不同生化检测系统实现结果可比性的方法

1、不同生化检测系统不同生化检测系统 实现结果可比性的方法实现结果可比性的方法问题的提出问题的提出问题问题1 目前，很多实验室都有两台或多台生化分目前，很多实验室都有两台或多台生化分析仪，经常有不同仪器检测同一项目结果析仪，经常有不同仪器检测同一项目结果不一致的情况。不一致的情况。 怎样才能使两台仪器之间的结果具有可比怎样才能使两台仪器之间的结果具有可比性呢？性呢？问题问题2 即使只有一台生化分析仪，但参加即使只有一台生化分析仪，但参加EQA结结果不成功，地区间不同实验室结果可比性果不成功，地区间不同实验室结果可比性差。差。 如何改进如何改进EQA成绩，提高地区间不同实验成绩，提高地区间不同实验室

2、之间结果的可比性呢？室之间结果的可比性呢？问题问题3 病人抱怨在不同医院检验结果不一致，不知道该相信谁。病人抱怨在不同医院检验结果不一致，不知道该相信谁。 医师不知道该如何依据检验结果对患者诊断和治疗。医师不知道该如何依据检验结果对患者诊断和治疗。 卫生部要求不同实验室之间结果卫生部要求不同实验室之间结果“互认互认”，降低医疗成，降低医疗成本。本。怎样解决这些问题呢？怎样解决这些问题呢？ 实现同一检测项目在不同检测系统中的检测结实现同一检测项目在不同检测系统中的检测结果具有可比性，是临床诊断疾病的基本要求，果具有可比性，是临床诊断疾病的基本要求，也是卫生部提倡也是卫生部提倡“结果互认结果互认”

3、的基础，更是实的基础，更是实验室管理的重要目标。验室管理的重要目标。 解决解决“可比性可比性”的关键在于检测系统的量值溯的关键在于检测系统的量值溯源。源。钥匙钥匙检测系统：检测系统： 是指完成一个检测项目所需要的仪器、试是指完成一个检测项目所需要的仪器、试剂、校准品、检验程序等的组合。剂、校准品、检验程序等的组合。仪器试剂校准品实验程序固定检测系统（封闭检测系统）：固定检测系统（封闭检测系统）： 由公司选定的仪器、试剂、校准品、检验程由公司选定的仪器、试剂、校准品、检验程序等组成固定的组合，用户实验室不能更改。序等组成固定的组合，用户实验室不能更改。这样的检测系统经过公司与参考系统校准比这样的

4、检测系统经过公司与参考系统校准比对，可以保证结果的可比性和量值溯源性。对，可以保证结果的可比性和量值溯源性。自建检测系统（开放检测系自建检测系统（开放检测系统）：统）： 实验室自行选择的仪器、试剂、校准品、检验实验室自行选择的仪器、试剂、校准品、检验程序的组合，其中的每一要件都可以更改。如程序的组合，其中的每一要件都可以更改。如果自建的检测系统经过比对、校准验证和偏倚果自建的检测系统经过比对、校准验证和偏倚评估，证明其有效性。则成为有效的检测系统，评估，证明其有效性。则成为有效的检测系统，其检测结果具有可比性和量值溯源性。其检测结果具有可比性和量值溯源性。 如果自建的检测系统未经过比对、校准验

5、证如果自建的检测系统未经过比对、校准验证和偏倚评估，其检测结果的可比性和量值溯和偏倚评估，其检测结果的可比性和量值溯源性未知，则称为源性未知，则称为“自攒检测系统自攒检测系统”。选择检测系统的原则：选择检测系统的原则：选择性能优良的仪器和质量好的试剂；选择性能优良的仪器和质量好的试剂；以性能和质量为主要标准，价格为次要标准；以性能和质量为主要标准，价格为次要标准；仪器制造商和试剂生产商的美誉度；仪器制造商和试剂生产商的美誉度；培训和售后服务；培训和售后服务；考虑发展因素；考虑发展因素；检测系统经过评价确定后，不可随意更换任一要素，特别检测系统经过评价确定后，不可随意更换任一要素，特别是试剂和程

6、序。除非有特殊原因，如原使用的试剂停产等。是试剂和程序。除非有特殊原因，如原使用的试剂停产等。特别不能因为经济利益的原因，随意更换试剂。特别不能因为经济利益的原因，随意更换试剂。如果确实需要更换试剂，必须重新评价新检测系统的性能如果确实需要更换试剂，必须重新评价新检测系统的性能指标，证明是有效的检测系统，方可在实际工作中应用。指标，证明是有效的检测系统，方可在实际工作中应用。实验方法的分级实验方法的分级检验方法学包括：检验方法学包括： (1)经详尽研究尚未发现不准确度或不确定性原因经详尽研究尚未发现不准确度或不确定性原因的决定性方法；的决定性方法； (2)经详尽研究证实不准确度与不精密度可以忽

7、略经详尽研究证实不准确度与不精密度可以忽略的参考方法；的参考方法； (3)可满足临床或其他目的需要的日常使用的常规可满足临床或其他目的需要的日常使用的常规方法。方法。决定性方法（决定性方法（definitive method） 是指准确度最高，系统误差最小，经过详细的研究，没有发现是指准确度最高，系统误差最小，经过详细的研究，没有发现产生误差的原因或在某些方面不够明确的方法。产生误差的原因或在某些方面不够明确的方法。 用于发展及评价参考方法和一级标准品。用于发展及评价参考方法和一级标准品。 参考方法（参考方法（reference method） 是指准确度与精密度已经充分证实的分析方法，是指准

8、确度与精密度已经充分证实的分析方法，干扰因素少，系统误差与重复测定的随机误差相干扰因素少，系统误差与重复测定的随机误差相比可以忽略不计，有适当的灵敏度、特异性及较比可以忽略不计，有适当的灵敏度、特异性及较宽的分析范围。这类方法在条件许可的实验室中宽的分析范围。这类方法在条件许可的实验室中应经常使用。应经常使用。 用于评价常规方法和试剂盒，鉴定二级标准品。用于评价常规方法和试剂盒，鉴定二级标准品。 常规方法（常规方法（routine method） 指性能指标符合临床或其他目的的需要，有足够的精密度、准指性能指标符合临床或其他目的的需要，有足够的精密度、准确度、特异性和适当的分析范围，而且经济实

9、用。确度、特异性和适当的分析范围，而且经济实用。 这类方法经有关学术组织认可后可称为推荐方法这类方法经有关学术组织认可后可称为推荐方法（recommended method），推荐方法应具有足够的实验证据。），推荐方法应具有足够的实验证据。 项目项目 决定性方法决定性方法 参考方法参考方法 常规方法常规方法钙钙 ID-MS 原子吸收分光光度法原子吸收分光光度法 邻甲酚肽络邻甲酚肽络合法合法氯氯 电量滴定法、电量滴定法、 电流滴定法电流滴定法 电量分析法电量分析法 中子活化法中子活化法 硝硝酸汞滴定法酸汞滴定法镁镁 ID-MS 原子吸收分光光度法原子吸收分光光度法 甲甲基麝香草酚兰比色法基麝香草

10、酚兰比色法磷磷 ID-MS 钾钾 ID-MS、 火焰光度法火焰光度法 火焰光度法火焰光度法 中子活化法中子活化法钠钠 重量分析法、重量分析法、 火焰光度法火焰光度法 火火焰光度法焰光度法 中子活化法中子活化法白蛋白白蛋白 免疫化学法免疫化学法 溴甲酚绿法溴甲酚绿法 总蛋白总蛋白 双缩脲法双缩脲法 双缩脲法双缩脲法肌酐肌酐 ID-MS、 离子交换层析法离子交换层析法 苦味酸法苦味酸法 离子交换层析法离子交换层析法尿素尿素 ID-MS 尿素酶法尿素酶法 尿素酶法尿素酶法尿酸尿酸 ID-MS 尿酸酶法（紫外法）尿酸酶法（紫外法） 尿酸酶法尿酸酶法胆红素胆红素 重氮反应法重氮反应法 重氮反重氮反应法应

11、法葡萄糖葡萄糖 ID-MS 己糖激酶法己糖激酶法 葡萄糖葡萄糖氧化酶法氧化酶法胆固醇胆固醇 ID-MS Abell-Kendall 法，法， 胆固醇氧化酶法胆固醇氧化酶法 胆固醇氧化酶法胆固醇氧化酶法甘油三酯甘油三酯 ID-MS 酶法酶法 酶法酶法AST 酶偶联法酶偶联法 酶偶联法酶偶联法ALT 酶偶联法酶偶联法 酶偶联法酶偶联法GGT 连续监测产物生成法连续监测产物生成法 连续监测产物生成法连续监测产物生成法CK 酶偶联法酶偶联法 酶偶联法酶偶联法生化参考方法（卫生部临检中心2011.12.23） 分析项目分析项目分析原理分析原理参考方法名称参考方法名称葡萄糖（葡萄糖（Glu）ID-LC/M

12、S/MS血清葡萄糖同位素稀释液相色谱串联质谱法血清葡萄糖同位素稀释液相色谱串联质谱法尿素（尿素（Urea）ID-GC/MS血清尿素同位素稀释气相色谱质谱法血清尿素同位素稀释气相色谱质谱法尿酸（尿酸（UA）ID-LC/MS/MS血清尿酸同位素稀释液相色谱串联质谱法血清尿酸同位素稀释液相色谱串联质谱法肌酐（肌酐（Crea）ID-LC/MS/MS血清肌酐同位素稀释液相色谱串联质谱法血清肌酐同位素稀释液相色谱串联质谱法丙氨酸氨基转移酶（丙氨酸氨基转移酶（ALT）IFCC-Spectrophotometry丙氨酸氨基转移酶活性浓度（丙氨酸氨基转移酶活性浓度（37）参考测定方法）参考测定方法天冬氨酸氨基转

13、移酶（天冬氨酸氨基转移酶（AST）IFCC-Spectrophotometry天冬氨酸氨基转移酶活性浓度（天冬氨酸氨基转移酶活性浓度（37）参考测定方法）参考测定方法转肽酶（转肽酶（GGT）IFCC-Spectrophotometryr-谷氨酰转移酶活性浓度（谷氨酰转移酶活性浓度（37）参考测定方法）参考测定方法乳酸脱氢酶（乳酸脱氢酶（LDH）IFCC-Spectrophotometry乳酸脱氢酶活性浓度（乳酸脱氢酶活性浓度（37）参考测定方法）参考测定方法肌酸激酶（肌酸激酶（CK）IFCC-Spectrophotometry肌酸激酶活性浓度（肌酸激酶活性浓度（37）参考测定方法）参考测定方法

14、淀粉酶（淀粉酶（AMY）IFCC-Spectrophotometry淀粉酶活性浓度（淀粉酶活性浓度（37）参考测定方法）参考测定方法钠（钠（Na）ICP/MS血清钠电感耦合等离子体质谱法血清钠电感耦合等离子体质谱法镁（镁（Mg）ICP/MS血清镁电感耦合等离子体质谱法血清镁电感耦合等离子体质谱法糖化血红蛋白糖化血红蛋白A1cIFCC-LC/MS/MS糖化血红蛋白液相色谱串联质谱糖化血红蛋白液相色谱串联质谱IFCC法法高密度脂蛋白胆固醇（高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）Ultracentrifugation-HPLC高密度脂蛋白及其亚类胆固醇超速离心高密度脂蛋白及其亚类胆固醇超速离心-高效液相色

15、谱法高效液相色谱法低密度脂蛋白胆固醇（低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）Ultracentrifugation-HPLC低密度脂蛋白及其亚类胆固醇超速离心低密度脂蛋白及其亚类胆固醇超速离心-高效液相色谱法高效液相色谱法胆固醇（胆固醇（TC）ID-LC/MS/MS血清总胆固醇同位素稀释液相色谱串联质谱法血清总胆固醇同位素稀释液相色谱串联质谱法胆固醇（胆固醇（TC）ID-GC/MS血清总胆固醇同位素稀释气相色谱质谱法血清总胆固醇同位素稀释气相色谱质谱法甘油三酯（甘油三酯（TG）ID-LC/MS/MS血清甘油三酯同位素稀释液相色谱串联质谱法血清甘油三酯同位素稀释液相色谱串联质谱法甘油三酯（甘油三酯（T

16、G）ID-GC/MS血清甘油三酯同位素稀释气相色谱串联质谱法血清甘油三酯同位素稀释气相色谱串联质谱法皮质醇（皮质醇（Co）ID-LC/MS/MS血清皮质醇同位素稀释液相色谱串联质谱法血清皮质醇同位素稀释液相色谱串联质谱法睾酮（睾酮（T）ID-LC/MS/MS血清睾酮同位素稀释液相色谱串联质谱法血清睾酮同位素稀释液相色谱串联质谱法孕酮（孕酮（P）ID-GC/MS血清孕酮同位素稀释气相色谱质谱法血清孕酮同位素稀释气相色谱质谱法血液参考方法（血液参考方法（卫生部临检中心卫生部临检中心2011.12.23） 检测项目检测项目检测原理检测原理参考方法名称参考方法名称白细胞计数（白细胞计数（WBC）单通道

17、电阻抗法单通道电阻抗法白细胞计数参考方法白细胞计数参考方法红细胞计数（红细胞计数（RBC）单通道电阻抗法单通道电阻抗法红细胞计数参考方法红细胞计数参考方法血红蛋白测定（血红蛋白测定（HGB）HiCN分光光度法分光光度法血红蛋白测定参考方法血红蛋白测定参考方法红细胞比容测定（红细胞比容测定（Hct）微量毛细管离心法微量毛细管离心法红细胞比容测定参考方法红细胞比容测定参考方法血小板计数（血小板计数（PLT）流式细胞术法流式细胞术法血小板计数参考方法血小板计数参考方法标准品的分级（标准品的分级（3级）级） 一级标准品（原级参考物质）一级标准品（原级参考物质） 是一种稳定而均一的物质，它的数值已由决定

18、性方法确定，或是一种稳定而均一的物质，它的数值已由决定性方法确定，或由高度准确的方法确定，所含杂质也已经定量，且有证书；由高度准确的方法确定，所含杂质也已经定量，且有证书； 用于校正决定性方法，评价及校正参考方法以及为二级标准品用于校正决定性方法，评价及校正参考方法以及为二级标准品定值。定值。二级标准品（次级参考物质）二级标准品（次级参考物质） 这类标准品可由实验室自已配制或为商品，它的示值必须用一这类标准品可由实验室自已配制或为商品，它的示值必须用一级标准品和参考方法确定；级标准品和参考方法确定； 主要用于常规方法的评价或为控制物定值和常规测定的结果计主要用于常规方法的评价或为控制物定值和常

19、规测定的结果计算。算。日常校准品日常校准品 用二级标准品和常规方法测定得到校准品，用于常规测定中的用二级标准品和常规方法测定得到校准品，用于常规测定中的标准。标准。 生化标准物质（国家标准）生化标准物质（国家标准）1.GBW 09174冰冻人血清中葡萄糖、肌酐、尿酸、尿素标准物质冰冻人血清中葡萄糖、肌酐、尿酸、尿素标准物质2.GBW 09175冰冻人血清中葡萄糖、肌酐、尿酸、尿素标准物质冰冻人血清中葡萄糖、肌酐、尿酸、尿素标准物质 3.GBW 09176冰冻人血清中葡萄糖、肌酐、尿酸、尿素标准物质冰冻人血清中葡萄糖、肌酐、尿酸、尿素标准物质4.GBW 09177冰冻人血清丙氨酸氨基转移酶、天冬

20、氨酸氨基转移冰冻人血清丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、酶、-谷氨酰基氨基转移酶、乳酸脱氢酶、肌酸激酶、谷氨酰基氨基转移酶、乳酸脱氢酶、肌酸激酶、-淀粉酶淀粉酶活性浓度标准物质活性浓度标准物质5.GBW 09178血清总胆固醇、总甘油、高密度脂蛋白胆固醇和低血清总胆固醇、总甘油、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇标准物质密度脂蛋白胆固醇标准物质6.GBW 09179血清总胆固醇、总甘油、高密度脂蛋白胆固醇和低血清总胆固醇、总甘油、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇标准物质密度脂蛋白胆固醇标准物质7.GBW 09180血清总胆固醇、总甘油、高密度脂蛋白胆固醇和低血清总胆固醇、总甘油、

21、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇标准物质密度脂蛋白胆固醇标准物质8.GBW 09181人血红蛋白溶液中糖化血红蛋白标准物质人血红蛋白溶液中糖化血红蛋白标准物质9.GBW 09182人血红蛋白溶液中糖化血红蛋白标准物质人血红蛋白溶液中糖化血红蛋白标准物质10.GBW 09183人血红蛋白溶液中糖化血红蛋白标准物质人血红蛋白溶液中糖化血红蛋白标准物质血液标准物质（国家标准）血液标准物质（国家标准） 检测项目检测项目标准物质名称标准物质名称证书编号证书编号HGB氰化高铁血红蛋白国家一级标物质氰化高铁血红蛋白国家一级标物质GBW09153 WBC、RBC、HBG、PLT血细胞分析国家一级标准物质

22、血细胞分析国家一级标准物质GBW09172HCT红细胞比容国家一级标准物质红细胞比容国家一级标准物质GBW09173免疫和核酸标准物质（国家标免疫和核酸标准物质（国家标准）准） 标准物质名称标准物质名称标准物质编号标准物质编号浓度浓度乙型肝炎表面抗原（乙型肝炎表面抗原（HBsAg）血清（冻干）标准物质）血清（冻干）标准物质GBW0916428.03.2IU/ml乙型肝炎表面抗原（乙型肝炎表面抗原（HBsAg）血清（液体）标准物质）血清（液体）标准物质GBW(E)0900380.230.08IU/ml乙型肝炎表面抗原（乙型肝炎表面抗原（HBsAg）血清（液体）标准物质）血清（液体）标准物质GBW

23、(E)0900390.740.23IU/ml乙型肝炎表面抗原（乙型肝炎表面抗原（HBsAg）血清（液体）标准物质）血清（液体）标准物质GBW(E)0900401.310.42IU/ml乙型肝炎表面抗原（乙型肝炎表面抗原（HBsAg）血清（液体）标准物质）血清（液体）标准物质GBW(E)0900412.550.80IU/ml乙型肝炎表面抗原（乙型肝炎表面抗原（HBsAg）血清（液体）标准物质）血清（液体）标准物质GBW(E)0900424.61.3IU/ml丙型肝炎病毒（丙型肝炎病毒（HCV）抗体血清（冻干）标准物质）抗体血清（冻干）标准物质GBW091608.000.20NCU/ml丙型肝炎病

24、毒（丙型肝炎病毒（HCV）抗体血清（液体）标准物质）抗体血清（液体）标准物质GBW(E)0900440.860.09NCU/ml丙型肝炎病毒（丙型肝炎病毒（HCV）抗体血清（液体）标准物质）抗体血清（液体）标准物质GBW(E)0900452.100.29NCU/ml丙型肝炎病毒（丙型肝炎病毒（HCV）抗体血清（液体）标准物质）抗体血清（液体）标准物质GBW(E)0900464.350.72NCU/ml丙型肝炎病毒（丙型肝炎病毒（HCV）抗体血清（液体）标准物质）抗体血清（液体）标准物质GBW(E)0900478.4 1.1NCU/ml 临床实验室使用常规方法和日常校准品，涉及到临床实验室使用常

25、规方法和日常校准品，涉及到分析仪器、试剂、分析参数和校准品。如果常规分析仪器、试剂、分析参数和校准品。如果常规方法的检测结果经一系列合理实验的验证，其量方法的检测结果经一系列合理实验的验证，其量值能够溯源到高级标准物质，说明检验结果有溯值能够溯源到高级标准物质，说明检验结果有溯源性。源性。 最高级标准为国际或国家标准，如无国际或国家最高级标准为国际或国家标准，如无国际或国家标准，常规测量结果通常应该溯源到厂家标准。标准，常规测量结果通常应该溯源到厂家标准。 实验室认可的两个国际标准实验室认可的两个国际标准ISO/IEC17025（检测和校准实验室（检测和校准实验室能力认可准则）和能力认可准则）

26、和ISO/15189（医学实验室（医学实验室质量和能力的专用质量和能力的专用要求）都对检验结果的溯源性和可比性提出了明确要求，强调要求）都对检验结果的溯源性和可比性提出了明确要求，强调 方法学比对试验是实现准确度溯源和患者标本检验结果可比性方法学比对试验是实现准确度溯源和患者标本检验结果可比性的重要途径的重要途径 美国临床和实验室标准协会（美国临床和实验室标准协会（CLSI）EP9-A2文文件提供了不同检测系统比对试验的方法。件提供了不同检测系统比对试验的方法。 在进行比对试验之前，首先应对自建系统作精密在进行比对试验之前，首先应对自建系统作精密度评价。度评价。EP5-A2文件提供了精密度评价

27、方法。文件提供了精密度评价方法。精密度和准确度精密度和准确度1. 精密度试验精密度试验 精密度实验一般选择精密度实验一般选择2个标本，个标本，1个为正常或在医个为正常或在医学决定水平附近，另学决定水平附近，另1个为异常值。个为异常值。 以本实验室研制的改良血清蛋白方法（以本实验室研制的改良血清蛋白方法（中华检验医中华检验医学杂志，学杂志，2005，11：1197-1200）的精密度评价为例，）的精密度评价为例，实验用实验用1份正常值混合血清和份正常值混合血清和1份高值混合血清。份高值混合血清。 精密度初步试验精密度初步试验 正常值和高值混合血清各重复测定正常值和高值混合血清各重复测定20次，计

28、算均值，次，计算均值，标准差（标准差（s），变异系数（），变异系数（CV%）。结果如下。）。结果如下。 正常值混合血清：正常值混合血清：x = 71.0g/L，s =1.30g/L， CV =1.81%。 高值混合血清：高值混合血清： x = 96.5g/L，s =1.36g/L， CV =1.42%。 精密度正式试验精密度正式试验 测定：取上述测定：取上述2个混合血清，每日测定个混合血清，每日测定2次（次（2次间隔次间隔2h），每次测定均作双份，连续），每次测定均作双份，连续20天。天。每次测定均同时做质控。每次测定均同时做质控。 离群点检查：如每次双份测定的差值超过初步离群点检查：如每次双

29、份测定的差值超过初步精密度测定时精密度测定时标准差的标准差的5.5倍（是倍（是99.99%的上的上限值），这对数据为限值），这对数据为“离群点离群点”，弃去并重新补，弃去并重新补做。做。表表1 1 精密度试验计算表（正常值混合血清）精密度试验计算表（正常值混合血清） 正常值混合血清：正常值混合血清： 日平均均值日平均均值=70.1S日间日间(B)=2.32，CV日间日间 =B/日平均均值日平均均值100%=3.32%S批 间批 间( A ) = ( E / 2 n )1 / 2= 1 . 6 5 ， C V批 间批 间= A / 日 平 均 均 值日 平 均 均 值100%=2.35%S批内批

30、内(F)=(C+D)/4n)1/2=1.39 CV批内批内=F/日平均均值日平均均值100%=1.99%S总总(G)=(B2+A2+F2)1/2=3.17 CV总总=G/日平均均值日平均均值100%=4.52%总总CV4.52%，低于，低于IFCC规定的规定的CV5%的标准。的标准。 表表2 精密度试验计算表（高值混合血清）精密度试验计算表（高值混合血清） 高值混合血清：高值混合血清： 日平均均值日平均均值=91.1S日间日间( (B) )=1.57， CV日间日间=B/日平均均值日平均均值100%=1.72%S批 间批 间( ( A ) ) = ( E / 2 n )1 / 2= 0 . 8

31、 7 ， C V批 间批 间= A / 日 平 均 均 值日 平 均 均 值100%=0.96%S批内批内( (F) )=(C+D) )/4n) )1/2=1.12，CV批内批内=F/日平均均值日平均均值100%=1.23%S总总( (G）=（B2+A2+F2）1/2=2.12CV总总=G/日平均均值日平均均值100%=2.33%总总CV2.33%，低于，低于IFCC规定的规定的CV5%的标准。的标准。 精密度好，准确度如何？精密度好，准确度如何？是是B还是还是C？2. 与参考方法或目标系统比对，与参考方法或目标系统比对，实现自建检测系统的量值溯源实现自建检测系统的量值溯源溯源性溯源性 ISO

32、15189：医学实验室：医学实验室-质量和能力的专用要求质量和能力的专用要求 “通过一条具有规定不确定度的不间断的比较链，使通过一条具有规定不确定度的不间断的比较链，使测量结果或测量标准的值能够与规定的参考标准，通常测量结果或测量标准的值能够与规定的参考标准，通常是与国家标准或国际标准联系起来的特性是与国家标准或国际标准联系起来的特性”。自建系统与目标系统比对与量值溯源链自建系统与目标系统比对与量值溯源链 比较方法。应是参考方法或推荐方法，如果该项目比较方法。应是参考方法或推荐方法，如果该项目没有参考方法或推荐方法，也可用公认的常规方法。没有参考方法或推荐方法，也可用公认的常规方法。但须具备：

33、但须具备： 比试验方法有更好的精密度。比试验方法有更好的精密度。 干扰影响已知。干扰影响已知。 与试验方法使用相同的计量单位。与试验方法使用相同的计量单位。 目标系统。性能良好的固定检测系统或室内质控目标系统。性能良好的固定检测系统或室内质控（IQC）和长期室间质评（）和长期室间质评（EQA）成绩合格的检测）成绩合格的检测系统，可作为比对的目标系统。系统，可作为比对的目标系统。 比较方法和目标系统比较方法和目标系统 实验标本实验标本 每天收集不同浓度的新鲜血清每天收集不同浓度的新鲜血清8份，连续收集份，连续收集5天以上，浓度范天以上，浓度范围尽可能覆盖该项目的测量范围，且参考值范围以外的标本尽

34、围尽可能覆盖该项目的测量范围，且参考值范围以外的标本尽可能在可能在50%以上。以上。 各浓度标本数量的按排可参阅表各浓度标本数量的按排可参阅表3。 表表3 方法比较中分析物浓度水平方法比较中分析物浓度水平 实验方法实验方法 每天用两种方法分别测定每天用两种方法分别测定8个标本，每个标本测定个标本，每个标本测定2次。第次。第1次按次按18，第，第2次按次按81的顺序，共测定的顺序，共测定5天，各获得天，各获得80个数据。个数据。 举例：举例：NCCLS (EP9-A2) 文件文件 2.3方法比较步骤方法比较步骤(以淀粉酶测定为例以淀粉酶测定为例) 2.3.1样品大小至少为样品大小至少为40 个标

35、本个标本, 每个标本用每个标本用2种种方法分别作双份测定方法分别作双份测定, 因此样本应有足够的量因此样本应有足够的量, 如如临床标本的量太少可将临床标本的量太少可将2 份含量相近的标本混合。份含量相近的标本混合。 2.3.2每天测定每天测定8 个标本个标本, 双份测定时第一次按顺双份测定时第一次按顺序序1, 2.7, 8, 第二次第二次8, 7.2, 1, 共测共测5 天天, 将数据整将数据整理成表理成表4。表表4淀粉酶测定试验方法淀粉酶测定试验方法(Y ) 与与BM 试剂试剂(X ) 比较比较(U/L) 试验方法试验方法 比较方法比较方法 试验方法试验方法 比较方比较方法法样品样品结果结果

36、1 结果结果2 结果结果1 结果结果2 结果结果1-2 结结果果1-2 1 1792 1795 1672 1676 3 4 2 1755 1751 1561 1562 4 1 3 1598 1595 1480 1483 3 3 . . 38 35 36 39 40 1 1 39 72 75 79 78 3 1 40 54 52 58 55 2 3 离群值检查离群值检查 方法内离群值的检查：计算每个标本重复测定值方法内离群值的检查：计算每个标本重复测定值间的绝对差值、每个标本测定值的均值，以平均间的绝对差值、每个标本测定值的均值，以平均绝对差值的绝对差值的4倍为限，超出限值即为离群点。倍为限，超

37、出限值即为离群点。（表（表5） 方法间离群值的检查：计算两方法间成对结果的方法间离群值的检查：计算两方法间成对结果的绝对差值及其平均值，以平均绝对差值的绝对差值及其平均值，以平均绝对差值的4倍为倍为限，超出限值即为离群点。（表限，超出限值即为离群点。（表6） 表表5方法内复测结果离群值检查方法内复测结果离群值检查Xi1= 1672Xi2= 1676 Yi1= 1792Yi2= 1795 DXi = xi1 - xi2 = 1672 - 1676= 4, X1= (Xi1+ Xi2) / 2= 1674 DYi = Yi1 - Yi2= 1792 - 1795= 3, Y1= (Yi1+ Yi2

38、) / 2= 1793.5 DXi= DXi / Xi = 4/1674 = 0.00239 DYi= DYi / Yi = 3/1793.5 = 0.00167 同样同样: I Xi1 Xi2 Yi1 Yi2 DX i DY i DX i DY i 1 1672 1676 1792 1795 4 3 0.00239 0.00167 2 1561 1562 1755 1751 1 4 0.00511 0.00228 3 1480 1483 1598 1595 3 3 0.00202 0.00202 . 38 39 40 35 36 1 1 0.0253 0.0282 39 79 78 72 7

39、5 1 3 0.0127 0.0382 40 56 55 54 52 1 2 0.0180 0.0377 DX = 2.75, 控制限值控制限值 = 4 DX = 42.75= 11 进位制进位制= 11 DY = 2.875, 控制限值控制限值= 4 DY = 42.875= 11.5 进位制进位制= 12 DX = 0.00698 控制限值控制限值= 4DX = 0.0288 DY = 0.0105 控制限值控制限值= 4DY = 0.0420 本例方法内未发现离群点。本例方法内未发现离群点。表表6方法间离群点检查方法间离群点检查Xi1= 1672 Xi2= 1676 Yi1= 1792

40、Yi2= 1795 Ei1=Yi1- Xi1=1792- 1672= 120 Ei2=Yi2- Xi2=1795- 1676= 119 Ei1= Ei1 / Xi1 = 120/1672 = 0.0718 Ei2= Ei2 / Xi2 = 119/1676 = 0.0710 同样：同样： I Ei1 Ei2 Ei1 Ei2 1 120 119 0.0718 0.0710 2 185* 189* 0.1180 0.1210 3 118 112 0.0797 0.0755 . 38 4 4 0.1030 0.1000 39 7 3 0.0886 0.0385 40 2 3 0.0357 0.054

41、5 40 2E = 1/80Eij =1/803359 = 41.99 I=1 j=1E 的控制限值= 4E = 441.99= 167.96进位= 168 40 2E = 1/80 Eij =1/804.831 = 0.0604 I=1 j=1E 的控制限值= 4E = 0.2416 本例方法间出现2 个离群点 实验数据的可接受性判断实验数据的可接受性判断两种方法的相关性分析：两种方法的相关性分析： 计算回归方程计算回归方程 y（自建）（自建）= a+bx（比对）（比对） 计算相关系数（计算相关系数（r）和决定系数（）和决定系数（r2）。）。 相关系数相关系数r 0.975或决定系数或决定系

42、数r20.95，说明实验，说明实验数据范围合适，直线回归统计的斜率和截距可靠。数据范围合适，直线回归统计的斜率和截距可靠。 相关系数相关系数r 0.975或决定系数或决定系数r21/3CLIA88TEa时，测时，测定随机误差不能接受。如果是方法本身的精密度定随机误差不能接受。如果是方法本身的精密度差，则应更换更好的方法。差，则应更换更好的方法。 每天随病人标本同时测定，记录结果，绘制质每天随病人标本同时测定，记录结果，绘制质控图。全部检测数据不超出控图。全部检测数据不超出2s，且在靶值线两，且在靶值线两侧随机分布为成功的质控结果。侧随机分布为成功的质控结果。 以以Westgard多规则判断标准

43、，符合多规则判断标准，符合22S规则或规则或13S规则为失控。应找出原因予以纠正。规则为失控。应找出原因予以纠正。室内质控（室内质控（IQC）室间质评（室间质评（EQA） 主要控制测定的系统误差（准确度）。主要控制测定的系统误差（准确度）。是是B还是还是C?室间质评（室间质评（EQA） 参加国际、国内或地区间质量评价活动。参加国际、国内或地区间质量评价活动。 根据结果的偏倚（根据结果的偏倚（%）、能力比对检验（）、能力比对检验（PT）得分、变异指数得分（得分、变异指数得分（VIS）判断）判断EQA成绩。成绩。 PT得分得分80%，VIS得分得分120，为合格的，为合格的EQA成绩。成绩。 PT

44、得分得分150，为不成功的，为不成功的EQA成绩。说明该项目存在不可接受的系统误差，成绩。说明该项目存在不可接受的系统误差，必须分析原因予以纠正。必须分析原因予以纠正。 室内质控与室间质评结果均为合格，说明该项室内质控与室间质评结果均为合格，说明该项目的精密度和准确性均符合要求，自建系统为有目的精密度和准确性均符合要求，自建系统为有效的检测系统，在一定范围内结果具有可比性和效的检测系统，在一定范围内结果具有可比性和溯源性。溯源性。 但是，这种方法要求但是，这种方法要求EQA使用的质控品中被分析使用的质控品中被分析物浓度应覆盖全部检测范围，往往不能达到。所物浓度应覆盖全部检测范围，往往不能达到。

45、所以只能说以只能说“在一定范围内结果具有可比性和溯源在一定范围内结果具有可比性和溯源性性”。 如果如果EQA成绩不成功，应分析原因予以改进，必成绩不成功，应分析原因予以改进，必要时更换检测系统。要时更换检测系统。 参考文献参考文献 1 杨昌国，许叶，张抗.精密度评价和方法比较中NCCLS评价方案的应用.临床检验杂志，1999，17(1):47-49. 2 黄亨建，李萍，宋昊岚，等。临床定量分析校准的验证评价。检验医学，2007，22（1）：86-87。 3 张秀明，李炜煊，郑松柏，等。不同检测系统17项常规生化结果的比对和偏倚评估。检验医学，2007，22（2）：166-170。 4 Sec.493.1255.2003.Clinical Laboratory Improvement Amendment of 1988:Final Rule,Federal RegisterS. 5 张秀明，李炜煊，蓝锴，等。自建生化检测系统的量值溯源性和可比性研究。检验医学，2007，22（3）：299-303。 6 National Committee for C