实验十细菌生化实验-微生物实验ppt课件

1、实 验 十 细菌生化实验.一、实验目的1、证明不同微生物对各种有机大分子的水解才干不同，从而阐明不同微生物有着不同的酶系统。2、掌握进展微生物大分子水解实验的原理和方法。3、了解糖发酵的原理和在肠道细菌鉴定中的重要作用。4、掌握经过糖发酵鉴别不同微生物的方法。5、了解IMViC与硫化氢反响的原理及其在肠道菌鉴定中的意义和方法。 .二、实验原理1、微生物对生物大分子的分解利用淀粉水解：淀粉酶油脂水解：脂肪酶明胶液化：蛋白酶石蕊牛乳实验：产酸、产碱、胨化、酸凝固等。2、糖发酵实验产酸：溴甲酚紫指示剂大肠杆菌：产气肠杆菌：产气：杜氏小管检测大肠杆菌：产气肠杆菌：3、IMViC实验.IMViC实验吲哚

2、实验：甲基红实验M.R.实验：伏-普实验乙酰甲基甲醇实验：柠檬酸盐实验：色氨酸酶：色氨酸吲哚对二甲基氨基苯甲醛玫瑰吲哚红色大肠杆菌：产气肠杆菌：产酸才干：强，甲基红变红；弱：甲基红不变色大肠杆菌：阳性产气肠杆菌：阴性葡萄糖丙酮酸乙酰甲基甲醇2,3-丁二醇乙酰甲基甲醇OH二乙酰精氨酸的胍基红色化合物大肠杆菌：阳性产气肠杆菌：阴性能否利用柠檬酸作为碳源大肠杆菌：阴性产气肠杆菌：阳性.三、实验资料1、菌种：枯草芽孢杆菌，大肠杆菌，金黄色葡萄球菌，铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa，普通变形杆菌Proteus vularis，产气肠杆菌。2、培育基：固体油脂培育基，固体淀粉培育基

3、，明胶培育基试管，石蕊牛奶试管，尿素琼脂试管、葡萄糖发酵培育基试管和乳糖发酵培育基试管各3支，普通变形杆菌内装有倒置的德汉氏小管 ，蛋白胨水培育基，葡萄糖蛋白胨水培育基，柠檬酸盐斜面培育基，醋酸铅培育基。3、溶液或试剂：革兰氏染色用卢氏碘液Lugols iodine solution，甲基红指示剂，40% KOH，5% -萘酚，乙醚，吲哚试剂等。 4、仪器或其他器具：无菌平板，无菌试管，接种环，接种针，试管架。.四、实验步骤1、细菌水解大分子物质实验 淀粉水解实验培育基：淀粉培育基平板菌种：大肠杆菌和枯草芽孢杆菌方法：平板上划“十字接种留意：接种前在平板底部作记号；“十字不要太大 油脂水解实验

4、培育基：油脂培育基平板菌种：大肠杆菌和金黄色葡萄球菌方法：平板上划折线接种留意：接种前在平板底部作记号 明胶液化实验培育基：试管明胶培育基菌种：大肠杆菌或 产气肠杆菌方法：穿刺接种留意：20培育 石蕊牛乳实验培育基：试管石蕊牛乳培育基2支菌种：粘乳产碱菌或铜绿假单胞菌方法：斜面划线接种留意：察看构造留意牛乳产酸、产碱、凝固、胨化景象是延续出现的。.四、实验步骤1、细菌水解大分子物质实验2、糖发酵实验培育基：葡萄糖发酵培育基和乳糖发酵培育基内装杜氏小管各3支菌种：大肠杆菌和产气肠杆菌方法：分别接种于葡萄糖发酵培育基和乳糖发酵培育基.四、实验步骤1、细菌水解大分子物质实验2、糖发酵实验3、IMVi

5、C实验.IMViC实验试验名称培养基名称菌种名称接种方式接种管数吲哚试验蛋白胨水培养基大肠杆菌和产气肠杆菌液体1甲基红试验葡萄糖蛋白胨培养基液体1伏普试验葡萄糖蛋白胨培养基液体1柠檬酸盐试验柠檬酸盐培养基斜面1.五、实验报告1、分别记录实验菌种对淀粉水解、脂肪水解、明胶液化、石蕊牛奶及尿素实验的结果。以“表示阳性，“表示阴性。2、记录大肠杆菌及普通变形杆菌对葡萄糖和乳糖的发酵实验结果。以“+表示产酸或产气，“表示不产酸或不产气。3、记录大肠杆菌和产气杆菌的吲哚实验、甲基红实验、伏-普实验、柠檬酸盐实验及硫化氢实验结果，以“+表示阳性反响。“表示阴性反响。4、不利用碘液，他怎样证明淀粉水解的存在？.五、实验报告5、假设某种微生物可以有氧代谢葡萄糖，发酵实验应该出现什么结果？6、为什么大