如何写好自然科学基金申报书

1、v 医学科学部负责医学科学领域基金项目的申请、受理、评审、资助等项目管理及其它相关工作。医学科学部下设1个综合处，8个科学处，主要资助针对机体细胞、组织、器官和系统的形态、结构、功能及发育异常以及疾病发生、发展、转归、诊断、治疗和预防等开展的基础研究和应用基础研究。 v 医学科学部共设一级申请代码31个，二级申请代码426个 。此申请代码体系的基本特点是： 一级申请代码是以器官系统为主线，从科学问题出发，将基础医学和临床医学融合，把各“学科”的共性科学问题放在一个评审体系中，取消了传统的“学科”和“临床科室”的概念； 二级申请代码按照从基础到临床，从结构、功能及发育异常到疾病状态的顺序进行设立

2、，兼顾疾病相关的基础研究和应用基础研究，统筹考虑各系统内的结构、功能及发育异常与先天性疾病、遗传性疾病、免疫相关性疾病、炎症与感染、移植等各研究领域的科学问题。 医学科学部将遵循科学研究自由探索和国家需求导向的医学科学部将遵循科学研究自由探索和国家需求导向的“双力驱动双力驱动”规律，重点支持规律，重点支持针对防病、控病和治病中的基础科学问题为目标开展的创新性研究，藉以提高我国医针对防病、控病和治病中的基础科学问题为目标开展的创新性研究，藉以提高我国医学科学基础研究和应用基础研究水平。学科学基础研究和应用基础研究水平。鼓励从医学实践中凝练和发掘科学问题，开展新学术思想和研究方法的创新研究；鼓励从

3、医学实践中凝练和发掘科学问题，开展新学术思想和研究方法的创新研究；鼓励基础医学和临床医学相结合的转化医学研究；鼓励基础医学和临床医学相结合的转化医学研究；鼓励利用多学科、多层面的新技术、新方法，从分子、细胞、组织、整体等不同层次，鼓励利用多学科、多层面的新技术、新方法，从分子、细胞、组织、整体等不同层次，针对疾病的发生、发展机制开展深入系统的整合医学研究；针对疾病的发生、发展机制开展深入系统的整合医学研究；鼓励在已有工作基础上提出创新性思想而开展的深入系统研究；鼓励在已有工作基础上提出创新性思想而开展的深入系统研究；鼓励与其他领域融合的学科交叉研究；鼓励与其他领域融合的学科交叉研究；鼓励开展国

4、际交流与合作研究；鼓励开展国际交流与合作研究；鼓励以高水平研究论文、专利等自主知识产权等为代表的科研产出；鼓励以高水平研究论文、专利等自主知识产权等为代表的科研产出；关系国计民生的重大疾病、突发公共卫生事件、危害人民群众健康的常见病、多发病关系国计民生的重大疾病、突发公共卫生事件、危害人民群众健康的常见病、多发病的基础研究与应用基础研究仍将是资助的重点领域，同时注意扶持相对薄弱的研究领的基础研究与应用基础研究仍将是资助的重点领域，同时注意扶持相对薄弱的研究领域，保障各研究领域均衡协调发展；域，保障各研究领域均衡协调发展；重视科技欠发达地区和中青年科研人才的培养。重视科技欠发达地区和中青年科研人

5、才的培养。从既往医学相关项目申请情况看，存在的问题包括：从既往医学相关项目申请情况看，存在的问题包括： 跟踪性和描述性的研究较多，临床实践中凝练和发掘的科学问题不够，独具特色或原创性的研究不多； 部分申请未能掌握国际同类及相关领域的研究动态，研究内容缺乏创新性； 部分申请立论依据缺乏对科学问题的有效凝练或科学假说，停留在观察性的描述层面； 存在盲目追求使用高新技术和跟踪热点问题的倾向，而忽略具有自己特点的持续性的研究； 研究内容的科学意义认识或表述不清； 研究设计不够慎密或者缺乏直接相关的研究基础，缺乏具有说服力的完成项目的可行性分析和完成能力； 申请者提供的信息不全或申报内容失实； 未按照申

6、请指南的要求申报。 一处：呼吸系统疾病、循环系统疾病、血液系统疾病、消化系统疾病、老年医学二处：泌尿系统疾病、生殖系统疾病、内分泌系统疾病、眼科学、耳鼻喉科学、口腔医学三处：神经系统疾病、精神疾病、影像医学与生物医学四处：医院病原微生物与感染性疾病、皮肤及其附属器官疾病、运动系统疾病、创伤、烧伤、整形、检验医学、特种医学、急重症医学、康复医学五处：肿瘤学六处：预防医学、医学免疫学、地方病学、职业病学、放射医学、法医学七处：药物学、药理学八处：中医学、中西医结合学、中药学v符合科学基金的资助范围和学科性质（仔细阅读指南），科学意义与学术价值，创新性。v上：原有研究的深入和拓展（扬长避短）。v中（

7、没有基础）：大量阅读文献，仔细分析推敲，找出薄弱点。新颖是关键。q重复研究：不完全了解前人的工作；不阅读项目指南,不查阅资助项目汇编 研究内容甚至项目名称都与前一两年资助项目雷同，无创新性。q打一枪换一个地方。 少或不用缩写词;明确,贴切;忌抽象和空泛。最好让别人一看题目就能知道你做哪方面的研究、研究对象、解决的问题。例1：蛋白磷酸酶4在胰岛素抵抗中的作用研究 蛋白磷酸酶4在TNF-诱导的胰岛素抵抗中的作用 与调控机理研究例2：核糖体蛋白L22在肺动脉高压发病中的作用研究 核糖体蛋白L22参与调控人肺动脉阻力血管平滑肌 细胞异常增殖的分子机制研究想让什么样的专家评您的“申请书”？例1：肺动脉高

8、压；人肺动脉平滑肌细胞；核糖体蛋白L22 人肺动脉平滑肌细胞；核糖体蛋白L22 ；分子机制；基因芯片例2：心肌梗塞；心功能不全；热休克蛋白；血管生成 心肌梗塞；热休克蛋白；血管内皮细胞；转基因；信号传导 v假设评审专家没有足够的时间看后面的内容，也能把握整假设评审专家没有足够的时间看后面的内容，也能把握整个标书的主要内容。个标书的主要内容。 v400400字以内，概述研究方法、内容、目标、科学意义字以内，概述研究方法、内容、目标、科学意义: :问题问题提出（即背景提出（即背景,1,12 2句）句）, ,研究内容为主（要体现研究思研究内容为主（要体现研究思路）路）, ,意义（意义（1 12 2句

9、句, ,要明确、具体）。要明确、具体）。 如：如：“用用方法（手段）进行方法（手段）进行研究，探索研究，探索/ /证明证明问题，对阐明问题，对阐明机制揭示机制揭示规律有重要意义，规律有重要意义，为为奠定基础提供奠定基础提供思路思路”。 胰岛素抵抗状态下肝糖异生异常是导致T2DM空腹高血糖的主要原因，其受胰岛素信号和胰高血糖素信号通路调节，PGC1/FOXO1在此过程中起重要作用。本项目组前期工作中通过PGC1转录活性的高通量细胞功能筛选发现新基因CL91具有抑制效应，更重要的是其也能抑制肝糖异生限速酶PEPCK的转录活性，依赖于IRS/CRE顺式元件负调控PGC1的活性是可能的参与机制。本研究

10、拟通过原代细胞和T2DM小鼠，从分子水平、组织水平和动物体内实验，探讨正常和胰岛素抵抗状态下新基因CL91影响肝糖异生的机制，以及在胰岛素信号和胰高血糖素信号调控下，新基因CL91和肝糖异生的关系，并阐明PGC1/FOXO1在此过程中的作用机理。本研究以PGC1/FOXO1相互作用为切入点，旨在研究胰岛素抵抗状态下新基因CL91对肝糖异生的影响以及同空腹高血糖的关系，为进一步发掘CL91的基因功能以及T2DM的临床应用研究提供线索。 胰岛素抵抗在2型糖尿病及其并发症的发病过程中起重要作用。炎性因子TNF-是导致胰岛素抵抗的重要因素之一。我们前期的研究显示，TNF-通过激活NADPH氧化酶引起氧

11、化应激，进而活化JNK及NFB信号通路，导致胰岛素抵抗。最近研究表明，TNF-可增强蛋白磷酸酶4（PP4）的活性，而PP4是JNK及NFB信号通路活化的新的调节因子。但PP4在TNF-诱导的胰岛素抵抗中的作用尚未见报道。本项目首次探讨PP4在TNF-诱导的胰岛素抵抗中的作用与调控机理，内容包括：（1）观察在TNF-诱导的肝细胞胰岛素抵抗过程中，PP4表达及活性的变化；（2）分析PP4表达及活性变化对胰岛素抵抗的影响；（3）研究TNF-对PP4活性调节机制；（4）探讨PP4作用机理，即所涉及的信号传导途径。本研究从PP4这个新视点为揭示胰岛素抵抗的发生机制奠定基础，为2型糖尿病及其并发症的防治提

12、供新的思路。RPE细胞的增殖和迁移是增生性玻璃体视网膜病变(PVR)主要病理过程, HSP70、HSP90与PVR的多个重要分子能相互作用，我们前期实验也证实抑制HSP90可以抑制RPE细胞的增殖。TTC36是我们实验室克隆的人全长新基因，经酵母双杂交、GST PULLDOWN和荧光共定位等结果显示，它可特异性和HSP70、HSP90相互作用，这提示在PVR中它可能参与了HSP70和HSP90的活性调控。本研究拟在前期工作基础上，采用细胞水平的基因超表达和RNA干扰等技术，观察TTC36过表达或表达沉默对RPE细胞的影响，并运用二维电泳、基因芯片方法对TTC36的生物学功能进行深层次的分析，进

13、而通过建立PVR兔模型，探讨TTC36与HSP70、HSP90相互作用对PVR发生发展的影响，以及具体作用的机制，从而为探索PVR的发病机制和找到新的治疗靶点奠定基础。骨桥蛋白（osteopontin,OPN）是一种分泌性钙结合糖硫酸化蛋白，在肿瘤的发生发展中起到重要的促进作用。在胶质瘤组织中OPN存在多种mRNA的剪接变异体，其表达模式及功能目前仍缺乏深入研究。本研究拟通过检测临床标本中OPN不同剪接变异体的表达并结合病人资料分析OPN各剪接变异体与肿瘤病理级别及病人预后的关系，同时构建靶向OPN的慢病毒siRNA表达载体及OPN各剪接变异体的突变型慢病毒表达载体，混合导入胶质瘤细胞中，在抑

14、制内源性总OPN基因表达的同时特异性地回复表达某一种OPN的剪接变异体，观测OPN不同剪接变异体对肿瘤细胞生长的影响，并探讨其上下游信号通路调控蛋白的表达差异，从而阐明胶质瘤中OPN各剪接变异体的表达与肿瘤病理级别及病人预后的关系，及其的功能、相应的调控机制和产生的可能原因，同时寻找基于OPN及其相关信号传导通路的人脑胶质瘤基因治疗的最优化策略。说明要做什么？为什么要做？说明要做什么？为什么要做？v研究现状评述(国际研究现状、国内研究现状)。v分析别人工作中存在的问题，从而凝练并提出问题，阐述重要性，解决及意义。v由已有的研究引出假设。v抓住关键点，说明自己的前期工作(在前期工作中发现了什么)

15、。v研究思路叙述。v可能意义的分析。v小结. (重点用黑体字)。v参考文献（2030条左右） ：权威、新（近3年内，最好是当年的）、有自引。总体要求：范围合适总体要求：范围合适; ;重点突出重点突出; ;关键问题选择准确关键问题选择准确 注意：小题大做、深做注意：小题大做、深做; ;不要大题小做、浅做。不要大题小做、浅做。v目标：目标：具体、明确、新颖（可以是假说）。具体、明确、新颖（可以是假说）。例：背景：炎症细胞产生的新因子(A)具有(离体)促心肌细胞肥大的作用。目标： 探讨A促进心肌细胞肥大的作用及机制。 探讨心肌肥厚发病的新因子A的作用及机制。 探讨联接炎症反应与心肌肥厚发病的新因子A

16、的作用及机制。v 研究内容：为完成本课题（论证假说）从不同方向（角度、层次）研究（紧扣目标，层次分明，突出重点，逻辑性强）。例：例：1.心肌肥厚发病过程中A因子的动态变化与疾病表现关系； 2.补充外源性A因子对心肌细胞肥大的影响； 3.阻断内源性A因子对心肌细胞肥大的影响； 4.A因子发挥效应是否通过已知的心肌肥大因素； 5.A因子效应的分子机制； 6.动物模型验证体外的结果。v完成本研究在理论上和技术上的完成本研究在理论上和技术上的“瓶颈瓶颈”, ,应简述应简述对策。对策。例例: :1.1.证明A是心肌肥厚发病的新因子是拟解决的关键问题。从分子(gain of function and lo

17、ss of function)、细胞(功能)和整体(动物模型、患者)不同层面探讨。2.另一个拟解决的关键问题是明确A因子发挥效应是否通过已知的心肌肥大因素。采用RNA干扰和激动剂、抑制剂等方法来证实。例例2 2n胡须体觉皮层局灶性脑缺血模型的建立。此模型制作技巧性较强，手术操作精细，目前国内还没有应用此模型的报道。目前我们研究组成员已在美国学习掌握了此模型的制作技术。n神经干细胞移植技术要求较高，移植后存活率低是难点。我们应用robos受体抑制剂R5体外处理神经干细胞，去除抑制轴突生长的Slits/robos信号系统的作用，然后进行干细胞移植，同时结合外周胡须刺激，以期为移植的干细胞提供一个更

18、好的生存环境，从而增加干细胞的存活率。n移植的干细胞与宿主细胞之间建立突触联系，是干细胞移植治疗最终成功的关键，也是难点。我们拟用Hoechst 33342 和GFP(绿色荧光蛋白) 双标记干细胞，再通过免疫荧光染色，直观显示干细胞与宿主细胞之间突触联系情况。例例3 3n本项目基于人肝癌细胞系HepG2 的前期研究，提示新基因KL92 可能参与肝糖异生的调控，但是，原代细胞实验是否支持这一假设？本项目通过分离正常C57BL/6J 和ob/ob 小鼠原代肝脏细胞，进行体外培养；同时，构建腺病毒表达载体，转染原代细胞后，在较高的转染效率保障下，对前期肝癌细胞系中发现的现象进行原代细胞验证。n本项目

19、目前的理论推论是基于细胞正常状态下的结果，但是在T2DM 或肝脏胰岛素抵抗的情况下，其分子作用机制有如何的变化？本项目将研究在胰岛素抵抗状态下，新基因KL92 对肝糖异生的调控功能。对于HepG2 细胞系的诱导，主要采用Glucosamine 法进行；对于原代肝细胞，主要根据不同状态来源的模型小鼠进行原代细胞培养。此外，还拟通过动物水平和人体水平，比较T2DM 状态下和正常状态下，新基因KL92在不同组织间的表达差异规律，如经费支持抗体制备成功，还可通过western Blot/免疫组化方法检测蛋白水平的分布规律。本项目组中，有三位临床医师参与，能保证T2DM 患者肝组织的活检取样。nKL92

20、 对肝糖异生的调控是否依赖于PGC1/FOXO1 分子靶点的作用，且在不同的胰岛素信号通路和胰高血糖素信号通路活化的状态下会发生什么样的变化？通过腺病毒介导的KL92 过表达或RNAi，通过设立FOXO1 组成型激活以及dominant-Negative突变体共转染组（质粒构建已经完毕），通过下游效应的改变从而进行阐述。 研究方案要合理研究方案要合理, ,环环相扣环环相扣, ,设计好对照组设计好对照组, ,列出具体的方列出具体的方法和技术（先进、可靠、有创新）法和技术（先进、可靠、有创新）, ,技术路线可用流程图技术路线可用流程图（即实验程序（即实验程序, ,不要太繁）。不要太繁）。v选用的有

21、关方法必须与研究目标直接关联，既通过什么样方法完成研究目标。v研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析其实就是把一个问题讲具体了。v简述具体的实验方法，使评审者相信申请人确实掌握了该方法。v尽可能使用经典的、公认的研究方法。如果使用的不是经典或公认的方法，解释该方法比经典方法的好处、可信度等。v该申请在理论上是否可行。v实验设计是否合理。v重点放在研究方法和研究方案的可行性上：已掌握的研究方法；材料来源；实验条件；前期工作基础；项目组人员结构。v可行性分析除了对本单位的研究实力进行恰当的分析外，最好找一家比自己单位强的合作伙伴，把他们的软硬件条件也加进去，现在的项目越来越看重多单位合作。v研究

22、基础扎实：研究基础扎实：前期我们在淋巴增殖性疾病的发病机制、生物学特性及预后相关因素前期我们在淋巴增殖性疾病的发病机制、生物学特性及预后相关因素方面做了大量工作，为实施本课题奠定了良好的基础，包括方面做了大量工作，为实施本课题奠定了良好的基础，包括 。v研究目标切实：研究目标切实：本课题的相关研究是建立在我们前期研究结果之上本课题的相关研究是建立在我们前期研究结果之上, ,以及我们对以及我们对miRNAmiRNA如何调节基因表达和在肿瘤发生机制中作用的深入认识的基础上如何调节基因表达和在肿瘤发生机制中作用的深入认识的基础上, ,确保了研究目标的确保了研究目标的切实可行。切实可行。v临床标本充足

23、：临床标本充足：。v技术平台与硬件设施完善：技术平台与硬件设施完善：已具备了良好的分子生物学和细胞生物学技术平台已具备了良好的分子生物学和细胞生物学技术平台, ,例例如：如：; ; 也具有先进完善的仪器设备也具有先进完善的仪器设备, ,主要有主要有。v团队年轻优秀：团队年轻优秀：课题申请者课题申请者; ; 课题组成员结构合理课题组成员结构合理, ,涵盖了本课题所需的各学科涵盖了本课题所需的各学科的人才。的人才。v研究经费充足研究经费充足：申请者目前主持申请者目前主持, , 从经费上进一步为本课题顺利完成提供保证。从经费上进一步为本课题顺利完成提供保证。v国际合作与交流国际合作与交流：与英国与英

24、国和德国和德国建立并保持长期学术交流和合作关系建立并保持长期学术交流和合作关系, ,共同共同开展开展。v所谓特色与创新即在本项目研究领域中申请者与国内外同所谓特色与创新即在本项目研究领域中申请者与国内外同行所不同的，应从对包括项目的立论依据、研究内容、研行所不同的，应从对包括项目的立论依据、研究内容、研究方法与手段、技术路线及实验方案上的研究与创新点进究方法与手段、技术路线及实验方案上的研究与创新点进行概括、提炼并集中反映出来行概括、提炼并集中反映出来: :学术思想（理论）的创新学术思想（理论）的创新; ;技术方法的创新技术方法的创新; ;研究新模式。研究新模式。nTTC36是我们实验室克隆的

25、一全长新基因，它在GenBank中的注册号是EU489483。n首次发现TTC36是HSP70，HSP90的调控蛋白，而HSP90与参与PVR的众多关键分子可以发生相互作用，通过本课题的研究对HSP在PVR中的调控作用将有新的更深入的了解，可能为治疗PVR找到新的治疗靶点。nTTC36与HSP70、HSP90相互作用对PVR的作用研究，具源头创新。n新基因KL92是本申请人前期参与工作中识别的一个功能基因，目前为止，除大规模序列分析后的ORF预测报道外，尚未见国内外有解析KL92基因功能的研究报道。因此，本项目属于源头创新，所研究的对象和所挖掘的任何信息都将具有突破性的价值。n研究KL92在肝

26、糖异生过程中的功能和机制目前未见任何报道，有望揭示新的作用机制。n本项目的实验设计中具有系统性的创新特色，从细胞系、原代细胞、组织和动物整体水平等多方面进行实验设计，拟挖掘KL92和肝糖异生的关系，并以PGC1/FOXO1为靶点，探索其可能机制。n本研究中，除KL92/PGC1/FOXO1的作用探索外，着重研究在T2DM疾病状态下，特别是肝脏胰岛素抵抗状态下，分子间的作用机理，这一层面上相对的工作在国内外都相对匮乏。n课题利用课题利用BOPBOP诱导叙利亚仓鼠胰腺癌肿瘤模型，同系动物进行胰腺癌肿瘤干细胞的分选诱导叙利亚仓鼠胰腺癌肿瘤模型，同系动物进行胰腺癌肿瘤干细胞的分选和接种，有效避免流式分

27、选肿瘤干细胞、一种接种成瘤的不足，目前尚无类似报道。和接种，有效避免流式分选肿瘤干细胞、一种接种成瘤的不足，目前尚无类似报道。n定向培养肿瘤组织中的干细胞，经过此轮初筛可以减少杂质细胞的干扰。避免从肿瘤定向培养肿瘤组织中的干细胞，经过此轮初筛可以减少杂质细胞的干扰。避免从肿瘤细胞悬液中大规模的流式或者磁珠的细胞悬液中大规模的流式或者磁珠的“海选海选”，缩小被分选的范围，大大增加了流式，缩小被分选的范围，大大增加了流式分选的效率和准确性。相对传统的肿瘤干细胞分离鉴定方法有重大改进。分选的效率和准确性。相对传统的肿瘤干细胞分离鉴定方法有重大改进。n结合仓鼠胰腺肿瘤干细胞表型，人类胰腺癌组织中分选出

28、相同表型的细胞，接种结合仓鼠胰腺肿瘤干细胞表型，人类胰腺癌组织中分选出相同表型的细胞，接种NOD/SCID IL2R-nullNOD/SCID IL2R-null小鼠，观测成瘤能力。小鼠，观测成瘤能力。 NOD/SCID IL2R-nullNOD/SCID IL2R-null小鼠是目前最能模拟小鼠是目前最能模拟人类免疫系统的模式动物，最大限度避免了一种接种成瘤的不足。并检测胰腺癌相关人类免疫系统的模式动物，最大限度避免了一种接种成瘤的不足。并检测胰腺癌相关基因表达。从分子生物学和细胞生物学两个角度推测基因表达。从分子生物学和细胞生物学两个角度推测nestinnestin细胞和胰腺肿瘤干细胞的细胞和胰腺肿瘤干细胞的关系。目前尚无文献报道。关系。目前尚无文献报道。v内容分划于各年度内容分划于各年度, ,层次分明层次分明, ,不要用专门时间去不要用专门时间去“文献调研、文献调研、结题、结题、整理、撰文整理、撰文”。v预期结果：明确预期结果：明确, ,可以达到可以达到, ,留有余地留有余地, ,与预期目标呼应：与预期目标呼应：该研究可能得出的结论；该研究可能得出的结论；该研究可能提出的进一步研究的线索；该研究可能提出的进一步研究的线索；发表的研究论文；发表的研究论文；申请的技术专利；