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文档简介

1、能将微量的DNA大幅增加,是分子生物学研究和实验的常规方法,PCR实验室广泛应用于生物学各个领域,例如:艾滋病检测,乙型肝炎,禽疫病,癌基因的检测和诊断,DNA指纹,个体识别,亲子鉴定及法医物证等等,今天为大家进行详解。一.PCR实验室布局PCR实验室原则上为试剂准备区,样品制备区,扩增区和扩增产物分析区四个单独的工作区域,并设有专用走廊,各工作区域应设缓冲间,工作区与缓冲间宜安装连锁装置。不同功能的工作区应是分隔独立的,各工作区有明显的标志,不能直通,如果紧密连接,需安装物品传递窗。前两区为扩增前区,后两区为扩增后区,即从:试剂准备区样品制备区PCR扩增室产物分析室,不得逆向流动。实验室的气

2、流也应从扩增前区流向扩增后区,不得逆向流动。各工作区顶部应该安装紫外灯,紫外灯波长为254mm,每20一支40W的紫外灯。二.实验室各区功能及主要设备1. 试剂准备区:主要进行试剂的制备,分装和主反应混合液的制备。试剂盒用于样品制作的材料应直接运送至该区域。试剂原材料必须贮存在本区内,并在本区内制备成所需的试剂。本区主要设备有天平,冰箱,离心机,加样器,振荡器等。对于气流压力的控制,本区并没有严格的要求,一般为+10Pa。2. 样品制备区:主要进行样品的保存,核酸提取,贮存及其加入至扩增反应管和测定DNA的合成。本区主要设备有冰箱,生物安全柜,离心机,加样器,振荡器等。本区

3、的压力梯度要求为:相对于邻近区域为正压,以避免从邻近区进入本区的气溶胶污染,一般为+10Pa。3. 扩增区:主要进行DNA扩增。此外,已制备的DNA模板(来自样品制备区)的加入和主反应混合液(来自试剂准备区)制备成反应混合液等也可在本区内进行。本区主要设备有:扩增仪,冰箱,离心机,加样器等。本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为负压,以避免气溶从本区漏出一般为-25Pa。4. 扩增产物分析区:扩增产物的测定。本区主要设备有酶标仪,洗板机.加样器和水浴箱等。本区的压力梯度的要求为:相对于邻近区域为负压,一般为-25Pa,以避免扩增产物从本区扩散至其它区域三. PCR

4、实验室通风系统及压力控制各区域之间应具备单间的实验工艺流,物流,人流与气流,形成单向流程的保护屏障,避免实验室之间的相互干扰,防止气溶胶扩散对实验过程造成污染。PCR实验室并没有严格的净化要求,但是为避免各个实验区域交叉污染的可能性,宜采用全送全排的气流组织形式,严格控制送,排风的比例以保证个实验区的压力要求。四.PCR实验室装饰实验室围护结构应牢固,气密性好;所有阴阳角宜采用圆弧过度;墙体内壁光洁,不积尘,耐腐蚀,易清洗消毒;地面使用PVC卷材或环氧树脂自流坪,材料应满足无缝隙,无渗漏,光洁,耐腐蚀的要求。五.PCR实验室注意事项1.几个区域的大小设置情况,试剂准备区,扩增区,扩增产物分析区,空间可以相对小一些,样品制备区要放置生物安全柜和低温冰箱,空间应大一些。2.试剂准备区,样品制备区设紧急洗眼器,以保证操作人员的安全。西安博尔实验室承接各类实验室整体建设,15年实验室行业解决方案经验,做过上百个行业的实验室建设:化学实验室设计物理实验室设计研发实验室设计PCR实验室设计微生物实验室设计医学实验室设计BSL-2实验室设计医药实验室设计分子生物实验室设计食品检测实验室设计药品检验实验室设计细胞实验室设计动物房实验室设计石油化工实验室设计环境监测实验室设计公安系统实验室设计

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