭也。作亭者/谁？山之僧/曰/智仙也。名之者/谁？太守/自谓也。太守与客来饮/于此，饮少/辄醉，而/年又最高，故/自号曰/醉翁也。醉翁之意/不在酒，在乎/山水之间也。山水之乐，得之心/而寓之酒也。节奏划分思考“山行/六七里”为什么不能划分为“山/行六七里”？明确：“山行”意指“沿着山路走”，“山行”是个状中短语，不能将其割裂。“望之/蔚然而深秀者”为什么不能划分为“望之蔚然/而深秀者”？明确：“蔚然而深秀”是两个并列的词，不宜割裂，“望之”是总起词语，故应从其后断句。

20、【教学提示】引导学生在反复朗读的过程中划分朗读节奏，在划分节奏的过程中感知文意。对于部分结构复杂的句子，教师可做适当的讲解引导。目标导学三：结合注释，翻译训练1学生结合课下注释和工具书自行疏通文义，并画出不解之处。【教学提示】节奏划分与明确文意相辅相成，若能以节奏划分引导学生明确文意最好；若学生理解有限，亦可在解读文意后把握节奏划分。2以四人小组为单位，组内互助解疑，并尝试用“直译”与“意译”两种方法译读文章。3教师选择疑难句或值得翻译的句子，请学生用两种翻译方法进行翻译。翻译示例：若夫日出而林霏开，云归而岩穴暝，晦明变化者，山间之朝暮也。野芳发而幽香，佳木秀而繁阴，风霜高洁，水落而石出者，山

21、间之四时也。直译法：那太阳一出来，树林里的雾气散开，云雾聚拢，山谷就显得昏暗了，朝则自暗而明，暮则自明而暗，或暗或明，变化不一，这是山间早晚的景色。野花开放，有一股清幽的香味，好的树木枝叶繁茂，形成浓郁的绿荫。天高气爽，霜色洁白，泉水浅了，石底露出水面，这是山中四季的景色。意译法：太阳升起，山林里雾气开始消散，烟云聚拢，山谷又开始显得昏暗，清晨自暗而明，薄暮又自明而暗，如此暗明变化的，就是山中的朝暮。春天野花绽开并散发出阵阵幽香，夏日佳树繁茂并形成一片浓荫，秋天风高气爽，霜色洁白，冬日水枯而石底上露，如此，就是山中的四季。【教学提示】翻译有直译与意译两种方式，直译锻炼学生用语的准确性，但可能会

22、降低译文的美感；意译可加强译文的美感，培养学生的翻译兴趣，但可能会降低译文的准确性。因此，需两种翻译方式都做必要引导。全文直译内容见我的积累本。目标导学四：解读文段，把握文本内容1赏析第一段，说说本文是如何引出“醉翁亭”的位置的，作者在此运用了怎样的艺术手法。明确：首先以“环滁皆山也”五字领起，将滁州的地理环境一笔勾出，点出醉翁亭坐落在群山之中，并纵观滁州全貌，鸟瞰群山环抱之景。接着作者将“镜头”全景移向局部，先写“西南诸峰，林壑尤美”，醉翁亭坐落在有最美的林壑的西南诸峰之中，视野集中到最佳处。再写琅琊山“蔚然而深秀”，点山“秀”，照应上文的“美”。又写酿泉，其名字透出了泉与酒的关系，好泉酿好

23、酒，好酒叫人醉。“醉翁亭”的名字便暗中透出，然后引出“醉翁亭”来。作者利用空间变幻的手法，移步换景，由远及近，为我们描绘了一幅幅山水特写。2第二段主要写了什么？它和第一段有什么联系？明确：第二段利用时间推移，抓住朝暮及四季特点，描绘了对比鲜明的晦明变化图及四季风光图，写出了其中的“乐亦无穷”。第二段是第一段“山水之乐”的具体化。3第三段同样是写“乐”，但却是写的游人之乐，作者是如何写游人之乐的？明确：“滁人游”，前呼后应，扶老携幼，自由自在，热闹非凡；“太守宴”，溪深鱼肥，泉香酒洌，美味佳肴，应有尽有；“众宾欢”，投壶下棋，觥筹交错，说说笑笑，无拘无束。如此勾画了游人之乐。4作者为什么要在第三

24、段写游人之乐？明确：写滁人之游，描绘出一幅太平祥和的百姓游乐图。游乐场景映在太守的眼里，便多了一层政治清明的意味。太守在游人之乐中酒酣而醉，此醉是为山水之乐而醉，更是为能与百姓同乐而醉。体现太守与百姓关系融洽，“政通人和”才能有这样的乐。5第四段主要写了什么？明确：写宴会散、众人归的情景。目标导学五：深入解读，把握作者思想感情思考探究：作者以一个“乐”字贯穿全篇，却有两个句子别出深意，不单单是在写乐，而是另有所指，表达出另外一种情绪，请你找出这两个句子，说说这种情绪是什么。明确：醉翁之意不在酒，在乎山水之间也。醉能同其乐，醒能述以文者，太守也。这种情绪是作者遭贬谪后的抑郁，作者并未在文中袒露胸怀，只含蓄地说：“醉能同其乐，醒能述以文者，太守也。”此句与醉翁亭的名称、“醉翁之意不在酒，在乎山水之间也”前后呼应，并与“滁人游”“太守宴”“众宾欢”“太守醉”连成一条抒情的线索，曲折地表达了作者内心复杂的思想感情。目标导学六：赏析文本，感受文本艺术特色1在把握作者复杂感情的基础上朗读文本。2反复朗读，请同学说说本文读来有哪些特点，为什么会有这