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文档简介

1、专题5DNA和蛋白质技术课题1DNA的粗提取与鉴定理一理判一判1 .可选猪血细胞作为提取DNA的材料。(X)2 .随着NaCl溶液浓度的升高,DNA在其中的溶解度先力高后降低。(X)3 .DNA不溶于冷酒精中,而细胞中的其他物质易溶于酒精溶液中。(V)4 .蛋白质和DNA都能忍受80C以上的高温。(X)5 .沸水浴条件下,DNA的结构仍可保持不变。(X)6 .在酒精溶液中析出DNA时,搅拌需轻缓地进行,以免严重断裂DNA分子。(,)7 .二苯胺试剂需要现配现用。(,)8 .将制备的含有DNA的滤液加入6075C的恒温水浴箱中保温1015min,可以将蛋白质沉淀析出。(,)悟一悟1 .制备鸡血细

2、胞液时,要在取鸡血的同时加入柠檬酸钠(防止血液凝固),静置后上层是血清,下层为所需要的血细胞。2 .破碎细胞应彻底充分。3 .对提取的含杂质较多的DNA进行提纯时,所用的酒精必须经过充分预冷。4 .实验过程中,搅拌时玻璃棒不能直插烧杯底部,并且搅拌要轻缓,以便获得较完整的DNA分子。5 .常温下,二苯胺试剂要现配现用,否则会影响鉴定的效果。感悟体会:练一练1.2019江苏高考真题下列关于DNA粗提取与鉴定的叙述,错误的是()A.用同样方法从等体积兔血和鸡血中提取的DNA量相近B.DNA析出过程中,搅拌操作要轻柔以防DNA断裂C.预冷的乙醇可用来进一步纯化粗提的DNAD.用二苯胺试剂鉴定DNA需

3、要进行水浴加热解析:兔属于哺乳动物,具红细胞没有细胞核及各种细胞器,提取不到DNA,而鸡属于鸟类,其红细胞内含有细胞核与各种细胞器,DNA含量较多,A项错误;DNA分子从细胞中被释放出来且除去蛋白后是非常容易断裂的,如果太过剧烈的搅拌,DNA链可能会被破坏,因此轻柔搅拌的目的是为了获得较完整的DNA分子,B项正确;在冷的95%酒精溶液中DNA的溶解度最低,DNA的沉淀量最大。如果用热的95%酒精会提高DNA的溶解度,不能完全使DNA沉淀,C项正确;将析出的DNA溶解在2mol/L的NaCl溶液中,加入二苯胺试剂后需要水浴加热才会呈现蓝色,D项正确。答案:A2.下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实

4、验的叙述,错误的是()A.酯母菌和菜花均可作为提取DNA的材料B.2mol/L和0.14mol/L的NaCl溶液均可溶解DNAC.研磨植物细胞时加入洗涤剂是为了溶解DNAD.在沸水浴条件下DNA与二苯胺反应呈现蓝色解析:酪母和菜花的细胞都含有DNA,都可以作为提取DNA的材料,A项正确;2mol/L和0.14mol/L的NaCl溶液均可溶解DNA,2mol/L的NaCl溶液中DNA溶解度较高,而0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度较低,B项正确;研磨植物细胞时加入洗涤剂是为了瓦解细胞膜,C项错误;在沸水浴的条件下,DNA遇二苯胺会被染成蓝色,D项正确。答案:C考点1实验原理1 .2019山

5、西高二期中下列反映DNA溶解度与NaCl溶液浓度之间关系的坐标图中,正确的是()解析:NaCl溶液浓度为0.14mol/L时,DNA的溶解度最低;NaCl溶液浓度小于0.14mol/L时,随着NaCl溶液浓度的升高,DNA的溶解度逐渐降低;NaCl溶液浓度大于0.14mol/L时,随着NaCl溶液浓度的升高,DNA的溶解度逐渐升高。故选D项。答案:D2 .将处理后的溶液过滤后,加入与滤液体积相等的冷却的酒精溶液进行处理,可以得到较纯的DNA。这是因为()A. DNA易溶于酒精,而滤液中某些杂质不易溶于酒精B. DNA不易溶于酒精,而滤液中某些杂质易溶于酒精C. DNA和滤液中其他成分更易溶于酒

6、精D. DNA和滤液中其他成分都不溶于酒精解析:在滤液中加入酒精,用玻璃棒沿一个方向搅拌,卷起的丝状物就是析出的DNA,此处利用的原理是DNA不易溶于酒精,而滤液中某些杂质易溶于酒精,B项正确,A、C、D三项错误。答案:B3 .在DNA粗提取和鉴定实验中,如果用马血代替鸡血,其他步骤相同,那么实验结果将是()A.和用鸡血一样的效果B.比用鸡血的效果好C.和用鸡血比,效果差的很多D.比用鸡血的效果差一点解析:DNA粗提取和鉴定实验的材料要求细胞中含DNA较多,而马等哺乳动物的成熟红细胞无细胞核,不易提取到DNA,因此与用鸡血比,实验结果效果差的很多。答案:C考点2实验设计4 .2019广西桂林十

7、八中高二期中下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验叙述,错误的是()A.酯母和菜花均可作为提取DNA的材料B.DNA既溶于2mol/LNaCl溶液也溶于蒸储水C.DNA溶液加入二苯胺试剂沸水浴加热,冷却后变蓝D.向鸡血细胞液中加蒸微水搅拌,可见玻棒上有白色絮状物解析:酯母和菜花细胞中均含有较多的DNA,均可作为提取DNA的材料,A项正确;根据分析可知,DNA既溶于2mol/LNaCl溶液也溶于蒸储水,B项正确;利用DNA与二苯胺沸水浴加热呈蓝色的特征,可用于DNA的鉴定,C项正确;向鸡血细胞液中加蒸微水搅拌,可使破裂细胞,释放DNA,但不会观察到玻棒上有白色絮状物,D项错误。答案:D5.2019

8、北京高二期末有关DNA粗提取及鉴定实验的叙述,正确的是()A,兔血不可替代鸡血进行该实验B.NaCl溶液浓度越低DNA溶解度越大C.利用DNA易溶于95%冷酒精的特性可将其提纯D.白色絮状物质滴加二苯胺试剂成蓝色解析:兔为哺乳动物,成熟的红细胞中不含细胞核,不可替代鸡血进行该实验,A项正确;DNA在0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最大,高于或低于该浓度,溶解度都降低,B项错误;DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精,可将DNA与蛋白质进一步分离提纯,C项错误;白色絮状物质DNA与二苯胺沸水浴加热,呈蓝色,D项错误。答案:A6 .2019贵州省铜仁第一中学高二期中下表有关

9、“DNA的粗提取与鉴定”实验的相关操作所选取的试剂中,正确的是()选项相关操作选取的试剂A破碎鸡血细胞生理盐水B溶解核内DNA浓度为0.14mol/L的NaCl溶液C析出杂质较少的DNA常温的体积分数为95%的酒精DDNA的鉴定二苯胺试剂解析:在鸡血细胞液中加入一定量的蒸储水,同时用玻璃棒搅拌,过滤后收集滤液即可,A项错误;2mol/LNaCl溶液能溶解核内DNA,去除不溶解的杂质,0.14mol/LNaCl溶液中,DNA的溶解度最低,B项错误;DNA不溶解于酒精,而其它杂质能溶解于酒精,则用体积分数为95%的冷酒精能提取杂质较少的DNA,C项错误;在沸水浴条件下,DNA遇二苯胺会被染成蓝色,

10、因此二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂,D项正确。答案:D7 .菜花可以作为提取DNA的实验材料,下列有关“菜花细胞中DNA的粗提取”实验的叙述,正确的是()A.实验过程中需要大量加入蒸储水使细胞涨破8 .实验过程中需要加入洗涤剂来瓦解细胞壁C.用滤纸过滤而得到的滤液中除了DNA,还有部分杂质D.可以在滤液中加入冷酒精来溶解杂质解析:菜花细胞有细胞壁,因细胞壁的支持和保护作用,若实验过程中加入大量的蒸储水,不会使细胞涨破,A项错误;实验过程中需要加入洗涤剂来瓦解细胞膜,B项错误;实验过程中应用纱布过滤,C项错误;DNA不溶于酒精溶液,但细胞中的某些蛋白质可溶于酒精溶液,因此可以在滤液中加入冷酒精来

11、溶解杂质,D项正确。答案:D8.关于DNA粗提取的实验材料的选择,经过了多次实验效果的比较,最终选择鸡血作实验材料。请回答下列问题。(1)鸡血细胞中红细胞有无细胞核?。家鸡属于鸟类,新陈代谢旺盛,因而血液中红细胞数目较多,可以提供丰富的。(2)实验前由老师制备鸡血细胞液供同学们做实验材料,而不用鸡全血,其主要原因是解析:(1)鸡血细胞中,红细胞含细胞核,由于家鸡属于鸟类,新陈代谢旺盛,因而血液中红细胞数目较多,可以提供丰富的DNA。(2)鸡血细胞液中DNA相对含量高,因此DNA提取实验的材料用鸡血细胞液而不用鸡的全血。答案:(1)含细胞核DNA(2)鸡血细胞液中DNA相对含量高一、选择题1.2

12、019天津一中高二期末在DNA的粗提取与鉴定的实验中,初步析出DNA和提取纯净的DNA所用的药品和浓度是:0.1g/mL柠檬酸钠溶液;2mol/LNaCl溶液;0.14mol/LNaCl溶液;体积分数为95%的酒精溶液;0.015mol/LNaCl溶液。以上几点正确的是()A.B.C.D.解析:0.1g/mL的柠檬酸钠溶液作为抗凝剂防止血液凝固,没有用于DNA的初步析出和提纯,错误;DNA可以溶于2mol/L的NaCl溶液,该溶液是为了溶解血细胞中的DNA,未用于DNA的初步析出和提纯,错误;DNA在0.14mol/L的氯化钠溶液中溶解度最低,止匕时DNA会从溶液中析出,可用于初步析出DNA,

13、正确;由于DNA不溶于酒精,而其它杂质可以溶于酒精,因此利用体积分数为95%的酒精溶液,可提取较纯净的DNA,正确;物质的量浓度为0.015mol/L的NaCl溶液浓度太低,DNA溶解度大,不能析出DNA,错误。答案:B2. .鉴定DNA的试剂及出现的颜色反应是()A.斐林试剂、传红色B.苏丹田染液、橘黄色C.双缩月尿试剂、紫色D.二苯胺试剂、蓝色解析:斐林试剂用于鉴定还原糖,在水浴加热的条件下生成传红色沉淀,A项错误;苏丹出染液可使脂肪呈橘黄色,B项错误;双缩月尿试剂可与蛋白质发生紫色反应,C项错误;在沸水浴的条件下,DNA遇二苯胺会被染成蓝色,D项正确。答案:D3. 2019山西高二期中在

14、DNA粗提取与鉴定实验中,将第三次过滤获得的纱布上含有的DNA的黏稠物(含有较多杂质)分别处理如下:放入2mol/L的NaCl溶液,搅拌后过滤;在含DNA的NaCl溶液中加入蒸储水,用玻璃棒朝一个方向搅拌卷起丝状物;放入0.14mol/L的NaCl溶液,搅拌后过滤;再加入冷却的、与滤液体积相等的体积分数为95%酒精溶液,用玻璃棒沿一个方向搅拌,卷起丝状物。上述操作过程正确的顺序是()A.B.C.D.解析:在DNA粗提取与鉴定实验中,将第三次过滤获得的纱布上含有的DNA的黏稠物(含有较多杂质)分别处理如下:放入2mol/L的NaCl溶液,搅拌后过滤,除去不溶于NaCl溶液的杂质;再加入冷却的、与

15、滤液体积相等的95%酒精溶液,除去溶于酒精的杂质,再用玻璃棒沿一个方向搅拌,卷起丝状物,故选C项。答案:C4. 2019西藏拉萨中学高二月考对“DNA的粗提取和鉴定”实验的叙述,错误的是()A.将滤液放在60C75C的恒温水浴箱中保温1015min能去除滤液中的杂质,其原理是利用了DNA和蛋白质对高温耐受性的不同B.在盛有血细胞的塑料烧杯中加蒸储水,快速搅拌后过滤是为了获得滤液C.利用DNA在0.14mol/LNaCl溶液中溶解度最大的特点,可将DNA与杂质分离D.取材时,一般不用鸡全血,而是用血细胞液解析:将滤液放在60C75C的恒温水浴箱中保温1015分钟能去除滤液中的部分杂质,其原理是利

16、用了DNA和蛋白质对高温耐受性的不同,A项正确;在盛有血细胞的塑料烧杯中加入蒸储水,快速搅拌后过滤,血细胞中的DNA被释放到滤液中,因此需要过滤后收集滤液,B项正确;利用DNA在0.14mol/LNaCl溶液中溶解度最小的特点,可将DNA与杂质分离,C项错误;DNA存在于鸡血细胞中,因此DNA提取实验的材料用鸡血细胞液而不用鸡的全血,D项正确。答案:C5. 2019江苏高考模拟下列有关“DNA粗提取与鉴定”实验的叙述,正确的是()A.向菜花组织中加入蒸储水并搅拌可释放核DNAB.鉴定DNA时,应将丝状物直接加入到二苯胺试剂中进行沸水浴C.利用鸡血细胞提取DNA时,初步析出DNA的试剂是0.14

17、mol/L的NaCl溶液D.保存好剩余的二苯胺试剂,以备下次实验时使用解析:菜花组织由植物细胞构成,植物细胞有细胞壁,故向菜花组织中加入蒸储水并搅拌,细胞不会吸水涨破,不释放核DNA,A项错误;鉴定DNA时,应将丝状物用玻璃棒搅拌,使丝状物溶解,之后加入到二苯胺试剂中进行沸水浴加热,B项错误;利用鸡血细胞提取DNA时,初步析出DNA的试剂是0.14mol/L的NaCl溶液,DNA在0.14mol/L的NaCl溶液溶解度最低,C项正确;二苯胺试剂要现配现用,D项错误。答案:C二、非选择题6. 2019贵州省思南中学高二期中血液作为一种常见的临床检测材料,如何从血液中快速、高效地分离和提取基因组D

18、NA,对于临床血液检验与分析非常重要,科研人员对比分析了超声波处理法(方法A)、高盐法(方法B)、改良高盐法(方法C)等三种快速提取大鼠全血基因组DNA的方法,实验过程如图,请分析回答:(1)常规的细胞破碎方法是o三种方法实验所需时间均较短,主要在样品处理和细胞破碎环节进行了优化,就三种方法而言,细胞破碎较理想的方法为。(2)方法B得到的溶液中RNA含量高于DNA,分析原因可能是O(3)步骤中加入NaCl的目的是(4)得到含DNA的溶液后进行鉴定,需向其中加入沸水浴加热冷却后变蓝。解析:(1)常规细胞破碎方法是加入蒸储水,使细胞吸水涨破,图中三种破碎细胞的方法中,方法C与方法A、B相比,破碎细

19、胞的效率高、成本低,是细胞破碎较理想的方法。(2)方法B得到的溶液中RNA含量高于DNA,其原因可能是蛋白酶K的加入抑制了RNA酶的活性。(3)步骤中加入NaCl的目的是充分溶解DNA,以便步骤中加入异丙醇使DNA析出。(4)得到含DNA的溶液后进行鉴定,需向其中加入二苯胺,沸水浴加热,冷却后变蓝。答案:(1)加入蒸储水,使细胞吸水涨破方法C(2)加入的蛋白酶抑制了RNA酶的活性(3)溶解DNA(4)二苯胺7. 2019陕西高考模拟DNA在NaCl溶液中的溶解度有两重性,随着NaCl溶液浓度的变化而变化。(1)DNA在不同浓度的NaCl溶液中DNA溶解度不同,DNA在mol/LNaCl溶液中溶

20、解度最大,而在mol/LNaCl溶液中溶解度最小。DNA不溶于酒精,但细胞中的某些物质却可以溶于酒精溶液,利用这一原理可以,可以推测溶于酒精中的可能有O(3)利用DNA遇二苯胺呈:色的特性,将该物质作为鉴定DNA的试剂,具实验过程要点是向放有DNA的试管中加入4mL的二苯胺试剂混合均匀后,将试管置于5min,待试管,观察试管中溶液颜色的变化。这个实验也说明DNA而寸。解析:(1)在不同浓度的NaCl溶液中DNA的溶解度不同,DNA在2mol/LNaCl溶液中溶解度最大,而在0.14mol/LNaCl溶液中溶解度最小。(2)DNA不溶于酒精溶液,而细胞中的某些盐类、蛋白质、糖类或其他大分子物质能

21、溶于酒精溶液,利用这一原理,可以将DNA与蛋白质等杂质进一步分离。(3)DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色;鉴定时向溶有DNA的试管中加入二苯胺试剂,沸水中加热后冷却即可以观察到蓝色,加热的目的是加快染色的反应速度,也说明DNA具有耐高温的特性,而冷却有利于DNA的析出。答案:(1)20.14(2)去除杂质某些盐类、蛋白质、糖类或其他大分子物质(3)蓝沸水中加热冷却后高温8. .下图表示生物实验中通过研磨提取有关物质的操作过程,请回答下列问题。(1)在证明C中含有脂肪时,需向滤液C中加入,观察到白颜色是。(2)在“DNA粗提取与鉴定”时:图中实验材料A可以是下面的。(填字母)a.菜花b.香蕉c

22、.猪肝d.猪血若选用植物组织,研磨前加入的B一般为,作用分别是。得到滤液C后,先向滤液C中加入,过滤得到滤液D,再向滤液D中加入蒸储水,目的是O实验中,将含有一定杂质的DNA丝状物分别放入2mL下表所示的3种溶液中,经搅拌后过滤,获得相应的3种滤液,含DNA较多的是滤液o溶液种类滤液12mol/L的NaCl溶液e20.014mol/L的NaCl溶液f3体积分数为95%的冷酒精溶液g解析:(1)如果要检测滤液C中含脂肪,则向滤液C中加入苏丹田(或苏丹IV),观察到的颜色是橘黄色(或红色)。(2)DNA的粗提取和鉴定实验中,原则上只要含有DNA的生物都可以作为实验材料,菜花、香蕉、猪肝都含有DNA

23、,都可以作为该实验的材料,而猪为哺乳动物,其成熟的红细胞中不含细胞核和细胞器,即不含DNA,因此猪血不能作为该实验的材料,选abco若选用植物组织,研磨前需加入食盐和洗涤剂,其中食盐能溶解DNA,洗涤剂能溶解细胞膜。得到滤液C后,先向滤液C中加入2mol/L的NaCl溶液(因为DNA在2mol/L的NaCl溶液中溶解度较大),过滤得到滤液D,再向滤液D中加入蒸储水,目的是稀释NaCl溶液至0.14mol/L,使DNA(溶解度下降而沉淀)析出(因为DNA在此浓度下溶解度最小)。DNA在2mol/L的NaCl溶液和0.014mol/L的NaCl溶液中的溶解度都较大,但不溶于体积分数为95%的冷酒精

24、溶液。因此将含有一定杂质的DNA丝状物分别放入2mL如表所示的3种溶液中,经搅拌后过滤,获得相应的3种滤液,含DNA最少的是滤液g,较多的是e、fo答案:(1)苏丹田/苏丹IV橘黄色/红色(2)abc洗涤剂、食盐溶解细胞膜、溶解DNA2mol/L的NaCl溶液使DNA(溶解度下降而沉淀)析出ef9.如图为菜花DNA的粗提取与鉴定的实验流程图。据图回答下歹IJ问题:选择菜花作为提取DNA的实验材料的原因是(2)研磨前,向研钵中加入石英砂的目的是,加入的物质a是。(3)研磨液过滤后,应向滤液中加入2mol/L的NaCl溶液,目的是;也可以向滤液中加入嫩肉粉,目的是(4)鉴定DNA所用的化学试剂为,

25、鉴定实验中,A、B两支试管属于对照组的是,对照组试管中加入的物质有。解析:(1)原则上含DNA的生物材料都可以作为提取DNA的实验材料,只是选用DNA含量相对较高的生物组织,实验成功的可能性更大。菜花中DNA含量相对较高,可以作为提取DNA的材料。(2)向研钵中加入石英砂是为了使研磨更充分。在本实验中同时向研钵中加入一定量的洗涤剂和食盐,洗涤剂可以瓦解细胞膜,有利于DNA的释放;食盐的主要成分是NaCl,有利于DNA的溶解。(3)在含有DNA的滤液中,加入2mol/L的NaCl溶液,可以使DNA溶解、析出不溶的杂质;嫩肉粉中含有木瓜蛋白酶,能分解滤液中的蛋白质。(4)鉴定DNA的原理是在沸水浴

26、条件下,DNA与二苯胺反应呈现蓝色,因此鉴定DNA所用的化学试剂为二苯胺。B试管中呈现蓝色,说明含有DNA,所以属于对照组的是A试管;对照组试管中加入的物质有NaCl溶液和二苯胺试剂,目的是排除NaCl溶液对二苯胺显色的影响。答案:(1)菜花中的DNA含量相对较高(2)使研磨充分洗涤剂和食盐(3)溶解DNA,析出不溶的杂质分解蛋白质(4)二苯胺ANaCl溶液和二苯胺试剂10.回答下列有关“DNA的粗提取和鉴定”实验的问题。(1)下列有关“DNA的粗提取和鉴定”实验原理的叙述,正确的是()A.DNA在NaCl溶液中的溶解度随NaCl溶液浓度的降低而减小B.利用DNA不溶于酒精的性质,可除去细胞中

27、溶于酒精的物质而得到较纯净的DNAC.DNA是大分子有机物,不溶于水而溶于某些有机溶剂D.在沸水中,DNA遇二苯胺会出现紫色反应(2)如下图为该实验过程中的一些重要操作示意图。的操作顺序是上图C、E步骤都加入蒸储水,但其目的不同,分别是口O图A步骤中所用酒精必须是经过才能使用,该步骤的目的是(3)为鉴定得到的丝状物的主要成分为DNA,可滴加试剂,沸水浴,如果出现,则该丝状物的主要成分为DNA。解析:(2)根据DNA的粗提取和鉴定步骤:加入蒸储水,破碎细胞一过滤,获取含DNA的滤液一去除滤液中杂质-DNA的析出f鉴定。所以正确的操作顺序是C-B-EfD-A。C加蒸储水是使血细胞吸水破裂,E加蒸储

28、水是使NaCl溶液的浓度降低,析出DNAoDNA不溶于酒精,95%的冷酒精凝集效果最佳,所以A步骤中所用酒精必须是经过充分预冷的才能使用,以便除去溶于酒精的杂质,提取含杂质较少(或较纯净)的DNAo(3)DNA鉴定用二苯胺水浴加热,呈蓝色。答案:(1)B(2)C-B-EfD-A加速血细胞的破裂降低NaCl溶液的浓度,使DNA析出充分预冷提取含杂质较少(或较纯净)的DNA(3)二苯胺蓝色11.2019江苏海安高级中学高二月考某生物兴趣小组在学习了DNA的粗提取和鉴定实验后,尝试开展RNA的粗提取和鉴定实验。通过查阅资料,制订了以下的实验方案:(实验课题泄孝母RNA的提取和鉴定。(实验目的)1.从酯母中提取RNA;2,鉴定RNA。(实验原理)微生物是工业上大量生产RNA的原料,其中以酯母尤为理想,因为酯母核酸中主要是RNA,DNA很少,菌体易收集,RNA易分离。RNA不溶于乙醇和无水乙醴,RNA热稳定性较蛋白质强。利用稀碱

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