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文档简介
1、 检测生物组织中的一.实验原理: 某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。如:.还原性糖的鉴定:还原性糖+.脂肪的鉴定: 脂肪+ 脂肪+ .蛋白质的鉴定:蛋白质+淀粉 +斐林试剂砖红色沉淀苏丹橘黄色苏丹红色双缩脲试剂紫色碘蓝色二.目的要求: 尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质1、还原糖的检测和观察: 选材 应该选择含 量高.颜色 为 的植物组织 以苹果.梨为最好。还原糖白色或近于白色制备组织样液:制浆 过滤 取液 三.实验过程:用一层纱布可溶性还原糖与斐林试剂在加热的过程中生成砖红色沉淀,说明植物组织样液中含有还原糖。注入2mL苹果组织样液注入1mL刚配制好
2、的斐林试剂水浴加热约2min呈色反应变成砖红色50-650C的温水结论:甲乙液等量混匀振荡、混合摇匀呈现蓝色 还原糖有 。 试剂: . (甲液:0.1g/ml 的 , 乙液:0.05g/ml的 .)甲乙液必须 后再加入样 液中, 。 必须 。葡萄糖,果糖,麦芽糖用水浴加热斐林试剂NaOHCuSO4等量混合均匀现配现用注意事项:颜色变化:浅蓝色棕色砖红色2、脂肪的检测和观察:圆形小颗粒呈橘黄色,说明有脂肪存在。取材:花生种子(浸泡34h),将子叶削成薄片制片取最理想的薄片在薄片上滴2-3滴苏丹染液3min去浮色(用50酒精) 制成临时装片观察低倍镜下寻找到已着色的圆形小颗粒,然后用高倍镜观察结论
3、:注意事项: 切片要薄,如厚薄不均就会导致观察时有的地方清晰有的地方模糊。 酒精的作用是: 。 需使用显微镜观察 使用不同的染色剂染色时间不同颜色变化: 。洗去浮色橘黄色或红色3、蛋白质的检测和观察: 选材 应该选择含 丰富的豆浆或鸡 蛋清溶液。(避免材料自身的颜色对 实验变化颜色的掩盖)蛋白质黄豆浆滤液或蛋清稀释液制备组织样液呈色反应组织样液2mL双缩脲试剂A液1mL双缩脲试剂B液4滴摇匀后变成紫色结论:说明组织样液中存在蛋白质。(3)注意事项: 试剂: A液:0.1g/ml的 ; B液: 0.01g/ml的 ) 先加 ,再加 。 B液要求量适中,否则多余 的B液将会与A液发生反应生 成Cu
4、(OH )2显色而遮盖原有的颜色。 鉴定前,留出一部分组织样液,以便对比双缩脲试剂A液1mlB液4滴NaOHCuSO4蛋白质的检测结果 用于蛋白质鉴定的蛋清必须稀释,以免 实验后粘住试管壁,不易洗刷斐林试剂与双缩脲试剂的比较:A液:0.1g/mLNaOHB液:0.01g/mLCuSO4甲液:0.1g/mLNaOH乙液:0.05g/mLCuSO4紫色物质生成砖红色沉淀先加A液,再加B液,不需加热甲液与乙液先混再用,且现配现用,需加热蛋白质还原性糖试剂组成检验结果试剂用法检测对象双缩脲试剂斐林试剂4、淀粉的检测和观察: 取材:马铃薯匀浆检测组织样液2mL碘液2滴结论:说明组织样液中存在淀粉。注意:
5、常用材料:马铃薯 试剂: 。颜色变化: 。碘液变蓝摇匀后变成蓝色思考感悟2检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质时,对于材料的选择有何统一要求?【提示】选择颜色较浅的且相应物质含量较高的生物组织,避免材料自身颜色对实验颜色变化的遮盖。特别提醒实验用的花生种子需提前浸泡34 h,浸泡时间太短,不易切片;浸泡时间太长,则组织太软,切下的薄片不易成形。(3)蛋白质的检测和观察选材与制备:鲜肝提取液或黄豆浆滤液实验探究创新验证性实验和探究性实验(1)验证性实验:是指实验者针对已知的实验结果而进行的以验证实验结果、巩固和加强有关知识内容、培养实验操作能力为目的的重复性实验。(2)探究性实验:是指实验者在不知晓实验结果的前提下,通过自己
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