胰岛素对血管损伤作用研究进展王旭开课件

1、二十年研究与思考二十年研究与思考胰岛素对血管损伤作用研究进展胰岛素对血管损伤作用研究进展 -1胰岛素对血管损伤作用研究进展王旭开Department of Cardiovascular Diseasen胰岛素、糖尿病、大血管病变的现状与问题胰岛素、糖尿病、大血管病变的现状与问题n高胰岛素血症致大血管损伤的临床证据高胰岛素血症致大血管损伤的临床证据n高胰岛素对血管损伤的实验室证据高胰岛素对血管损伤的实验室证据n总结总结内内 容容2胰岛素对血管损伤作用研究进展王旭开Department of Cardiovascular Disease胰岛素的历程胰岛素的历程胰岛素调节血糖的基本作用被发现已经历了

2、胰岛素调节血糖的基本作用被发现已经历了8585年年1949发现可以促进细胞摄取葡萄糖发现可以促进细胞摄取葡萄糖 1971发现细胞表面有发现细胞表面有INS受体受体1985发现发现INS受体遍布全身各种细胞并克隆成功受体遍布全身各种细胞并克隆成功 近近20余年的成就主要是发现了余年的成就主要是发现了INS在细胞内的在细胞内的 传导信号途径，以及信号传导受损后细胞代谢传导信号途径，以及信号传导受损后细胞代谢 和功能的改变，糖毒性、脂毒性、炎症介质对和功能的改变，糖毒性、脂毒性、炎症介质对 内皮功能和内皮功能和VSMC的性状影响。的性状影响。 解释解释IR和和MS相关性疾病的关系和可能的临床相关性疾

3、病的关系和可能的临床干预干预3胰岛素对血管损伤作用研究进展王旭开Department of Cardiovascular Disease遗传性遗传性获得性获得性少见突变少见突变6胰岛素受体胰岛素受体6葡萄糖转运子葡萄糖转运子6信号蛋白信号蛋白常见形式常见形式6大量未经确认大量未经确认的的6较少运动较少运动6肥胖肥胖6老龄化老龄化6药物药物6高血糖高血糖6FFA升高升高胰岛素抵抗胰岛素抵抗胰岛素抵抗胰岛素抵抗遗传性的与获得性的影响遗传性的与获得性的影响4胰岛素对血管损伤作用研究进展王旭开Department of Cardiovascular Disease基础状态基础状态: 血糖血糖3.8-6

4、.1mmol/L，分泌分泌1u/1h高血糖时高血糖时: 血糖血糖6.1mmol/L， 分泌分泌5u/1h正常人胰岛素基础正常人胰岛素基础24u+餐后餐后15u（30u） 40u（50u）低血糖时低血糖时:1.67 mmol/L，停止分泌停止分泌 内源胰岛素内源胰岛素40%-50%在肝脏代谢分解在肝脏代谢分解半寿期半寿期: 内源胰岛素内源胰岛素5min 静脉注射外源胰岛素静脉注射外源胰岛素20min胰岛素的需胰岛素的需求求5胰岛素对血管损伤作用研究进展王旭开Department of Cardiovascular Disease在体和离体高胰岛素血症的定量在体和离体高胰岛素血症的定量nINS与与

5、INS-C肽的关系肽的关系nINS受体的部位、质量、病变受体的部位、质量、病变n在体临床在体临床INS量的估计量的估计n离体离体INS量量6胰岛素对血管损伤作用研究进展王旭开Department of Cardiovascular Disease在体临床胰岛素量的估计在体临床胰岛素量的估计“高胰岛素血症高胰岛素血症” 在学术文献中的解释在学术文献中的解释n高胰岛素血症是指空腹胰岛素（高胰岛素血症是指空腹胰岛素（FINS）大于）大于 总体总体样本均值样本均值2S; 测定及统计方法胰岛素测测定及统计方法胰岛素测 定用放射免疫法定用放射免疫法 n高胰岛素血症的定义高胰岛素血症的定义 空腹胰岛素空腹胰

6、岛素85 pmolL 7胰岛素对血管损伤作用研究进展王旭开Department of Cardiovascular Disease离体胰岛素量离体胰岛素量n胰岛素引起剂量依赖性的胰岛素引起剂量依赖性的TDR incorporation (150% 增生超过基线）增生超过基线）100 nM 12n10100nM 胰岛素可以诱导细胞增殖胰岛素可以诱导细胞增殖Am J Physiol Cell Physiol 275:42-49, 19988胰岛素对血管损伤作用研究进展王旭开Department of Cardiovascular Disease糖尿病的流行病学糖尿病的流行病学n20年来中国发病率增

7、加年来中国发病率增加3倍倍;城市上升城市上升40%(2008,68ADA,旧金山旧金山)n全世界全世界3.1亿亿DM,中国有中国有5000万万n糖尿病死亡中有糖尿病死亡中有75%合并有冠心病合并有冠心病9胰岛素对血管损伤作用研究进展王旭开Department of Cardiovascular DiseaseDM与与CAD关系的证据关系的证据IGT与与CAG检出检出CAD独立强相关独立强相关(2008,57 ACC)ADVANCE试验试验HBA1C水平水平6.5%的强化降糖的强化降糖组肾病降低但未降低心血管事件组肾病降低但未降低心血管事件,死亡率升高死亡率升高 UKPDS研究研究DM确诊确诊9

8、年内有年内有20%DM发生大血发生大血 管事件管事件,9%发生微血管病变发生微血管病变.10胰岛素对血管损伤作用研究进展王旭开Department of Cardiovascular Disease血栓血栓PAI-1PAI-1 纤溶酶原纤溶酶原CRPCRPFFAFFA脂代谢紊乱脂代谢紊乱VLDL (VLDL (甘油三酯甘油三酯) )HDLHDL肥胖肥胖TNF-TNF- LipaemiaLipaemiaAGEsAGEs遗传易感性遗传易感性高血压高血压高胰岛素血症高胰岛素血症胰腺胰腺肝脏肝脏脂肪细胞脂肪细胞骨骼肌骨骼肌功能蛋白糖化功能蛋白糖化高血糖高血糖胰岛素抵抗胰岛素抵抗 FFAFFALibby

9、 P, et al. Circulation 2002;106:276063.糖尿病并发心血管疾病的机制糖尿病并发心血管疾病的机制-111胰岛素对血管损伤作用研究进展王旭开Department of Cardiovascular DiseaseSchnell O, et al. Klinikarzt 2000;2:29.AGE 受体受体GLUT蛋白基因型发生改变蛋白基因型发生改变过度增殖过度增殖基因表达发生改变基因表达发生改变转录因子转录因子PKCAGEs形成形成氧化应激氧化应激IP3醇通路醇通路高渗高渗MAPK血胰岛素血胰岛素 血糖血糖 心血管并发症心血管并发症糖尿病并发心血管疾病的机制糖尿

10、病并发心血管疾病的机制-212胰岛素对血管损伤作用研究进展王旭开Department of Cardiovascular DiseaseDM与胰岛素供应的关系与胰岛素供应的关系 胰岛素敏感性胰岛素敏感性 胰岛素分泌胰岛素分泌大血管病变大血管病变 30% 50% 或外源或外源 50% 50% 70% -100% 或或150以上以上 40% 70% 150% 10%100% 100% 2 2型糖尿病型糖尿病 糖耐量低减糖耐量低减 出现胰岛素抵抗出现胰岛素抵抗 正常糖代谢正常糖代谢Leslie RDGLeslie RDG等，等，糖尿病发病的分子机制糖尿病发病的分子机制第第2222章章13胰岛素对血管

11、损伤作用研究进展王旭开Department of Cardiovascular Disease心脏的并发症心脏的并发症14胰岛素对血管损伤作用研究进展王旭开Department of Cardiovascular Disease 重度狭窄伴不稳定病变重度狭窄伴不稳定病变粥样斑粥样斑块块15胰岛素对血管损伤作用研究进展王旭开Department of Cardiovascular Disease高血糖高血糖 OR 高胰岛素血症高胰岛素血症n大血管病变及微血管病变是影响糖尿病大血管病变及微血管病变是影响糖尿病 患者丧残率的主要并发症患者丧残率的主要并发症n在在IGRIGR阶段阶段, ,大血管病变的

12、发病危险已经大血管病变的发病危险已经 显著增加显著增加nIGRIGR既是糖尿病发病的危险因素既是糖尿病发病的危险因素, ,也是大也是大 血管病变发病的危险因素血管病变发病的危险因素16胰岛素对血管损伤作用研究进展王旭开Department of Cardiovascular DiseaseMuniyappa, R. et al. Endocr Rev 2007;28:463-491胰岛素的心血管靶器官和作用胰岛素的心血管靶器官和作用17胰岛素对血管损伤作用研究进展王旭开Department of Cardiovascular Disease糖尿病的心血管致病性糖尿病的心血管致病性n糖毒性糖毒性

13、n脂毒性脂毒性nINS诱导的炎症介质毒性诱导的炎症介质毒性18胰岛素对血管损伤作用研究进展王旭开Department of Cardiovascular Disease糖毒性的证据糖毒性的证据nFPG与与PCI术后冠脉再狭窄关系术后冠脉再狭窄关系:301,5年年, 老年老年,269例例n4组组:7n结论结论:5.6以上组再狭窄和心脏事件显著增以上组再狭窄和心脏事件显著增 加加;生存率显著降低生存率显著降低苏海燕苏海燕,中华心血管病杂志中华心血管病杂志;2008,36(8):710-71319胰岛素对血管损伤作用研究进展王旭开Department of Cardiovascular Diseas

14、e脂毒性的证据脂毒性的证据n糖尿病心肌病糖尿病心肌病: 心肌间质纤维化和冠脉微心肌间质纤维化和冠脉微 血管病变血管病变;n正常正常:FFA 应激应激:GLU 胰抵抗胰抵抗:FFA以甘以甘 油三脂储存心肌细胞中油三脂储存心肌细胞中, 心肌舒张功能下心肌舒张功能下 降降,心力衰竭心力衰竭中华高血压杂志中华高血压杂志,2008,16(6):48820胰岛素对血管损伤作用研究进展王旭开Department of Cardiovascular Disease胰岛素诱导的炎症介质毒性胰岛素诱导的炎症介质毒性-诱导血管损伤诱导血管损伤n血管疾病是血管疾病是2 2型糖尿病患者最主要的死亡原型糖尿病患者最主要的

15、死亡原因因n针对血糖的治疗对于糖尿病大血管病变的减针对血糖的治疗对于糖尿病大血管病变的减 少并不令人满意少并不令人满意 n在接受介入治疗的患者中，和非糖尿病相比，在接受介入治疗的患者中，和非糖尿病相比，糖尿病患者有着更高的再狭窄率糖尿病患者有着更高的再狭窄率21胰岛素对血管损伤作用研究进展王旭开Department of Cardiovascular Disease内内 容容n胰岛素、糖尿病、大血管病变的关系胰岛素、糖尿病、大血管病变的关系n高胰岛素血症致大血管损伤的临床证据高胰岛素血症致大血管损伤的临床证据n高胰岛素对血管损伤的实验室证据高胰岛素对血管损伤的实验室证据n总结总结22胰岛素对血

16、管损伤作用研究进展王旭开Department of Cardiovascular Disease高胰岛素对血管损伤的临床证据高胰岛素对血管损伤的临床证据 n医源性高胰岛素血症常见于使用大剂量外医源性高胰岛素血症常见于使用大剂量外 源性胰岛素，以获得接近正常血糖浓度的源性胰岛素，以获得接近正常血糖浓度的 糖尿病患者，糖尿病患者，n尤以尤以2 2型糖尿病伴肥胖、胰岛素用量偏大者型糖尿病伴肥胖、胰岛素用量偏大者 常见。常见。23胰岛素对血管损伤作用研究进展王旭开Department of Cardiovascular Diseasen使用胰岛素治疗的中年使用胰岛素治疗的中年2 2型糖尿病并伴发冠型糖

17、尿病并伴发冠 脉事件的患者；脉事件的患者；n血清胰岛素和肽测量血清胰岛素和肽测量, ,血清胰岛素和肽血清胰岛素和肽 测量为自变量；测量为自变量； n均行冠状动脉造影检查。分别以病变冠状动均行冠状动脉造影检查。分别以病变冠状动 脉记分和病变冠状动脉支数为因变量；脉记分和病变冠状动脉支数为因变量； n进行单元直线相关分析和多元逐步回归分析。进行单元直线相关分析和多元逐步回归分析。 设设 计计24胰岛素对血管损伤作用研究进展王旭开Department of Cardiovascular Disease 观察对象观察对象 20002000年年6 6月至月至20072007年年8 8月住我院心血管内科的

18、月住我院心血管内科的 有明确有明确2 2型糖尿病诊断，并连续使用胰岛素治型糖尿病诊断，并连续使用胰岛素治 疗在三年以上的疗在三年以上的2 2型糖尿病患者有或无合并急型糖尿病患者有或无合并急 性心脏事件患者性心脏事件患者, ,共为共为8585例例34345454岁岁( (平均平均4444 岁岁), ), 男女不限，无高血压史，有血脂异常，男女不限，无高血压史，有血脂异常， 主要以甘油三酯增高为主。主要以甘油三酯增高为主。 25胰岛素对血管损伤作用研究进展王旭开Department of Cardiovascular Disease冠脉造影检查冠脉造影检查 病变冠脉支数病变冠脉支数:造影示腔内直径

19、狭窄造影示腔内直径狭窄50%的的 病病变累及左前降支、左回旋支或右冠脉的支数。变累及左前降支、左回旋支或右冠脉的支数。 病变冠脉记分病变冠脉记分:按狭窄程度分级计分按狭窄程度分级计分:25%狭窄狭窄, 1分分;26%50%狭窄狭窄,2分分;51%75%狭窄狭窄,3; 75% 狭窄狭窄,4分。若一支血管有多处狭窄分。若一支血管有多处狭窄,则以最则以最 狭窄病变的分数作为该支血管狭窄分数。若多支狭窄病变的分数作为该支血管狭窄分数。若多支 血管有狭窄血管有狭窄,则将各支血管狭窄分数累加即为该患则将各支血管狭窄分数累加即为该患 者病变冠脉记分。者病变冠脉记分。 26胰岛素对血管损伤作用研究进展王旭开D

20、epartment of Cardiovascular Disease结结 果果 胰岛素使用量与冠脉事件病例数的比较胰岛素使用量与冠脉事件病例数的比较 胰岛素日用量胰岛素日用量(IU) 冠脉事件患者冠脉事件患者(47例例) 1525 6 2635 8 3646 11 46 2227胰岛素对血管损伤作用研究进展王旭开Department of Cardiovascular Disease冠脉病变程度与胰岛素用量相关分析冠脉病变程度与胰岛素用量相关分析 胰岛素用量（胰岛素用量（IU/IU/日）日）病变冠脉支数病变冠脉支数病变冠脉记分病变冠脉记分小于小于150-231.316250-250.7826

21、351-271.2236452-3131.82大于大于463151.9828胰岛素对血管损伤作用研究进展王旭开Department of Cardiovascular Disease 伴发冠脉事件组血清胰岛素水平显著高于对照组，该伴发冠脉事件组血清胰岛素水平显著高于对照组，该 组病人日均胰岛素用量多数在组病人日均胰岛素用量多数在30 IU以上。以上。 冠脉事件组胰岛素及冠脉事件组胰岛素及C肽与病变冠状动脉记分呈显著肽与病变冠状动脉记分呈显著 正相关，病变冠状动脉支数与血清胰岛素和肽呈正正相关，病变冠状动脉支数与血清胰岛素和肽呈正 相关，并有浓度递增关系。相关，并有浓度递增关系。 逐步回归分析显

22、示血清胰岛素和肽与冠状动脉病变逐步回归分析显示血清胰岛素和肽与冠状动脉病变 程度独立相关。冠状动脉病变程度与胰岛素及程度独立相关。冠状动脉病变程度与胰岛素及C肽呈肽呈 正相关。血清胰岛素和肽与冠状动脉病变程度独立正相关。血清胰岛素和肽与冠状动脉病变程度独立 相关。相关。结结 果果29胰岛素对血管损伤作用研究进展王旭开Department of Cardiovascular DiseaseCAG病例病例: 对照组对照组30胰岛素对血管损伤作用研究进展王旭开Department of Cardiovascular DiseaseCAG病例病例:胰岛素组胰岛素组31胰岛素对血管损伤作用研究进展王旭开

23、Department of Cardiovascular Diseasen采用冠脉病变记分、病变冠脉支数两种方法采用冠脉病变记分、病变冠脉支数两种方法 评定冠脉病变程度评定冠脉病变程度, ,并与并与3 3个胰岛素敏感性指个胰岛素敏感性指 标作回归相关分析；标作回归相关分析；n病变冠脉支数与胰岛素敏感性指标作回归相病变冠脉支数与胰岛素敏感性指标作回归相 关分析的相关性最大关分析的相关性最大, ,其次为冠脉病变记分；其次为冠脉病变记分；n提示冠脉病变程度和范围的指标可靠提示冠脉病变程度和范围的指标可靠, ,与胰岛与胰岛 素及素及C C肽的相关性越好；肽的相关性越好；结结 论论32胰岛素对血管损伤作

24、用研究进展王旭开Department of Cardiovascular Diseasen胰岛素胰岛素C肽越高肽越高, 则冠脉病变程度越严重则冠脉病变程度越严重,这不但这不但 体现在冠脉病变的狭窄程度上，还体现在病变的体现在冠脉病变的狭窄程度上，还体现在病变的 个数或范围上；个数或范围上；n这提示胰岛素在血中的浓度增高，不仅与冠脉狭这提示胰岛素在血中的浓度增高，不仅与冠脉狭 窄相关联，更重要的是与动脉粥样硬化的发生和窄相关联，更重要的是与动脉粥样硬化的发生和 发展相关联；发展相关联；n医源性胰岛素的剂量对医源性胰岛素的剂量对2型糖尿病合并冠状动脉型糖尿病合并冠状动脉 事件的病理生理急性改变存在

25、显著的相关关系。事件的病理生理急性改变存在显著的相关关系。结结 论论33胰岛素对血管损伤作用研究进展王旭开Department of Cardiovascular Disease内内 容容n胰岛素、糖尿病、大血管病变的关系胰岛素、糖尿病、大血管病变的关系n高胰岛素血症致大血管损伤的临床证据高胰岛素血症致大血管损伤的临床证据n高胰岛素对血管损伤的实验室证据高胰岛素对血管损伤的实验室证据n总结总结34胰岛素对血管损伤作用研究进展王旭开Department of Cardiovascular Disease insulin insulin receptor RAS IRS-1和和IRS-2 RAF

26、MEEK PI3K PAPK VSMC growth NO分泌增加分泌增加 migration 糖摄入增加糖摄入增加高胰岛素对血管损伤的实验室证据高胰岛素对血管损伤的实验室证据35胰岛素对血管损伤作用研究进展王旭开Department of Cardiovascular DiseaseMuniyappa, R. et al. Endocr Rev 2007;28:463-491General features of insulin signal transduction pathways36胰岛素对血管损伤作用研究进展王旭开Department of Cardiovascular Diseas

27、e一、胰岛素对血管平滑肌细胞作用一、胰岛素对血管平滑肌细胞作用 高胰岛素血症可促进高胰岛素血症可促进VSMC发生表型转变，合成表发生表型转变，合成表 型的型的VSMC中常见有中常见有脂滴和髓样结构，脂滴和髓样结构，收缩功能降收缩功能降 低而分泌功能亢进。合成型低而分泌功能亢进。合成型VSMC内酸性胆固醇酶内酸性胆固醇酶 活性较收缩型低。导致胆固醇及其脂在胞质内积聚，活性较收缩型低。导致胆固醇及其脂在胞质内积聚， 更易形成更易形成肌源性泡沫细胞肌源性泡沫细胞 VSMC增殖、迁移是原发性高血压、动脉粥样硬化的增殖、迁移是原发性高血压、动脉粥样硬化的 特征性变化。体内与体外实验均证实高浓度胰岛素可特

28、征性变化。体内与体外实验均证实高浓度胰岛素可 通过多种途径发挥其其通过多种途径发挥其其致丝分裂作用，促进平滑肌细致丝分裂作用，促进平滑肌细 胞胞DNA的合成，刺激平滑肌细胞的增殖和迁移的合成，刺激平滑肌细胞的增殖和迁移37胰岛素对血管损伤作用研究进展王旭开Department of Cardiovascular Disease胰岛素胰岛素-蛋白激酶调控血管平滑肌细胞增殖蛋白激酶调控血管平滑肌细胞增殖 胰岛素作用下胰岛素作用下PKC亚型改变与细胞增殖的关系亚型改变与细胞增殖的关系n人人VSMC细胞中主要有细胞中主要有PCK、PCK、PCK三种三种 亚型，发现亚型，发现63%分布在胞浆中；分布在胞

29、浆中；n人人VSMC细胞细胞PKC总量随着总量随着PMA、胰岛素浓度的增加、胰岛素浓度的增加 而增加，人而增加，人VSMC细胞数也随着细胞数也随着PMA、胰岛素的浓度、胰岛素的浓度 增加而增加；增加而增加；nPKC、PKC亚型在亚型在PMA、胰岛素干预后向核内区、胰岛素干预后向核内区 域转移。人域转移。人VSMC细胞中以细胞中以PKC、三型含量较三型含量较 多，其中多，其中PKC、PKC有转位现象。有转位现象。 （1993-2007 年国家自然科学基金资助项目）年国家自然科学基金资助项目）38胰岛素对血管损伤作用研究进展王旭开Department of Cardiovascular Disea

30、se 将将PKC阻断后细胞内阻断后细胞内MAPK活性明显降低。活性明显降低。证证 实胰岛素对血管平滑肌细胞增殖除实胰岛素对血管平滑肌细胞增殖除IP3途径外途径外还存在有还存在有PKCMAPK通路。通路。 胰岛素胰岛素PKCMAPK可通过对细胞内原癌可通过对细胞内原癌基基 因的表达血管平滑肌细胞增高而引起增殖。因的表达血管平滑肌细胞增高而引起增殖。 胰岛素对血管平滑肌细胞增殖除胰岛素对血管平滑肌细胞增殖除IP3途径途径外还存在有外还存在有PKCMAPK通路通路39胰岛素对血管损伤作用研究进展王旭开Department of Cardiovascular Disease10nM胰岛素可导致培养的大

31、鼠血管平滑肌细胞增殖，胰岛素可导致培养的大鼠血管平滑肌细胞增殖，基因芯片检测发现是多基因共同的作用，而不是单一基因芯片检测发现是多基因共同的作用，而不是单一或几个基因作用的结果或几个基因作用的结果胰岛素导致血管平滑肌细胞内胰岛素导致血管平滑肌细胞内 相关生长因子群表达升高相关生长因子群表达升高40胰岛素对血管损伤作用研究进展王旭开Department of Cardiovascular Disease大鼠大鼠VSMC在胰岛素干预前后细胞蛋白二维电泳图在胰岛素干预前后细胞蛋白二维电泳图谱，也显示胰岛素引起血管平滑肌细胞增殖及表型谱，也显示胰岛素引起血管平滑肌细胞增殖及表型转换也是多种蛋白表达差异

32、共同作用的结果，与基转换也是多种蛋白表达差异共同作用的结果，与基因芯片的结果相符因芯片的结果相符pI 3-10SDS-PAGE41胰岛素对血管损伤作用研究进展王旭开Department of Cardiovascular Disease Insulin(-) insulin(+)M WKY SHR WKY SHR-SM500 bp250 bp500 bp250 bp Insulin(-) insulin(+) M WKY SHR WKY SHRMatrix gal500bp250 bp Insulin(-) insulin(+) M WKY SHR WKY SHROPN-actin-actin

33、-actinRelative abundanceAB42胰岛素对血管损伤作用研究进展王旭开Department of Cardiovascular Disease胰岛素介导的胰岛素介导的VSMC增殖的分增殖的分子机制子机制 ？ 探讨基因外的改变对胰岛素介导的探讨基因外的改变对胰岛素介导的VSMC异常增殖相关基因表达的调控机制异常增殖相关基因表达的调控机制43胰岛素对血管损伤作用研究进展王旭开Department of Cardiovascular Disease 胰岛素胰岛素MAPK 组蛋白乙酰化组蛋白乙酰化/去乙酰化去乙酰化VSMC异常增殖异常增殖？作用方式作用方式 VSMC增殖相关基因表达

34、增殖相关基因表达基因表达变化基因表达变化？44胰岛素对血管损伤作用研究进展王旭开Department of Cardiovascular DiseasePD98059阻断阻断MAPK活性活性TSA阻断组蛋白去乙酰化阻断组蛋白去乙酰化胰岛素干预胰岛素干预组蛋白乙酰化水平组蛋白乙酰化水平相关基因及蛋白表达相关基因及蛋白表达MAPK表达及酶活性表达及酶活性相关基因及蛋白表达相关基因及蛋白表达胰岛素干预胰岛素干预研究内容研究内容45胰岛素对血管损伤作用研究进展王旭开Department of Cardiovascular Disease乙酰化乙酰化H3GAPDH胰岛素作用胰岛素作用VSMCs后，细胞内

35、组蛋白乙酰化水平的免疫印迹结果后，细胞内组蛋白乙酰化水平的免疫印迹结果1:对照 2. 胰岛素组 3: pGCsilencerU6 MAPK siRNA2胰岛素 4.PD59098胰岛素组蛋白乙酰化组蛋白乙酰化H3表达水平与表达水平与MAPK间的关系间的关系1 2 3 4 46胰岛素对血管损伤作用研究进展王旭开Department of Cardiovascular Disease组蛋白乙酰化的水平与组蛋白乙酰化的水平与MAPK基因启动子区的关系基因启动子区的关系1：对照 2：胰岛素组 3：PD59098组 4：pGCsilencerU6 MAPK siRNA2 5：pGCsilencerU6

36、MAPK siRNA2胰岛素组胰岛素作用胰岛素作用VSNCs后后ERK1的的CHIP结果结果 1 2 3 4 5 219bpMAPK被抑制后（被抑制后（PD98059和和siRNA作用作用VSMC后，再用后，再用100nM胰岛素作用胰岛素作用VSMCs，用，用CHIP（免疫共沉淀）法检（免疫共沉淀）法检测测MAPK启动子区域的变化启动子区域的变化,结果显示其启动子区结果显示其启动子区PCR产产物是降低的（与对照比物是降低的（与对照比)47胰岛素对血管损伤作用研究进展王旭开Department of Cardiovascular Disease组蛋白去乙酰化阻断后组蛋白去乙酰化阻断后MAPK的表

37、达的表达pMAPK(UD)48胰岛素对血管损伤作用研究进展王旭开Department of Cardiovascular Disease胰岛素干预后胰岛素干预后VSMCs SM-的表达明显降低的表达明显降低A：未加胰岛素对照组：未加胰岛素对照组 B: 加胰岛素组加胰岛素组 C：TSA+胰岛素组胰岛素组ABC49胰岛素对血管损伤作用研究进展王旭开Department of Cardiovascular Disease二、胰岛素对血管内皮细胞的作用二、胰岛素对血管内皮细胞的作用n在动物实验中生理或低浓度胰岛素在动物实验中生理或低浓度胰岛素(0. 11 nmol/L) 可以促进可以促进EPCs的增殖

38、和的增殖和NO分泌分泌,延缓延缓EPCs衰老衰老,n而而10 nmol/L胰岛素对于胰岛素对于EPCs增殖仅有较弱的促进增殖仅有较弱的促进, 对于衰老和对于衰老和NO分泌无明显影响。分泌无明显影响。n而而Schatteman等发现等发现1 2 mol/L 胰岛素可以抑胰岛素可以抑 制制EPCs增殖增殖,提示胰岛素对提示胰岛素对EPCs也有双相作用也有双相作用,但其但其 作用机制尚不清楚。作用机制尚不清楚。 （Curr Diab Rep 2003; 3:279288）50胰岛素对血管损伤作用研究进展王旭开Department of Cardiovascular Diseasen高胰岛素血症是冠心

39、病独立的危险因素高胰岛素血症是冠心病独立的危险因素n最主要是胰岛素对内皮细胞的双相作用最主要是胰岛素对内皮细胞的双相作用n生理浓度促生理浓度促NO合成和释放合成和释放,发挥抗动脉粥样硬化作用发挥抗动脉粥样硬化作用n高浓度时损害内皮高浓度时损害内皮,表现致动脉粥样硬化作用。表现致动脉粥样硬化作用。（Curr Diab Rep 2003; 3:279288.）胰岛素对内皮的双向作用胰岛素对内皮的双向作用51胰岛素对血管损伤作用研究进展王旭开Department of Cardiovascular Diseasen磷酸化磷酸化Akt可以导致内皮一氧化氮合酶可以导致内皮一氧化氮合酶( eNOS)磷酸化磷酸化,使使 eNOS 酶活性增强酶活性增强,从而增加从而增加NO释放释放, 所以在生理浓度下所以在生理浓度下 胰岛素有益于胰岛素有益于EPCs功能改善。功能改善。n而在胰岛素抵抗时，高浓度胰岛素使而在胰岛素抵抗时，高浓度胰岛素使IRS/PI3K/Akt通路受通路受 阻，高浓度胰岛素对阻，高浓度胰岛素对EPCs的损伤作用可能是胰岛素抵抗的损伤作用可能是胰岛素抵抗 致动脉粥样硬化的机制之一。致动脉粥样硬化的机制之一。Nat Rev Mol Cell Biol 2006; 7:8596；J Biol Chem 2003; 278:3082130