琥珀酸脱氢酶活性的测定_第1页
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文档简介

1、12 以脱氢方式使物质氧化的酶,称脱氢酶。琥珀酸脱以脱氢方式使物质氧化的酶,称脱氢酶。琥珀酸脱氢酶氢酶(succinate dehydrogenase)是三羧酸循环中的一个是三羧酸循环中的一个酶,能促使琥珀酸脱氢成为反丁烯二酸,并将脱下的氢酶,能促使琥珀酸脱氢成为反丁烯二酸,并将脱下的氢传递给受氢体。用甲烯兰作受氢体,结果甲烯兰被氢还传递给受氢体。用甲烯兰作受氢体,结果甲烯兰被氢还原生成无色的甲烯白。原生成无色的甲烯白。3COOHHCCH2CH2COOH+ MBHOOCCH + MB2H琥珀酸琥珀酸反丁烯二酸反丁烯二酸COOH4 在无氧环境下在无氧环境下 ,琥珀酸脱氢酶的活性与甲烯兰脱,琥珀酸

2、脱氢酶的活性与甲烯兰脱色的速度成正比,使定量甲烯兰脱色所需时间的倒数,色的速度成正比,使定量甲烯兰脱色所需时间的倒数,可以用来表示酶的活性。本实验用液态石蜡制造无氧环可以用来表示酶的活性。本实验用液态石蜡制造无氧环境,这样可以不用真空设备或氮气。境,这样可以不用真空设备或氮气。5 1 1、材料、材料 新鲜肌肉糜新鲜肌肉糜 2 2、试剂、试剂 (1 1)0.01%0.01%甲烯兰溶液;甲烯兰溶液; (2 2)0.020.02M M琥珀酸溶液琥珀酸溶液 (3 3)液态石蜡;)液态石蜡; 3 3、仪器设备、仪器设备 试管及试管架、恒温水浴锅、试管及试管架、恒温水浴锅、1 1毫升及毫升及2 2毫升的吸

3、量毫升的吸量管、烧杯。管、烧杯。6 取取2 2支试管,各加支试管,各加0.020.02M M琥珀酸溶液琥珀酸溶液0.50.5毫升,毫升,0.01%0.01%甲烯兰溶液甲烯兰溶液1 1毫升和液态石蜡溶液毫升和液态石蜡溶液2 2毫升。再分别加入毫升。再分别加入0.50.5克肌肉糜和煮过的肌肉糜分别混匀后,将试管放入克肌肉糜和煮过的肌肉糜分别混匀后,将试管放入3737水浴中保温,随时观察并记录甲烯兰脱色过程和时水浴中保温,随时观察并记录甲烯兰脱色过程和时间,酶活力间,酶活力=1/=1/时间。时间。7 3737水浴中保温随时观察并记录甲烯兰脱色过程和时水浴中保温随时观察并记录甲烯兰脱色过程和时间,酶活力间,酶活力=1/=1/时间时间81.1.琥珀酸脱氢酶活性的测定的原理是什么琥珀酸脱氢酶活性的测定的原理是什么? ?2.2.实验过程中要

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