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文档简介

1、Capillary Gel Electrophoresis毛细管凝胶电泳nCITPnCZEnCIEF nCGE nCECCapillary Gel Electrophoresisn根据带电组分的大小分离n毛细管的表面电荷少n分离介质 交联聚丙烯酰胺 线性聚丙烯酰胺其它可更换的水溶性聚合物n适用于淌度相近而大小不同的组分DNAProteins-SDS complexOgston ModelRepatation ModelCH2=CHC=ONHCH2NHCH2=CHC=OCH2=CHCONH2丙烯酰胺量(a)甲叉双丙烯酰胺(b)PA凝胶的浓度T和CT单体和交联剂的百分浓度C交联剂的量a 丙烯酰胺量

2、（g）b甲叉双丙烯酰胺的量（g）m缓冲溶液的体积（ml）%100%100babCmbaT聚丙烯酰胺凝胶毛细管柱的制备方法聚丙烯酰胺凝胶毛细管柱的制备方法检测窗口制备检测窗口制备内壁修饰内壁修饰 120C热空气吹，室温氨气冲洗2h，后503甲基丙烯酰氧丙基三甲氧基硅烷（3methacryloxypropyl-trimethoxysilane)充满一昼夜后，用甲醇和水冲洗缓冲溶液制备缓冲溶液制备 1.1g Tris和 0.01g EDTA溶于100 ml 7M尿素溶液，用NaH2PO4调至pH 8.6单体溶液制备单体溶液制备 29g 丙烯酰胺和1g N甲叉双丙烯酰胺溶解在100ml 缓冲溶液中催化

3、剂制备催化剂制备 0.2g 过硫酸铵溶于2ml 缓冲溶液中凝胶溶液制备凝胶溶液制备 10ml 单体溶液加入到30ml缓冲溶液中，甲4ul 催化剂溶液，2.5 ul 四甲基乙二胺（TEMED）预聚合45分钟1.1.灌注聚合灌注聚合 上述凝胶溶液注入毛细管到无气泡，将两端浸入缓冲溶液中聚合数小时。亲水高分子聚合物无胶筛分体系Mobility of dsDNA and the choice of gel concentration凝胶的浓度ssDNAConcentration of HPMC on the separation of dsDNA ladderA-0.1%， B-0.3%， C-0.7%电场强度ssDNA 高效分离塔板数达3千万！EB and dsDNAssDNASanger 链中止法扩增测序HV supplyCapillaryGlass slideDetectionwindowITO thermostatPCR vialFractureChip PCR online with chip CEDenaturing of protein before SDS-C-PAGEDenature condition: 1% SDS, 2% beta-mercaptoethanol 30min at 90C.SDS CGE of prote

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