X染色体STR基因座在同胞亲缘鉴定中的应用

1、X染色体STR基因座在同胞亲缘断定中的应用吴淑珍，林刻智，张洪勤【摘要】目的:探究X染色体STR基因座奇特的遗传方法在同胞亲缘干系断定中的应用。要领:应用聚合酶链式反响PR、聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染显带技能对1名未知女性个别与3名同胞兄妹的22个基因座举行分型，并对线粒体D环高变区作序列测定。效果:得到具有去除代价的2个X染色体基因座DXS7132、DXS6804和4个常染色体基因座D1S549、D2S441、D16S539、D5S818，否认了未知个别与3名同父同母兄妹的亲缘干系。结论:X染色体基因座在男性的基因组中呈单倍型情势存在，特别实用于法医学理论中在怙恃缺如环境下姐妹之间的亲缘断定。

2、【关键词】法医物证学；X染色体；短串联重复序列；同胞亲缘断定Abstrat:bjetive:TstudytheappliatinfspeifigenetipatternfX-hrseSTRliinsiblingsidentifiatin.ethds:22STRlifhlebldfsuspiiusneandthreesiblingsereexainedithplyerasehainreatin(PR),PAGEandsilverstainingtehnique,andthehypervariablereginftheithndrialD-lperesequened.Results:TX-hrse

3、STRliDXS7132、DXS6804andFurautsalSTRliD1S549,D2S441,4D16S539andD5S818havebeenfund,hihanbeusedtexludethesuspiininsiblingsidentifiatin.nlusin:X-hrseSTRliexistinthealegeneinthefrfhaplid,hihisespeiallyusefulfrfrensisieneappliatin,suhasthesiblingsidentifiatinintheabsenefparents.Keyrds:frensibilgialevidene

4、;Xhrse;shrttanderepeats;siblingsidentifiatinX染色体短串联重复序列(shrttanderepeats,STR)普及漫衍于真核基因组中，高度不变且具有高度多态性，在男性的基因组中呈单倍型情势存在，遗传方法奇特-父亲的等位基因只能遗传给女儿，以是它具有一些常染色体遗传标识表记标帜无法相比的长处，特别实用于法医学理论中在怙恃缺如环境下姐妹之间的亲缘断定，这种奇特的遗传方法已引起了一些法医事情者的留意1，2。1质料和要领1.1同胞干系断定的案例由状师事件所托付,对一位未知女性个别与3位同胞兄妹之间是否存在同胞亲缘干系举行断定。1.3STR基因座的检测取未知个

5、别1号和三名同胞兄妹2、3、4号的血样，接纳helex-100快速法3提取基因组DNA后举行扩增:94预变性3in，9450s，5840s，7240s，34个循环，72末次延伸10in，4保存。检测位点包罗DXS7132、DXS6804、DXS6799等3个X染色体STR基因座和D6S477、D1S549、D3S1754、D12S391、D12S375、D18S865、D18S535、D7S2846、D16S539、D3S1358、D8S1179、SFIP、VA、D5S818、D19S400、D18S1364、D13S317、D2S441、D20S85等19个STR基因座。扩增产物经6%非变性

6、聚丙烯酰胺凝胶电泳分散,银染表现电泳谱带，用尺度等位基因Ladder确定其基因型。1.4线粒体D环高变区DNA序列测定将1号与2号的线粒体D环高变区DNA经PR扩增和产物纯化后，托付上海Sangn用双脱氧停顿法在ABI公司的3730测序仪上测定序列。2效果2.1所检测的22个STR基因座分型效果见表1，两个违犯遗传纪律的X染色体基因座阐发见表2；图1为22个STR基因座中的12个基因座，此中包罗6个对付本案亲缘干系的阐发断定具有紧张代价的基因座。2.2比力1号与2号在线粒体D环高变区1602016423位置上的DNA测序效果，共检出11处碱基序列不雷同表3，仅1621716327片断上就检出5

7、处碱基序列差异图2，从而去除两者来自同一母系的大概性。3讨论如今用于断定同胞亲缘干系的要拥有常染色体和性染色体STR基因座多态性阐发、线粒体测序。常染色体STR基因座具有种类多、漫衍广、高度多态性、易于检测等长处，但在举行同胞干系鉴按时，由后代的基因型反推怙恃的基因组适时，至少需提供3名或3名以上后代的样本作参照4。如本文提供的样本是1个未知个别和3个同胞兄妹，检测19个常染色体STR基因座，反推同胞兄妹怙恃的基因型，共检出具有去除代价的4个基因座：D1S549、D2S441、D16S539、D5S818基因座。按照德国亲子断定专家协会认订婚权干系的尺度，去除亲权干系应有3个或3个以上的STR

8、基因座去除证据为根据5，可以去除未知个别和同胞之间存在完全同胞的大概性，但不克不及去除同父异母或同母异父的半同胞干系。在一些缺乏双亲的特别的案例中，如断定一个未知女性个别和另一个女性个别是否存在姐妹亲缘干系时，常染色体STR基因座无法去除姐妹干系。线粒体DNA是位于真核细胞胞质内的环状DNA，由于线粒体呈母系遗传，兄弟姐妹间的线粒体挨次均雷同,故可用于做身源断定和同一认定6。本研究将2号作为同胞兄妹的代表与1号举行比对，测序创造两者在线粒体D环高变区1602016423位置上有11处碱基序列不雷同，去除了同母干系，但不克不及去除同父干系。别的，线粒体测序有其范围性，与被断定人的母亲为同一母系支

9、属的全部个别，均与其母亲有雷同的序列，以是查验效果雷同也不克不及作必定的结论。X染色体STR基因座由于其奇特的遗传方法，在男性的基因组中呈单倍型情势存在,并以单倍型遗传给女儿而不遗传给儿子7，也就是说，女儿的等位基因只能泉源于父亲。因此，X染色体STR基因座最大的应用代价在于可以办理两个女性个别之间是否存在姐妹亲缘干系的案件。比方本文的1号和4号，检测两人的DXS7132、DXS6804基因座，创造两人间没有雷同的等位基因，说明她们的等位基因不是泉源于同一个父亲，由此得出她们两人不是同父所生的结论。固然，同胞中女性个别越多，去除同父干系就越轻易，如本文通过3号和4号在X染色体上所共有的等位基因

10、确定父亲的基因型，从而对未知个别做出去除同父干系的断定。固然X染色体STR基因座具有高度的多态性，但在同胞亲缘断定中只能起到去除同父干系的作用。要正确、快速、有用地举行同胞亲缘干系断定，X染色体STR基因座提供的信息还不敷充实，必需与常染色体和线粒体等多态性标识表记标帜相结合，X染色体STR基因座仅是这些多态性标识表记标帜的紧张增补2，8。【参考文献】1SzibrR,Krazak,HeringS,etal.UsefX-linkedarkersfrfrensipurpseJ.IntJLegaled,2022,117(2):67-74.2吕德坚,刘秋玲.X染色体STR的法医学应用希望J.中王法医学

11、杂志,2002,17(4):252-255.3Gehrig,HhEister,BrerUV,etal.Sissauasianppulatindatafr13STRliusingApFISTRprfilerplusandfilerPRaplifiatinkitsJ.JFrensiSi,1999,44(5):1035-1038.4赵庆国,朱爱萍,张郁,等.使用基因座多态性断定无双亲寻姐弟的同胞干系J.中王法医学杂志,2002,17(1):45.5Kayser,SajantilaA.utatinsatY-STRli:iplia-tinsfrpaternitytestingandfrensianalysisJ.FrensiSiInt,2001,118(2-