分析化学综合实验开放设计方案实验ppt课件

1、分析化学分析化学综合实验综合实验开放性设计开放性设计实验实验实 验 目 的l开放实验教学，培育独立任务才干；l针对实践样品写出可行性设计实验方案；l综合运用实验技艺；l培育查阅资料才干，运用知识的才干。开放式设计研讨实验标题开放式设计研讨实验标题大豆中钙、镁含量测定大豆中钙、镁含量测定奶粉中蛋白质含量测定奶粉中蛋白质含量测定油条等食物中铝含量的测定油条等食物中铝含量的测定1.食品分析方面参考书可在超星图书馆下载2.?食品科学?杂志以及其他中文期刊校园网-图书馆-中国期刊网3.相关的教材?分析化学实验?、分析化学5.网上查阅相关资料搜索4.中华人民共和国国家规范1.实验标题2.作者姓名、学号3.

2、前言简单表述4.设计原理：总体设计思想，可用框图简单表示；设计中的实际计算方案可行性，设计报告重点部分。要求做到思绪明晰，实际正确，计算准确，步骤详细，测定结果的公式表达量化根据要准确、规范，固体试样用质量分数表示，水质试样用质量浓度表示。可以灵敏运用表格5.主要仪器和试剂：试剂选择要有根据，取量范围要有计算依据，配制、标定方法要有可行性操作规程。6.分析测试方法：自拟的操作规程要有真实的可操作性，越详细越好。 设计实验报告是在设计总体思想的指点下，详细施行，获得实验成果后的详细表达。详细要求如下： 1-6 同设计报告， 7.原始记录要求齐全。 8.实验结果与数据处置：设计实验报告的重点部分，

3、表达实验成果的部分，要求列出三线格，表序、表头、表注均表达清楚。 9.参考文献 10.写出设计总结心得领会、阅历教训、误差分析、教学建议等。奶粉中蛋白质含量的测定奶粉中蛋白质含量的测定奶粉中蛋白质含量的测定 奶粉中蛋白质含量10-20% 蛋白质含量测定的意义 蛋白质含量的测定方法：凯氏定氮法、双缩脲法、folin酚试剂法、紫外吸收法、考马斯亮蓝法及氨基酸分析仪法实验原理 双缩脲法：双缩脲双缩脲法：双缩脲NH3CONHCONH3是两个分是两个分子脲经子脲经180左右加热，放出一个分子氨后得到的左右加热，放出一个分子氨后得到的产物。在强碱性溶液中，双缩脲与产物。在强碱性溶液中，双缩脲与CuSO4构

4、成紫色构成紫色络合物，称为双缩脲反响。凡具有两个酰胺基或两络合物，称为双缩脲反响。凡具有两个酰胺基或两个直接衔接的肽键，或能过一个中间碳原子相连的个直接衔接的肽键，或能过一个中间碳原子相连的肽键，这类化合物都有双缩脲反响。肽键，这类化合物都有双缩脲反响。 紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，而紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关，故可用来测定与蛋白质分子量及氨基酸成分无关，故可用来测定蛋白质含量。测定范围为蛋白质含量。测定范围为1-10mg蛋白质。干扰这一蛋白质。干扰这一测定的物质主要有：硫酸铵、测定的物质主要有：硫酸铵、Tris缓冲液和某些氨缓冲液和某

5、些氨基酸等。基酸等。 实验原理 考马斯亮蓝法：考马斯亮蓝考马斯亮蓝法：考马斯亮蓝G-250Coomassie brilliant blue G-250测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。在游离形状下呈红色，最大光吸收在在游离形状下呈红色，最大光吸收在488nm；当它与蛋；当它与蛋白质结合后变为青色，蛋白质白质结合后变为青色，蛋白质-色素结合物在色素结合物在595nm波波长下有最大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比，长下有最大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比，因此可用于蛋白质的定量测定。蛋白质与考马斯亮蓝因此可用于蛋白质的定量测定。蛋白质与考马斯亮蓝G-

6、250结合在结合在2min左右的时间内到达平衡，完成反响非常左右的时间内到达平衡，完成反响非常迅速；其结合物在室温下迅速；其结合物在室温下1h内坚持稳定。该法是内坚持稳定。该法是1976年年Bradford建立，试剂配制简单，操作简便快捷，反响建立，试剂配制简单，操作简便快捷，反响非常灵敏，灵敏度比非常灵敏，灵敏度比Lowry法还高法还高4倍，可测定微克级倍，可测定微克级蛋白质含量，测定蛋白质浓度范围为蛋白质含量，测定蛋白质浓度范围为01 000g/mL，最小可测最小可测2.5g/mL蛋白质，是一种常用的微量蛋白质快蛋白质，是一种常用的微量蛋白质快速测定方法。速测定方法。 实验原理 紫外吸收法

7、：蛋白质组成中长含有酪蛋白和色氨酸紫外吸收法：蛋白质组成中长含有酪蛋白和色氨酸等芳香族氨基酸，在紫外光等芳香族氨基酸，在紫外光280nm波优点有最大吸波优点有最大吸收峰，一定浓度范围内其浓度与吸光度成正比，故收峰，一定浓度范围内其浓度与吸光度成正比，故可用紫外分光光度计经过比色来测定蛋白质的含量。可用紫外分光光度计经过比色来测定蛋白质的含量。 由于核酸在由于核酸在280nm波优点也有光吸收，对蛋白质波优点也有光吸收，对蛋白质测定有一定的干扰作用，但核酸的最大吸收峰在测定有一定的干扰作用，但核酸的最大吸收峰在260nm处。好像时测定处。好像时测定260nm的光吸收，经过计算的光吸收，经过计算可以

8、消除其对蛋白质测定的影响。因此如溶中存在可以消除其对蛋白质测定的影响。因此如溶中存在核酸时必需同时测定核酸时必需同时测定280nm及及260nm的吸光度，方的吸光度，方可经过计算测得溶液中的蛋白质浓度。可经过计算测得溶液中的蛋白质浓度。 提供以上三种测试方法供选择； 设计实验留意： A根据所选测试方法，估算样品处置与称量的量； B主要试剂及用量； C实验步骤； D配制规范蛋白溶液大致的浓度范围大豆中钙、镁含量测定大豆中钙、镁含量测定人体需求营养素，提供生长、发育、生命活动的需求。营养素：蛋白质、糖、脂类、维生素、无机盐、水六大物质。无机盐Ca、Mg、 Fe 、K、P等又称矿物质，人体内无机盐有

9、60多种，含量很少，占人体重成人的4%。其中有11种是主要的:C、H、O、N、S、P、 Cl、 K、Ca、 Mg、Fe它是维持正常生理机能不可短少的物质。1.钙人体从食物中摄取钙主要是氯化钙、磷酸钙、草酸钙、脂肪酸钙等等。其中只需氯化钙溶于水，其他都较难溶于水，不易被人体吸收。Ca存在什么组织内？人体中的钙99%存在于骨骼和牙齿中。Ca在人体中的作用功能？能促进骨、牙齿的正常生长。钙是血液凝固的必需求素，是许多酶的致活剂。钙能调理心脏和神经功能，维持肌肉的紧张力。 缺钙病症我国膳食多以含钙低的谷物和植物性食物为主，呵斥了全民缺钙，缺钙会导致骨质疏松、增生、四肢麻木、抽筋、高血压、糖尿病、儿童发

10、育缓慢、挑食、盗汗、青少年生长痛等疾病。 钙的来源：钙来源较丰富。动物性食物中奶类含量丰富，每100g里含有120mg钙。虾皮2000mg/100g、蟹、蛤蜊和蛋类含钙也较多。植物性食物绿叶菜和豆类也是钙的重要来源 钙的吸收情况食物中的钙虽然较多，但由于各种要素的影响，大部分不能吸收。其影响要素有： 1体内缺乏维生素D 2草酸和植酸过多，与钙生成难溶性正磷酸钙，不利于钙的吸收和利用。 人体中钙与磷的比例：成人：11.5，儿童：11 人体日需钙量：成人：600mg/日，儿童：600800mg/日，青少年：10001200mg/日。 每天的食物中能否能满足呢？ 本人可估算一下。2.镁 镁是人体必需

11、的微量元素之一。对心脏血管具有重要的维护作用，有“心血管卫士之称。人体假设缺镁，可导致心动过速、心律不齐及心肌坏死和钙化。 把镁称为生命活动激活剂是当之无愧的。 国外科学家研讨指出，人到中年以后要“镁食。即要多食含镁丰富的食物。心血管疾病，如冠心病、高血压、高血脂、心肌堵塞、糖尿病等多在人到中年之后发生，这与体内镁含量降低有关。 营养学家引荐的富镁且其它营养素均较齐全的食物有： 谷类：荞麦面、小米、玉米、高粱面等；豆类有黄豆、黑豆、蚕豆、豌豆、豇豆、豆腐等； 蔬菜、水果：雪里蕻、苋菜、芥菜、干蘑菇、冬菇、紫菜、杨桃、桂圆、花生、核桃仁、虾米、芝麻酱等。 紫菜含镁最高，每100克含460毫克，被

12、誉为“镁元素的宝库。 镁是人体中仅次于钾的细胞内正离子，它参与体内一系列新陈代谢过程，包括骨及细胞的构成，与神经肌肉和心脏功能有亲密关系。假设缺镁，可导致肌肉无力，耐久力降低。男性为350毫克，女性为300毫克。 专家以为，在正常摄入食物的情况下，普通不存 在缺镁和补镁的问题。 选择大豆、芝麻、海带、虾皮等。菜类：小白菜、芹菜、大头菜等，测定其中钙、镁含量。 经过本人亲身测试，大家会了解到每天吃的食物中含钙、镁量的情况，以此来指点 本人饮食安康，把本人所学的知识与生活 现实联络起来。大豆中钙镁含量的测定实验目的：了解大豆样品分解处置方法，并能运用所学实际知识设计出测定其中钙含量的方法。了解日常

13、食物中该的含量，留意饮食质量，提高安康认识。样品分解残渣Ca2+,Mg2+ 取一份另取一份 pH=12, NaOHCa2+, MgOH2pH=10,NH3H2OEDTA滴定 Ca2+,Mg2+合量EDTA滴定Ca2+含量实验原理简介 大豆中钙含量的参考值是367mg/100g，属于常量分析的范畴，可以思索用络合滴定法进展测定，其原理如下： 大豆经粉碎处置后，在碱性溶液中以钙指示剂指示终点，用EDTA规范溶液滴定，其反响是：Ca2+ + H2Y = CaY + 2H+根据耗费VEDTA 计算样品中 Ca2+ 的含量。相关实际计算1.EDTA滴定Ca2+适宜酸度范围及最正确酸度： 最低酸度：金属离

14、子水解的酸度: 最低酸度：最高酸度: 计算阐明： EDTA滴定 Ca2+适宜酸度范围： 选用钙指示剂，其log KCaIn=6.1；解离常数 Ka1=10-12.4Ka2=10-8.1最正确酸度确定的相关实际计算见表1表1.采用钙指示剂最正确酸度的选择pHlogYH log KcaY pCasplog InH log KCaIn pCa TE%结论：计算数听阐明，EDTA滴定 Ca2+ 在适宜的酸度范围，选用钙指示剂指示终点其最正确酸度应为pH= 。2.估算大豆试样称样量 滴定分析要求TE0.2% ,滴定效耗EDTA 的体积是：mLVEDTAmL. 根据大豆试样参考值367 mg/100g，可

15、配制CEDTA= 0.005 molL-1，大豆称样量估算如下：3.估计基准物的称量范围: EDTA采用基准物CaCO3标定，称取一定量的CaCO3，溶解后定容250.0mL，分取25.00mL平行五份，为满足滴定误差的要求，滴定时耗费EDTA的体积要在20-25mL之间，那么基准物CaCO3称样量的称量范围是：主 要 试 剂实验步骤大豆试样的处置： 在市场上购置的大豆用家用粉碎机粉碎后，称取12克置于蒸发皿中，在煤气炉上灰化、炭化完全，置于高温炉中650灼烧1小时。取出冷却后，参与10mL 1：1HCl溶液浸泡20分钟，并不断搅拌，静止沉降，过滤。用250mL容量瓶承接，用蒸馏水洗沉淀、蒸发

16、皿数次。定容、摇匀，待用。大豆试样中钙含量的测定 用移液管移取上述溶液25.00mL于锥形瓶中，加5mL 1：3三乙醇胺,加水至100mL，加7-8 mL 20% NaOH溶液，加少许钙指示剂，用EDTA标注溶液滴定溶液由红色变为蓝色为终点。平行3份，计算大豆试样中钙含量。结果与讨论表 1EDTA溶液的标定实验工程1 12 23 34 45 5称量瓶+CaCO3倾出前 / g13.796413.7964称量瓶+CaCO3倾出后 / g13.694413.6944称出CaCO3质量/ g基准Ca的浓度/molL-1VCa/ml0.10200.00407625.00VEDTA/mlCEDTA/ m

17、olL-119.600.00519919.500.00522619.680.00517819.520.00522119.500.005226C C平均平均/ molL-1/ molL-1Sc/ molL-1Sc/ molL-1Sc/CSc/C%0.0052100.0052100.000010.000010.20.2m试样 表 2.大豆试样中钙含量的测定125.0019.400.004043337.6325.0019.600.004085341.1实验工程V试样 /mlVEDTA /mlCCa / molL-1Ca /mg/100gCa平均 /mg/100g相对平均偏向%225.0019.420

18、.004047337.9338.8注：1. Ca =CEDTA V EDTA M Ca25 . 00250.02. CEDTA = 0.005210 molL-13. MCa = 40.078 g/mol100mg/100g 讨论：表中数听阐明此次实验结果为 mg/100g，与资料上给出的参考值367 mg/100g相比偏低。这能够与地域、环境等要素有关。油条等食品中铝含量的测定油条等食品中铝含量的测定1.铝油 炸 食品和膨化食品：含铝膨松剂人体摄入铝含量的规范？WTO和FAO规定铝的暂定每周允许摄入量为7mg/kg；我国食品添加剂运用卫生规范GB2760一1996规定食品中铝的残留量不得超越100mg/kgAl对人体的危害？人体的中枢神经系统、脑、肝、骨、肾、细胞、造血系统、人体免疫功能、胚胎等均有不良影响，还能够干扰孕妇