检验科生物安全手册哈哈多赚点分

1、生物安全评估和管理 乌鲁木齐人民医院 生物安全手册（888年第一版） 乌鲁木齐人民医院1生物安全管理体系1-11.1紧急事件电话和办公室联系方式1.2生物安全管理机构1.3职责2生物安全评估和管理2-12.1风险评估和风险管理表2.2暴露途径2.3生物安全等级3标志3-13.1 墙面标志3.2 门上标志3.3 标贴和颜色3.4 外送维修或处理的设备4生物安全要求和人员管理4-14.1生物物质的使用登记4.2生物安全柜4.3人员管理5医学监督程序5-15.1暴露于结核杆菌员工的筛选5.2免疫5.3医学限制5.4员工血清贮存6个人防护装备（PPE）6-16.1实验服、隔离衣6.2手套6.3工作鞋6

2、.4护目镜6.5口罩、帽子7实验室设备7-17.1生物安全柜7.2 离心沉淀程序7.3 化学吸附真空管和过滤器7.4注射器和针头7.5移液管7.6搅拌机、混匀器、超声波清洗和粉碎机7.7 冻干7.8其它设备（水浴箱、冷藏箱、振荡器）8实验室操作8-18.1与实验室事故相关的人为因素和态度8.2 一级生物安全8.3 二级生物安全8.4 生物危害物的运输（实验室间或物体间）8.5 基础生物安全操作8.6内务管理8.7菌（毒）种和生物样本管理9意外9-19.1暴露事件的紧急处理9.2 报告事件9.3 医疗援助9.4 实验室事件的调查9.5应急处置10溢出反应10-110.1 一个基础溢出试剂盒的组成

3、10.2 1级生物安全实验室溢出10.3 2级生物安全实验室溢出11消毒和灭菌处理过程11-111.1 实验室材料的清洁11.2 消除局部环境的污染11.3 清除生物安全柜的污染11.4 洗手/清除手部污染11.5 去污（净化）方法11.6 高压灭菌器程序11.7 化学去污剂的特征（特性）11.8废弃物处理12运送12-112.1 传染性物质的包装和运送13. 化学品、火和电的安全13-12. 生物安全评估和管理在建设实验室或开展实验活动之前，生物安全办公室应参照卫生部名录组织各相关方面的专家对拟操作的生物因子的危害程度、实验活动的危险性、气溶胶传播的可能性、预防治疗的获得性、防护屏障的安全性

4、、应急预案的有效性等因素进行评估，确定相应的生物安全防护水平等级。实验室生物危害评估结果应由中心的法定代表人签字认可，并归档保存。生物安全负责人最终对实验室内的安全负责，其职责之一是指导现行工作以判断潜在的危害（生物安全评估），职责之二是实验开始前采用合适的安全程序（风险管理）。特定的实验开始前需要预先进行登记和通过生物安全负责人的批准。风险评估和风险管理的5个“P”是指：u Pathogen 病原体 危险的生物因子u Procedures 规程 推荐的实验操作和安全的操作规范u Personnel 人员 相应的培训与技能u Protective equipment 防护设备 防护衣和安全设备

5、u Place 地点 实验室所在位置实验室工作的每一方面都应考虑风险评估和风险管理的5个“P”。正确地指导和风险评估能帮助免受生物危害的暴露，以及最大程度减少实验室受到感染的可能性。2.1 风险评估和风险管理表风险评估风险管理病原体u 传染因子类型 (见附录A)u 感染途径u 感染性疾病发生过程病毒性、致病性、数量、浓度、人群中影响程度、昆虫媒介的存在u 登记n 生物安全办公室n 感染机构n 约束机构n 疾控中心 选择机构规程u 气溶胶风险：超声、离心 、混匀、混合、振动u 经皮风险: 针头、注射器、玻璃吸液管、解剖刀、低温刀片/刀等u 飞溅/溅泼风险: 吸液管、接种环u 建立一套结合安全使用

6、的标准操作规程u 遵守基本的生物安全规则u 实验室、工作区域、 BSL-2或更高传染因子实验室内的设备贴上标识u 指导实验室操作和检查实验设备u 用非传染性材料做尝试性试验，以测试新的规程/设备人员u 人员免疫n 赘生物疾病n 感染n 免疫抑制治疗n 年龄、种族、性别、妊娠n 手术 (脾、胃切除)u 免疫力u 后暴露预防u 血清库u 对安全的态度u 安慰u 外伤、破损皮肤、湿疹、皮炎u 安全培训u 以前从事生物危害的经历u 技术的熟练程度u 立即向生物安全负责人和生物安全办公室报告所有的暴露事件、被忽视的事件以及相关疾病的症状u 调查/核实事件/飞溅等，以防止再次发生防护设备u 防护：l 气溶

7、胶-可以吸入粒子直径<5µml 飞溅/溅泼l 锐器u 个人防护设备 (PPE):u 口罩 HEPA, N-99, N-95,等u 面部（眼、鼻、嘴）防护-面具和安全眼镜、或盖住下颌的面罩、前面无缝外衣或实验室外衣u 手套u 生物安全柜u 安全离心管/转子地点u 风险组/生物安全等级、设备u 气溶胶风险u 受限制的过道u 基本的实验室-门、易清洁的地方、冲眼器、窗户u 标签u 用直接气流预防2.2 暴露途径生物因子要导致疾病发生，首先必须有足够数量的因子进入或侵入人体，进入的途径有经口、呼吸道、黏膜及与动物的接触（叮、抓伤），当生物危害物进入人体，它产生疾病还需满足其它条件，它们

8、必须在人体细胞、组织和/或器官内生长繁殖，克服人体的自然免疫机制和变异或适合人体的变化。年龄、免疫状况、职业、物理或地理环境等因素会导致个体对疾病的不同易感性。在涉及生物危害时，确定其最低感染量是很困难的。同一病原体相同剂量在一个人身上可能无症状，而在另一人身上可能导致严重的症状甚至致命。有些微生物只要一个进入到人体就足以侵入并促使疾病的发生，结核杆菌就是一个例子。暴露途径的更多信息见下图。24感染因子的传播途径黏膜：通过飞溅或溅泼暴露眼、鼻、嘴里的黏膜Mucous Membranes:吞咽；口腔吸入、吃、喝、在实验室里抽烟Exposures to mucous membranes of th

9、e eyes, nose and mouth through splashes or splatters.Ingestion:Mouth pipetting, eating, drinking, smoking in the lab.吸入：吸入气溶胶粒子 (直径<5µm), 离心渗漏物、溢出物、吸液等Inhalation:Breathing in respirable sized aerosols (<5µm), centrifuge leaks, spills, pipetting, etc.经皮:被感染过的锐器刺伤完好或破损皮肤、动物叮咬、抓伤、湿疹Perc

10、utaneous:Through intact or non-intact skin via needlestick, puncture with contaminated sharp object, animal scratch or bite, through wounds abrasions, or eczema.接触 (间接传播):通过接触污染面（如凳子、电话、电脑、设备把手等）的手来触摸黏膜或破损皮肤，或实验后洗手不彻底Contact (indirect transmission):Via mucous membranes or nonintact skin from hands t

11、hat have been in contact with a contaminated surface (i.e. benches, phones, 消毒、灭菌和废弃物的处理过程 2.2.1 实验室内传染因子的传播途径 暴露途径 防护措施黏膜：通过飞溅或溅泼暴露眼、鼻、嘴里的黏膜通过以下方式进行面部的预防：u 戴护眼镜或面罩u 在生物安全柜内或保护罩后工作u 进行规范的微生物操作吸入：由于离心渗漏、溢出或产生气溶胶的操作如吸液、混匀等而吸入了可吸入的气溶胶粒子 (直径<5µm)。 通过以下方式避免暴露气溶胶： u 在生物安全柜内工作u 离心时使用密封转子或杯u 进行规范的微生

12、物操作吞咽；口腔吸入、吃、喝、在实验室里抽烟通过以下方式防止经吞咽产生的暴露：u 不在实验室内吃、喝或吸烟u 始终使用手工吸液u 进行规范的微生物操作经皮:被感染过的锐器刺伤完好或破损皮肤、动物叮咬、抓伤、湿疹通过以下方式防止皮肤破损：u 用塑料制品代替玻璃制品u 使用锐器要非常小心u 用后立即将锐器丢弃在坚固防漏容器内u 适当限制动物u 戴不易划破的手套、袖套、u 用防水绷带包扎好破损皮肤并戴双层手套接触 (间接传播):通过接触污染面（如凳、电话、电脑、设备把手等）的手来触摸黏膜或破损皮肤，或实验后洗手不彻底。通过以下方式防止间接暴露：u 工作台面消毒u 工作后、脱去手套后总是洗手。u 不要

13、用戴手套或不戴手套的手触摸脸部（良好的个人习惯）u 实验室内不使用化妆品。在实验室内的任何时候始终执行以下工作制度：u 不在实验室内吃、喝或吸烟u 工作结束后或脱去手套后总是洗手u 实验室内穿戴好个人防护设备，离开实验室前务必脱去个人防护设备u 不用口吸、始终用手工吸液u 使用锐器格外小心u 用合适的设备抑制气溶胶的产生u 对工作台面、溢出物和废弃物进行消毒2.3 生物安全等级国家和卫生部对微生物和生物医学实验室确立了从事生物危害工作对应的生物安全等级。提供了微生物操作、实验室设备和安全设施的结合使用，以及所选的感染因子与使用推荐的四种生物安全等级的实验室操作。以下是1-4级生物安全所要求的实

14、验室操作、防护设备、实验室设施和传染因子的概括。2.3.1 所推荐的生物安全等级与相应感染因子生物安全等级感染因子规 程安全设备（第一道屏障）实验室设备（第二道屏障）BSL-1已知对健康成人 和动物不造成疾病。标准微生物操作。不需要。u 开放工作台。u 防止节肢动物和啮齿动物进入。u 实验室靠近出口处有洗手池。u 实验室的窗户有纱窗。u 适当的消毒设备。BSL-2能引起人或动物发病，但一般情况下对健康工作者、群体、家畜或环境不会引起严重危害的病原体。实验室感染不导致严重疾病，具备有效治疗和预防措施，并且传播风险有限。BSL-1操作加：u 限制进入u 生物危害警示标记u 锐器谨慎使用u 制定安全

15、手册，确定所有废物消毒和医疗监督计划I 级or II级生物安全柜或其它物理防护设备，这些设备应用于可能会产生飞溅或气溶胶的感染因子的操作；个人防护设备：外套、手套、所需要的面部防护BSL-1加：u 实验室门应带锁并可自动关闭。u 应设洗眼设施、高压灭菌锅。BSL-3能引起人或动物严重疾病，或造成严重经济损失，但通常不能因偶然接触而在个体间传播，或能用抗生素抗寄生虫药治疗的病原体。BSL-2操作加：u 控制进入u 所有废弃物消毒u 实验室衣服洗之前对其进行消毒II级（B2）或级生物安全柜和用于所有感染因子操作的其它物理防护设备；个人防护设备：防护衣、手套、需要的呼吸道防护。清洁区设置淋浴装置。B

16、SL-2加：u 自成隔离区，进入实验室的过道用物理方式隔开。u 入口处采用自动关闭双层门。u 独立的送排风系统，空气排至室外，不在室内循环。u 实验室负压u 实验室污染区内设不排蒸汽的高压蒸汽灭菌器。BSL-4能引起人或动物非常严重的疾病，一般不能治愈，容易直接、间接或因偶然接触在人与人，或动物与人，或人与动物，或动物与 动物之间传播的病原体。BSL-3操作加：u 进入实验室前更衣u 出口处冲淋u 所有材料在出口处消毒按照级生物安全的所有步骤进行，全身穿上有空气供应系统、正压个人防护衣。BSL-3加：u 远离建筑物或单独的区域u 安装供应、排放真空系统u BMBL上的其它需求根据国家标准GB

17、19489-2004实验室生物安全通用要求编制2.3.2生物安全评估目前实验室内开展的病原体检测的范围为：病毒名称危害程度分类未经培养的感染材料的操作英文名中文名分类学地位Hepatitis A virus甲型肝炎病毒小RNA病毒科第三类BSL-2Hepatitis B virus乙型肝炎病毒嗜肝DNA病毒科第三类BSL-2Hepatitis C virus丙型肝炎病毒黄病毒科第三类BSL-2Hepatitis D virus丁型肝炎病毒卫星病毒第三类BSL-2Hepatitis E virus戊型肝炎病毒嵌杯病毒科第三类BSL-2序号病原菌名称危害程度分类样本检测所需生物安全实验室级别学名中

18、文名1.Mycobacterium bovis牛型分枝杆菌第二类BSL-22.Mycobacterium tuberculosis结核分枝杆菌第二类BSL-23.Vibrio cholerae霍乱弧菌第二类BSL-24.Staphylococcus spp葡萄球菌属第三类BSL-25.Streptococcus spp链球菌属第三类BSL-26.Enterococcus spp肠球菌属第三类BSL-27.Micrococcus spp微球菌属第三类BSL-28.Moraxella spp莫拉菌属第三类BSL-29.Neisseria spp奈瑟菌属第三类BSL-210.Corynebacter

19、ium spp棒状杆菌属第三类BSL-211.Bacillus spp芽胞杆菌属第三类BSL-212.Listeria spp李斯特菌属第三类BSL-213.Erysipelothrix spp丹毒丝菌属第三类BSL-214.Rhodococcus equi马红球菌第三类BSL-215.Nocardia spp诺卡菌属第三类BSL-216.Eikenella corrodens啮蚀艾肯菌第三类BSL-217.Enterobacteriaceae肠杆菌科第三类BSL-218.Vibrio spp弧菌属（除霍乱弧菌）第三类BSL-219.Aeromonas spp气单胞菌属第三类BSL-220.P

20、lesiomonas spp邻单胞菌属第三类BSL-221.Pseudomonas spp假单胞菌属第三类BSL-222.Acinetobacter spp不动杆菌属第三类BSL-223.Flavobacterium spp黄杆菌属第三类BSL-224.Haemophilus spp嗜血菌属第三类BSL-225.Pasteurella spp巴斯德菌属第三类BSL-226.Gardnerella spp加德纳菌属第三类BSL-227.Legionella pneumophila嗜肺军团菌第三类BSL-228.Campylobacter spp弯曲菌属第三类BSL-229.Helicobacte

21、r spp螺杆菌属第三类BSL-230.Clostridium spp梭菌属第三类BSL-231.Bacteroides spp拟杆菌属第三类BSL-232.Fusobacterium spp梭杆菌属第三类BSL-233.Peptostreptococcus anaerobius厌氧消化链球菌第三类BSL-234.Actinomadura spp放线菌属第三类BSL-235.Arcanobacterium spp隐秘杆菌属第三类BSL-236.Chlamydia pneumoniae肺炎衣原体第三类BSL-237.Mycoplasma pneumoniae肺炎支原体第三类BSL-238.Ure

22、aplasma urealyticum解脲脲原体第三类BSL-239.Candida albicans白假丝酵母菌第三类BSL-240.Cryptococcus neoformans新生隐球菌第三类BSL-2根据上述病原体检测的表格，本中心的实验室仅仅允许在生物安全等级为1和2 的实验室里工作。2.3.3生物安全检查生物安全办公室应定期组织人员对实验室进行生物安全检查，每年至少一次（可以和内审一同进行）。检查结果应与实验室人员和管理者一起讨论，对于在检查过程中发现的所有不足之处，实验室应指定专人负责采取改正措施。3 标志3.1 墙面标志3.1.1 实验室入口处的墙面上应有实验室名称。3.2 门

23、上标志3.2.1 实验室入口处门上必须有生物危害警告标志。标志包括国际生物危害符号、生物危害等级（如BSL-1或2或3），有特殊要求的专用实验室应标明特殊进入等要求。 国际生物危害警告标志3.2.2 BSL-2实验室入口处门上必须有人员出入限制标志和相关信息，如实验室责任人的姓名、联系电话等。3.3 标贴和颜色3.3.1 在实验室内，生物危害符号应贴在医用垃圾容器、冰箱、冷冻箱、培养皿和含BSL-2或BSL-3传染因子的离心机、污水池、超声腐蚀器及生物安全柜等上。3.3.2 当设备用于处理人血液标本、其它潜在感染物质或感染因子时，生物危害符号应临时贴在相关的设备上。3.3.3生物危害符号也应贴

24、在其它用于储存、运送BSL-2或BSL-3传染因子、血液标本或“其它潜在感染物质”（注意：未怀疑包含传染因子或“其它潜在感染物质”的运送可以不贴生物危害符号，而贴诊断样品标志）的容器上。标贴应用带子、线、粘胶或其它方式尽可能贴近容器以防止松动或意外弄丢。3.3.4生物危害警告标志底色应该是桔红色带荧光，字母和符号用对比明显的颜色。（可以购买）如果有下列情况，生物危害警告标志可以免贴：（1） 废弃物是放在黄色有生物危害符号的袋内；（2） 在储存、转移、运送、处理过程中，单个盛血液或“其它潜在物质”的容器被放置在贴有生物危害符号的第二个容器中。（3） 当实验室门上贴有生物危害警告标志时，其室内的仪

25、器等物品可免贴。3.4 外送维修或处理的设备3.4.1已污染或可能污染的设备外送维修或处理必须尽可能彻底消毒，在设备上贴上生物危害警示。3.4.2 对一些不能进行彻底消毒的仪器设备，在外送之前，将这些仪器设备尽可能的消毒（冲洗或擦干净外部），并贴上生物危害警示。3.4.3 生物危害警示还必须注明哪些部分仍存在污染，生物危害符号贴在污染区域附近。生物危害警示本设备的外部和内部表面已消毒，已无任何生物危害。本设备将作为（在内打勾） 服务/维修 重新安置 报废 消毒操作人员 所使用的消毒剂 消毒日期 设备放置地点 实验室联系电话 设备的以下区域 仍存在污染生物危害警示的推荐样式4.生物安全要求和人员

26、管理以下的内容描述了实验人员的要求。每个专业科室负责人的职责是确保实验室能遵循规章制度。4.1生物物质的使用登记各专业科室实验室生物安全责任人要完成和递交“生物物质的使用登记表”。生物安全办公室必须保存有关人员使用生物物质的准确的信息（例如：微生物、细胞系、人源物质、动物和毒物），并要求各专业科室负责人每年递交准确信息，以及一年里有关生物物质的增加或删除、房间位置的增加或删除等变化。4.1.1人类病毒在开始研究人类致病因子前需要在生物安全办公室登记。生物安全办公室必须在实验开始前批准全部包括有传染性因子或潜在生物危害的生物物质导入动物。实验人员必须在新的实验开始前接受生物安全培训。生物安全培训

27、由生物安全办公室组织安排。生物安全负责人的职责是确保实验室全体人员得到适当操作和技术的培训。生物安全负责人和/或实验室生物安全责任人在用风险组2（生物安全水平2）因子工作前必须到生物安全办公室登记。风险组2和较高致病因子名单见附录A。生物安全办公室将定期监控设备和操作，同时回答任何关于安全的问题。在下列情况发生之前必须联系生物安全办公室：u 开始用新的可感染因子工作u 改变现有工作的范围或位置u 将可感染因子提供给科内外其他工作人员u 在实验室安排非本实验室的工作人员工作4.1.2人类血液、体液、组织和其他潜在有传染性的物质血液耐受致病标准适用于“职业暴露”于人类血液或其他潜在有传染性物质下的

28、工作人员。其他潜在有传染物质包括：u 人类细胞或组织培养u 来自于人类（活的或死的）任何不固定的组织或器官，除了完整无缺的皮肤。u 人类体液，包括尿液、粪、唾液或眼泪等。u HIV或HBV包括培养液或其他溶液u 血液，器官或其他来自于感染了HIV或HBV或其他血液耐受致病原的实验动物组织。如果工作人员没有直接接触血液或其他潜在有传染物质，但使用那些用于处理或贮存血液，其他潜在有传染物质或血液耐受致病原的仪器，那么此人也被认为是职业暴露。员工暴露于由人类血液、组织和体液，可引起一个重要的健康风险，它们含有血液耐受致病原诸如：¨ 人类免疫缺陷病毒（HIV）¨ 巴贝西虫¨

29、; 科罗拉多壁虱热¨ 乙型肝炎（HBV）¨ 疏螺旋体菌¨ 虫媒病毒¨丁型肝炎（HDV）¨ 布氏杆菌¨ 减少螺菌¨ 丙型肝炎（HCV）¨ 钩端螺旋体¨ Creutzfeldt-Jakob virus¨ 疟原虫¨ 弗朗西斯菌¨ Human T-lymphotropicVirus Type I I型人类T淋巴促激素病毒¨ 密螺旋体¨ Streptobacillus moniliformis念珠链杆菌¨ Hemorrhagic Fever viruses

30、出血热病毒4.1.3动物全部的研究实验包括动物管理必须由生物安全负责人批准。一经批准，必须在实验开始前与生物安全办公室联系确保制定安全协议。实验人员必须与生物安全办公室及有关安全人员沟通描述标准操作规程概要。4.2生物安全柜空气清洁设备能确保科室员工的健康和安全，同时可保护实验和预防临床传染性物质释放到环境中。生物安全柜的功效依赖于操作者的行为，如在设备中物品的定位和实验室人员的移动。本中心的全部生物安全柜必须具有中心证明/服务合同以及至少每年鉴定。生物安全办公室联系确定需每年鉴定的日期。当转让给新买主、报废、从中心搬走或从其他单位或制造商获得生物安全柜时，须预先通知生物安全办公室。如设备有服

31、务或维修需要（例如，更换荧光灯、开关等）应联系生物安全办公室。在生物安全柜被重新贮存、维修（内部）或报废前，必须由有证的技师用甲醛等专业排污。购买生物安全柜应与生物安全办公室协调。生物安全办公室评价全部生物安全柜的购买要求。科室不购买和使用超净工作台，因为超净工作台的空气吹向工作表面而进入操作者的面部和（皮肤）破损处。超净工作台不能提供保护人员或环境防止可传染性或潜在可传染性因子、过敏原、化学品或物质。4.3人员管理实验室应建立工作人员上岗考核制度，所有与实验活动相关的人员都应经过培训并取得上岗资质。培训对象应包括实验室管理人员、实验室技术人员、样本运输人员、废弃物处置人员、仪器设备维修人员及

32、保洁工等。实验室相关人员应每年接受生物安全培训。培训组织机构应采取有效方法对培训的效果进行评估。科室应建立人员培训档案。人为的失误和不规范的操作会极大地影响所采取的安全措施对实验室人员的防护效果。因此，熟悉如何识别与控制实验室危害的有安全意识的工作人员，是预防实验室感染、差错和事故的关键。基于这一原因，不断地进行安全措施方面的在职培训是非常必要的。一个有效的安全规程首先始于实验室管理者，管理者应确保安全的实验室操作及程序融合到工作人员的基本培训中。安全措施方面的培训是新工作人员岗前培训的有机组成部分，应向工作人员介绍生物安全操作规范和实验室操作规程，包括安全手册或实验的操作手册。应采用诸如签名

33、传阅的方法，来确保工作人员阅读并理解这些规程。专业科室主任在对属下工作人员进行规范性实验室操作技术培训时起着关键作用，生物安全委员会可以帮助进行人员培训并研制教具和教案。4.3.1培训规划不断进行岗位安全教育对于维持实验室工作人员和后勤保障人员的安全意识是很重要的。下列各项是保证生物安全培训规划行之有效的必备要素：需求评估。这一过程包括确定相关的任务、重要性等级（以发生频率、危害程度以及复杂性来表示）以及完成这些任务的必要步骤等细节。确立培训目的。最令人满意的情况是，期望受培训者在进行培训之后，能在工作中加以应用。培训的目的是要了解开展实验的条件以及所需的熟练水平。

34、规定培训的内容和方法。培训内容是受培训者为了实现实验操作目标所必须掌握的知识或技术。通常由那些对工作和相关要求最为了解的人员来确定生物安全培训规划的内容。其他的内容可能集中在练习如何解决工作中发生的问题，以及学习纠正人们在使用某一技术过程中所犯的错误。还不能确定某种教学方法（专题讲座、计算机辅助教学、交互式影像方式等）是否会比另一种更好，教学方法的好坏很大程度上取决于特定的培训需要、培训对象的构成等。人员培训的内容应包括实验室生物安全的基本知识、基本技能、消防和应急处置预案、化学、生物危险和传染预防、应急救护等课程。还应包括：A. 吸入危险（气溶胶产物），如何使用接种环、划线接种

35、琼脂平板、移液、制作涂片、打开培养物、采血/血清标本、离心等。B. 食入危险，如处理标本、涂片以及培养物。C. 在使用注射器和针头时刺伤皮肤的危险。D. 处理血液以及其它有潜在病理学危险的材料E. 感染性材料的清除污染和处理。考虑不同培训对象的差异。有效的培训一定要考虑培训对象的特点。不同人员在资质、读写、文化、口语以及培训前所掌握的技术水平等方面都可能不一致。关于培训规划能否提高受培训者的操作技能和个人安全水平，这可能取决于培训所采用的方法。对某些人应采用更直观的或“手把手”的方式更好；而其他人则以学习文字材料更有效果。工作人员如有特别要求时也应提出，例如对听力缺陷人员的课程调

36、整。除了考虑这些因素外，建议制定安全培训规划的人员要熟悉了解成人教育的基本原则。针对不同的学习要求。教学内容（例如培训课程、录像、文字材料等）不应该同所教授的技术或主题相冲突、相抵制或没有关联。例如，如果培训的目的是要提高解决问题的能力，那么在教育中就应该强调思维推理而并非死记硬背，应该要求培养创造性的行为和或相应的反馈（肯定正确可靠）能力。此外，提供与实际工作条件相似的实践机会有助于将技能应用到实际工作中。培训评估。培训评估有助于判断培训是否达到了预定效果。培训评估通常包括下列四种方式：· 检查培训对象对所进行培训的反应· 考核培训对象对所培训

37、内容的记忆和/或操作执行情况· 评估培训对象在工作中的行为变化· 按培训机构的目的或目标来考查是否已有明确的效果。对培训效果最完整的评估应包括全部上述四个方面。仅考虑培训对象对所进行培训的反应是一种最不有效的评估方法，因为这种反应与培训对象对培训内容的实际掌握程度之间可能没有关系，它也不应作为评估培训效果的唯一指标。培训调整。由于衡量结果的标准多种多样，因此对培训效果的评估很难表明培训规划究竟是完全成功还是彻底失败。通常的结果为，培训对象与其他人相比，对课程内容的某些部分会有更好的理解、掌握和应用。培训所造成的知识或能力上的不同或差异，可能提示是否需要更长的培

38、训时间、采用其他的培训方法或聘请更有能力的教师。5.医学监督程序。医学监督程序由生物安全办公室管理。程序的目的是对员工作定期的健康评估，关注对特殊的生物因子员工可能的处理（方式）有关的因素或条件。对特殊的员工医学监督程序可以做一些预防测定，包括免疫、定期身体检查和采集血清样本。实验室应定期对实验人员开展与其从事实验活动相关的健康体检，建立人员健康档案。实验室工作人员应在身体状况良好的情况下进入实验区工作，若出现疾病、过劳状态或其他意外状况，则不应进入实验区或立即退出实验区。医学监督程序的目的是：u 推荐下列的合适的医学预防（措施）u 做员工的定期评价以决定假如与工作相关的医学条件是普遍的，这样

39、的话，采取确定的测定以减轻他们的（影响）对一个特定的员工医学监督的范围将是非常不同和依赖于：Ø 课题本身存在的潜在因素Ø 那些直接或潜在暴露生物因子的员工与现在或以前健康状况有关的某些附加因素医学监督将可提供员工可能导致的潜在暴露。5.1暴露于结核杆菌员工的筛选面对职业暴露于结核杆菌的员工在科室生物安全办公室登记。职业安全和健康管理从下列范围鉴定潜在暴露：u 可能处理肺结核菌的实验室有风险新员工在雇用时必须用肺结核皮肤试验（PPD）测试TB暴露以建立其基础值。有风险全体员工必须每年做PPD试验。暴露于活性TB案例中的员工必须报告在暴露时初始TB试验基线和以后暴露3个月测试的

40、事件和经历。5.2免疫在某些情况下，做特殊研究的人员要用合适的疫苗免疫，诸如狂犬病，风疹和麻疹。疫苗建议B型肝炎疫苗推荐给使用人类血液，体液或组织工作的人员其他疫苗由员工健康医生决定。在一些案例中定期收集适当的上述血清样本测定疫苗引起的抗体。5.3医学限制5.3.1怀孕一般认为在怀孕期间暴露于某些传染因子例如母亲被因子感染可能会影响胎儿。怀孕的或将怀孕的妇女要告知生物安全办公室。员工要与生物安全委员会及生物安全办公室讨论关于实验操作与怀孕的风险问题。生物安全办公室是怀孕妇女询问任何问题或涉及到有关她们工作环境风险的机构，同时办公室又扮演着怀孕员工和她们各自的部门负责人之间的联络员角色。5.3.

41、2生殖生物学危害生殖生物学危害包括但并不仅仅限于下列：u 巨细胞病毒（CMV）u B型肝炎病毒（HBV）u E型肝炎病毒u 人类免疫缺陷病毒（HIV）u 人类细小病毒B19u 风疹（德国麻疹）u 淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒u 水痘带状疱疹病毒（鸡疹）只要需要，生物安全办公室与各专业科室一起去评价实验室工作程序以确保最小的暴露。5.3.3其它限制经过与员工及医生讨论后，制定员工的限制和推荐的基线。以条件为例证明特殊预防感染、免疫抑制条件和抑制免疫系统的药物治疗。因此，假如你正处于上述任何条件，你必须将有关情况告知你的医生和办公室。5.4员工血清贮存许多传染病并非明显疾病条件引起。可预先收集新进员工

42、、传染病实验室员工的血清作为本底血清。6个人防护装备（PPE）个人防护装备是减少操作人员暴露于气溶胶、飞溅物以及意外接触等危险的一个屏障。实验室应具备足够的符合不同级别的个人防护装备，供实验人员选择和使用。6.1实验服、隔离衣进入实验区域必须穿实验服，反复使用的实验服必须是耐用的。在二级生物安全实验室里从事病原微生物学实验和HBV、HCV、HIV等血清学检测工作时，应该在实验服外面穿上隔离衣。每隔适当的时间应更换实验服以确保清洁，当实验服或隔离衣已被危险材料污染时应立即更换，放在指定的位置，告知保洁人员先消毒再清洗。实验服、隔离衣不得穿离实验区域。6.2 手套手套应符合舒服、合适、耐磨、耐撕的

43、要求。在进行实验室一般性工作，以及在处理感染性物质、血液和体液标本时，应戴手套，并保证：¨ 所戴手套无漏损；¨ 戴好手套后应完全遮盖手及腕部；¨ 在撕破、损坏或受污染时应立即更换手套；¨ 在完成工作后应摘除手套并彻底洗手。用过的一次性手套应丢弃在生物垃圾袋内；¨ 手套不得戴离实验室区域。6.3 工作鞋实验区域必须穿不露脚趾的鞋，鞋应舒适，鞋底防滑。推荐使用皮制的不渗液体的鞋类。从事临床基因扩增检验项目和在二级生物安全实验室工作时应穿一次性鞋套，在从事可能出现漏出的工作时也应穿一次性鞋套。用过的鞋套应丢弃在生物垃圾袋内，鞋套不得穿离实验室区域。6

44、.4 护目镜在HIV初筛实验室，应备有护目镜。在从事可能出现飞溅的工作时应戴护目镜，可避免实验物品飞溅对眼睛造成的伤害。护目镜不得戴离实验室区域。6.5 口罩、帽子 在无菌室从事无菌实验时应戴口罩、帽子。在从事可能出现飞溅的工作时应戴口罩、帽子。用过的口罩、帽子应丢弃在生物垃圾袋内，口罩、帽子不得戴离实验室区域。7实验室设备 实验室所用设施、设备和材料应符合国家相关标准和规定要求。一级病原微生物实验室和二级病原微生物实验室的设施设备要求。7.1 生物安全柜有生物安全柜的科室要有一个生物安全柜的操作规程。合适地使用生物安全柜能提供一个清洁的工作环境。生物安全柜能提供给人员、物品和环境的保护。生物

45、安全柜隔离来自被限制的生物危害材料区域人员的生物危害。生物安全柜藉由经过高效率微粒子空气滤过器(HEPA)过滤空气中烟雾状生物危害性材料。吸入的空气在进入生物安全柜工作区域之前经一个 HEPA 滤过器过滤。排气也通过 HEPA滤过器过滤。气溶胶在生物安全柜的工作区域中产生被包含在生物安全柜里面。二级生物安全柜操作程序:l 如果使用,把紫外灯关掉；打开荧光灯和排风机。l 用75%的乙醇或适当的消毒剂消毒所有的内部表面。l 将物品按程序放入生物安全柜内的位置;不要阻塞进气孔。等候 2-3 分钟对工作区域清洁。l 在工作区域之内，物品之间保持适当的间距。l 工作应该从干净的到污染的地方进行。l 工作

46、完毕后,让柜内的物品在移出之前运行 2-3 分钟。l 用75%乙醇或适当的消毒剂擦拭所有的工作表面。l 关闭荧光灯和排风机。需要注意的是：A. 生物安全柜运行正常时才能使用。B. 生物安全柜在使用中打开的玻璃观察挡板不能超过规定高度。C. 安全柜内应尽量少放器材或标本，不能影响后部压力排风系统的气流循环。D. 安全柜内不能使用明火，否则燃烧产生的热量会干扰气流并可能损坏过滤器。允许使用微型电加热器，但最好使用一次性无菌接种环。E. 所有工作必须在工作台面的中后部进行，并能够通过玻璃观察挡板看到。F. 尽量减少操作者身后的人员活动。G. 操作者不应反复移出或伸进手臂以免干扰气流。H. 不要使实验

47、记录本、移液器以及其它物品阻挡空气格栅，因为这将干扰气体流动，引起物品的潜在污染和操作者的暴露。I. 在安全柜内的工作开始前和结束后，安全柜的风机应至少运行23分钟。J. 在生物安全柜内操作时，不能进行文字工作。许多生物安全柜装备有杀菌的紫外线灯。照射时间、距离、灰尘或碎片的出现和紫外灯强度影响紫外灯的杀菌效果。紫外灯的可见兰紫色光不指示有杀菌的效应。紫外灯需要定期地清洁排除灰尘。紫外灯可能损害眼睛、皮肤和实验室设备。紫外灯应该在有人进入前被关闭。禁止使用到期的紫外灯。7.2 离心沉淀程序所有的离心沉淀将使用放入密封的离心转子中的离心机保护桶或密封的离心管。如果使用的是无效的小离心机安全杯，则

48、应该在生物安全柜中操作离心机。操作离心机的每个人应该熟悉相应的操作程序。在操作记录簿上详细记录离心机和转子使用情况以决定技术维修的需要。下列是被推荐的离心沉淀法程序:l 在使用离心管和瓶之前检查它们有否压力标记。l 在生物安全柜里面轻轻装满所有的离心机管和瓶。在放入安全杯或转子前用消毒剂擦拭离心管。l 离心管决不要装得太多,当离心管装得太满可能发生泄漏。最大为离心管的3/4。l 离心前离心管的盖子处于盖着状态。l 所有的管子放入保护桶或密封转子中。检验保护桶的“O”型密封圈和保护桶或转子的内部。l 在放入转子或保护桶之前用消毒剂擦拭管子或瓶子的外面。l 不要超过安全的转子速度。l 如果一个异常

49、的情况发生(噪音或振动) 立即停止离心机。l 离心完毕后在打开离心机之前等候五分钟。这将会使气溶胶沉淀下来以防止事故的发生。l 在每次使用后清洁和防护输送器或转子和离心机内部。l 在生物安全柜中打开保护桶或转子。7.3 化学吸附真空管和过滤器化学吸附真空管和过滤器防止传染性和非传染性物质吸入真空管线里。化学吸附真空管和过滤器:l 将化学消毒剂放入化学吸附瓶中。让被吸附液体完全稀释。(例如: 100 毫升普通漂白氯开始,吸入 900 毫升的液体和废弃物)。l 如果真空管堵塞或者液体接触过滤器则检查真空过滤器并替换。旧的过滤器将作医学废弃流处理。组织培养瓶过滤器消毒剂溶液溢出瓶收集瓶真空管7.4注

50、射器和针头注射器和皮下注射器的针头是一种危险的器械。为了减少偶尔的意外注射、气溶胶的产生或溢出，当有替代的方法可以利用的时候，应避免使用注射器。例如，在注射器上为口腔或鼻腔的注射使用钝针或套管。当使用肠外注射的时候，推荐下列使用皮下注射器针头和注射器的注意点：l 在生物安全柜里使用注射器和针头时，最好和避免拿注射器的手作快速和不必要的移动。l 检查玻璃注射器是否有裂纹和碎裂以及针头是否有倒钩和堵塞。这些检查应该在使用和消毒前完成。只使用针头锁闭为了确信针头被安全锁定放入桶内。无论什么时候只要有可能就用塑料的可任意处理的注射器替换玻璃制的注射器。l 只要可能就使用更安全的针。l 使用操作针和注射

51、器的时候戴乳胶手套。l 装满注射器时尽量减少注射器内泡沫和气泡的产生。l 排除掉注射器内多余的气体、液体和泡沫，垂直打入湿的含合适的消毒剂的脱脂棉花内或打入含有消毒棉花的小瓶内。l 不要为了混匀而用注射器将有传染性物质的液体强力地注射进开口的小瓶里。如果注射器的针头在试管里液面下则用注射器混合仅仅是用来补液。l 注射器从试管中被装满时，注意不要污染注射器的中部，这可能导致传染性物质转移至手指头。l 在从橡皮塞中拔除注射器和针头时，用含适当的消毒剂的脱脂棉花包裹和塞住针头。如果有涉及消毒剂污染到敏感的实验材料，可以使用消毒的脱脂棉，并立即丢弃至生物危害袋内。l 将注射器丢入专用的容器内。别折弯、

52、别剪、别重复或以别的方式处理针。如果重复使用不可避免，使用相同的手法。别将注射器扔进非专用的容器内。7.5移液管l 决不要用嘴吸移液管；在吸取传染性材料的时候总是使用一些移液管辅助器具。所有危险的东西更适宜在生物安全柜里操作。l 传染性的或有毒的材料不应该从移液管中强力地排出。l 传染性的或有毒的液体要防止因用空气吹打液体而导致泡沫的产生。l 决不应该为了混合而用移液管反复地吹吸含有传染性或者有毒物质的液体。l 移液管的排出除应该与液体或琼脂水平尽可能地近，并且，只要可能内容物应该沿着管壁或瓶壁排出，不要从高处排出。l 用于吸取传染性或者有毒材料移液管尾部应该用棉花塞住，甚至在操作AIDS时用安全移液管。l 避免从移液管中偶然落下的传染性或者有毒的材料到工作面。在抛弃或再次使用前放含湿的消毒剂的毛巾或其他的能吸收的材料到工作面和高压锅上。l 污染的移液管应该放入类似次氯酸盐消毒剂的容器内。装移液管的圆筒不要垂直地放置由于其高度，必须放在生物安全柜外的地面上。从生物安全柜中拿出污染的移液管，将它们垂直地放入容器中防止从移液管中的液体滴入到地面上或容器的边缘而形成气溶胶，并且，移液管顶部常常超出消毒剂的液面。l 为被使用的移液管在生物安全柜的范围内放置丢弃盘。经适当时间的浸泡后，多余的消毒剂小心的倒入水池。盘子和移液管一起高压消毒，用清洁的盘子换上新鲜的消毒剂备用。