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文档简介
1、一种细胞生长因子冻干粉的制备MSC是目前研究最多的干细胞,目前许多临床试验以证实MSC能 够治疗多种疾病,并且具有较好效果,细胞生长因子是一种多功能强力 细胞因子,对促进成纤维细胞的代谢和蛋白的形成发挥着重要功能。在 体内的含量极微,但是具有很高的生物活性 能够促进和调控皮肤细胞的分 裂、增殖和分化,对多种细胞生理功能和代谢活动发挥生物调节作用 有延缓皮肤细胞衰老、促进表皮细胞捌修复和生长作用使皮肤光骨丰润堪称 我们的青春因子。市场上现有的技术主要是将细胞因子提取后制备成脂质 体包裹物,或者注射液,或者涂抹剂,由于细胞因子生物活性会由于保存 不当随着时间的延长慢慢消失这一时效点,因此并不能发挥
2、细胞因子真 正的效果。基于上述原因,直接将MSC为来源的细胞因子制备冻干粉视 为保护细胞因子活性最为简单有效的办法本文提供一种细胞生长因子冻干粉制备方法及应用,细胞生长因子 冻干粉是由脐带间充质干细胞传代培养的细胞培养上清液进行冰冻后 制备而成,并加入人血白蛋白作为保护剂。制备方法包括以下步骤: 脐带间充质干细胞进行分离;B:将脐带间充质干细胞加入培养基中进 行传代培养;C:收集步骤B中脐带间充质干细胞培养上清液,加入甘 露醇与人血白蛋白后先将细胞培养上清液抽至离心管中放置低温冰箱 或者液氮罐中冻存至固态状,使培养基完全冰冻结实,将固态状的冰 冻培养基放置冻存瓶中,然后上机冷冻干燥2-24h制
3、成冻干粉,并冷 藏保存。加入人血白蛋白作为保护剂,不易引起过敏及其他排反应更易吸收,对皮肤有抗氧化的功效 进一步延缓皮肤衰老。一种细胞生长因子冻干粉,其特征在于,所述细胞生长因子冻干粉是由脐带 间充质干细胞传代培养的细胞培养上清液进行冰冻后制备而成,并加入人血白蛋白作为保护剂。一种细胞生长因子冻干粉制备方法,其特征在于,其包括以下步骤:A:将脐带间充质干细胞进行分离B:将脐带间充质干细胞加入培养基中进行传代培养;C:收集步骤B中脐带间充质干细胞培养上清液,加入甘露醇与人血白蛋白后,先将细胞培养上清液抽至离心管中放置低温冰箱或者液氮罐中冻存至固态状,使培养基完全冰冻结实,将瞰状的冰冻培养基放置冻
4、存瓦中然后上机冷冻干燥12-2犹制成冻干粉,并冷藏保存。根据权利2所述一种细胞生长因子冻干粉制备方法,其特征在于,所述步骤A包括以下步骤:A1:分离新羊脐带血管周围的沃顿胶 剪卒;入2:放入1型胶原酶,加入双抗和两性霉IB,混合均匀后置于培养箱中37。过夜,取出后加入胰酶,再次置于培养箱中C,消化30min;A3:消化后用生理盐水稀释6倍后3000 rpm离心1520min;A4:离心后弃上清液,加入培养基混悬后转入培养皿中,每皿;加忝加剂,双抗和两性霉素B,置培养箱中培养,根据培养状态进行换液,待细胞长满 后传代培养。4 .根据权和所述一种细胞生长因子冻干粉制备方法,其特征在于,所述步骤B包括以下步骤:B1:细胞长满后进行传代,按1: (35X专代培养,吸取步骤中培养基至离 心管;B2:在离心管中加入生理盐水和浓度为0 .05%胰酶,混匀消化,消化好后加入培养基终止消化;B3:把消化好细胞洗下来收集到离心管中,1800 rpm离心5min;B4:离心后弃上清,加入培养基(含添加剂混悬,稀释后转入培养皿;B5:放入培养箱中培养。权利要求1所述一种细胞生长因子冻干粉在延缓皮肤衰老,促进胶原 蛋白生长、补
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