碱性磷酸酶(AKP)_第1页
碱性磷酸酶(AKP)_第2页
碱性磷酸酶(AKP)_第3页
碱性磷酸酶(AKP)_第4页
碱性磷酸酶(AKP)_第5页
已阅读5页，还剩10页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

1、碱性磷酸酶（碱性磷酸酶（ALP）功能结构催化机理金属离子的作用功能：功能：将底物分子(核酸、蛋白质、生物碱)上的磷酸基团除去，并生成磷酸根离子和自由的羟基。一般用于催化核酸分子脱掉5磷酸基团，从而使DNA或RNA片段的5-P末端转换成5-OH末端。碱性磷酸酶（碱性磷酸酶（ALP）同工酶同工酶来自肝脏：ALP1、ALP2、ALP6来自骨细胞：ALP3来自胎盘及癌细胞：ALP4来自小肠绒毛上皮与成纤维细胞：ALP5二聚体蛋白中央：10层-折叠；两侧：15个 不等的-螺旋；顶部：单一的-螺旋、三层-折叠。每个亚基含499个AA，均具有一个活性中心酶中心有一个空腔口袋，用于与磷酸酯结合。结结 构构Zn

2、1His-331、His-412的咪唑氮Asp-327的羧基的两个氧H2O 磷酸酯的氧原子配位环境Zn2Asp-369、Asp-51的羧基的其中一个氧His-370的咪唑氮H2O 磷酸酯的氧原子MgAsp-51的另一个氧Thr-155、Glu-322羧基上的一个氧原子三个水分子催化机理催化机理底物磷酸酯嵌入酶的结合部位，磷酸酯的两个氧原子分别与Zn1和Zn2配位，形成两个Zn原子之间的磷酸盐桥其它的磷酸的氧原子则与Arg-166的胍基形成氢键与Mg配位的OH-，使Ser去质子化，则Ser的氧原子有更强的亲核性去质子化的Ser进攻磷原子，从而导致Ser-残基的磷酸化，并形成共价Ser-磷酸盐中间

3、体(仍然与Zn配位)中间体的磷原子断裂P-OR键磷酸酯被绑定到Ser-102中的活性位点Mg配位的水分子现在作为一个质子酸，将一个质子给Ser-102，则P-Ser键断裂Zn1原子配位的氢氧根离子进攻磷酸基，形成P-OH键，最终形成无机磷酸盐与底物的非共价结合形式。H2O取代无机磷酸，完成催化反应锌离子在碱性磷酸酶中有广义Lewis酸的作用，极化底物，使之成为一个良好的亲电试剂。金属离子的作用金属离子的作用酶与底物以金属离子Zn为桥接点，金属将底物磷酸引导到正确的位置（Ser-活性部位），使酶促反应顺利进行。金属离子的作用金属离子的作用金属Zn1中和离去基团的负电荷，是RO能够顺利离去。金属离子的作用金属离子的作用Mg定位了水分子，催化Ser-102的质子化和去质子化的反应。金属离子的作用金属离子的作用锌离子在碱性磷酸酶中有广义Lewis酸的作用，极化底物，使之成为一个良好的亲电试剂。酶与底物以金属离子Zn为桥接点，金属将底物磷酸引导到正确的位置（Ser-活性部位），使酶促反应顺利进行。金属Zn1中和离去基团的负电荷，是RO-能够顺利离去。Mg定位了水分子，催化Ser-102的质子化和去质子化的反应。金属离子的作用金属离子的作用可直接参与磷代谢，在钙、磷的消化、吸收、分泌及骨化过程中发挥了重要作用在基因工程中主要是应用该酶处理经限制性内切酶切割后的载体DNA，去除载体

人人文库> 全部分类> 教育资料 > 课件下载

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论