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文档简介
1、专题3胚胎工程测试题第一部分:基础知识填空胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术,如、等技术。(P59)经过处理后获得的胚胎,还需移植到雌性动物体内生产后代,以满足人类的各种需求。胚胎工程的许多技术,实际是在条件下,对动物和条件进行的模拟操作。(P61)一、动物胚胎发育的基本过程1、精子的发生:场所:时间:从开始,直到。过程:第一阶段:位于曲细精管管壁的精原细胞进行数次,产生大量的,其中部分精原细胞经过染色体复制和其他物质的合成,进一步形成。第二阶段:初级精母细胞连续进行分裂(即,包括和),形成个细胞。第三阶段:变形形成精子。变为精子头的主要部分,发育为头部的顶体,演变
2、为精子的尾,聚集在尾的基部形成线粒体鞘,细胞内的其它物质浓缩为,随精子的成熟过程向移动,直到最后。哺乳动物成熟的精子外形似,分、和三大部分。不同种动物精子的,略有不同,与动物的无关。2、卵子的发生场所:过程:第一阶段时间:场所:过程:卵原细胞大量的卵原细胞卵原细胞初级卵母细胞初级卵母细胞被卵泡细胞包围,形成第二阶段时间:场所:卵巢的卵泡中过程:初级卵母细胞口第一极体第三阶段时间:场所:条件:次级卵母细胞受精子激活后进行分裂过程:次级卵母细胞合子+第二极体排卵是指从中排出,而并非卵泡从卵巢中排出。刚排出的卵子不是成熟的卵子。(排出的卵子的结构示意图见课本62页图3-4)判断卵子是否受精的重要标志
3、是:在的间隙可以观察到时,说明卵子已经完成了受精。3、精子和卵子发生的异同(1)相同点:最初阶段均为分裂,不断增加原始生殖细胞的数量,经过分裂才能形成精子或卵子。(2)不同点:名称精子的发生卵子的发生场所睾丸的曲细精管卵巢输卵管时期从初情期开始胚胎在性别分化以后是合义形变形/、艾形细胞质分裂均等不均等结果形成4个精子细胞MI和MH是否连续连续不连续精子和卵子在发生上的重要区别是:卵泡的形成和在卵巢内的储备(即间期)是在(即期)完成的。4、受精:精子和卵子结合形成(即受精卵)的过程(三)受精(1)过程:受精包括阶段和阶段。在自然条件下,受精是在内完成的。受精前的准备阶段:精子:刚刚排出的精子,不
4、能立即与卵子受精,必须发生相应的生理变化后,才能获得受精能力。卵子的准备卵子都要在输卵管中进一步成熟,到时,才具备受精能力。(动物排出的卵子成熟程度,有的可能是初级卵母细胞,如马、犬等,有的可能是次级卵母细胞,如猪、羊等。)哺乳动物的受精过程主要包括:,进入,和第一步:精子穿越放射冠和透明带获能后的精子与卵子相遇时,首先发生,使内的酶释放出来。是包围在卵子外面的细胞群,精子所释放的可直接溶解之间的物质,形成精穿过放射冠的精子立即与接触,随后将透明带溶出一条孔道,精子借穿越透明带,并接触。在精子触及的瞬间,会产生阻止后来的精子进入透明带的生理反应,这个反应称做,它是防止多个精子进入透明带,引起多
5、精子入卵受精的。第二步:进入卵黄膜只有穿过透明带的精子才能与接触。由于表面有大量的,当精子与卵黄膜接触时,立即被微绒毛抱合,随后,精子和相互融合,精子入卵。精子入卵后,会立即发生一种生理反应,拒绝其他精子再进入卵内,这种生理反应称做C这是防止多精入卵受精的。第三步:原核形成精子入卵后的另一个变化,是,并且原有的破裂;随后,精子形成一个新的,最后形成一个比原来精子核还大的核,叫做。与此同时,精子入卵后被激活的卵子完成排出后,形成,一般略小于。第四步:配子结合形成合子雌、雄原核充分发育后,移动,彼此接触,二者体积、,两组合为一组,形成一个含的,也就是。受精过程至此结束,受精卵的也由此开始。5、早期
6、胚胎发育三)早期胚胎发育每一个细胞都具有发A育成完整胚胎的潜能,属于细胞。受叩卵(个体发育的起点)卵裂分裂方式:每个细胞体积:胚胎总体积:不变或略有缩小桑族胚(细胞数目达到32个左右)囊胚:细胞开始出现内细胞团(聚集在胚胎一端,细胞个体较):将来发育成胎儿的滋养层细胞(沿透明带内壁扩展和排列的、个体较的细胞):将来发育成:胚胎内部含液体的囊腔:囊胚进一步扩大,会导致的破裂,胚胎从其中伸展出来,这一过程叫做孵化。原肠胚:内细胞团分化为三胚层,即和中胚层,滋养层发育为胎儿的胎膜和胎盘。二、体外受精和早期胚胎培养1、试管动物技术(1) 概念:试管动物技术是指通过人工操作使卵子和精子在条件下成熟和受精
7、,并通过培养发育为后,再经移植产生后代的技术。(2) 试管动物与克隆动物的比较试管动物克隆动物生殖方式生殖生殖是否遵循遗传规律技术手段体外受精、技术、胚胎移植(3) 试管婴儿和母亲正常怀孕生产的过程相比较相同点:都通过生殖产生,在发育形成胎儿。不同点:“试管婴儿”受精作用和生殖细胞的成熟在体外,并在体外发育成早期胚胎后进行胚胎移植。2、体外受精哺乳动物的体外受精过程主要包括、和。(4) 卵母细胞的采集和培养方法对小型动物(如小鼠、兔、猪羊等)一般采用:用处理,使其排出更多的卵子,然后,从中冲取卵子(即卵母细胞),直接与获能的精子在体外受精。对大型动物(如牛等)一般采用从屠宰场已屠宰母畜的中采集
8、卵母细胞或从的卵巢中吸取卵母细胞。(此时采集的卵母细胞为卵母细胞,要在体外经人工培养成熟后,才能与获能的精子在体外受精。)(5) 精子的采集和获能采集方法r:采用仿生学的方法,模仿发情雌性动物引导环境设计的装置,它能够满足雄性动物交配时对、和的要求,同时配有与采精动物相适应的活台畜或假台畜I:适于猪和犬等体型较小,易于控制的家畜。电刺激法L:即将收集的精子放入人工配制的中,培养一段时间,使精子获能。适用获能方法J于等动物的精子。1:即将精子放在一定浓度的或钙离子载体A23187溶液中,用化学药物I诱导精子获能。适用于等家畜。(3)受精:获能的精子和培养成熟的卵子,一般情况下都可以在或中完成受精
9、过程。3、胚胎的早期培养(1) 培养目的:检测和的发育能力(2) 培养液的成分:哺乳动物胚胎的培养液中含有水、无机盐、有机盐、维生素、以及动物等物质。(即两盐、两素、两酸)(3) 胚胎去向:当胚胎发育到的阶段时,可将其取出向受体动物移植,或保存。(不同动物胚胎移植的时间不同,牛、羊一般要培养到阶段才进行移植,人的试管胚胎可在816个细胞阶段移植。)4、“试管牛”工厂化生产的技术流程图采集良种母牛的卵产细胞卵母细胞的mn中期_>采集良种公的精子T精子受精早期胚胎(适宜阶段)受体牛J妊娠分娩试管牛试管动物技术需要用到、技术三、胚胎移植和胚胎分割移植1、胚胎工程技术包括体外受精、和胚胎干细胞培
10、养等技术。2、胚胎移植(1)概念:胚胎移植是指将动物体内的早期胚胎,或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎,移植到的、相同的其他雌性动物的体内,使之继续发育为新个体的技术。胚胎来源:雌性动物体内早期胚胎(P77)通过体外受精得到(P72)动物转基因受精卵经培养得到(P13)动物通过哺乳动物体细胞核移植及培养而得到(P48)动物对受体的要求:同一;与供体处于相同的;雌性动物。(2)胚胎移植的基本程序选择供体母牛受体母牛超数排卵处理供体一公牛胚胎移植到)3C中保存妊娠检查I分娩(产下胚胎移植的犊牛)(3)胚胎移植成功的标志:移植的胚胎在受体内能正常发育并分娩。(4)胚胎移植的生理学基础哺乳动物排卵后
11、,在一段时间内,同种动物的供、受体生殖器官的生理变化是的,这为供体的胚胎移入受体提供了,是胚胎能够移入受体的生理基础。哺乳动物的早期胚胎形成后,在一定时间内与母体子宫建立组织上的联系,而是处于状态,这为胚胎的收集提供了可能,是胚胎收集的生理基础。受体对移入子宫的外来胚胎基本不发生反应,这为胚胎在受体内的提供了可能,是胚胎在受体内能够存活的生理基础。供体胚胎可与受体子宫建立联系,但在孕育过程中不影响供体胚胎的,这是供体胚胎正常发育的生理基础。(5)胚胎移植成功与否的两个重要条件一般应在的雌性供体和受体之间进行供、受体的要相同(关键)即:供、受体母畜的时间一致;胚胎移入受体子宫的位置应与其在供体内
12、的位置。(6)实质:是,而胚胎本身的遗传物质并不发生改变,因此各种性状能保持原来的优良特性。(P76)(7)优势:充分发挥性优良个体的,从而大大缩短了供体本身的,增加一生繁殖的后代数量。(8)胚胎移植在胚胎工程中的位置:胚胎移植是胚胎工程其他技术的“工序”。3、胚胎分割(1)概念:胚胎分割是指采用方法将早期胚胎切割成2等份、4等份或8等份等,经移植获得或(2)选择的胚胎:(原因:细胞或分化程度低,具有全能性,分割后易成活;分割时,若细胞数目太少则易对细胞造成损伤,影响胚胎的恢复和进一步发育,故不选择胚胎。)(3)使用的主要仪器设备:和(4)特点:来自同一胚胎的后代具有相同的。(胚胎分割可以看做
13、动物或的方法之一。)(5)优势:可成倍增加胚胎数量,快速繁殖良种家畜(即提高胚胎的)。(6)基本过程:选择胚胎一一将胚胎移入盛有操作液的培养皿中一一用进行分割一一移植胚胎给受体着床广仔。注:对囊胚阶段的胚胎进行分割时,要注意将,否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。(7)局限性:刚出生的动物体重偏低,毛色和斑纹上还存在差异等;采用胚胎分割技术产生同卵多胚的可能性是的,最常见的为。(胚胎分割的份数越多,操作的难度会越,移植的成功率也越。)四、胚胎干细胞1、概念:胚胎干细胞(简称或细胞),是由早期胚胎(囊胚的)或中分离出来的一类细胞。2、特点(1)形态:。(2)功能:具有发育的性,即可以分化为成
14、年动物体内任何一种组织细胞。(3)培养ES细胞可以增殖而不分化,对它可以进行冷冻保存,也可进行遗传改造。(培养条件:在细胞上或添加的培养液中培养,能够维持的状态。)3、胚胎干细胞的主要用途(1)将胚胎干细胞核移植到去核的卵母细胞中进行克隆。(2)通过ES细胞,获得移植器官,以解决目前临床上存在的和的问题。(3)ES也是研究体外细胞分化的理想材料。ES细胞在,或在的培养液中,能够维持不分化的状态。在培养液中加入,如牛黄酸、丁酰环腺甘酸等化学物质时,就可以诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化。(4)用于治疗人类由于、或引起的疾病,如帕金森综合症、少年糖尿病、老年痴呆症、肝衰竭、心衰竭和成骨不良等。
15、注:干细胞移植治疗的主要特点是:安全、低毒性或无毒性,无反应。第二部分:胚胎工程专题高考题汇总1、(2013山东卷)35.(8分)【生物一一现代生物科技专题】科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导性多能干细胞克隆鼠,流程如下:(iPS),继而利用iPS细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的诱导因子黑鼠(体细胞供体)体细胞iPS细胞特殊处理灰鼠2细胞胚胎(胚胎供体)囊胚(内细胞团不发育)重组囊胚克隆鼠(1)从黑鼠体内获得体细胞后,对其进行的初次培养称为,培养的细胞在贴壁成长至充链满培养皿底时停止分裂,这种现象称为。(2)图中2细胞胚胎可用人工方法从灰鼠输卵管内获得,该过程称为,也可从灰鼠体内取出卵子,通
16、过后进行早期胚胎培养获得。(3)图中重组囊胚通过技术移入白鼠子宫内继续发育,暂不移入的胚胎可使用方法保存。(4)小鼠胚胎干细胞(ESS可由囊胚的分离培养获得,iPS与ES细胞同样具有发育全能性,有望在对人类iPS细胞进行定向后用于疾病的细胞治疗。必答题(10分)2、(2013福建卷)33.生物-现代生物科技专题克隆猪成功率较低,与早期胚胎细胞的异常凋亡有关。基因转录水平,进而了解该基因与不同胚胎时期细胞凋亡的关系。Bcl-2基因是细胞凋亡抑制基因,用PCR技术可以检测该克隆猪的培育及该基因转录水平检测流程如图。卵母细胞良种猪一体细胞胚胎移植重组细胞一早期胚胎受体子宫克隆猪不同发育时期提取TXP
17、CR总mRNAcDNA扩增产物请回答:(1)图中重组细胞的细胞核来自细胞,早期胚胎移入受体子宫后继续发育,经桑棋胚、囊胚和胚最终发育为克隆猪。(2)在PCR过程中可检测出cDNA中Bcl-2cDNA的分子数,进而计算总mRNA中Bcl-2mRNA的分子数,从而反映出Bcl-2基因的转录水平。图中X表不过程。从基因组数据库中查询Bcl-2mRNA的核甘酸序列,以便根据这一序列设计合成用于PCR扩增,PCR扩增过程第一轮循环的模板是。3、(2014福建卷)33.生物-现代生物科技专题必答题(10分)Rag基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag基因缺失小鼠进行
18、基因治疗。其技术流程如图:法也干蒯胞ES期施ES奶胞(1)步骤中,在核移植前应去除卵母细胞的。(2)步骤中,重组胚胎培养到期时,可从其内细胞团分离出ES细胞。设计引物,利用PCR技术扩增(3)步骤中,需要构建含有基因Rag?的表达载体。可以根据Rag2基因的Rag2基因片段。为将该片段直接连接到表达载Rag2基因片段。用Hindlll和PstI限制酶分别在片段两侧进行酶切获得体,所选择的表达载体上应具有酶的酶切位点。(4)为检测Rag2基因的表达情况,可提取治疗后小鼠骨髓细胞的,用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验。4、(2013新课标卷I)40.【生物一一选彳3现代生物科技专题】(15分)阅读
19、如下材料:材料甲:科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵在,得到了体型巨大的超级小鼠”;科学家采用农杆菌转化法培育出转基因烟草。材料乙:T4溶菌酶在温度较高时易失去活性,科学家又编码T4溶菌酶的基因进行改造,使其表达的T4溶菌酶的第3位的异亮氨酸变为半胱氨酸,在该半胱氨酸与第97为的半胱氨酸之间形成了一个二硫键,提高了T4溶菌酶的耐热性。材料丙:兔甲和兔乙是同一物种的两个雌性个体,科学家将兔甲受精卵发育成的胚胎移植到兔乙的体内,成功产出兔甲的后代,证实了同一物种的胚胎可在不同个体的体内发育。回答下列问题:(1)材料甲属于基因工程的范畴。用的工具酶有是(2)材料乙属于成,对原因是组成该酶肽链的将基
20、因表达载体导入小鼠的受精卵中常用。在培育转基因植物时,常用农杆菌转化工程范畴。该工程是指以分子生物学相关理论为基础,,进行改造,或制造制造一种的技术。在该实例中,引起(4)材料丙属于胚胎工程的范畴。序列发生了改变。胚胎移植是指将获得的早期胚胎移植到雌性动物体内,使之继续发育成新个体的技术。在资料丙的实例中,兔甲称为法。构建基因表达载体常法,农杆菌的作用通过基因修饰或基因合T4溶菌酶空间结构改变的种的、生理状况相同的另一个体,兔乙称为体。第三部分:高考题参考答案及解析1、(1)原代培养接触抑制(2)冲卵体外受精(3)胚胎移植冷冻(或低温)(4)内细胞团细胞诱导分化【解析】(1)原代培养指将动物组
21、织用酶处理成单个细胞后进行的初次培养。接触抑制指贴壁的细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止裂增殖的现象。(2)将早期胚胎从母牛子宫中冲洗出来的方法叫冲卵。(3)暂不进行胚胎移植的胚胎可放入一196C的液氮中冷冻保存。(4)胚胎干细胞简称ES或EK细胞,是由早期胚胎或原始性腺分离出来的一类细胞。iPS与ES细胞一样,可通过诱导定向分化修补某些功能异常的细胞来治疗疾病。2、(1)体原肠(2)、反转录、引物Bcl-2cDNA【解析】(1)图中重组细胞的细胞核来自良种猪的体细胞,胚胎发育过程中囊胚继续发育形成原肠胚。(2)以mRNA为模板形成DNA的过程为反转录(或逆转录)。PCR扩增的前提是需要有一段已知的核甘酸片段,以便根据这一序列合成引物。图示可知,PCR扩增过程第一轮循环的模板是以mRNA为模板反转录形成的cDNA,因引物是依据Bcl-2mRNA的核甘酸序列合成,故模板实际是其中的Bcl-2cDNA。3、【答案】(10分)(1)细胞核(2)囊胚(3)核甘酸序列Hindm和PstI(4)蛋白质【解
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