核酸分离纯化技术_第1页
核酸分离纯化技术_第2页
核酸分离纯化技术_第3页
核酸分离纯化技术_第4页
核酸分离纯化技术_第5页
已阅读5页，还剩63页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

1、基因诊断基因诊断(gene diagnosis)是利用分子生物学及利用分子生物学及分子遗传的技术和原理，在分子遗传的技术和原理，在DNA水平分析基因的存水平分析基因的存在、鉴定疾病所涉及基因的置换、缺失或插入等突在、鉴定疾病所涉及基因的置换、缺失或插入等突变，以诊断各种感染性疾病和遗传性疾病，进行肿变，以诊断各种感染性疾病和遗传性疾病，进行肿瘤分子水平的研究。瘤分子水平的研究。主要技术及过程主要技术及过程区分或鉴定区分或鉴定DNADNA的异常的异常分离、扩增待测的分离、扩增待测的DNADNA片断片断基因探针的制备和标记基因探针的制备和标记要求：要求：1.不能存在对核酸结构功能有影响的物质不能存

2、在对核酸结构功能有影响的物质2.降低蛋白、多糖、脂类分子污染降低蛋白、多糖、脂类分子污染，避免酸碱对核酸的磷酸二脂键的破，避免酸碱对核酸的磷酸二脂键的破坏坏.破碎.核酸核酸的紫的紫外吸外吸收曲收曲线线 离心机离心机 水浴锅水浴锅EPEP管管微量移液器微量移液器仪器用具仪器用具琼脂糖凝胶琼脂糖凝胶电泳电泳 仪器仪器 电泳仪电泳仪 电泳槽电泳槽 灌胶模具等灌胶模具等Tris-硼酸（硼酸（TBE） Tris-乙酸（乙酸（TAE） Tris-磷酸（磷酸（TPE）常用电泳缓冲液常用电泳缓冲液 上样缓冲液上样缓冲液核酸染色剂核酸染色剂注意事项：注意事项：EBEB是致癌物质，切勿用手接触，更不要污染环境。是

3、致癌物质，切勿用手接触，更不要污染环境。DNADNA分子量标准分子量标准不同种类不同种类DNA Marker1.1.凝胶制备凝胶制备 制备制备1%1%琼脂糖凝胶。称取适量琼脂糖加入琼脂糖凝胶。称取适量琼脂糖加入 20mL 0.520mL 0.5TBETBE，加热至琼脂糖全部熔化，冷却至，加热至琼脂糖全部熔化，冷却至50-50-60 60 时，加入时，加入 EB EB 至终浓度至终浓度 0.50.5g/mLg/mL。缓慢倒入胶板，。缓慢倒入胶板，待胶凝固后拔出梳子。待胶凝固后拔出梳子。2.2.加样加样 取取1010l DNAl DNA样液与样液与 2 2l l 上样上样 buffer buffer 混匀，混匀，用微量移液器小心加入样品槽。用微量移液器小心加入样品槽。3.3.电泳电泳 接通电源，切记靠近加样孔的一端为负，电压接通电源，切记靠近加样孔的一端为负，电压为为15V/cm15V/cm（长度以两个电极之间的距离计算）（长度以两个电极之间的距离计算）, ,待溴酚待

人人文库> 全部分类> 教育资料 > 辅导培训

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论