无创产前筛查采血操作规范_第1页
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文档简介

1、附件3胎儿染色体非整倍体(T21、T18、T13)检测样本采集手册一、受 检 者 准 备1检测对象:孕周范围为孕12-24周的孕妇。2采样体位:坐位取血,且在采血前患者需要有10分钟时间稳定自己的体位。【注意事项】要求受检孕妇先进行B超检测,确认胎儿为单活胎。采血前24小时内避免运动和饮酒,不宜改变饮食习惯和睡眠习惯。二、样 本 采 集 前 准 备1、知情同意书签署:送检医生与受检者及其家属作良好沟通,告知该检测的重要性、临床意义及潜在的风险,并指导受检者签署知情同意书。对于孕周大于24周并坚持要求进行该检测的受检者,由送检医生指导其签署知情同意书补充条款。2、送检单填写:要求用钢笔或签字笔填

2、写,并使用正楷字体,字迹清晰,填写完整。3、送检单必填信息:送检单位、送检医生、采血日期、受检者姓名、年龄、孕周、B超检查结果、身份证号码、联系电话。4、信息核对:仔细核对送检单和受检者的基本信息,确保一致;检查受检者是否按照医嘱准备,并向其解释操作目的以取得配合。5、样本标识:在采集管、知情同意书、送检单上贴上样本唯一条码, 并注明受检者姓名、年龄、孕周、检验项目等信息,确保与送检单一致。【注意事项】1粘贴条码标签时,应使条码与采集管的管长平行,字母朝管口方向,避免以环绕管壁粘贴的方式使管周被遮挡,而无法清晰看到管内样本情况。(条码7个,分配:患者一个、采血机构一个、保健所3个、保健院一个、

3、检测中心一个)2. 样本采集后使用的条码必须为抗冻条码,并且粘贴牢固,确保在运输、检测、储存过程中不会脱落或字迹模糊不清。三、样本采集1、采样器:医用一次性采血针、10 mL EDTA抗凝管、灭菌棉签、止血带、消毒液。2、采集操作:全血标本的采集使用普通的10mlEDTA采血管:严格按照实验室操作技术规范的要求采取10 mL孕妇外周血,采血后请立即缓慢颠倒6次使血液与管内成分混匀(如图1),拖延颠倒混匀时间可能会造成检测失败。混匀后立即放直立于4冰箱内,并在6个小时内进行血浆分离。按照无创产前检测血浆分离要求操作(见附件),分离后样本放入-20冰箱储存。血浆样本需在0以下冷冻运输,不应超过72

4、小时图1. 颠倒混匀示意图【注意事项】1.不可使用肝素抗凝的采血管进行取样.。2.颠倒混匀时动作应轻柔,防止溶血,影响检测结果的准确性。3.禁止将普通EDTA抗凝样本和血浆样本在室温状态下放置。4.全血离体后必须在6小时进行血浆分离,防止母体有核细胞破裂,增加检测背景,影响检测结果的准确性5.未采血的Streck Cell-Free DNA BCT储存温度为18-25,禁止将已采血的Streck Cell-Free DNA BCT 存放于4或以下。四、标本递送1甲方采集血标本后,4小时内连同送检单、知情同意书、知情同意书补充条款(如适用),该部分资料医院均需留有备,一同送到旗县区约定的标本收集

5、机构 (有能力分离血浆的医疗机构) 进行血浆分离及保存。(血浆分离操作见附件)2血浆样本应保存于标准的 2mL EP 管,并用封口膜密封管口,以防止样本溢出;3寄送包装箱应为壁厚 6cm 以上的硬质泡沫箱,泡沫箱内容量视样本量可适当调整;4血浆样本寄送采用干冰运输,寄送所用的干冰量为 10 公斤/2-3 天,15 公斤/4-5 天,可根据运输时间长短适当增加用量。保证样本到达生产地,干冰有剩余。5将复核后需寄送的血浆样本及收集的白细胞管放入冻存盒内,并用保鲜袋将冻存盒封好,所有将纸质送检单、知情同意书装入自封袋中封好,置于泡沫箱内最上层6乙方按规定的时间到旗县约定的标本收集机构收取标本附件血

6、浆 分 离 步 骤一、低温离心血样离心(15min):将采血管按编号顺序放入离心桶中,用托盘天平严格配平,将配平好的离心桶放在位置相对的吊篮中,设置离心机“xg:1600xg,tem:4time:10 min ,ACC:5。按“star”开始第一次离心,并在血浆制备中“第一次离心”下打“”。在离心10分钟内做其他准备工作:清洁超净台,给垃圾桶套上黄色医疗垃圾袋、准备2ml无菌EP管,根据每份血样3个2mlEP管准备,将EP管的开口朝内放到双面板上,同一血样标记相同的标号1、1、1、2、2、220、20、20。同样标号的管子并排放置,根据标号顺序依次排列。分离血浆:离心完成后从离心机中取出样本,

7、此时样本分为三层,下层为红细胞层,中间为白细胞和血小板,上层为我们所需要的血浆,将采血管按编号从小到大顺序放到采血管架的相应位置。用移液器将上清液移到与采血管编号对应的其中2个EP管中,每管2ml共约4ml。吸取白细胞层:血浆分离后吸取中间白细胞1ml到与采血管编号对应的另1ml个EP管中(贴上与申请单一致的条形码)。【注意事项】血样离心后已经分层,从离心机中取出时要轻拿轻放,不可倾斜采血管,避免破坏分层。吸取血浆时吸头要垂直伸入采血管,从液面下3-6mm处吸取,接年白细胞层时要缓慢吸取,为确保不吸到白细胞层,可留有3mm左右血浆不吸。吸取白细胞层时,需将吸头贴近中间层缓慢吸取,避免吸取过多的

8、红细胞和血浆。二、高速离心血浆离心(15min):将EP管中体积接近的血浆放在微量台式离心机转子的相应位置,盖上离心机黄色内盖,并通过向上提内盖确保盖好,设置离心机参数“xg: 6000xg, time:10 min ,按“star”开始第二次离心,并在血浆制备中“第二次离心”下打“”。在离心的10分钟内做其他准备工作:根据每份血样4个无菌2mlEP管准备,将EP管的开口朝内放到双面板上,同一血样标记相同的标号1、1、2、220、20。同样标号的管子并排放置,根据标号顺序从小到大依次排列。提取上清液(30min):吸取离心所得的上清,即得到较为纯净的血浆,将血浆按每管不少于1ml分装于对应编号

9、的2mlEP管中(EP管上贴上与申请单一致的条形码)。血浆QC检测(2min):审核血浆的体积与溶血情况,血浆体积少于2ml判定为不合格;根据样本接收规程中溶血标准判断是否溶血,如溶血则为不合格,需要重新采集样本。不合格样本需在血浆制备单的备注栏中注明此样本的不合格信息,并在LIMS系统中填写不合格及不合格理由,然全报告实验室负责人,发送重采血报告。【注意事项】分装血浆时,需将同一样本的血浆分装在具有相同标号的EP管内,切勿弄混。吸取血浆时,可从沉淀物的对立面缓慢吸取,避免吸头沾到沉淀或吸到沉淀。三、血浆样本保存血浆分离后与白细胞管立即低温保存,一周之内-20 条件下暂存:长期保存需置于-80 冰箱中。血浆不可常温保存。血浆样本避免反复冻融。送检样本合格标准1外观:要求样本保存管完好,无裂管、开盖等泄漏或样本外溢情况。2样本体积:孕妇外周血5

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