药物分析学：各论第五章抗菌药物与抗生素类的分析

1、各论 第五章 抗菌药物与抗生素类药物的分析第一节 喹诺酮类抗菌药物的分析一、结构通式6-氟-4-喹诺酮-3-羧酸化学合成抗菌药，由于抗菌谱广、抗菌作用强，使用安全，易于制造，得到迅速发展。代表药物：二、喹诺酮类药物的理化性质一般为类白色或淡黄色结晶（一）两性与溶解性羧基弱酸性氮原子弱碱性1、与酸、碱均能成盐2、酸性或碱性溶液中溶解度（二）紫外吸收（三）旋光性（四）与金属离子络合与钙、镁、铁、锌等离子形成螯合物不宜与牛奶等食物或药品同服长期服用会引起缺铁、缺钙等三、鉴别试验（一） 与丙二酸的反应eg. 诺氟沙星乳膏的鉴别：（叔胺化合物）取含量测定项下的供试品溶液5ml，置水浴上蒸干，残渣中加丙二

2、酸约50mg与酸酐1ml，在水浴中加热10分钟，溶液显红棕色。（二） 紫外可见分光光度法eg. 左氧氟沙星的UV鉴别：取供试品适量，加0.1mol/L 盐酸溶液溶解并稀释制成每1ml中约含5g 的溶液，在226nm与294nm的波长处有最大吸收，在263nm的波长处有最小吸收。注意鉴别的专属性（三）TLC法ChP2010对氧氟沙星、诺氟沙星和氟罗沙星用TLC法鉴别。（四）HPLC法ChP2010规定：喹诺酮类药物含量测定项下的供试品主峰应与相应对照品主峰的保留时间一致。ChP2010收载的喹诺酮类药物均采用高效液相色谱法进行鉴别。（五）IR法盐酸环丙沙星的鉴别：供试品的红外光吸收图谱应与对照的

3、图谱一致。 四、特殊杂质检查1、左氧氟沙星光学杂质(右氧氟沙星)配合交换手性流动相法（HPLC）2、环丙沙星中有关物质的HPLC检查五、含量测定（一）非水溶液滴定法ChP2010吡哌酸的含量采用非水溶液滴定法注意事项 ：1、严格控制醋酐加入量，并用水分测定法调节至滴定液含水量为0.01%0.2%。否则结果明显偏低。2、亦可在二甲基甲酰胺溶液中，以麝香草酚蓝为指示剂用甲醇钠标准溶液滴定。（二）紫外分光光度法诺氟沙星乳膏含量的UV测定（三）高效液相色谱法盐酸洛美沙星含量的戊烷磺酸钠离子对HPLC 测定 （离子对色谱外标法）第二节 -内酰胺类抗生素分析 青霉素类 头孢菌素类母核为6-氨基青霉烷酸（6

4、-APA） 母核称为7-氨基头孢菌烷酸（7-ACA）代表药物 一、结构特点与性质（一）羧基：酸性1、与碱金属(Na+、K+)成盐 易溶于水2、与有机碱(普鲁卡因)成盐 难溶于水（二）手性碳原子：旋光性 （三）共轭体系：UV（四）-内酰胺环二、鉴别试验（一）色谱法：对照品对照法1、TLC法2、HPLC法（二）光谱法1、IR法2、UV法（1）样品的最大吸收波长e.g. 头孢氨苄:max = 262nm 青霉素V钠：A280nm/A264nm = 1.301.50（2）分解产物的最大吸收波长（三）呈色反应1、羟肟酸铁反应2、类似肽键的反应：-CONH-3、其他呈色反应：酚羟基（四）各种盐的反应三、检

5、查1、聚合物：分子排阻色谱法2、有关物质和异构体：色谱法3、杂质含量：吸光度4、有机溶剂： GC法5、结晶性 四、含量测定HPLC第三节 氨基糖苷类抗生素一、结构分析与代表药物代表药物二、结构与性质（一）碱性多与硫酸成盐（二）溶解性：水溶性（三）稳定性（四）UV链霉素：230nm（五）旋光性硫酸巴龙霉素：+50至 +55（右旋）硫酸庆大霉素：+107至 +121三、鉴别试验（一）茚三酮反应（二）Molisch反应（三） N-甲基葡萄糖胺反应（Elson-Morgan反应）（四）麦芽酚反应：链霉素特征反应（五）坂口反应：链霉胍特有反应（六）硫酸盐反应（七）色谱法1、TLC法2、HPLC法四、有关

6、物质及组分分析（一）有关物质检查链霉素B（甘露糖链霉素）1、来源：发酵产物2、方法 TLC中的对照品法（二）组分测定1、测定：HPLC蒸发光散射、衍生化法2、计算：峰面积归一化法3、衍生化原理4、蒸发光散射检测器(ELSD)2005年版药典ChP2010：蒸发光散射检测固定相：十八烷基硅烷键合硅胶流动相：0.2mol/L三氟醋酸-甲醇(928)检测器：蒸发光散射检测器 规定 C1 2550% C1a 1540% C2a +C2 2050%五、含量测定微生物检定法（管碟法）、HPLC法第四节 四环素类抗生素一、结构分析与代表药物代表药物二、结构与性质（一）两性酚羟基、烯醇型羟基弱酸性二甲胺基弱碱

7、性1、与酸、碱均能成盐2、强酸或强碱中溶解度（二）旋光性盐酸土霉素： -188-200盐酸四环素： -240-258盐酸多西环素： -105-120（三）紫外吸收盐酸多西环素: 269; 353nm (max) 234; 296nm (min )盐酸美他环素： 345; 282; 353nm(max) 264; 222nm(min)（四）荧光吸收（五）不稳定性1、差向异构化2、酸性降解3、碱性降解三、鉴别试验（一） HPLC法（二）TLC法e.g. 盐酸土霉素的鉴别：EDTA 克服痕量金属造成的拖尾现象（三）IR光谱法（四）UV法（五）浓H2SO4反应（六）FeCl3反应四、杂质检查（一）有关物质：标准品对照法e.g. 盐酸四环素4-差向四环素（ETC）：盐酸金霉素(CTC)脱水四环素（ATC）：差向脱水四环素（EATC)ChP、USP、BP均用HPLC（二）杂质吸光度A