第四节脂类的测定

1、（1）脂肪在食品与食品加工中的作用（2）食品中脂肪存在的形式（3）脂类的提取（4）常用的测定脂类的方法（1 1）脂肪在食品与食品加工中的作用）脂肪在食品与食品加工中的作用脂肪是食品中重要的营养成分之一。脂肪是食品中重要的营养成分之一。脂肪可为人体提供必需脂肪酸。脂肪是一种富脂肪可为人体提供必需脂肪酸。脂肪是一种富含热能营养素，是人体热能的主要来源。含热能营养素，是人体热能的主要来源。 脂肪是脂溶性维生素的良好溶剂，有助于脂溶性维生脂肪是脂溶性维生素的良好溶剂，有助于脂溶性维生素的吸收。素的吸收。 脂肪与蛋白质结合生成脂蛋白，在调节人体生理机能脂肪与蛋白质结合生成脂蛋白，在调节人体生理机能和完成

2、体内生化反应方面都起着十分重要的作用。和完成体内生化反应方面都起着十分重要的作用。 在食品加工过程中，原料、半成品、成品的在食品加工过程中，原料、半成品、成品的脂类含量对产品的风味、组织结构、品质、脂类含量对产品的风味、组织结构、品质、外观、口感等都有直接的影响。蔬菜本身的外观、口感等都有直接的影响。蔬菜本身的脂肪含量较底，在生产蔬菜罐头时，添加适脂肪含量较底，在生产蔬菜罐头时，添加适量的脂肪可以改善产品的风味，对于食品面量的脂肪可以改善产品的风味，对于食品面包之类焙烤食品，脂肪含量特别是卵磷脂组包之类焙烤食品，脂肪含量特别是卵磷脂组分，对于面包心的柔软度、面包的体积及其分，对于面包心的柔软度

3、、面包的体积及其结构都有影响。结构都有影响。 因此，在含脂肪的食品中，其含量都有一定因此，在含脂肪的食品中，其含量都有一定的规定，是食品质量管理中的一项重要指标。的规定，是食品质量管理中的一项重要指标。测定食品的脂肪含量，可以用来评价食品的测定食品的脂肪含量，可以用来评价食品的品质，衡量食品的营养价值，而且对实行工品质，衡量食品的营养价值，而且对实行工艺监督，生产过程的质量管理，研究食品的艺监督，生产过程的质量管理，研究食品的储藏方式是否恰当等方面都有重要的意义。储藏方式是否恰当等方面都有重要的意义。（2）食品中脂肪存在形式）食品中脂肪存在形式游离态存在游离态存在: :如动物性脂肪及植物性油脂

4、；如动物性脂肪及植物性油脂；结合态存在结合态存在: :如天然存在的磷脂、糖脂、脂蛋如天然存在的磷脂、糖脂、脂蛋白及某些加工品（如焙烤食品及麦乳精等）中白及某些加工品（如焙烤食品及麦乳精等）中的脂肪，与蛋白质或碳水化合物形成结合态。的脂肪，与蛋白质或碳水化合物形成结合态。 对大多数食品来说，游离态脂肪是主要对大多数食品来说，游离态脂肪是主要的，结合态脂肪含量较少。的，结合态脂肪含量较少。（3）脂类的提取脂类的共同特点是在水中的溶解度非常脂类的共同特点是在水中的溶解度非常小，能溶于脂肪溶剂中，再根据小，能溶于脂肪溶剂中，再根据相似相溶相似相溶的规律具体选择。的规律具体选择。常用测定脂类的有机溶剂常

5、用测定脂类的有机溶剂乙醚乙醚 有一定极性，但不如乙醇、甲醇、水等有一定极性，但不如乙醇、甲醇、水等,溶解脂溶解脂肪的能力强，应用最多。肪的能力强，应用最多。GB中关于脂肪含量的测中关于脂肪含量的测定都采用它作提取剂。定都采用它作提取剂。 乙醚沸点低（乙醚沸点低（34.6），易燃。），易燃。 乙醚可饱和乙醚可饱和2%的水。含水乙醚在萃取脂肪的同的水。含水乙醚在萃取脂肪的同时，会抽提出糖分等非脂成分。时，会抽提出糖分等非脂成分。 所以必须用无水乙醚作提取剂，被测样品也要所以必须用无水乙醚作提取剂，被测样品也要事先烘干。事先烘干。石油醚石油醚 石油醚的沸点乙醚，不太易燃，溶解脂肪能力比乙醚弱，吸石油

6、醚的沸点乙醚，不太易燃，溶解脂肪能力比乙醚弱，吸收水分比乙醚少，允许样品含微量的水分。收水分比乙醚少，允许样品含微量的水分。 石油醚溶解脂肪的能力比乙醚弱些，但吸收水分比乙醚少，没石油醚溶解脂肪的能力比乙醚弱些，但吸收水分比乙醚少，没有乙醚易燃，使用时允许样品含有微量水分，这两种溶液只有乙醚易燃，使用时允许样品含有微量水分，这两种溶液只能直接提取游离的脂肪，对于结合态脂类，必须预先用酸或能直接提取游离的脂肪，对于结合态脂类，必须预先用酸或碱破坏脂类和非脂成分的结合后才能提取。碱破坏脂类和非脂成分的结合后才能提取。 因二者各有特点，故常常混合使用。但乙醚、石油醚都只因二者各有特点，故常常混合使用

7、。但乙醚、石油醚都只能提取样品中游离态的脂肪。对于结合态的脂类，必须预先能提取样品中游离态的脂肪。对于结合态的脂类，必须预先用酸或碱及乙醇破坏脂类与非脂类的结合后，才能提取。用酸或碱及乙醇破坏脂类与非脂类的结合后，才能提取。氯仿氯仿甲醇甲醇一种有效的溶剂，对脂蛋白、磷脂提取效一种有效的溶剂，对脂蛋白、磷脂提取效率较高。特别适用于水产品、家禽、蛋制率较高。特别适用于水产品、家禽、蛋制品中脂肪的提取。品中脂肪的提取。二、样品的预处理二、样品的预处理1 1、固体样品要粉碎，颗粒大小要合适，注意粉、固体样品要粉碎，颗粒大小要合适，注意粉 碎过程中的温度，防止脂肪氧化。碎过程中的温度，防止脂肪氧化。2

8、2、样品要干燥、样品要干燥 温度低温度低酶活力高，脂肪易降解。酶活力高，脂肪易降解。 温度高温度高脂肪易氧化成结合态。脂肪易氧化成结合态。 较理想的方法是冷冻干燥法。较理想的方法是冷冻干燥法。3 3、酸水解、酸水解 对于乙醚不能渗入内部的或含结合态脂肪对于乙醚不能渗入内部的或含结合态脂肪将样品粉碎、切碎、碾磨等；将样品粉碎、切碎、碾磨等；将样品烘干；将样品烘干；有的样品易结块，可加入有的样品易结块，可加入4 46 6倍量的海砂；倍量的海砂；有的样品含水量较高，可加入适量无水硫酸有的样品含水量较高，可加入适量无水硫酸钠钠, ,使样品成粒状。使样品成粒状。以上的处理目的都是为了增加样品的表面积，以

9、上的处理目的都是为了增加样品的表面积，减少样品含水量，使有机溶剂更有效的提取出减少样品含水量，使有机溶剂更有效的提取出脂类。脂类。用溶剂提取食品中的脂类时，要根据食品用溶剂提取食品中的脂类时，要根据食品种类、性状及所选取的分析方法。种类、性状及所选取的分析方法。对样品进行预处理方式：对样品进行预处理方式：三、常用的测定脂类的方法1 1、索氏提取法、索氏提取法、2 2、酸分解法、酸分解法、3 3、罗紫、罗紫- -哥特里法、哥特里法、4 4、巴布科克氏法、巴布科克氏法、5 5、盖勃氏法、盖勃氏法6 6、氯仿、氯仿甲醇提取法等。甲醇提取法等。7 7、酸水解法能对包括结合态脂类在内的、酸水解法能对包括

10、结合态脂类在内的 全部脂类全部脂类进行定量。而罗紫进行定量。而罗紫- -哥特里法主要用于乳及乳制品中脂类哥特里法主要用于乳及乳制品中脂类的测定。的测定。1 索氏提取法索氏提取法2 酸水解法酸水解法3 罗紫罗紫-哥特里法哥特里法4 巴布科克法和盖勃法巴布科克法和盖勃法5 氯仿氯仿甲醇提取法甲醇提取法将经前处理而分散且干燥的样品用无水乙醚或石油醚等溶剂回流提取，使样品中的脂肪进入溶剂中，回收溶剂后所得到的残留物，即为脂肪（或粗脂肪）。 一般食品用有机溶剂浸提，挥干有机溶剂后得到的重量主要是游离脂肪，此外，还含有磷脂、色素、树脂、蜡状物、挥发油、糖脂等物质，所以用(2) (2) 适用范围与特点适用范

11、围与特点 此法适用于脂类含量较高，结合态的脂此法适用于脂类含量较高，结合态的脂类含量较少，能烘干磨细，不易吸湿结类含量较少，能烘干磨细，不易吸湿结块的样品的测定。索氏提取法测得的只块的样品的测定。索氏提取法测得的只是游离态脂肪，而结合态脂肪测不出来。是游离态脂肪，而结合态脂肪测不出来。 此法经典，对大多数样品的测定结果比此法经典，对大多数样品的测定结果比较可靠。但费时长（较可靠。但费时长（8 812 h12 h）溶剂用溶剂用量大，需要专门的仪器量大，需要专门的仪器, ,索氏提取器。索氏提取器。(3) 仪器索氏提取器。索氏提取器。电热恒温水浴（电热恒温水浴（5080）。）。电热恒温烘箱（电热恒温

12、烘箱（80120）。）。(4) (4) 试剂试剂 无水乙醚或石油醚无水乙醚或石油醚(5) (5) 测定方法测定方法滤纸筒的制备滤纸筒的制备 样品制备样品制备 索氏提取器的准索氏提取器的准备备 抽提抽提 回收溶剂回收溶剂 滤纸筒的制备将滤纸裁成将滤纸裁成8cm15cm大小，以直径位大小，以直径位2.0cm的大试管的大试管为为模型，将模型，将滤纸紧靠试管壁卷成滤纸紧靠试管壁卷成圆筒型，把底端封口，圆筒型，把底端封口，内放一小片脱脂棉，内放一小片脱脂棉，用白细线扎好定型，用白细线扎好定型，在在1001050C烘箱中烘烘箱中烘至 恒 量 （ 准 确 至至 恒 量 （ 准 确 至0.0002g）。）。

13、样品处理样品处理a.固体样品固体样品精密称取干燥并研细的样品精密称取干燥并研细的样品 25g（可取测定水可取测定水分后的样品分后的样品)，必要时拌以海砂，无损地移入滤纸筒内。，必要时拌以海砂，无损地移入滤纸筒内。b.半固体或液体样品半固体或液体样品称取称取5.010.0g于蒸发皿中，加入海砂于蒸发皿中，加入海砂约约20g于沸水浴上蒸干后，再于于沸水浴上蒸干后，再于95105烘干、研细，全部烘干、研细，全部移入滤纸筒内，蒸发皿及粘附有样品的玻璃棒都用沾有乙醚的移入滤纸筒内，蒸发皿及粘附有样品的玻璃棒都用沾有乙醚的脱脂棉擦净，将棉花一同放进滤纸筒内。脱脂棉擦净，将棉花一同放进滤纸筒内。索氏抽提取器

14、的准备索氏抽提取器:回流冷凝管提脂管、提脂烧瓶抽提脂肪之前应将各部分洗涤干净并干燥，提脂烧瓶需烘干并称至恒量。抽提 将滤纸筒或滤纸包放入索氏抽提器内，连接已干燥至恒重的将滤纸筒或滤纸包放入索氏抽提器内，连接已干燥至恒重的脂肪接受瓶，由冷凝管上端加入无水乙醚或石油醚（脂肪接受瓶，由冷凝管上端加入无水乙醚或石油醚（3060沸程）沸程） ，加量为接受瓶的，加量为接受瓶的23体积，于水浴上体积，于水浴上(夏天夏天65，冬天，冬天80左右左右)加热使乙醚或石油醚不断的回流提取，加热使乙醚或石油醚不断的回流提取，控制每分钟滴下乙醚控制每分钟滴下乙醚80滴左右滴左右，抽提抽提34h至抽提完全（视至抽提完全（

15、视含油量高低，或含油量高低，或8-12h，甚至甚至24h）。）。可用滤纸或毛玻璃检查，可用滤纸或毛玻璃检查，由提脂管下口滴下的乙醚滴在滤纸或毛玻璃上，挥发后不留由提脂管下口滴下的乙醚滴在滤纸或毛玻璃上，挥发后不留下下油渍油渍。 回收溶剂回收溶剂 称重称重 取出滤纸筒，用抽提器回收乙醚，当乙醚在提脂管内将虹吸时立即取下提脂管，将其下口放到盛乙醚的试剂瓶口，使之倾斜，使液面超过虹吸管，乙醚即经虹吸管流入瓶内。按同法继续回收，将乙醚完全蒸出后，取下提脂烧瓶，于水浴上蒸去残留乙醚。用纱布擦净烧瓶外部，于（100105）烘箱中烘至恒量并准确称量。或将滤纸筒置于小烧杯内，挥干乙醚，在（100 105） 烘

16、箱中烘至恒量，滤纸筒及样品所减少的质量即为脂肪质量。所用滤纸应事先用乙醚浸泡挥干处理，滤纸筒应预先恒量。(6) 结果计算%10012mmm式中 -脂类质量分数，%； m-试样质量，g; m1-提脂瓶质量，g; m2-提脂瓶与样品所含脂肪质量，g;或脂类（质量分数）=（抽提前滤纸筒质量-抽提后滤纸筒质量/样品质量）100%(7) 注意及说明 样品应干燥后研细，样品含水分会影响溶剂提取效果，样品应干燥后研细，样品含水分会影响溶剂提取效果，而且溶剂会吸收样品中的水分造成非脂成分溶出。装而且溶剂会吸收样品中的水分造成非脂成分溶出。装样品的滤纸筒一定要严密，不能往外漏样品，也但不样品的滤纸筒一定要严密，

17、不能往外漏样品，也但不要包得太贤影响镕剂渗透。放入滤纸筒时高度不要超要包得太贤影响镕剂渗透。放入滤纸筒时高度不要超过回流弯管，否则超过弯管的样品中的脂肪不能提尽，过回流弯管，否则超过弯管的样品中的脂肪不能提尽，造成误差。造成误差。 对含多量糖及糊精的样品，要先以冷水使糖及糊精溶对含多量糖及糊精的样品，要先以冷水使糖及糊精溶解，经过滤除去，将残渣连同滤纸一起烘干，再一起解，经过滤除去，将残渣连同滤纸一起烘干，再一起放入抽提管中。放入抽提管中。 抽提用的乙醚或石油醚要求无水、无醇、无过氧化物，挥发抽提用的乙醚或石油醚要求无水、无醇、无过氧化物，挥发残渣含量低。因水和醇可导致水溶性物质溶解，如水溶性

18、盐残渣含量低。因水和醇可导致水溶性物质溶解，如水溶性盐类、糖类等，使得测定结果偏高。过氧化物会导致脂肪氧化，类、糖类等，使得测定结果偏高。过氧化物会导致脂肪氧化，在烘干时也有引起爆炸的危险。在烘干时也有引起爆炸的危险。 提取时水浴温度不可过高，以每分钟从冷凝管滴下提取时水浴温度不可过高，以每分钟从冷凝管滴下8080滴左右，滴左右，每小时回流次为宜，提取过程应注意防火。每小时回流次为宜，提取过程应注意防火。在抽提时，冷凝管上端最好连接一个氯化钙干燥管，这样，在抽提时，冷凝管上端最好连接一个氯化钙干燥管，这样，可防止空气中水分进入，也可避免乙醚挥发在空气中，如无可防止空气中水分进入，也可避免乙醚挥

19、发在空气中，如无此装置可塞一团干燥的脱脂棉球。此装置可塞一团干燥的脱脂棉球。 抽提是否完全，可凭经验，也可用滤纸或毛玻璃检查，由抽抽提是否完全，可凭经验，也可用滤纸或毛玻璃检查，由抽提管下口滴下的乙醚滴在滤纸或毛玻璃上，挥发后不留下油提管下口滴下的乙醚滴在滤纸或毛玻璃上，挥发后不留下油迹表明已抽提完全。迹表明已抽提完全。 在挥发乙醚或石油醚时，切忌用直接火加热，应该用电热套，在挥发乙醚或石油醚时，切忌用直接火加热，应该用电热套，电水浴等。烘前应驱除全部残余的乙醚，因乙醚稍有残留，电水浴等。烘前应驱除全部残余的乙醚，因乙醚稍有残留，放入烘箱时，有发生爆炸的危险。放入烘箱时，有发生爆炸的危险。 反

20、复加热会因脂类氧化而增重。重量增加时，以增重前的重反复加热会因脂类氧化而增重。重量增加时，以增重前的重量作为恒重。量作为恒重。因为乙醚是麻醉剂，要注意室内通风。因为乙醚是麻醉剂，要注意室内通风。快速测油器设计原理:快速测油器有多种结构形式，基本工作原理是：先把被测量的样品放到乙醇中浸煮提出大部分的脂肪，再回收大部分乙醚，使样品高于乙醚的液面以上，用乙醚进行淋洗出样品中残余的油。本实验室使用的脂肪自动测定仪就是利用这个原理。某些食品中，脂肪被包含在食品组织内部，或与食品某些食品中，脂肪被包含在食品组织内部，或与食品成分结合而成结合态脂成分结合而成结合态脂类类，如，谷物等淀粉颗粒中的，如，谷物等淀

21、粉颗粒中的脂类，面条脂类，面条、焙、焙烤食品等组织中包含的脂类，用索氏烤食品等组织中包含的脂类，用索氏提取法不能完全提取出来。这种情况下，必须要用强提取法不能完全提取出来。这种情况下，必须要用强酸将淀粉酸将淀粉、蛋白质蛋白质、纤维素水解，使脂类游离出来，纤维素水解，使脂类游离出来，再用有机溶剂提取。再用有机溶剂提取。 此法使用于各类食品总脂肪的测定，此法使用于各类食品总脂肪的测定，特别对于易吸潮，结块，难以干燥的食特别对于易吸潮，结块，难以干燥的食品应用本法测定效果较好，但此法不宜品应用本法测定效果较好，但此法不宜用高糖类食品，因糖类食品遇强酸易炭用高糖类食品，因糖类食品遇强酸易炭化而影响测定

22、效果。化而影响测定效果。 应用此法，脂类中的磷脂，在水解应用此法，脂类中的磷脂，在水解条件下将几乎完全分解为脂肪酸及条件下将几乎完全分解为脂肪酸及碱，当用于测定含大量磷脂的食品碱，当用于测定含大量磷脂的食品时，测定值将偏低。故对于含较多时，测定值将偏低。故对于含较多磷脂的蛋及其制品，鱼类及其制品，磷脂的蛋及其制品，鱼类及其制品，不适宜用此法。不适宜用此法。( (一）原理一）原理将试祥与盐酸溶液一同加热进行水解，将试祥与盐酸溶液一同加热进行水解，使结合或包藏在组织里的脂肪游离出来，再使结合或包藏在组织里的脂肪游离出来，再用乙醚和石油醚提取脂肪，回收溶剂，干燥用乙醚和石油醚提取脂肪，回收溶剂，干燥

23、后称量，提取物的重量即为脂肪含量。后称量，提取物的重量即为脂肪含量。（二）（二） 适用范围与特点适用范围与特点 此法适用于各类、各种状态的食品中此法适用于各类、各种状态的食品中脂肪测定。特别是加工后的混合食品，脂肪测定。特别是加工后的混合食品，易吸湿，不好烘干的，用索氏提取法不易吸湿，不好烘干的，用索氏提取法不行的样品，效果更好。行的样品，效果更好。 本法不适于测定含磷脂高的食品、如：鱼、贝、蛋品等。因为在盐酸加热时，磷脂几乎完全分解为脂肪酸和碱，当只测定前者时，使测定值偏低。本法也不适于测定含糖高的食品，因糖类遇强酸易炭化而影响测定。(1) 仪器 恒温水浴5080。 100ml具塞量筒。(2

24、) 试剂 乙醇（乙醇（95%体积分数）。体积分数）。 乙醚（不含过氧化物）。乙醚（不含过氧化物）。 石油醚（石油醚（3060沸腾）。沸腾）。 盐酸。盐酸。(3) (3) 测定步骤测定步骤样品处理提取水解回收溶剂称重烘干 水解水解 准确称取固体样品准确称取固体样品2g于于50ml大试大试管中，加入管中，加入8ml水，用玻璃棒充分混水，用玻璃棒充分混合，加合，加10ml盐酸。盐酸。或称取液体样品或称取液体样品10g于于50mL大试管中，加大试管中，加10ml盐酸。盐酸。混匀后于混匀后于70 80的水浴中，每隔的水浴中，每隔（510）min用玻璃棒搅拌一次至脂用玻璃棒搅拌一次至脂肪游离为止，约须肪游

25、离为止，约须（4050）min，取取出静置，冷却。出静置，冷却。 提取提取 取出试管加入取出试管加入10mL乙醇乙醇，混合。冷却后将混合混合。冷却后将混合物移入物移入100mL具塞筒中，用具塞筒中，用25mL乙醚乙醚分次冲洗试管，分次冲洗试管，洗液一并倒入具塞量筒内。加塞振摇洗液一并倒入具塞量筒内。加塞振摇1min,将塞子将塞子慢慢慢慢转动放出气体，再塞好，静置转动放出气体，再塞好，静置15min，小心小心开塞开塞，用用石油醚石油醚-乙醚等乙醚等量量混合液混合液冲洗塞及筒口附着的脂肪。冲洗塞及筒口附着的脂肪。静置静置1020min,待上部液体清晰，吸出上层清夜于已待上部液体清晰，吸出上层清夜于

26、已恒量的锥形瓶内，再加入恒量的锥形瓶内，再加入5ml乙醚乙醚于具塞量筒内振摇，于具塞量筒内振摇，静置后仍将上层乙醚吸出，放入静置后仍将上层乙醚吸出，放入原原锥形瓶内。将锥锥形瓶内。将锥形瓶于水浴上蒸干，置形瓶于水浴上蒸干，置95 105烘箱中烘箱中干燥干燥2h，取出取出放放干燥器中冷却干燥器中冷却30min后称量后称量(4) 结果计算式中式中 -脂类质量分数，脂类质量分数，%； m-式样质量，式样质量，g; m1-空锥形瓶质量，空锥形瓶质量，g; m2-锥形瓶与样品脂类质量锥形瓶与样品脂类质量，g;%10012mmm3、 氯仿-甲醇提取法 索氏提取法对包含在组织內部的脂肪等不能索氏提取法对包含

27、在组织內部的脂肪等不能完全提取出来，酸分解法常使磷脂分接而损失。完全提取出来，酸分解法常使磷脂分接而损失。而在一定的水分存在下，极性的甲醇及非极性的而在一定的水分存在下，极性的甲醇及非极性的氯仿混合溶液却能有效地提取结合态脂类，如氯仿混合溶液却能有效地提取结合态脂类，如脂脂蛋白蛋白、蛋白脂等及磷脂蛋白脂等及磷脂，此法对于高水分生物试，此法对于高水分生物试样样如鲜鱼、蛋类等脂类的测定更为有效。如鲜鱼、蛋类等脂类的测定更为有效。(1) 原理 将将试试样分散于样分散于氯氯仿仿-甲醇甲醇混合液混合液中，于水中，于水浴上轻微沸腾，浴上轻微沸腾，氯氯仿仿-甲醇混合液甲醇混合液与一定的水与一定的水分形成提取

28、脂类的有效溶剂，分形成提取脂类的有效溶剂，在在使使试样组织试样组织中结合态脂类中结合态脂类游离游离出来的同时与磷脂等极性出来的同时与磷脂等极性脂类的亲合性增大脂类的亲合性增大，从而有效地提取出全部从而有效地提取出全部脂类。再经过滤，除去非脂成分，然后回收脂类。再经过滤，除去非脂成分，然后回收溶剂，对于残留脂类要用石油醚提取，定量。溶剂，对于残留脂类要用石油醚提取，定量。(2) 仪器仪器 具塞三角瓶具塞三角瓶 电热恒温水浴：电热恒温水浴：50 100 提取装置提取装置 布氏漏斗布氏漏斗 具塞离心管具塞离心管 离心机：离心机：3000r/min。 氯仿：氯仿：97%（体积分数）以上。（体积分数）以

29、上。 甲醇：甲醇：96%（体积分数）以上。（体积分数）以上。 氯仿甲醇混合液：按氯仿甲醇混合液：按2 1体积比混合。体积比混合。 石油醚。石油醚。 无水硫酸钠：无水硫酸钠：以以120 135干燥干燥（12）h。 （3 3）试剂试剂（4） 操作步骤操作步骤提取提取准确称取均匀样品准确称取均匀样品5g于具塞三角瓶内于具塞三角瓶内（高水分食品可加适量硅藻土使其分散），加入（高水分食品可加适量硅藻土使其分散），加入60mL氯仿氯仿-甲醇混合液（对于干燥食品，可加入甲醇混合液（对于干燥食品，可加入23mL水）。连接提取装置，于水）。连接提取装置，于65 水浴中，由水浴中，由轻微沸腾开始，加热轻微沸腾开始

30、，加热1h进行提取。进行提取。 回回收溶剂收溶剂提取结束后，取下烧瓶用布氏漏提取结束后，取下烧瓶用布氏漏斗过滤，并用氯仿斗过滤，并用氯仿-甲醇混合液洗涤滤器，烧瓶及甲醇混合液洗涤滤器，烧瓶及滤器中试样残渣，滤液滤器中试样残渣，滤液、洗涤液一并收集于具塞洗涤液一并收集于具塞三角瓶内，置三角瓶内，置65 70水浴中回收溶剂，至烧水浴中回收溶剂，至烧瓶内物料呈浓稠态，而不能使其干，然后冷却。瓶内物料呈浓稠态，而不能使其干，然后冷却。 石油醚萃取石油醚萃取、定量定量 用移液管加入用移液管加入25ml石油醚，然后加入石油醚，然后加入15g无水硫酸钠，立即加塞混摇无水硫酸钠，立即加塞混摇1 min ，将醚

31、层移将醚层移入具塞离心沉淀管进行离心分离（入具塞离心沉淀管进行离心分离（3000r/min）5min。用用10mL移液管加入迅速吸取离心管中移液管加入迅速吸取离心管中澄清的石油醚澄清的石油醚10mL,于已称量至恒量的干燥称于已称量至恒量的干燥称量瓶内，量瓶内，蒸蒸发去除石油醚发去除石油醚，于于100 105烘箱中烘箱中烘至恒量（约烘至恒量（约30 min ）。）。（5 5）结果计算）结果计算%1005.2)(12mmm式中式中 -脂类质量分数，脂类质量分数，%; m-试样质量，试样质量，g; m2-称量瓶与脂类质量，称量瓶与脂类质量，g; m1-称量瓶质量，称量瓶质量，g; 2.5-从从25m

32、L乙醇中取乙醇中取10mL进行干燥，进行干燥，故乘以系数故乘以系数2.5。 4、 罗紫罗紫哥特里法哥特里法 此法为国际标准化组织（ISO），联合国粮农组织/世界卫生组织（FAO/WHO）等采用，为乳、炼乳、奶粉、奶油等脂类定量的国际标准法。它适用于各种液状乳（生乳、加工乳、部分脱脂乳、脱脂乳等）、各种炼乳、奶粉、奶油 及冰淇淋。除乳制品外，也适用于豆乳或加工成乳状的食品。（一）原理（一）原理 利用氨利用氨-乙醇溶液破坏乳的胶体性状及脂乙醇溶液破坏乳的胶体性状及脂肪球膜使非脂成分溶解于氨肪球膜使非脂成分溶解于氨-乙醇溶液中，乙醇溶液中，而脂肪游离出来，再用乙醚而脂肪游离出来，再用乙醚-石油醚提取

33、出石油醚提取出脂肪，蒸馏去除溶剂后，残留物即为乳脂脂肪，蒸馏去除溶剂后，残留物即为乳脂肪。肪。 （二）适用范围与特点（二）适用范围与特点 本法适用于各种液状乳本法适用于各种液状乳(生乳、加工乳、生乳、加工乳、部分脱脂乳、脱脂乳等部分脱脂乳、脱脂乳等)，各种炼乳、奶粉、，各种炼乳、奶粉、奶油及冰淇淋等能在碱性溶液中溶解的乳制奶油及冰淇淋等能在碱性溶液中溶解的乳制品，也适用于豆乳或加水呈乳状的食品。品，也适用于豆乳或加水呈乳状的食品。（三）仪器（三）仪器抽脂瓶：内径抽脂瓶：内径2.02.5厘米，容积厘米，容积100mL，如如 下图。下图。 （四）测定方法（四）测定方法 取一定量样品于抽脂取一定量样

34、品于抽脂 瓶中，分瓶中，分别加入别加入氨水、乙醇、乙醚、石油醚氨水、乙醇、乙醚、石油醚，充分摇匀，待上层液澄清时读取醚充分摇匀，待上层液澄清时读取醚层体积，放出一定体积醚层于一已值层体积，放出一定体积醚层于一已值重的烧瓶中，蒸馏回收乙醚和石油醚，重的烧瓶中，蒸馏回收乙醚和石油醚，烘干至恒重烘干至恒重，称重。称重。5 、 巴布科克法和盖勃法巴布科克法和盖勃法（一）原理 用浓硫酸溶解乳中的乳糖和蛋白质等非脂成分，将牛奶中的酪蛋白钙盐转变成可溶性的重硫酸酪蛋白，使脂肪球膜被破坏，脂肪游离出来，再利用加热离心，使脂肪完全迅速分离，直接读取脂肪层的数值，便可知被测乳的含脂率。 （二）适应范围与待点（二）

35、适应范围与待点 这两种方法都是测定乳脂肪的标准方法，这两种方法都是测定乳脂肪的标准方法，适用于鲜乳及乳制品脂肪的测定。对含糖多的适用于鲜乳及乳制品脂肪的测定。对含糖多的乳品乳品(如甜炼乳、加糖乳粉等如甜炼乳、加糖乳粉等)，采用此方法时，采用此方法时糖易焦化，使结果误差较大，故不适宜。糖易焦化，使结果误差较大，故不适宜。 此法操作简便，迅速。对大多数样品来说此法操作简便，迅速。对大多数样品来说测定精度可满足要求，但不如重量法准确。测定精度可满足要求，但不如重量法准确。( (三三) )测定方法测定方法 精密吸取精密吸取17.6mL样品，倒入巴布科克氏乳脂瓶样品，倒入巴布科克氏乳脂瓶中，再取中，再取17.5mL硫酸，沿瓶颈缓缓注入瓶中，将瓶硫酸，沿瓶颈缓缓注入瓶中，将瓶颈回旋，使液体充分混合，至无凝块并呈均匀棕色。颈回旋，使液体充分混合，至无凝块并呈均匀棕色。置乳脂离心机上，以约置乳脂离心机上，以约1000r/min的速度离心的速度离心5min，取出，加入取出，加入8