《微生物学实验》课件实验七微生物的紫外诱变_第1页
《微生物学实验》课件实验七微生物的紫外诱变_第2页
《微生物学实验》课件实验七微生物的紫外诱变_第3页
《微生物学实验》课件实验七微生物的紫外诱变_第4页
《微生物学实验》课件实验七微生物的紫外诱变_第5页
已阅读5页，还剩7页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

1、实验七微生物的紫外诱变一、目的要求掌握紫外线诱发微生物突变的基本原理。掌握选育高产突变型菌株的方法。 二、基本原理紫外线是一种最常用的物理诱变因素。它的主要作用是使DNA双链之间或同一条链上两个相邻的胸腺嘧啶形成二聚体，阻碍双链的分开、复制和碱基的正常配对，从而引起突变。紫外线照射引起的DNA损伤，可由光复活酶的作用进行修复，使胸腺嘧啶二聚体解开恢复原状。为了避免光复活，用紫外线照射处理时以及处理后的操作应在红光下进行，并将照射处理后的微生物放在暗处培养。三、实验器材菌株枯草芽孢杆菌培养基淀粉培养基溶液或试剂碘液，无菌生理盐水，盛4.5ml无菌水试管仪器或其他用具1ml无菌吸管，玻璃涂布棒，血

2、细胞计数板，显微镜，紫外灯（15W），磁力搅拌器，台式离心机，振荡混合器等。四、操作步骤制备菌悬液取枯草芽孢杆菌48h斜面培养物4-5支用10ml无菌生理盐水洗下菌苔倒入无菌大试管振荡30s，打散菌块3000r/min离心10min弃上清液用无菌生理盐水洗涤菌体2-3次制成菌悬液用显微镜直接计数法调整细胞浓度108个/ml。（老师完成）制作淀粉琼脂培养基平板紫外线处理打开紫外灯预热20min。各取3ml菌悬液，分别加入2套6cm无菌平皿中，并放入一根无菌磁力棒。将平皿置于磁力搅拌器上，打开皿盖，在距离30cm，15W的紫外灯下分别搅拌照射1min和3min。盖上皿盖，关闭紫外灯。稀释：把照射过

3、的菌悬液用无菌水稀释成10-1-10-6；涂平板：取 10-4、10-5、10-6稀释液和未经照射的稀释液（对照）各0.1ml涂平板，重复三个平板；培养：用黑布或纸包好，37培养48h。分别计算紫外线处理1min和3min后的存活率和致死率存活率（%）=致死率（%）=观察诱变效应选取cfu数在5-6个左右的处理后涂布的平板观察诱变效应。分别向平板内加碘液数滴，在菌落周围出现透明圈。分别测量透明圈直径与菌落直径并计算其比值（HC比值）。选取HC比值大的菌落转接到试管斜面上培养，可用于复筛。五、注意事项紫外线照射计时从开盖起，加盖止；先开磁力搅拌器，再开盖照射，使菌悬液中的细胞接受均等照射；从紫外线照射处理开始，直到涂布完平板的所有操作步骤都需在红光下进行。六、实验结果观察诱变效应，计算存活率、致死率、HC比值。结果填入1.(1)(2)。稀释倍数平均数/皿处理时间/min存活率/%致死率/%0（对照）六、实验结果菌落HC比值诱变剂UV(1min)UV(3min)对照七、思考题.(2)、(3)用紫外线进行诱变时，为什么要打开皿盖？为什么要在红光下操作，暗环境下培养？分析你的实验

人人文库> 全部分类> 教育资料 > 课件下载

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论