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文档简介

1、2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体新课导入乙肝病毒模式图l 一般来说,医院如何检测人体内是否存在乙肝病毒? 检测抗原l 乙肝病毒用什么检测? 相应的抗体思思考考题题学习目标1.通过观察图片、阅读文本,能够了解动物细胞融合的原理、过程和意义。2.通过师生交流、图像分析,能够理解单克隆抗体制备的过程和应用。新知探究诱导方式物理法:离心、振荡、电融合技术化学法:聚乙二醇生物法:灭活的仙台病毒一、动物细胞融合鼠B淋巴细胞 鼠骨髓瘤细胞人工诱导杂交瘤细胞u 动物细胞融合过程 动物细胞融合(技术):是指(在一定的条件下)两个或多个细胞融合形成一个单核细胞的过程。u 动物细胞融合技术的意义和应用植物体细胞

2、杂交和动物细胞融合的比较比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合细胞融合原理细胞膜的流动性细胞膜的流动性细胞融合的方法去除细胞壁后诱导原生质体融合使细胞分散后诱导细胞融合诱导方法电刺激化学(聚乙二醇)电融合、PEG、灭活的仙台病毒用途获得杂种植株制备单克隆抗体二、单克隆抗体u 单克隆 由一个细胞经过无性繁殖(多次有丝分裂)形成的一个细胞群,叫一个克隆,即单克隆。u 单克隆抗体 由一个效应B淋巴细胞经过无性繁殖形成的一个细胞群产生的化学性质单一,特异性强的抗体,即单克隆抗体。(1)传统抗体生产方法:抗原动物体内抗体刺激效应B(抗体不纯)筛选单一效应B细胞不能增值,产生大量抗体特异性差、纯度低;产量低、

3、反应不够灵敏。(2)单克隆抗体制备过程:l 设计方案:一个B淋巴细胞小鼠骨髓瘤细胞杂交瘤细胞+化学性质单一、特异性强的抗体。l 特性:思考问题1、本过程利用了哪些原理?免疫原理,细胞融合原理和动物细胞培养原理这样融合成的杂交瘤细胞,继承了双亲细胞的遗传物质,不仅具有B细胞分泌抗体能力,而且还有无限增殖的本领,因而可以获得大量单克隆抗体2、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合?l 单克隆抗体的应用:疾病的诊断、治疗和预防l 优点:特异性强,灵敏度高,优越性强l 临床应用:单抗探针l 正在研究:用单克隆抗体治疗癌症课堂小结动物细胞融合单克隆抗体制备过程:原理:细胞膜的流动性意义:突破有性杂交局限,

4、使远缘杂交成为可能应用:主要用于制备单克隆抗体制备过程:特点:特异性强,灵敏度高,产量大应用:用作诊断试剂,治疗疾病和运载药物随堂测试1、在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中,正确的是()A结果是相同的B杂种细胞的形成过程基本相同C操作过程中酶的作用相同D诱导融合的手段相同B2、单克隆抗体制备过程中,骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后,要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞,在这种培养基上不能存活增殖的细胞是( )淋巴细胞小鼠骨髓瘤细胞B淋巴细胞自身融合细胞小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞杂交瘤细胞A BC D C3、单克隆抗体制备过程中培育的杂交细胞是( )A由小鼠能产生抗体的B淋巴细胞与肝细胞融合 B由小鼠一个B淋巴细胞诱导融合而成 C由小鼠一个B淋巴细胞与肌瘤细胞诱导融合而成 D由小鼠一个B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合而成 D4、生产单克隆抗体时,在培养液中加入某种试剂能筛选出杂交瘤细胞,因为该试剂( )A.能抑制淋巴细胞和杂交瘤细胞的DNA复制B.能阻止淋巴细胞的原癌基因被激活C.选择性抑制骨髓瘤细胞的DNA复制 D.能阻止杂交瘤细胞核糖体上所有蛋白质合成C5、科学家们用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合,得到杂交瘤细胞,经培养可产生大量

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