诊断血栓与止血ppt课件

1、血栓与止血检验一、血栓与止血的挑选检验一期止血缺陷的挑选检验：指血管壁和血小板异常所引起的止血功能缺陷。相关挑选检验：1 出血时间BT2 血小板计数PLT3 血块收缩时间CRT4 毛细血管脆性实验CFT又称束臂实验1. 出血时间测定BT原理：参考值：临床意义：延伸 见于血小板数量减少或功能异常临床常见病有原发性或继发性血小板减少性紫癜、血小板无力症、巨血小板综合症、凝血因子缺乏临床常见病有vWD、DIC、血管异常临床常见病遗传性毛细血管扩张症及药物影响如乙酰水杨酸、潘生丁等缩短 见于血栓前形状或血栓性疾病。 2. 血小板计数PLT略3.血块收缩实验CRT原理：参考值：48%64%临床意义：收缩

2、不良或不收缩 见血小板减少和血小板无力症、严重凝血因子缺乏及凝血妨碍、红细胞增多症等。4.毛细血管脆性实验(CRF) 原理：参考值：男5个，女10个临床意义：阳性见于遗传性毛细知管扩张症、过敏性紫癜、维生素C或P缺乏症、原发性和继发性血小板减少症、血小板增多症、先天性和获得性血小板功能缺陷症、血管性血友病一、血栓与止血的挑选检验二期止血缺陷的挑选检验：指凝血和纤溶异常所引起的止血功能缺陷。相关挑选检验：1 全血凝固时间CT2 活化的部分凝血活酶时间APTT3 血浆凝血酶原时间(PT)1. 全血凝固时间CT略2.活化部分凝血活酶时间测定APTT原理：在37条件下，在血浆中参与以白陶土激活剂和脑磷

3、脂部分凝血活酶悬液及Ca+后，血浆凝固所需时间。参考值：3243秒临床意义：延伸: 见内源性凝血系统因子缺乏及II、V、X因子、纤维蛋白原缺乏、抗凝物质增多等。缩短 : 见于高凝形状及血栓性疾病。3. 凝血酶原测定PT原理：在血浆中参与组织凝血活酶和Ca+，使凝血酶原转变为凝血酶，后者使纤维蛋白原转变为纤维蛋白所需时间。参考值：PT 1115秒 INR 0.81.5临床意义： 延伸：见于外源性凝血途径因子缺乏及II、V、X因子、纤维蛋白原缺乏、抗凝物质增多等。 缩短：见于高凝形状及血栓性疾病。一、血栓与止血的挑选检验纤溶活性加强的挑选检验相关挑选检验：1 优球蛋白溶解时间测定 ELT2 血清纤

4、维蛋白原降解产物检测 FDP3 血浆D-二聚体检测D-D 1. 优球蛋白溶解时间测定 ELT原理：血浆优球蛋白中含有纤维蛋白原、纤溶酶原和纤溶酶原活化剂等，但不含有纤溶酶抑制物。在pH4.5时使优球蛋白沉淀，经离心除去纤溶抑制物，并将此沉淀(即优球蛋白)溶于缓冲液中，再参与适量的钙溶液(加钙法)或凝血酶(酶法)使其凝固，察看凝块完全溶解所需时间，即为优球蛋白溶解时间。参考值：加钙法：1298+41.1min 加酶法：l57.5+59.1min临床意义 缩短(小于70min)：阐明纤溶活性加强，见于原发性和继发性纤溶亢进。 延伸：阐明纤溶活性减低，见于血栓前形状、血栓构成性疾病和运用抗纤溶药物等

5、。 2.血清纤维蛋白原降解产物检测(FDP原理：胶乳凝集法 在血清中参与用特异性抗纤维蛋白(原)D、E片段抗体标志的胶乳颗粒悬液,与血清中FDP发生抗原抗体反响,导致胶乳颗粒凝集。参考值：5mg/L临床意义：增高 见于原发性纤溶症、DIC、恶性肿瘤、肝脏疾病、肾脏疾病、肺梗死、DVT、溶栓治疗、白血病、器官移植的排斥反响等。3.D-二聚体测定DD原理：胶乳凝集法 ELISA法参考值：200 g/L临床意义： DD是交联纤维蛋白降解产物 是原发性纤溶与继发性纤溶鉴别目的 是溶栓治疗监测目的增高 见于继发性纤溶、血栓构成及临床出血。 二、血管壁内皮检验相关检验：1 血管性血友病因子抗原测定VwF:

6、Ag2 血浆内皮素-1检测 ET-13 血浆血栓调理蛋白抗原测定(TM:Ag)4 血浆6-酮-前列腺素F1a测定6-k-PGF1a1.血管性血友病因子抗原测定VwF:Ag原理：免疫火箭电泳法参考值：94.1%32.5%临床意义： 减低 见于血管性血友病 增高 见于血栓性疾病心肌梗死、心绞痛、脑堵塞等、肾病急或慢性肾炎、肾病综合症及妊娠高血压综合症、糖尿病、大手术后等。2. 血浆内皮素-1检测 ET-1原理： ELISA法参考值： 5ng/L临床意义： 增高：见于心肌梗死、心绞痛、肺动脉高压、原发性高血压、高脂血症、缺血性脑卒中、肾功能衰竭、原发性醛固酮增多症、支气管哮喘、休克等。3.血浆血栓调

7、理蛋白抗原测定(TM:Ag)原理：放射免疫法参考值：2035g/L临床意义：增高 见于糖尿病、系统性红斑狼疮、DIC、血栓性血小板减少性紫癜及部分脑血栓、急性心肌梗死、肺栓塞、闭塞性脉管炎患者。4.血浆6-酮-前列腺素F1a测定6-k-PGF1a原理：ELISA法参考值：17.97.2ng/L临床意义：减少 见于糖尿病、急性心肌梗死、心绞痛、动脉粥样硬化、脑血管病变、肿瘤转移、肾小球病变、周围血管血栓性血小板减少性紫癜等三、血小板相关检测1.血小板生存时间(PST)测定2.血小板相关免疫球蛋白测定PAIg3.血小板粘附实验PAdT4.血小板聚集实验PAgT5.血小板第3因子有效性(PF3aT)

8、测定6.血小板膜糖蛋白(GP)测定7.血小板活化目的测定1.血小板生存时间(PST)测定原理: 丙二醛(MDA)法与血栓烷B2(TXB2)法 由于阿司匹林不可逆性抑制血小板环氧化酶活性，使MDA与TXB2合成受抑，故血小板MDA与TXB2含量减低。与此同时因新生血小板未受阿司匹林的抑制，故其MDA与TXB2含量正常。因此察看口服阿司匹林后血小板MDA与TXB2的恢复曲线可以推断出血小板生存时间。 参考值: MDA法 PST为10.84.2d; TXB2法 PST为9.31.7d临床意义: 缩短：见于血小板破坏增多性疾病：如特发性血小板减少性紫癜、药物免疫性血小板减少性紫癜、输血后紫癜、脾功能亢

9、进、系统性红斑狼疮；血小板耗费过多性疾病：如DIC、血栓性血小板减少性紫癜(TTP)、溶血尿毒症综合征(HUS)；血栓性疾病：如心肌梗死、心绞痛、糖尿病伴血管病变、深静脉血栓构成、肺梗死、妊高征、恶性肿瘤等。2.血小板相关免疫球蛋白测定PAIg原理：ELISA法参考值： PAIgG 078.8ng/107血小板 PAIgA 02.0ng/107血小板 PAIgM 07.0ng/107血小板 PAC3 018ng/107血小板临床意义: 增高 见ITP、SLE、同种免疫性血小板减少性紫癜、输血后紫癜、药物免疫性血小板减少性紫癜、恶性淋巴瘤、慢性活动性肝炎及淋巴细胞白血病、多发性骨髓瘤、Evan综

10、合症、良性单株丙球蛋白血症等。3.血小板粘附实验PAdT原理：血小板具有粘附于受损血管外表或异物外表的特性，测定一定量血液与一定异物面积接触前后血小板数，即可求出血小板粘附率。参考值：玻璃柱法：62.5% 5.61% 玻璃球旋转法：34.9% 5.95% 玻璃滤器法： 31.9% 10.9% 临床意义： 增高: 见于高凝形状和血栓性疾病,如心肌梗死、心绞痛、糖尿病、深静脉血栓、肾小球病变、妊娠高血压综合症、口服避孕药、切脾术后。 减低: 见于血小板无力症、vWD、巨血小板综合症、MDS、尿毒症、异常纤维蛋白原血症、肝硬化、服用抗血小板药物等。4.血小板聚集实验PAgT原理：比浊法 参与诱导剂前

11、后，富含血小板血浆浊度变化。参考值：ADP 0.5mmol/L 3575%临床意义： 增高：见于高凝形状和血栓性疾病 急性心肌梗死、心绞痛、糖尿病、脑血管病变、妊娠高血压综合症、深部静脉血栓等。 减低：见于血小板无力症、巨血小板综合症、纤维蛋白原降低、尿毒症、肝硬化、骨髓增生性疾病、急性白血病、服用抗血小板药物等。5.血小板第3因子有效性(PF3aT)测定 原理: PF3是血小板在活化过程中所构成的一种膜外表磷脂(即磷脂酰丝氨酸)，是凝血的重要成分。当PF3缺乏时凝血即有异常。本实验将正常人和病人富血小板血浆(PRP)和贫血小板血浆(PPP)交叉配合，以白陶土作活化剂，促使PF3构成，再测定各

12、组标本的复钙时间，比较各组时差，从而得知PF3能否有缺陷。参考值:第l组比第2组的结果延伸不超越5s。假设延伸超越5s，那么为PF3有效性减低。第3组与第4组为对照，在血友病时第3组亦会延伸。临床意义:PF3aT减低 见于先天性PF3缺乏症、血小板无力症、宏大血小板综合征以及肝硬化、尿毒症、异常蛋白血症、骨髓增殖异常综合征、SLE、血小板减少症、急性白血病、再生妨碍性贫血以及某些药物的影响。6.血小板膜糖蛋白(GP)测定原理: 用抗人血小板膜GPIb、GPlIb和GPlla单克隆抗体与被检者血小板膜相应糖蛋白的特异免疫反响的原理，经过放射免疫分析可以定量测定血小板膜相应GP的含量。参考值: 每

13、个血小板含GPIb分子数为(1.540.49)104； GPbGP a分子数为(5.451.19)104临床意义: GPIb缺乏: 见于宏大血小板综合征。 GPbGPa缺乏: 见于血小板无力症7.血小板活化目的测定血小板活化目的包括:血浆-血小板球蛋白(-TG) 、血小板a颗粒膜蛋白140( GMP-140)和血小板第4因子(PF4)原理：ELISA法参考值：-TG 16.4 9.8g/L GMP-1401.61 0.72X1010分子数/L PF4 3.2 2.3 g/L 临床意义： 见于高凝形状和血栓性疾病，表示血小板被激活及释放反响亢进，对缺血性心、脑血管病变的早期诊断及糖尿病血管病变、

14、尿毒症预后有重要意义。四、凝血因子检验常用血液制剂中所含有的因子1.正常混合血浆:含有除、外一切凝血因子2.正常人血清:含、 乏、3.正常人储存血浆(正常人血浆于37中储存24小时或于冰箱储存2周):乏、4.正常人储存血清(正常人血清于4储存1周):乏、5.正常人硫酸钡吸附血浆:乏、6.正常吸附血清:含、四、凝血因子检验简易凝血活酶生成实验STGT及纠正实验血浆因子、促凝活性检测血浆因子、促凝活性检测凝血因子定性实验和亚基抗原检测1.简易凝血活酶生成STGT及纠正实验原理：STGT是用受检者稀释全血溶液作为实验所需的全部凝血因子的来源，本身红细胞溶解产物替代 PF3，按一定时间参与基质血浆提供

15、凝血酶和纤维蛋白原，测定凝血活酶生成所需时间，以检查内源凝血系统凝血活酶生成有无妨碍。 纠正实验：在STGT延伸的受检稀释全血溶血液中分别参与1/100容量的正常硫酸钡吸附血浆、正常血清和正常新颖血浆，分别测定正常基质血浆的最短凝固时间，以确定内源性凝血活酶生成缺陷的因子。2、参考值：最短的凝固时间小于15S10-14S临床意义：检测凝血因子缺乏及抗凝物质存在。2.血浆因子、促凝活性检测原理：将受检血浆分别与乏因子、基质血浆混合，再加免脑粉浸出液和钙溶液，分别作血浆凝血酶原时间测定。将受检者血浆测定结果与正常人新颖混合血浆比较，分别计算各自的因子：C、：C、：C、：C促凝活性。参考值： F：C

16、:97.7%16.7% F ：C:102.4%30.9% F ：C:103%17.3% F ：C:103%19.0%临床意义：本实验是继外源凝血系统挑选实验异常，进而直接检测诸因子促凝活性的更更敏感、更可靠目的。增高见血栓性疾病;减低见肝病变、维生素K缺乏、DIC、口服抗凝剂、抑制物存在。3.血浆因子、促凝活性检测原理：受检血浆中分别参与乏F、的基质血浆、白陶土脑磷脂悬液和钙溶液，分别记录开场出现纤维蛋白丝所需的时间。从各自的规范曲线中，分别计算出受检血浆中F：C、：C、：C、：C相当于正常人的百分率%参考值： F：C:103%25.7% F ：C:98.1%30.4% F ：C:100%18

17、.4% F ：C:92.4%20.7 %临床意义：本实验是在内源凝血挑选实验的根底上，省略以往逐级挑选和纠正实验，直接检测各自相应凝血因子促活性的更为理想和直观的实验方法，同时也是血友病评价和分型的重要目的之一。 增高见血栓性疾病;减低见血友病、血管性血友病、肝病变、维生素K缺乏、DIC、口服抗凝剂、抑制物存在。4.凝血因子定性实验和亚基抗原检测(1)凝血因子定性实验原理：受检血浆参与钙离子，使纤维蛋白原转变为纤维蛋白凝块，将凝块置5mol/L尿素溶液中，凝块溶讲解明受检血浆缺乏因子，反之，凝块不溶，那么阐明受检血浆不缺乏因子。参考值： 24小时凝块不溶临床意义：见先天性和后天性因子缺乏，肝病

18、变、系统性红斑狼疮、DIC、原发纤溶、转移性肝癌、恶性淋巴瘤等。4.凝血因子定性实验和亚基抗原检测(2)凝血因子亚基抗原检测原理：免疫火箭电泳法。参考值：Fa Ag:100.4% 12.9% F Ag:98.8% 12.5%临床意义：先天性因子缺乏症 纯合子型Fa Ag1%， F Ag轻度减低；杂合子型Fa Ag50%， F Ag正常。 后天性因子缺乏症，见肝病变、原发纤溶、急性心梗、急性白血病，ITP、DIC、SLE、恶性淋巴瘤等。五.生理性抗凝蛋白检验1.抗凝血酶检测2.蛋白C检测 3.血浆蛋白S抗原检测4.组织因子途径抑制物检测1.抗凝血酶检测1血浆抗凝血酶活性检测原理：发色底物法 受检

19、血浆参与过量凝血酶，使AT与凝血酶构成1：1复合物，多余的凝血酶作用于发色底物S-2238，释出显色基团对硝基苯胺，其显色深浅与多余的凝血酶呈正相关，而与AT呈负相关。参考值： 108.5% 5.3%临床意义： 增高 见血友病、和再障等疾病的急性出血期及口服抗凝药物治疗。 降低 见先天和获得性AT缺乏症，后者见血栓前形状、血栓性疾病和肝病、肾病综合症等。1.抗凝血酶检测(2血浆抗凝血酶抗原检测原理：免疫火箭电泳法。参考值： 0.29 0.06g/L临床意义： 增高 见血友病、和再障等疾病的急性出血期及口服抗凝药物治疗。 降低 见先天和获得性AT缺乏症，后者见血栓前形状、血栓性疾病和肝病、肾病综

20、合症等。2.蛋白C检测1血浆蛋白C活性检测原理：发色底物法 受检血浆参与蛋白C 激活剂，蛋白C被激活为活化蛋白C，作用于发色底物释出显色基团对硝基苯胺，其显色深浅与蛋白C含量呈平行关系。参考值： 108.24% 13.18%临床意义： 增高 见冠心病、糖尿病、肾病综合症、妊娠后期、炎症及疾病急性期。 降低 见先天和获得性蛋白C 缺陷，后者见DIC、肝功能不全、手术后、口服双香豆素抗凝剂等。2.蛋白C检测(2血浆蛋白C抗原检测原理：免疫火箭电泳法。参考值： 102.5 20.1%临床意义： 增高 见冠心病、糖尿病、肾病综合症、妊娠后期、炎症及疾病急性期。 降低 见先天和获得性蛋白C 缺陷，后者见

21、DIC、肝功能不全、手术后、口服双香豆素抗凝剂等。3.血浆蛋白S抗原检测原理：免疫火箭电泳法。参考值：TPS：96.6 9.8% FPS：40.4 11.6%临床意义： 降低 见先天和获得性蛋白S 缺乏症，后者见肝疾病、口服抗凝剂等。4.组织因子途径抑制物抗原检测原理：ELISA法。参考值： 97.5 26.6 g/L临床意义： 增高 生理性见老年人和妊娠，病理性见慢性肾功能衰竭期。 降低 见先天和获得性组织因子途径抑制物缺乏，前者易患血栓性疾病，后者常见DIC、大手术、脓毒血症。六.病理性抗凝物质检验1.复钙交叉实验2.凝血酶时间检测及纠正实验3.普通肝素和低相对分子质量肝素检测4.凝血因子

22、抑制物检测5.狼疮抗凝物质的挑选实验和确诊实验1.复钙交叉实验原理：受检血浆复钙时间延伸不能被1/10量正常血浆纠正，提示受检血浆中存在抗凝物质。参考值： 2.2 3.8min临床意义： 延伸 见反复输血的血友病、肝病、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎及胰腺疾病。2.凝血酶时间检测及纠正实验1凝血酶时间检测原理：受检血浆中参与凝血酶后，血浆凝固所需时间。参考值： 16 18秒临床意义： 延伸 超越正常对照3秒以上，见DIC、低或无纤维蛋白原血症、原发纤溶、肝病、肝素及肝素样抗凝物质增多、FDP增多。 缩短 见异常蛋白血症、巨球蛋白血症。2.凝血酶时间检测及纠正实验2凝血酶纠正实验时间检测原理：甲

23、苯胺蓝可纠正肝素的抗凝作用，在凝血酶时间延伸受检血浆中参与甲苯胺蓝后，血浆凝血酶时间恢复正常或明显缩短，那么表示受检血浆中肝素或肝素样物质增多。参考值： TT5秒临床意义： 血中类肝素物质增多，见于过敏性休克、严重肝病DIC、运用氮芥及放疗后患者。3.普通肝素和低相对分子质量肝素检测原理：发色底物法。参考值： 0 U/L临床意义： 用于肝素防治过程中用量的监测。4.凝血因子抑制物检测原理：Bethesda法。参考值： F：C:100%临床意义： 凝血因子抑制物出现见于反复输血或接受抗血友病球蛋白治疗的血友病A患者，也可见于某些免疫性疾病和妊娠期妇女。5.狼疮抗凝物质的挑选实验和确诊实验原理：改

24、良Russell蝰蛇毒稀释法。参考值：0.8 1.2 临床意义： 狼疮抗凝物质阳性见于SLE、自发性流产、也可见于某些血栓构成性疾病。七.纤溶活性检验1.血浆硫酸鱼精蛋白副凝固实验2.血浆组织型纤溶酶原活化剂的检测3.血浆纤溶酶原活化抑制剂的检测4. 纤溶酶原的检测5.血浆a2-抗纤溶酶的检测1.血浆硫酸鱼精蛋白副凝固实验原理：血浆硫酸鱼精蛋白副凝固实验plasma protamine paracoagulation 3P，在凝血酶的作用下，纤维蛋白原释放出肽A、B后转变FM，Fib在PL的作用下产生FDP，FM与FDP可构成可溶性复合物，硫酸鱼精蛋白可使该复合物的FM游离，FM可自行聚合呈肉

25、眼可见的纤维网状、絮状或胶冻状，此为阳性反响结果。参考值：正常人为阴性 临床意义：3P实验对继发性纤溶有较好的特异性，但敏感性差。建议用D二聚体来替代3P实验。阳性：DIC早、中期，外科大手术后、严重感染、人工流产、分娩、肝病变以及呕血、咯血等。阴性：正常人、DIC晚期和原发性纤溶。2.血浆组织型纤溶酶原活化剂的检测(1)血浆组织型纤溶酶原活化剂活性检测原理：发色底物法。参考值： 300 600U/ml临床意义： 增高 纤溶亢进原发和继发，见DIC、药物治疗。 减低 纤溶减低，见高凝形状、血栓性疾病、高脂血症、手术及口服避孕药。2.血浆组织型纤溶酶原活化剂的检测(2)血浆组织型纤溶酶原活化剂抗

26、原检测原理：ELISA法。参考值： 1.5 10.5g/L临床意义： 增高 纤溶亢进原发和继发，见DIC、药物治疗。 减低 纤溶减低，见高凝形状、血栓性疾病、高脂血症、手术及口服避孕药。3.血浆纤溶酶原活化抑制剂的检测(1)血浆纤溶酶原活化抑制剂活性检测原理：发色底物法。参考值： 100 1000U/L临床意义： 增高 见高凝形状、血栓性疾病见DIC、药物治疗。 减低 见纤溶亢进原发和继发)。3.血浆纤溶酶原活化抑制剂的检测(2)血浆纤溶酶原活化抑制剂抗原检测原理：SDS凝胶密度法。受检血浆中参与过量PA,与PAI构成复合物,于SDS凝胶板上电泳、染色、扫描。参考值： 1 U/ml临床意义：

27、增高 见高凝形状、血栓性疾病见DIC、药物治疗。 减低 见纤溶亢进原发和继发)4. 纤溶酶原的检测(1)血浆纤溶酶原活性检测原理：发色底物法。参考值： 75% 140%临床意义： 增高 表示纤溶活性减低，见高凝形状、血栓性疾病。 减低 表示纤溶活性增高，见PLG缺陷症、纤溶亢进原发和继发)、肝病等获得性纤溶酶原缺乏症。 4. 纤溶酶原的检测(2)血浆纤溶酶原抗原检测原理：ELISA法。参考值： 0.22 0.03g/L临床意义： 增高 表示纤溶活性减低，见高凝形状、血栓性疾病。 减低 表示纤溶活性增高，见PLG缺陷症、纤溶亢进原发和继发)、肝病等获得性纤溶酶原缺乏症。 5.血浆a2-抗纤溶酶的

28、检测(1)血浆a2-抗纤溶酶活性检测原理：发色底物法。参考值： 800 1200 U/L临床意义： 增高 见动、静脉血栓构成、恶性肿瘤、分娩后等。 减低 见肝病、DIC、手术后、先天性a2-抗纤溶酶缺乏症。 5.血浆a2-抗纤溶酶的检测(2)血浆a2-抗纤溶酶抗原检测原理： ELISA法。参考值： 1500 300 U/L临床意义： 增高 见动、静脉血栓构成、恶性肿瘤、分娩后等。 减低 见肝病、DIC、手术后、先天性a2-抗纤溶酶缺乏症。八.血液流变学检测1.全血粘度测定2.血浆粘度测定3.红细胞变形性测定4.红细胞电泳检测1.全血粘度测定原理：毛细管式粘度计测定法 旋转锥板式粘度计测定法参考

29、值：临床意义：增高 见于高血压病、冠心病、心肌梗死、脑血栓构成、DVT、糖尿病、高脂血症、恶性肿瘤、肺源性心脏病、真性红细胞增多症、多发性骨髓瘤、原发性巨球蛋白血症、大面积烧伤等。减低 见于各种贫血。2.血浆粘度测定原理：同全血粘度参考值：临床意义：增高 见于血浆球蛋白和血脂增高的疾病，如多发性骨髓瘤、原发性巨球蛋白血症、糖尿病、高脂血症等。3.红细胞变形性测定原理：微孔滤膜滤过法参考值：红细胞滤过指数 0.19 0.10临床意义：增高 见于红细胞变形性减低的疾病，如遗传性球形红细胞增多症、珠蛋白生成妨碍性贫血、心肌梗死、脑血栓构成、高脂血病、糖尿病、高血压等。4.红细胞电泳检测原理：红细胞外表带负电荷，在电场中向正极方向挪动。参考值：红细胞本身电泳时间： 16.5 0.85秒临床意义：红细胞电泳速度减慢 常见于缺铁性疾病、冠心病、心肌