基因工程药物

1、第一章、基因工程药第一章、基因工程药物概述物概述 提提 纲纲n发展历史发展历史n应用现状应用现状n今后研发方向今后研发方向第一节、基因工程药第一节、基因工程药物发展历史物发展历史主要参考资料：汤仲明.生物技术药物（第1版）.北京：化学工业出版社，2008.1953年，Watson和Crick揭示了DNA双螺旋结构1966年，遗传密码被破译1970年，发现了限制性内切酶1973年，Cohen和Boyer用限制性内切酶第一次完成了DNA的切割与连接1977年，Genentech公司在大肠杆菌表达第一个人蛋白生长抑素，随后又成功表达了rhGH。1978年， Genentech公司基因重组人胰岛素在大

2、肠杆菌中成功表达1979年，年，FDA批准了第一个基因重组药物批准了第一个基因重组药物-人胰人胰岛素岛素Humulin上市（ Genentech公司）1982年，第一个用酵母表达的基因重组胰岛素年，第一个用酵母表达的基因重组胰岛素-Novolin上市上市1983年，PCR技术出现1984年，嵌合抗体技术创立1986年，人源化抗体技术创立1986年，第一个重组抗肿瘤药物年，第一个重组抗肿瘤药物-IFN上市上市1987年，第一个用动物细胞年，第一个用动物细胞（中国仓鼠卵巢细胞CHO）表达的基因工程产品表达的基因工程产品t-PA（组织型纤溶酶原激活物）上上市市1988年，第一个基因重组疫苗上市（乙肝

3、疫苗，年，第一个基因重组疫苗上市（乙肝疫苗，Recombivax-HB）1990年，噬菌体展示人源抗体制备技术创立1994年，第一个基因重组嵌合抗体年，第一个基因重组嵌合抗体ReoPro上市上市1997年，FDA批准第一个肿瘤治疗性抗体Rituxan上市（IDEC和Genentech公司）（CHO表达，抗CD20）2002年，年，EMEA批准第一个治疗性人源抗体批准第一个治疗性人源抗体Humira上市上市（Abbott公司，抗TNF-抗体，治疗类风湿关节炎）2004年，中国批准了第一个基因治疗药物P53腺病毒注射液腺病毒注射液2006年，FDA批准第一个基因重组肿瘤疫苗肿瘤疫苗Gardasil

4、（佳达修，加德西）上市（用于预防HPV感染诱发的宫颈癌）2011年，FDA批准第一个抗体药物偶联物（抗体药物偶联物（ADCs）抗CD30-毒素偶联物上市（用于霍奇金淋巴瘤的治疗）用于霍奇金淋巴瘤的治疗）第二节、基因工程药第二节、基因工程药物的种类及应用现状物的种类及应用现状参考文献： 美国食品药物管理局网站：/DragsFDA： http:/www.accessdata.F/scripts/cder/drugsatfda中国国家食品药品监督管理局（SFDA）网站胡显文在“基因工程药物与抗体药物研发与质量控制关键技术研讨会”上的报告。 基因重组多肽及

5、蛋白药物基因重组多肽及蛋白药物 核酸类重组药物核酸类重组药物 重组活载体药物重组活载体药物是将具有药物活性的多肽及蛋白的编码基因与载体DNA重组后转入受体细胞表达并分离纯化生产的药物。常用种类：常用种类：蛋白多肽类激素、细胞因子、抗体、酶、可溶性受体、亚单位疫苗、血浆蛋白等 由机体多种细胞分泌的具有调控细胞生长分化、调节免疫功能等生理活性并参与病理反应的小分子蛋白质。免疫系统在抗原刺激下，由B淋巴细胞增殖分化为浆细胞所产生的、可与相应抗原发生特异性结合、具有免疫功能的蛋白质。蛋白质。组成主要为组成主要为球蛋白，也称为免疫球蛋白（球蛋白，也称为免疫球蛋白（为膜表面受体的胞外部分，由于呈游离可溶状

6、为膜表面受体的胞外部分，由于呈游离可溶状态，被称为可溶性受体。态，被称为可溶性受体。外源治疗性可溶性受体可与相应的膜受体竞争配体而起到抑制作用，借此发挥治疗作用。 用病原体上能够诱发保护性反应的蛋白（而非完整病原体）生产的疫苗。传统疫苗：完整病原体制备的灭活疫苗（死疫苗）、减毒活疫苗（弱毒疫苗）和细菌外毒素经一定浓度甲醛处理后生产的类毒素（toxiod)疫苗。 利用重组核酸进行疾病防治的药物。利用重组核酸进行疾病防治的药物。DNA疫苗（ DNA vaccine ）：是把编码病原体保护性抗原的基因连接到真核表达载体上，用重组载体制成的疫苗。又称为基因疫苗（genetic vaccine）、核酸疫

7、苗（nucleic acid immunizaiton）等。将编码病原体有效抗原有效抗原的基因插入无致病性的活病毒（如痘病毒疱疹病毒、腺病毒等) 或细菌（沙门氏菌、结核杆菌)基因组，利用重组病毒或重组细菌制成的疫苗。也称为重组活疫苗。（一）（一）FDA激素类上市产品激素类上市产品胰岛素及各种突变体：治疗糖尿病甲状旁腺激素：调节钙磷代谢，治疗绝经期妇女的骨质疏松人生长激素：治疗生长激素缺乏性矮小症胰高血糖素：治疗胰岛素使用过量的低血糖症人绒毛膜促性腺激素（HCG）：促进女性排卵，治疗不育症促卵泡激素（ FSH ）：促进卵泡发育和排卵，治疗不育症促黄体素（LH）：治疗严重缺乏LH和FSH的不育症患

8、者。鲑鱼降钙素：预防骨质疏松症及骨折、Paget疾病、恶性高钙血症。治疗疾病：糖尿病、不育症、矮小症、骨质疏松国产：胰岛素及各种突变体、人生长激素（rhGF）。进口：瑞士、蛋白、韩国产生长激素生长激素；瑞士产人人促黄体激素促黄体激素；瑞士和荷兰产人促卵泡激素人促卵泡激素；意大利产人绒毛膜促性腺激素人绒毛膜促性腺激素。治疗疾病：糖尿病、矮小症、不育症（一）细胞因子分类白细胞介素（interleukin， IL）干扰素（interferon， IFN）肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor ，TNF）集落刺激因子（colony stimulating factor，CSF）生长因

9、子（growth factor， GF）趋化性细胞因子（chemokine）定义：由白细胞产生并主要介导白细胞间相互作用的细胞因子命名为白细胞介素白细胞介素（interleukin， IL）。已发现33种，IL-1IL-33。功能：刺激免疫细胞增殖、免疫调节（抑制或增强）、促进炎症等作用。定义：定义：具有干扰病毒感染和复制的低分子可溶性糖蛋白。分类：根据稳定性（耐热耐酸性）、天然来源细胞、氨基酸组成和序列差异，分为不同的型（ 型和型）、类（、）、亚类（ 1 25、 1 4、 1 4）及次亚类（如 2a 2c） 。生物活性：不同种类IFN生物活性相似，具有抗病毒和免疫调节活性（干扰病毒复制、增强

10、细胞免疫、抑制体液免疫）。型（主要为和类）稳定性较好。定义：定义：一种能使肿瘤组织发生出血坏死的细胞因子。分类： TNF- 和TNF-功能：抗肿瘤作用（引起肿瘤细胞凋亡、肿瘤组织坏死）、免疫调节作用、炎症介质。定义：定义：能够刺激造血干细胞和不同发育分化阶段的造血祖细胞增殖分化、在半固体培养基上形成相应细胞集落的细胞因子。又称为造血刺激因子造血刺激因子或造血调节因子造血调节因子。粒细胞集落刺激因子（granulocyte CSF，G-CSF）粒细胞、巨噬细胞集落刺激因子（ granulocytemacrophage CSF，GM-CSF）巨噬细胞集落刺激因子（ macrophage CSF，M

11、-CSF）干细胞因子（stem cell factor，SCF）红细胞生成素（erythropoietin，EPO血小板生成素（thrombopoietin，TPO）定义：定义：具有刺激细胞生长作用的细胞因子。种类：种类： 表皮生长因子（epidermal growth factor，EGF）； 成纤维细胞生长因子（fibroblast growth factor， FGF）；血管内皮细胞生长因子（vascular endothelial growth factor， VEGF）；神经生长因子（nerve growth factor， NGF）；血小板衍生的生长因子（platelet deri

12、ved growth factor，PDGF）；肝细胞生长因子（hepatic growthfactor，HGF ） 定义定义：对多种白细胞（单核细胞、嗜中性粒细胞、淋巴细胞）具有趋化作用和激活活性的小分子蛋白质。趋化作用（chemotaxis） ：是指化学刺激物（趋化因子）刺激细胞沿浓度上升梯度向着化学刺激物定向移动的作用（移动的速度为每min520m）IL-2：肿瘤。IL-11：血小板减少症。各种类型干扰素（IFN）：治疗肿瘤、炎症、自身免疫治疗肿瘤、炎症、自身免疫性疾病性疾病。EPO：肾性贫血。TPO：血小板减少性紫癜。rhG-CSF： 白细胞减少症 IL-2：T细胞生长因子，刺激T细胞

13、增殖。IL-11：血小板刺激因子，促进血小板产生。血小板源性生长因子（PDGF）：促进创伤愈合，治疗糖尿病足溃疡。骨成型蛋白2（BMP-2）：促进骨质形成，治疗脊骨退行性融合。角化细胞生长因子-1（KGF-1）：促进上皮细胞移行及再生，用于治疗化疗引起的重度口腔黏膜炎。胰岛素样生长因子-1（IGF-1）：儿童IGF缺乏性生长不良 IL-2相关产品相关产品IL-11相关产品相关产品各种类型各种类型IFNTNF：注射用重组改构人肿瘤坏死因子（天恩福） EPOTPOrhG-CSFrhGM-CSFrEGF（重组表皮生长因子）及（重组表皮生长因子）及rFGF（重组成纤维细胞生长因子） ：创伤、烧伤、眼科

14、疾病等。rhIFN 2arhIFN 2a注射液：注射液：罗荛愫，Roferon-A：瑞士瑞士。PEGPEG化化rhIFN rhIFN -2-2a a注射液：注射液：派罗欣，Pegasys，瑞士瑞士。PEGPEG化化rhIFN -2brhIFN -2b注射剂：注射剂：佩乐能，Peg-Intron，新加新加坡坡。rhIFN-1brhIFN-1b：倍泰龙，Betaferon， 美国rhIFN-1arhIFN-1a注射液：注射液：利比，Rebif，意大利。rhEPOrhEPO注射液：注射液：利血宝，ESPO，日本；日本；阿司伯根，Espogen，韩国；韩国；罗可曼，Recormon，瑞士。瑞士。rhG

15、-CSFrhG-CSF：惠尔血，GRAN，日本；日本；格拉诺赛特，Granocyte，日本。（一）抗体基本结构：按同一方向排列的4条肽链（两条相同的长链称之为重链，两条相同的短链称为轻链）经二硫键连接组成的形态呈“Y”的单体。（二）分类：5类，IgG、IgM、IgA、IgD、IgE。其中在血液中含量最高、功能最全的为IgG。1、抗原结合位点：位于N段可变区。2、补体结合位点： 位于IgG分子Fc段的CH2，可与补体结合。3、Fc受体结合位点：位于IgG分子Fc段的CH3，可与IgG的FcR结合。4、母体胎盘结合位点：位于IgG分子Fc段的CH2，可与母体胎盘滋养层细胞上的受体结合，介导IgG从

16、母体一侧穿过胎盘到达胎儿。IgG尚有母体胎盘结合位点；IgA有1、识别和结合抗原产生中和、封闭等作用。2、活化补体，产生溶菌、溶细胞作用及补体的调理作用。3、结合Fc受体（IgG和IgE），介导抗体的调理作用（IgG）、 ADCC作用（IgG）等。4、通过胎盘（IgG）：参与胎儿及初生儿被动免疫中和作用：抗体与病原微生物和毒素病原微生物和毒素等有害抗原物质结合，阻止其与细胞受体结合而保护细胞免受危害的作用。具有中和作用的抗体称为中和抗体。封闭作用：抗体与功能细胞表面抗原或可溶性抗功能细胞表面抗原或可溶性抗原原结合阻止其发挥效应的作用。这类抗体被称为封闭抗体 。CVB3：柯萨奇B3病毒 中和抗体

17、结合位点两个思考题：1、能与病原表面抗原结合的抗体是否都是中和抗体？2、用来制备中和抗体的抗原应具备什么基本条件？由抗体的Fc段及吞噬细胞表面的相应受体结合介导的促进吞噬细胞吞噬细菌等颗粒性抗原作用。一些细菌的荚膜具有抗吞噬作用ADCC即antibody dependent cell-mediated cytotoxicity的缩写，中文含义是：抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用。指表达Fc受体的细胞毒性效应细胞效应细胞通过识别抗体Fc段杀伤被抗体包被的靶靶细胞细胞的作用。M ：巨噬细胞（ macrophage ）；Mo：单核细胞（ monocytes） ；Eo：嗜酸性粒细胞（ eosinophi

18、lic granulocytes ，Eo）；PMN：中性粒细胞（polymorphonuclear neutrophil，PMN）；NK：自然杀伤细胞。重组抗体的意义：重组抗体的意义： 减少单克隆抗体的鼠源部分，降低其免疫原性； 减小抗体分子量，提高其作为导向抗体的靶向渗透性。抗体免疫原性的主要来源：抗体分子恒定区抗体免疫原性的主要来源：抗体分子恒定区 完整抗体完整抗体：人鼠嵌合抗体；人源化抗体（改型抗体）、人源抗体 抗体片段：抗体片段：Fab抗体抗体（Fab片断）；Fv抗抗体体；ScFv 抗体（单链抗体可变区片段，Single Chain Antibody Variable Region F

19、ragments ，ScFv），简称单链抗体。 抗体融合蛋白抗体融合蛋白 人人鼠嵌合抗体（人鼠嵌合抗体（Chimeric antibodiesChimeric antibodies） 用人的恒定区基因片段代替鼠的恒定区基因，所得到的抗体同时含有人和鼠抗体的部分，称为人鼠嵌合抗体。人人源化抗体（Humanized Antibodies) 用鼠单克隆抗体的CDR替换人抗体的CDR所产生的抗体。 其编码基因大约包含95的人DNA和5的鼠DNA。人源化抗体也称为改型抗体（reshaped antibody）免疫原性更低complimentarity determining regions ，互补决定区

20、。是Ig分子上与抗原表位互补结合的区域。也是可变区中氨基酸组成和排列顺序在不同Ig分子中变化更大的区域，又称为高变区（hypervariable region，HVR）或超变区。 只含抗体重链VH 、 CH1和轻链VL、CL的抗体。如果恒定区片段是人源性的，称之为重组Fab。渗透性增强，免疫原性小半衰期缩短（比全IgG1缩短10倍）用于肿瘤成像诊断准确性达95%以上Fab段：即抗原结合片段（fragment of antigen binding，Fab）。ScFv 抗体 是由抗体轻链和重链可变区基因（VH、VL）通过一段编码连接肽基因拼接后表达形成的单链重组抗体。VH连接肽VL 是具有抗原结合

21、能力的最小抗体片段。渗透性更强，半衰期缩短（比全IgG1缩短10倍）对实体瘤显像明显强于传统单克隆抗体和Fab片段缺点是抗原亲和力降低。抗体基因片段与其他有治疗功能的蛋白基因的融合表达产物。可以增加治疗药物的靶向性。例：抗体-细胞因子融合蛋白重组抗体药物是基因重组药物的主体和生物制重组抗体药物是基因重组药物的主体和生物制药业的支柱！药业的支柱！截止截止2012年底，美国年底，美国FDA已批准上市已批准上市40多种多种治疗性抗体药物，种类占上市基因重组药物的治疗性抗体药物，种类占上市基因重组药物的1/3。续上表商品名商品名批准时间批准时间说明说明适应症适应症公司公司Simponi (golimu

22、mab)2009-4-24NS0表达的表达的anti-TNF- 人源抗人源抗体体类风湿关节炎，强直性脊柱类风湿关节炎，强直性脊柱炎，银屑病炎，银屑病CentocorIlaris (canakinumab)2009-6-17SP2/0表达的表达的anti-IL-1人源抗人源抗体体家族冷因性自体发炎症候和家族冷因性自体发炎症候和穆穆-韦二氏综合征韦二氏综合征(CAPS)NovartisStelara (ustekinumab)2009-9-25NS0表达的表达的anti-P40(IL-12和和IL-23的亚基的亚基)人源抗体人源抗体银屑病银屑病CentocorArzerra (ofatumumab

23、)2009-10-26NS0表达的表达的anti-CD20的人源抗的人源抗体体慢性淋巴细胞白血病慢性淋巴细胞白血病GlaxoSmithKlineActemra (tocilizumab)2010-1-8CHO表达的表达的anti-IL6R人源化抗人源化抗体体类风湿关节炎类风湿关节炎Genentech/Roche2009年1月-2013年1月FDA批准上市的治疗性抗体-1商品名商品名批准时间批准时间说明说明适应症适应症公司公司Prolia (denosumab)2010-6-1CHO表达的表达的anti- RANKL 人源人源抗体抗体女性绝经后的骨质疏松女性绝经后的骨质疏松AmgenBenlys

24、ta (belimumab)2011-3-10动物细胞表达的动物细胞表达的anti- BlyS人源人源抗体抗体systemic lupus erythematosus (SLE)Human Genome Sciences and GSKXgeva (denosumab)2010-11-18CHO表达的表达的anti- RANKL 人源人源抗体抗体Osteolytic Bone Metastases of Solid TumorsAmgenYervoy (ipilimumab)2011-3-25CHO表达的表达的anti-CTLA-4人源抗人源抗体体Melanoma - MetastaticBr

25、istol-Myers SquibbNulojix (belatacept) Injection2011-6-15CHO(CTLA4-Ig )突变体突变体 (L104 to E; A29 to Y)，Fc融合蛋白融合蛋白抗移植排斥抗移植排斥Bristol-Myers SquibbAdcetris (brentuximab vedotin) Injection2011-8-19anti-CD30的抗体，与毒素偶联的抗体，与毒素偶联主要用于霍奇金淋巴瘤的主要用于霍奇金淋巴瘤的治疗治疗Seattle Genetics, Inc.2009年1月-2013年1月FDA批准上市的治疗性抗体-2商品名商品名

26、批准时间批准时间说明说明适应症适应症公司公司Adcetris (brentuximab vedotin) Injection2011-8-19anti-CD30的抗体，与毒素偶联的抗体，与毒素偶联主要用于霍奇金淋巴瘤的主要用于霍奇金淋巴瘤的治疗治疗Seattle Genetics, Inc.Eylea (aflibercept) Injection 2011-11-18CHO表达的表达的VEGFR-Fc融合蛋融合蛋白，相当于白，相当于anti-VEGF抗体抗体用于黄斑变性，与用于黄斑变性，与Lucentis相似相似Regeneron/BayerPerjeta (pertuzumab)2012-

27、6-8CHO表达的另一种表达的另一种anti-Her2的的产品，与产品，与Herceptin联用联用治疗乳腺癌治疗乳腺癌GenentechZaltrap (ziv-aflibercept) Injection2012-8-3和和Eylea (aflibercept) Injection是同一种产品是同一种产品用于治疗结直肠癌用于治疗结直肠癌Regeneron/sanofiABthrax， 2012-12-14anti-PA抗体抗体炭疽防治炭疽防治GlaxoSmithKline2009年1月-2013年1月FDA批准上市的治疗性抗体-3尼妥珠单抗注射液：尼妥珠单抗注射液：泰欣生，百泰生物药业有限

28、公司。为人源化抗人表皮生长因子受体（抗人表皮生长因子受体（EGFR）单克隆抗体，用于EGFR阳性表达的/期鼻咽癌。碘碘131I肿瘤细胞核人鼠嵌合单克隆抗体注射液：肿瘤细胞核人鼠嵌合单克隆抗体注射液：唯美生，上海美恩生物技术有限公司。为131I标记的重组抗肿瘤细胞核人鼠嵌合单克隆抗体，用于晚期肺癌的放射免疫治疗。重组抗重组抗CD25人源化单克隆抗体注射液人源化单克隆抗体注射液：健尼哌，上海中信国健药业股份有限公司。用于预防肾移植急性排斥反应的发生。为我国为我国自主研发的创新产品。自主研发的创新产品。种类有限，主要依赖进口托珠单抗注射液：托珠单抗注射液：雅美罗，Actemra，日本日本。为。为重组

29、人源化抗抗IL-6抗体抗体。AR治疗。贝伐珠单抗注射液：贝伐珠单抗注射液：安维汀，Avastin，瑞士瑞士。人源化抗抗-VEGF 。雷珠单抗注射液：雷珠单抗注射液：诺适得，Lucentis，瑞士瑞士。重组人源化抗抗VEGFR单克隆抗体。老年湿性黄斑变性。利妥昔单抗注射液：利妥昔单抗注射液：美罗华，MabThera，瑞士瑞士。重组鼠人嵌合抗抗CD20抗体抗体。注射用英夫利西单抗：注射用英夫利西单抗：类克，Remicade，荷兰荷兰。重组鼠人嵌合抗抗TNF-抗抗体体。阿达木单抗注射液：阿达木单抗注射液：修美乐，HUMIRA，英国英国。重组人源抗抗TNF-抗体抗体。西妥昔单抗注射液：西妥昔单抗注射液

30、：爱必妥，Erbitux，德国德国。抗抗EGFR人鼠嵌合单克隆抗体，抗肿瘤。注射用曲妥珠单抗：注射用曲妥珠单抗：赫赛汀，Herceptin，瑞士瑞士。抗HER2人源化单抗，乳腺癌。CD3、CD11a、CD20、CD25、CD30、CD33、CD52IL-1R、IL1-、IL-6、IL-6R、P40（IL-12和IL-23的亚基）TNF、TNFRVEGF、 VEGFR、EGFR、HER2（ Human epidermal growth factor receptor2，人表皮生长因子受体人表皮生长因子受体2）CTLA-4、LFA-3、C5、IgE、RANKL（ Receptor Activato

31、r for Nuclear Factor- B Ligand，核因子 B受体活化因子配体） 、Blys（ B lymphocyte stimulator， B 淋巴细胞刺激因子）、PA、TPO、呼吸道合胞病毒F蛋白、4-integrin（整合素）作业：查阅上述治疗靶点的生物学意义及与对应抗体作业：查阅上述治疗靶点的生物学意义及与对应抗体所治疗疾病的关系。所治疗疾病的关系。用于治疗酶作用底物积累酶作用底物积累或酶促产物缺乏酶促产物缺乏导致的疾病。戈谢病（Gauchers病）：-葡萄糖脑苷脂酶活性异常引起葡萄糖脑苷脂在组织巨噬细胞内蓄积而引发的疾病。常见症状：肝、脾、骨髓中出现Gauchers细胞

32、（饱含葡萄糖脑苷脂的细胞），引发进行性肝、脾肿大、严重贫血和血小板减少等症状。囊性纤维化：是一种威胁生命的遗传病，是由跨膜调节因子CFTR蛋白的功能障碍性纤维化引起的疾病。气管中有含高浓度DNA的黏稠脓性分泌物，降低了肺功能并增加了感染机会。纤溶酶缺乏纤溶酶缺乏：凝血与溶血过程失衡，血纤维蛋白凝块堵塞血管引起的脑梗和心肌梗死等疾病。组织型纤溶酶原激活物（组织型纤溶酶原激活物（tPAtPA）及其突变体：）及其突变体：用于急性心梗溶栓DNADNA酶（酶（dornase alfadornase alfa）：囊性纤维化。葡糖脑苷脂酶（葡糖脑苷脂酶（ImigluceraseImiglucerase）：G

33、auchers病（戈谢病，高歇病）尿酸水解酶（尿酸水解酶（rasburicaserasburicase）：血浆尿酸症粘多糖粘多糖- - -L-L-艾杜糖醛酸水解酶艾杜糖醛酸水解酶（laronidase）： 粘多糖贮积病半乳糖苷酶半乳糖苷酶- - （Algasidase betaAlgasidase beta）：Febry病，法布里病。葡萄糖苷酶：葡萄糖苷酶：庞培氏病，糖元病或糖元贮积症。心肌糖元贮积。凝血酶（凝血酶（rhThrombinrhThrombin）：外科止血。其他：注射用重组链激酶：注射用重组链激酶：斯凯通，上海凯茂生物医药有限公司；国大欣通，青岛国大生物制药股份有限公司。溶栓注射用

34、重组葡激酶：注射用重组葡激酶：依力通，成都地奥九泓制药厂；施爱克，通化玉金药业股份有限公司。溶栓注射用重组人尿激酶原：注射用重组人尿激酶原：普佑克，上海天士力药业有限公司；我国自行研制，拥有自主知识产权。溶栓重组人组织型纤溶酶原激酶衍生物：重组人组织型纤溶酶原激酶衍生物：瑞通立，山东阿华生物药业有限公司。溶栓产品种类少，适应症少（仅限于溶栓）血栓性疾病是由于凝血与溶血过程失衡所致血纤维蛋白凝块堵塞血管引起的疾病。凝血：血纤维蛋白原（溶解度很大）血纤维蛋白单体（溶解度很低）血纤维（血栓，溶解度更低）。溶血:纤溶酶水解纤维蛋白 激活无活性的血浆纤溶酶原，形成有活性的纤溶酶，后者催化血栓主要基质纤维

35、蛋白水解，使血栓溶解，血管再通。纤溶酶原（plasminogen，Plg）纤溶酶（plasmin，Plm） 纤维蛋白水解血栓溶解mucopolysaccharidoses ，MPS。是一种因先天性粘多糖酶缺乏、粘多糖贮积而累及多脏器的新陈代谢异常性疾病。根据主要伤及的器官，分为肝型、心脏型、骨骼肌型等，引起肝肥大、心脏肥大、骨骼肌无力等症状。为遗传性半乳糖苷酶活性降低引起糖鞘脂在人体重要器官聚集诱发的疾病。该病主要累及肾脏及心脏。 无。问题：除了血栓性疾病，FDA用酶治疗的一些代谢性疾病在我国是否发生？我国临床对这些疾病是如何治疗的？我国我国CFDA2013年年9月登记在案的国产可溶性受体上市

36、产月登记在案的国产可溶性受体上市产品：品：注射用重组人注射用重组人型肿瘤坏死因子受体型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白抗体融合蛋白（益赛普，上海中信国健药业股份有限公司，2012）用于治疗类风湿性关节炎、银屑病、强直性脊柱炎。机制：TNF-水平异常增高增加了这几种疾病的水平异常增高增加了这几种疾病的严重程度严重程度。是一种以关节滑膜病变为主的慢是一种以关节滑膜病变为主的慢性、全身性的炎性自身免疫病性、全身性的炎性自身免疫病病因尚未完全明确。但目前认为，最终引起病理变化的主要机制是：自身变性IgG与其诱发的IgM类抗体（类风湿因子，类风湿因子，RF）形成的复合物沉积于小关节处引起机体损伤。是一种以

37、骶髂关节、椎间是一种以骶髂关节、椎间关节病变为主的慢性炎性关节病变为主的慢性炎性疾病，疾病，临床主要表现为腰背颈臀髋部疼痛以及关节肿痛，严重者可发生脊柱脊柱畸形和强直畸形和强直。是一种慢性、炎症性皮肤病，以角质形成细胞（是一种慢性、炎症性皮肤病，以角质形成细胞（ KC）高度增生和炎症反应为特征。）高度增生和炎症反应为特征。俗称牛皮癣。病因尚未完全明了，但众多研究表明，免疫因病因尚未完全明了，但众多研究表明，免疫因素与银屑病的发生及病理生理有密切关系。素与银屑病的发生及病理生理有密切关系。FDA 批准上市的疫苗（截止批准上市的疫苗（截止2013年年1月）月）酵母表达乙肝疫苗酵母表达乙肝疫苗(19

38、86)(1986)。酵母表达酵母表达HPV（人乳头瘤病毒）疫苗（ Gardasil）：预防宫颈癌。昆虫细胞表达昆虫细胞表达HPV双价疫苗：双价疫苗：Cervarix，用于预，用于预防宫颈癌。防宫颈癌。昆虫细胞表达流感疫苗：昆虫细胞表达流感疫苗：Flublok （influenza vaccine）：预防季节性流感。）：预防季节性流感。宫颈癌是全球第二大妇女常见恶性肿瘤。上世纪70年代，德国科学家哈拉尔德楚尔豪森(Harald zur Hausen)发现，感染人类乳头瘤病毒(HPV)是诱发宫颈癌的主要病因。HPV病毒有200多型，约70%的宫颈癌病例由HPV16型和HPV18型病毒引起。中文名“

39、加卫苗 ”、“佳达修”等， 是FDA批准的唯一一种预防子宫颈癌的疫苗。可预防由6、11、16、18型HPV引起的宫颈癌、癌前病变或不典型增生病变以及生殖器疣。接种对象： 9岁女性。中文名“卉研康”，为葛兰素史克（GSK）研发生产的二价（ 16、18型HPV）宫颈癌疫苗。获FDA、欧盟、台湾、香港等批准上市。接种对象： 9岁女性。重组乙肝疫苗：重组乙肝疫苗：酿酒酵母表达，酿酒酵母表达，深圳康泰生物制品股份有限公司、北京天坛生物制品股份有限公司；汉逊酵母表达，汉逊酵母表达，华兰生物疫苗有限公司，大连汉信生物制药有限公司；CHO表达，表达，北京华尔盾生物技术有限公司、成都生物制品研究所有限责任公司、

40、华北制药金坦生物技术股份有限公司、兰州生物制品研究所有限责任公司。重组重组B亚单位亚单位/菌体霍乱疫苗（肠溶胶囊）：菌体霍乱疫苗（肠溶胶囊）：可唯适，上海联合赛尔生物工程有限公司。重组戊型肝炎疫苗重组戊型肝炎疫苗益可宁：大肠埃希菌表达，大肠埃希菌表达，厦门万泰沧海生物技术有限公司。戊型肝炎是一种易发于青壮年和孕妇的病毒性肝炎戊型肝炎是一种易发于青壮年和孕妇的病毒性肝炎，通过食物、粪便污染的水源、接触和血液传染。临床表现和甲肝类似，主要以乏力、厌油、恶心、食欲不振，并伴有肝区疼痛，皮肤、小便发黄等症状为主。接种对象： 16岁的易感人群。如畜牧养殖者、餐饮业人员、学生或部队官兵、育龄期妇女、疫区旅

41、行者等。流行性感冒病毒亚单位疫苗流行性感冒病毒亚单位疫苗（ Influenza vaccine（Sub-unit）（爱阁力保，Agrippal）：意大利意大利， 2009-09-30至2014-09-29。流感病毒亚单位疫苗（流感病毒亚单位疫苗（类病毒体）（ Polyvalent Virosomal Influenza Vaccine）（因福舒，Inflexal V）：瑞士瑞士， 2012-07-17至2017-07-16。流感病毒亚单位疫苗流感病毒亚单位疫苗（ Influenza vaccine, surface antigen, inactivated）（英伏可，Influvac）：荷兰荷

42、兰， 2013-06-25至2018-06-24。重组乙型肝炎疫苗重组乙型肝炎疫苗（酿酒酵母）（安在时，Engerix B）：比利时比利时， 2010-07-07至2015-04-06。主要为各种凝血因子。用于治疗血友病。主要为各种凝血因子。用于治疗血友病。血友病为一种X性联阴性遗传的凝血功能障碍所致的性联阴性遗传的凝血功能障碍所致的出血性疾病。出血性疾病。发生于男孩，总发病率1.52/万。发病机制：某些种类的凝血酶缺乏导致发病机制：某些种类的凝血酶缺乏导致凝血时间延长。血友病A：凝血因子缺乏，占血友病人总数的85%血友病B：凝血因子缺乏，占血友病人总数的15%。凝血因子a (NovoSeve

43、n、BHK表达)：血友病A或B凝血因子(Bioclate）, 哺乳动物细胞表达；Helixate, BHK表达； Recombinate rAHF, CHO表达； ReFacto，CHO表达)：血友病A凝血因子IX (BeneFix , CHO表达)：血友病B凝血因子a：在凝血酶链式瀑布中不存在，但促进凝血因子和IX的活化，用于治疗对因子和IX产生抑制物的A型或B型血友病人的自发性和手术后出血。注射用重组人凝血因子注射用重组人凝血因子（任捷，Xyntha）：美国美国，2012-08-16至2017-08-15。注射用重组人凝血因子注射用重组人凝血因子（百因止，ADVATE）：瑞士瑞士， 201

44、2-04-28至2017-04-27。注射用重组人凝血因子注射用重组人凝血因子IX（贝赋，BeneFIX）：西班牙西班牙，2012-07-10至2017-07-09。注射用重组人凝血因子注射用重组人凝血因子VIIa（诺其，NovoSeven）：丹丹麦麦诺和诺德公司，2010-05-19至2015-05-18。无国产重组产品。优优 点点免疫效应期长。可同时诱发体液免疫和细胞免疫。热稳定性好。易于大量生产。表达效果及免疫原性不确切。DNA整合的风险。诱导产生抗DNA抗体，并有可能诱发自身免疫性疾病。缺缺 点点尚无上市产品。尚无上市产品。 但自1997年以来，已有超过70种针对各种传染病（如HBsA

45、g核酸疫苗、HIV9P160核酸疫苗、 SARS相关冠状病毒S2DNA疫苗）和癌症的DNA疫苗在临床前和临床研究中。对人：无对动物：1、禽流感新城疫重组二联活疫苗：、禽流感新城疫重组二联活疫苗：2005年12月24日，农业部在北京宣布，我国已成功研制出鸡鸡痘病毒作为载体的禽流感新城疫重组二联活疫痘病毒作为载体的禽流感新城疫重组二联活疫苗苗，并正式批准生产。 2、禽流感重组鸡痘病毒载体活疫苗（、禽流感重组鸡痘病毒载体活疫苗（H5） 第三节、基因工程药第三节、基因工程药物今后的研发方向物今后的研发方向 提提 纲纲1、利用后基因组时代的成果寻找新的药物靶标2、对原有重组药物产品进行遗传改造和化学修饰

46、，以改善药物性能。3、研究基因工程药物新剂型新剂型及新的给药途径给药途径。（一）后基因组时代指功能基因组时代。获得了大量基因的功能信息。/druggable（二）药物靶标：指药物在体内的作用结合靶点，包括受体、酶、离子通道、核酸等生物大分子。（三）作为理想药物靶点的主要条件：特异性。即与特定疾病关系密切并与其在正常细胞中的功能明显区别.可药性。能够与药物发生相互作用又能引起药物效应的基因或其产物。分析正常组织与病理组织、药物干预前后功能基因表达的差异，是发现药靶的重要手段之一。疾病模型（人、动物、细胞）基因转录及表达差异分析药靶鉴定基因芯片蛋白双向电泳联合质谱分析生物信息学酵母双杂交及三杂交药靶确证RNA干扰技术基因过表达技术转基因动物基因敲除