复合螺旋藻多糖对人胃癌MGC细胞的抑制作用

1、复合螺旋藻多糖对人胃癌MGC细胞的按捺作用乔明霞，于蕾妍，郝言芝，郭春生，张志娟，王清吉【摘要】目的研究复合螺旋藻多糖对人胃癌G细胞的按捺作用。要领将螺旋藻多糖PSP与银杏叶有用身分GBE以差异剂量按必然比例复合，不雅察复合制剂在体外对人胃癌G细胞的按捺作用。结果PSP与GBE11比例复合组、12比例复合组和21比例复合组对人胃癌G细胞的按捺率，高剂量时别离比空缺比较组进步92.44P0.01，26.36P0.01和71.32P0.01；中剂量时别离比空缺比较组进步62.37P0.01，20.57P0.01和24.15P0.01；低剂量时别离比空缺比较组进步27.94P0.01，30.36%P

2、0.01和17.92P0.01。结论单一身分的螺旋藻多糖组对人胃癌G细胞也有较好的按捺作用，并呈剂量依靠性。高、中剂量复合螺旋藻多糖对人胃癌G细胞的按捺作用，11比例配比时按捺结果最好。此中高剂量组11配比时按捺率到达92.4。表白复合螺旋藻多糖在该剂量配比时协同增效作用最大。【关键词】螺旋藻多糖银杏叶有用身分人胃癌G细胞抑瘤率胃癌是天下上第二大癌症死因，该疾病是严峻威胁人类康健的恶性肿瘤之一。如今临床上除了手术和放射疗法外，重要接纳环磷酰胺等化学合成药物治疗肿瘤疾病，但这些药物在杀伤肿瘤细胞的同时，对患者的机体也造成了很大的损伤，因此，挑选无毒副作用的自然药物用来治疗肿瘤疾病成为医学界研究的

3、热门。螺旋藻多糖作为一类具有紧张生物活性的自然多糖化合物，其生物活性已渐渐为人们所熟悉。研究创造，螺旋藻多糖是一种很好的免疫加强剂，如今已被渐渐应用于临床和药理实行。据报道，银杏叶有用身分具有抗氧化、落血脂、进步免疫力、抗肿瘤等方面的作用1，它们的药理作用也不竭被熟悉，临床应用也越来越普及。本实行将螺旋藻多糖PSP与银杏叶有用身分(GBE)按必然比例复合，不雅察复合制剂在体外对人胃癌G细胞的按捺作用。1质料与仪器1.1螺旋藻多糖与银杏叶有用身分螺旋藻购于中国科学院南海海洋研究所三亚站，为浅绿色粉末。参照文献2，接纳三氯乙酸除卵白法提取螺旋藻多糖PSP，多糖含量93以上；银杏叶有用身分GBE为实

4、行室自提，总黄酮含量24，萜内酯含量6。1.2仪器超净事情台苏州净化装备厂；2恒温造就箱南京畅翔仪器装备有限责任公司；双目倒置显微镜凯迪高速阐发仪器；del550主动酶联检测仪美国Bi-rad公司。1.3肿瘤细胞人胃癌G细胞购于山东省医学科学院药物研究所。1.4试剂及配制RPI1640造就基Gib公司；小牛血清杭州四序青生物工程质料；二甲亚砜DS上海生工生物工程；噻唑兰TTSiga公司。细胞造就液的配制：将1包RPI1640，2.0gNaH3，青霉素、链霉素各10万U和2.0gHepes放于烧杯中，加适量三蒸水在磁力搅拌器上溶解，并定容至1L，用5.6NaH3溶液调治pH至7.27.4，用0.

5、22双层滤膜过滤除菌，4冰箱保存。磷酸盐缓冲液PBS的配制：正确称取Na2HP4H21.56g，KH2P40.20g，Kl0.20g，Nal8.00g，加三蒸水溶解并定容至1L，调治pH至7.2，115.6高压蒸气灭菌30in，并分装成100l/瓶，4冰箱保存。0.25胰卵白酶溶液的配制：称取胰酶0.25g，EDTA0.02g，参加灭菌的PBS液100l充实搅拌溶解，调pH至7.27.4，置4冰箱留宿，0.22双层虑膜过滤除菌，并分装入瓶10l/瓶。-20冰箱保存备用。TT溶液的配制：称取TT250.00g，加PBS50l，在磁力搅拌器上搅拌30in，使TT充实溶解，继承加PBS使TT溶液的终

6、浓度为5g/l，用双层0.22的微孔滤膜过滤除菌，分装，4保存，两周内有用。1.5供试药物的配制按实行最高浓度的100倍配制母液，溶剂为PBS与DS等体积混淆物。利用前用造就液稀释到实行方案浓度，终极溶剂在造就液中的浓度不凌驾1。各实行组终极药物浓度如表1。表1实行分组及各实行组药物浓度略2要领起首取对数生恒久的人胃癌G细胞用胰酶消化，以含10小牛血清的RPI-1640造就液稀释细胞，制成5104/l细胞悬液。将配制好的细胞悬液参加96孔造就板中，每孔200l，置37，52造就箱中造就24h后，按分组环境参加差异复合比例的供试药物，继承造就72h，造就竣事前4h，每孔加TT20l，继承造就4h

7、后，直接吸弃上清液，然后加DS200l/孔，微量振荡器振荡5in，使深蓝色沉淀物完全溶解。用del550多孔主动酶标仪比色(波长570n)，测吸光度值，并按以下公式盘算生长按捺率：细胞存活率=抗癌药物组吸光度值/细胞比较组吸光度值100。按捺率=100细胞存活率3结果由表2可见，高剂量的PSP，银杏黄酮和银杏内酯3种单一身分都对人胃癌G细胞有必然的按捺作用，此中PSP的按捺结果较好，银杏黄酮的按捺结果较差。PSP与银杏叶有用身分按3种比例复合利用，此中11比例复合组按捺人胃癌G细胞结果最好。表2高剂量复合螺旋藻多糖对人胃癌G细胞的按捺作用略由表3可见，中剂量的PSP，银杏黄酮和银杏内酯3种单一

8、身分对G细胞的按捺作用，银杏黄酮效力最高。复合比例的PSP与银杏叶有用身分的抑瘤结果较单一身分高。此中11复合组的结果最好。表3中剂量复合螺旋藻多糖对人胃癌G细胞的按捺作用略由表4可见，低剂量的PSP，银杏黄酮和银杏内酯3种单一身分组以及复合比例的PSP与银杏叶有用身分对人胃癌G细胞的按捺作用，银杏黄酮组结果较好；别的组结果不显着。表4低剂量复合螺旋藻多糖对人胃癌G细胞的按捺作用略4讨论螺旋藻中所含有的最重要的活性身分之一为螺旋藻多糖，它重要由D-甘露糖、D-葡萄糖、D-半乳糖和葡萄糖醛酸构成，是一种水溶性多糖。李羚等3报道利用Fentn反响，螺旋藻多糖能有用扫除H、2-自由基，对脂质过氧化及

9、DNA的H氧化损伤有明显按捺作用。于红等4报道随螺旋藻多糖浓度的增长HeLa细胞和HeGp-2细胞的存活率渐渐低落，但对正凡人二倍体成纤维细胞无影响,光镜下不雅察螺旋藻多糖作用2448h后HeLa细胞出现显着的形态学改变。关燕清等5报道螺旋藻多糖可协同结实化藻蓝卵白对体外造就的人胰腺癌S1990细胞起按捺作用。在17.5g/L螺旋藻多糖存鄙人，按捺率最高可到达86%。曲显俊等6报道螺旋藻多糖治疗后的荷瘤小鼠其脾淋巴细胞产生白细胞介素的成效加强。别的，口服螺旋藻多糖还具有必然提拔或规复因利用环磷酰胺所致动物外周血白细胞低落的作用。银杏叶身分庞大，重要活性身分为含有苷和酚羟基布局的银杏黄酮、内酯和

10、多糖类。研究创造7银杏叶提取物中萜类内酯化合物是血小板激活因子的特异性受体拮抗剂，因此不停是人们存眷的核心地点。固然如今还没有关于银杏有用身分抗肿瘤的报道，但有研究4表白银杏有用身分具有SD样自由基拮抗作用。银杏叶中的黄酮类化合物具有多方面的生理活性8，在心脑血管疾并抗炎等方面疗效明显。可直接扫除多种活性氧簇，如2-，N，H，脂质过氧化物等。而肿瘤的产生与氧自由基有着紧张的接洽。实行的结果，PSP与银杏黄酮、银杏内酯单独利用对人胃癌G在体外就有较好的按捺作用。刘力生等9报道螺旋藻多糖可以或许明显进步机体非特异性的细胞免疫成效和特异性的体液免疫成效。这大概与PSP、银杏黄酮和银杏内酯含有羟基或酚

11、羟基布局有关。此中创造单一的PSP和银杏内酯组对人胃癌G细胞的按捺呈剂量依靠趋势。高剂量组的按捺结果显着优于中、低剂量组。王晓杨等10报道螺旋藻多糖可促进nA诱导的体外小鼠淋巴细胞转化，且表示出剂量依靠干系。而实行创造银杏黄酮的剂量与抑瘤作用呈负相干趋势。有研究创造5含有雷同或雷同官能团的化合物举行复合，可以或许使药物发挥协同增效作用。螺旋藻多糖和银杏叶有用身分都含有羟基或酚羟基布局，这为两种活性物质团结利用发挥协同增效提供了基矗本实行表白，在高、中剂量时PSP与GBE复合11利用对人胃癌G的按捺率高于PSP、银杏黄酮和银杏内酯单一利用组。PSP与GBE复合利用，在对人胃癌G的按捺作用上11复

12、适时协同增效作用发挥至最大，尤其高剂量复适时到达92.44%。说明复合螺旋藻多糖抑瘤率的凹凸与PSP与GBE的剂量、配比有关。这大概是由于螺旋藻多糖与银杏叶有用身分按此剂量、比例搭配，可以使复合制剂中的苷、羟基、酚羟基和糖苷键等活性基团彼此促进产生最大的协同增效作用。【参考文献】1刘宗敏，张慧，戴梓茹，等.银杏黄酮的生理作用研究近况及生长远景J.湖南林业科技，2022，336:75.2钱志刚.螺旋藻多塘提取新工艺研究J.淮海工学院学报，2000,92:50.3李羚,高云涛，戴云，等.螺旋藻及螺旋藻多糖体外扫除活性氧及抗氧化作用研究J.化学与生物工程，2022，243:55.4于红，张学成.螺旋藻多糖抗肿瘤作用的实行研究J.高技能通讯，2022，137:83.5关燕清,郭宝江.藻多糖对结实化藻蓝卵白抑癌作用的影响J.营养学报，20023:252.6曲显俊,崔淑香，解砚英，等.螺旋藻多糖抗癌作用的实行研究J.中国海洋药物，2000，194:10.7王雁,杨义芳.银