实验基础知识基本技能培训课件

1、实验基础知识基本技能培训课件目目 录录前言：分子生物学实验规程前言：分子生物学实验规程第一节：分子生物学实验设备第一节：分子生物学实验设备第二节：分子生物学根本技术第二节：分子生物学根本技术第三节：实验安排第三节：实验安排实验规程实验规程 严格遵守生命科学中心制定的平安规那么。严格遵守生命科学中心制定的平安规那么。 发现实验室发现实验室/楼内任何地方有危害平安之人、事、物等，楼内任何地方有危害平安之人、事、物等，必须立即向有关人员反映并作紧急处理。必须立即向有关人员反映并作紧急处理。 1) 穿着规定穿着规定 必须按规定穿戴工作服。必须按规定穿戴工作服。 进行危害物质、挥发性有机溶机、特定化学物

2、质等化学进行危害物质、挥发性有机溶机、特定化学物质等化学药品操作实验，必须要穿戴防护具防护口罩、防护手药品操作实验，必须要穿戴防护具防护口罩、防护手套、防护眼镜。套、防护眼镜。 长发及松散衣服妥善固定。长发及松散衣服妥善固定。实验规程实验规程2) 饮食规定饮食规定 禁止在实验室吃喝食物且使用化学药品后禁止在实验室吃喝食物且使用化学药品后需先洗净双手方能进食。需先洗净双手方能进食。 严禁在实验室内吃口香糖。严禁在实验室内吃口香糖。 禁止使用实验室仪器冷藏禁止使用实验室仪器冷藏/加热食物。加热食物。 实验规程实验规程3) 药品操作相关规定：药品操作相关规定：操作危险性药品请务必遵守操作守那么或遵操

3、作危险性药品请务必遵守操作守那么或遵照老师操作流程进行实验，勿自行更换实照老师操作流程进行实验，勿自行更换实验流程。验流程。 识记清楚药品危害性，防止危害发生。识记清楚药品危害性，防止危害发生。实验规程实验规程4) 用电平安相关规定：用电平安相关规定：按照规定电压、功率合理用电。按照规定电压、功率合理用电。手上有水或潮湿请勿接触电器用品或电器设备。手上有水或潮湿请勿接触电器用品或电器设备。 掌握主要仪器、设备的性能和操作方法，严格按操作掌握主要仪器、设备的性能和操作方法，严格按操作规程操作。规程操作。 最后离开实验室务必随手将不用的水、电等开关关闭。最后离开实验室务必随手将不用的水、电等开关关

4、闭。如：擦拭、维修过程中要关闭电源如：擦拭、维修过程中要关闭电源实验规程实验规程5) 环境卫生相关规定：环境卫生相关规定：注重环境卫生，并须保持整洁。注重环境卫生，并须保持整洁。化学物溢满地面或工作台时应立即选用适宜的方法擦拭化学物溢满地面或工作台时应立即选用适宜的方法擦拭冲洗干净。冲洗干净。 严格区分开污染区和洁净区。严格区分开污染区和洁净区。 污染区：戴手套操作。污染区：戴手套操作。洁净区：徒手操作。洁净区：徒手操作。实验要求实验要求 1) 详细记录和分析实验结果，并按时提交详细记录和分析实验结果，并按时提交实验报告；实验报告； 2) 实验中一定要处处用心、勤动手，多问实验中一定要处处用心

5、、勤动手，多问为什么；为什么； 3) 仔细操作和观察；仔细操作和观察； 4) 保存好每一步的实验样品，在确准的情保存好每一步的实验样品，在确准的情况下才能当废液扔掉。况下才能当废液扔掉。分子生物学实验设备分子生物学实验设备1) 温度控制系统温度控制系统 2) 实验用水处理系统实验用水处理系统 3) 消毒系统消毒系统4) 计量系统计量系统5) 离心设备离心设备 6) 电泳装置电泳装置 7) 凝胶成像系统凝胶成像系统8) PCR仪仪9) 生物培养设施生物培养设施 10) 蛋白质检测设备蛋白质检测设备11) 其他设备其他设备温度控制系统温度控制系统 环境温控：大局部的分子生物学实验都要求在一定的环境

6、温控：大局部的分子生物学实验都要求在一定的温度下进行操作，为了保持这些条件，实验室应装备空调温度下进行操作，为了保持这些条件，实验室应装备空调等。等。 药品、试剂、样品等的保存：不同药品、试剂、样品要药品、试剂、样品等的保存：不同药品、试剂、样品要求在不同的温度下保存，实验室必须备有求在不同的温度下保存，实验室必须备有44、2020、8080的冰柜的冰柜/ /箱，需要在更低温度下保存的样品，那么须使箱，需要在更低温度下保存的样品，那么须使用液氮罐。用液氮罐。 药品、试剂、样药品、试剂、样品等的取放品等的取放温度控制系统温度控制系统 低温操作可以用制冰机制冰块降温；低温操作可以用制冰机制冰块降温

7、； 对于需在较高温度下进行的操作，那么可对于需在较高温度下进行的操作，那么可使用烘箱、微波炉、恒温水浴锅、恒温空气摇使用烘箱、微波炉、恒温水浴锅、恒温空气摇床等。床等。实验用水实验用水 一次蒸馏水：水经过一次蒸馏，不挥发的组分残留在容一次蒸馏水：水经过一次蒸馏，不挥发的组分残留在容器中被除去，挥发的组分氨、二氧化碳、有机物进入蒸器中被除去，挥发的组分氨、二氧化碳、有机物进入蒸馏水的初始馏分中，通常只收集馏分的中间局部，约占馏水的初始馏分中，通常只收集馏分的中间局部，约占6060。 屡次蒸馏水：在一次蒸馏水中参加碱性高锰酸钾溶液，屡次蒸馏水：在一次蒸馏水中参加碱性高锰酸钾溶液，除去有机物和二氧化

8、碳；参加非挥发性的酸硫酸或磷酸，除去有机物和二氧化碳；参加非挥发性的酸硫酸或磷酸，使氨成为不挥发的铵盐。使氨成为不挥发的铵盐。 无去离子水：指除去了呈离子形式杂质后的纯水。无去离子水：指除去了呈离子形式杂质后的纯水。主要指采用离子交换树脂处理方法，应用离子交换树脂去主要指采用离子交换树脂处理方法，应用离子交换树脂去除水中的阴离子和阳离子，但水中仍然存在可溶性的有机除水中的阴离子和阳离子，但水中仍然存在可溶性的有机物。物。实验用水处理系统实验用水处理系统实验用水实验用水 超纯水：既将水中的导电介质几乎完全去除，又将水超纯水：既将水中的导电介质几乎完全去除，又将水中不离解的胶体物质、气体及有机物均

9、去除至很低程度的中不离解的胶体物质、气体及有机物均去除至很低程度的水。水。 超纯水中除了水分子超纯水中除了水分子(H20)(H20)外，几乎没有什么杂质。外，几乎没有什么杂质。 各种用水，在贮存中都会被污染：各种用水，在贮存中都会被污染： 塑料容器会产生有紫外吸收的有机物；塑料容器会产生有紫外吸收的有机物； 玻璃和金属容器会产生金属离子的污染；玻璃和金属容器会产生金属离子的污染； 长时间放置更会使水长菌，空气中长时间放置更会使水长菌，空气中CO2CO2会溶入水中。会溶入水中。 所以贮存一定要隔绝空气，密封盖严，必要时贮存在所以贮存一定要隔绝空气，密封盖严，必要时贮存在冰箱的冷藏室中；最好使用冰

10、箱的冷藏室中；最好使用“新鲜的水。新鲜的水。实验用水处理系统实验用水处理系统分子生物学实验用水分子生物学实验用水 普通蒸馏水、二次蒸馏水、无普通蒸馏水、二次蒸馏水、无/ /去离子水、超纯水。去离子水、超纯水。实验用水处理系统实验用水处理系统 常用的灭菌方法：高温、高压灭菌、紫外线照射、火常用的灭菌方法：高温、高压灭菌、紫外线照射、火焰燃烧、过滤除菌、酒精等试剂浸泡消毒等，因此实验室焰燃烧、过滤除菌、酒精等试剂浸泡消毒等，因此实验室必须配备各种无菌处理设备。必须配备各种无菌处理设备。 常用的灭菌仪器设备：高压灭菌锅、紫外灯、常用的灭菌仪器设备：高压灭菌锅、紫外灯、酒精灯、滤膜等。酒精灯、滤膜等。

11、消毒系统消毒系统 常用的定量系统有：称量系统、液体体积度量系统、常用的定量系统有：称量系统、液体体积度量系统、pHpH测定系统、液体溶质定量系统等。测定系统、液体溶质定量系统等。 称量仪器：最常用的是电子天平。称量仪器：最常用的是电子天平。 酸碱度酸碱度pHpH测量仪器：最常用的是测量仪器：最常用的是pHpH试纸和试纸和pHpH计。计。计量系统计量系统液体体积度量仪器：常用的有各种量筒、移液管、液体体积度量仪器：常用的有各种量筒、移液管、容量瓶、容量瓶、移液器移液器。计量系统计量系统 液体溶质定量仪器：主要有紫外分光光度计和液体溶质定量仪器：主要有紫外分光光度计和可见分光光度计等。可见分光光度

12、计等。 计量系统计量系统实验用离心机分为制备性离心机和分析性离心机。实验用离心机分为制备性离心机和分析性离心机。制备性离心机主要用于别离各种生物材料。制备性离心机主要用于别离各种生物材料。离心方法是别离和制备生物大分子最常用的手段。离心方法是别离和制备生物大分子最常用的手段。制备性离心机可分为三类制备性离心机可分为三类: :低速、高速冷冻、超速低速、高速冷冻、超速离心机。离心机。离心设备离心设备 电泳是生化实验中最常用最重要的实验技术之一，主电泳是生化实验中最常用最重要的实验技术之一，主要用于分析、鉴定，也可用于制备。要用于分析、鉴定，也可用于制备。 电泳装置由电泳仪和电泳槽两局部组成。电泳装

13、置由电泳仪和电泳槽两局部组成。 电泳仪：电泳时提供一定的电压和电流电泳仪：电泳时提供一定的电压和电流 电泳槽：凝胶电泳系统的核心局部，根据电泳的原电泳槽：凝胶电泳系统的核心局部，根据电泳的原理，凝胶都是放在两个缓冲腔之间，电场通过凝胶连接理，凝胶都是放在两个缓冲腔之间，电场通过凝胶连接两个缓冲腔。两个缓冲腔。电泳装置电泳装置 电泳槽：核酸或蛋白质的电泳定性电泳槽：核酸或蛋白质的电泳定性/ /定量分析时的定量分析时的凝胶支架。凝胶支架。 电泳槽又分为水平电泳槽和垂直电泳槽。电泳槽又分为水平电泳槽和垂直电泳槽。电泳装置电泳装置 是分子生物学实验中的重要观测仪器，几乎全部的实是分子生物学实验中的重要

14、观测仪器，几乎全部的实验结果都需要经由凝胶成像系统来观察。验结果都需要经由凝胶成像系统来观察。 可用于观察分析各种透明或不透明的电泳图像，可用于观察分析各种透明或不透明的电泳图像，包括琼脂糖凝胶电泳检测包括琼脂糖凝胶电泳检测DNADNA结果的观察、结果的观察、PCRPCR产物的产物的检测观察，垂直板凝胶电泳检测基因多态性的银染胶、检测观察，垂直板凝胶电泳检测基因多态性的银染胶、蛋白胶、斑点印迹蛋白胶、斑点印迹RNA/RNA/蛋白质检测结果的观察等。蛋白质检测结果的观察等。凝胶成像系统凝胶成像系统紫外分析仪紫外分析仪 用于检测许多主要生物大分子物质如蛋用于检测许多主要生物大分子物质如蛋白质、核苷

15、酸等。白质、核苷酸等。 PCR(Polymerase Chain Reaction) PCR(Polymerase Chain Reaction)是指聚合酶是指聚合酶链式反响。其反响是用链式反响。其反响是用DNADNA聚合酶在体外大量扩增聚合酶在体外大量扩增DNADNA片段的一种方法。片段的一种方法。 PCR PCR仪就是将此方法实现了自动化操作的一种仪就是将此方法实现了自动化操作的一种仪器，是分子生物学实验常用和必备的设备。仪器，是分子生物学实验常用和必备的设备。 PCR PCR仪包括普通仪包括普通PCRPCR仪、梯度仪、梯度PCRPCR仪、荧光定量仪、荧光定量PCRPCR仪。仪。PCR仪仪

16、 超净工作台超净工作台 恒温培养箱恒温培养箱生物培养设施生物培养设施 蛋白电泳槽和转印槽蛋白电泳槽和转印槽- -用于用于western-blottingwestern-blotting实验实验蛋白质检测设备蛋白质检测设备 酶标仪酶标仪- -用于用于ELISA ELISA 酶联免疫吸附实验实验。酶联免疫吸附实验实验。蛋白质检测设备蛋白质检测设备 实验室除以上常规设备和设施外，还必须装备以下一实验室除以上常规设备和设施外，还必须装备以下一些常用设备：些常用设备：A.A.通风柜：用于有害和有毒气体的操作。通风柜：用于有害和有毒气体的操作。 B.B.组织打碎机和匀浆器：用于各种生物材料、动植组织打碎机

17、和匀浆器：用于各种生物材料、动植物组织和细胞的破碎。研钵物组织和细胞的破碎。研钵C. C. 超声清洗机：用于各种器皿、移液管和自动取液器吸超声清洗机：用于各种器皿、移液管和自动取液器吸头的清洗和高效液相色谱仪所用流动相的脱气等。头的清洗和高效液相色谱仪所用流动相的脱气等。其它设备其它设备 其它设备其它设备 D.D.冰冻枯燥机：用于生物大分子水溶液的冰冻枯燥，冰冻枯燥机：用于生物大分子水溶液的冰冻枯燥，可由其水溶液直接制得固体干粉。可由其水溶液直接制得固体干粉。E.E.机械和水环式真空泵：用于旋转蒸发器和各种真空抽机械和水环式真空泵：用于旋转蒸发器和各种真空抽气操作。气操作。F.F.冷室冷室:

18、4-10: 4-10的冷室，工作人员可以在其中进行各种柱的冷室，工作人员可以在其中进行各种柱层析、各种电泳、生物大分子的提取和别离、透析等操作，层析、各种电泳、生物大分子的提取和别离、透析等操作，并可以贮存各种生物制品和生化试剂。并可以贮存各种生物制品和生化试剂。G.G.暗室暗室: :主要用于一些避光的实验，如显影。主要用于一些避光的实验，如显影。H.H.基因导入仪：用于向受体生物细胞中导入基因。基因导入仪：用于向受体生物细胞中导入基因。常用的导入仪有：电导入仪、基因枪、激光和超常用的导入仪有：电导入仪、基因枪、激光和超声导入仪、原生质体融合仪等。声导入仪、原生质体融合仪等。I.I.高效液相色

19、谱仪和毛细管电泳仪：用于各种生物高效液相色谱仪和毛细管电泳仪：用于各种生物大分子的分析与鉴定。大分子的分析与鉴定。其它设备其它设备 分子生物学根本技术分子生物学根本技术-使用方法及本卷须知使用方法及本卷须知 1) 温度控制系统温度控制系统 2) 实验用水处理系统实验用水处理系统 3) 消毒系统消毒系统 4) 计量系统计量系统 5) 离心设备离心设备 6) 电泳装置电泳装置 7) 凝胶成像系统凝胶成像系统1) 温度控制系统温度控制系统 冰箱冰箱/柜的使用：柜的使用： 门随手关，关严门随手关，关严 电源防止不小心关闭电源防止不小心关闭 微波炉：微波炉： 要用微波炉专用容器不能加热金属、密封物；要用

20、微波炉专用容器不能加热金属、密封物； 不要让微波炉空转；不要让微波炉空转； 微波炉工作时微波炉工作时不要将眼睛紧靠微波炉不要将眼睛紧靠微波炉5厘米之内厘米之内去观看微波炉工作去观看微波炉工作-眼睛对微波最敏感，以免受到不必眼睛对微波最敏感，以免受到不必要的伤害；要的伤害； 防灼伤！不要徒手拿容器、不要把容器口冲着人！防灼伤！不要徒手拿容器、不要把容器口冲着人！1) 温度控制系统温度控制系统 制冰机的使用：水制冰机的使用：水-进水、排水；电进水、排水；电 1不管何种原因停机时，不得连续启动，要每隔不管何种原因停机时，不得连续启动，要每隔5分分钟再启动，以免损坏压缩机！钟再启动，以免损坏压缩机！

21、2定时检查进、出水管接头，以便处理可能泄露定时检查进、出水管接头，以便处理可能泄露的少量余水！的少量余水！ 3不用时，应排掉内胆内余水，用干净的布擦干不用时，应排掉内胆内余水，用干净的布擦干储冰箱内胆！储冰箱内胆！ 5在对制冰机进行清洁、检查及一周以上不用时，请在对制冰机进行清洁、检查及一周以上不用时，请拔掉电源插头。拔掉电源插头。1) 温度控制系统温度控制系统 液氮罐液氮生物容器液氮罐液氮生物容器 的使用：的使用： 液氮是一种超低温液体液氮是一种超低温液体(-196)，如溅到皮肤上会引，如溅到皮肤上会引起类似烧伤一样的冻伤，在灌充和取出液氮时应特别起类似烧伤一样的冻伤，在灌充和取出液氮时应特

22、别注意。注意。 液氮罐主要结构：内胆、真空夹层容器真空封口接头、液氮罐主要结构：内胆、真空夹层容器真空封口接头、外壳、颈管、专用罐盖。外壳、颈管、专用罐盖。 注意：注意：1、液氮罐只用于盛装液氮，不允许盛装其他、液氮罐只用于盛装液氮，不允许盛装其他液体；液体； 2、严防冲击和碰撞；、严防冲击和碰撞； 3、操作及取放冷冻物品时，请注意要轻拿轻放；、操作及取放冷冻物品时，请注意要轻拿轻放； 4、长期贮存时，需要定期补充液氮。、长期贮存时，需要定期补充液氮。保持容器夹层真空的关键部件，保持容器夹层真空的关键部件，用户不得擅自翻开容器真空封用户不得擅自翻开容器真空封口接头口接头 1) 温度控制系统温度

23、控制系统 烘箱的使用：烘箱的使用：是利用电热丝隔层加热使物体枯燥的设备。是利用电热丝隔层加热使物体枯燥的设备。适用于比室温度高适用于比室温度高5300有的高有的高200范围的烘培、枯燥、热范围的烘培、枯燥、热处理等，灵敏度通常为处理等，灵敏度通常为1。 根本结构一般由箱体、电热系统和自动控温系统三局部组成。根本结构一般由箱体、电热系统和自动控温系统三局部组成。 注意：注意：1、每次使用前要根据烘干物品要求确定适宜的温度；、每次使用前要根据烘干物品要求确定适宜的温度； 2、物品不能排列太密，以免影响热气流动、散热；、物品不能排列太密，以免影响热气流动、散热； 3、保证鼓风机正常运转；、保证鼓风机

24、正常运转； 4、需要观察工作室内样品情况时，可透过玻璃门观察。、需要观察工作室内样品情况时，可透过玻璃门观察。但箱门以少开为好，以免影响恒温。特别是但箱门以少开为好，以免影响恒温。特别是200以上时，开箱以上时，开箱门可能使玻璃门骤冷而破裂。门可能使玻璃门骤冷而破裂。不允许整夜使用！不允许整夜使用！1) 温度控制系统温度控制系统 恒温水浴锅、恒温空气摇床：恒温水浴锅、恒温空气摇床： 根据需要设置温度；根据需要设置温度； 恒温水浴锅中要保持足够的水量。恒温水浴锅中要保持足够的水量。分子生物学根本技术分子生物学根本技术 1) 温度控制系统温度控制系统 2) 实验用水处理系统实验用水处理系统 3)

25、消毒系统消毒系统 4) 计量系统计量系统 5) 离心设备离心设备 6) 电泳装置电泳装置 7) 凝胶成像系统凝胶成像系统防污染防污染3) 消毒系统消毒系统 高压灭菌锅高压灭菌锅1 在主体腔内参加适量的清水，将灭菌物品放入灭菌器内；在主体腔内参加适量的清水，将灭菌物品放入灭菌器内；2 盖好注意密封胶圈顶盖后必须拧紧顶盖；盖好注意密封胶圈顶盖后必须拧紧顶盖；3 翻开灭菌器的热源，开启排气阀排完空气后约在水沸翻开灭菌器的热源，开启排气阀排完空气后约在水沸腾后腾后10 min15 min 关闭排气阀；关闭排气阀；4 将压力升至将压力升至102.9 kPa(1.05 kg/),温度要求达温度要求达121

26、,维持到规定时间根据物品性质以及有关情况确维持到规定时间根据物品性质以及有关情况确定定,一般一般20 min30 min;5 灭菌结束后灭菌结束后,要待压力恢复到零位后开盖取物。要待压力恢复到零位后开盖取物。对液体进行灭菌，容器不能密封、体积不能超过容积的对液体进行灭菌，容器不能密封、体积不能超过容积的2/3；灭菌结束后不能翻开排气阀尤其是上排气阀。；灭菌结束后不能翻开排气阀尤其是上排气阀。分子生物学根本技术分子生物学根本技术 1) 温度控制系统温度控制系统 2) 实验用水处理系统实验用水处理系统 3) 消毒系统消毒系统 4) 计量系统计量系统 5) 离心设备离心设备 6) 电泳装置电泳装置

27、7) 凝胶成像系统凝胶成像系统4) 计量系统计量系统-质量质量电子天平电子天平对环境高度敏感的精密电子测量仪器对环境高度敏感的精密电子测量仪器, 使用时应小心操作使用时应小心操作, 台面应无明显振动台面应无明显振动, 不要放在空调口。不要放在空调口。注意：注意：1 调整底角螺丝使水平指示器的气泡居中。调整底角螺丝使水平指示器的气泡居中。 2 使用精密电子天平前最好热机使用精密电子天平前最好热机1520分钟，以确保分钟，以确保正确读取电子天平的数值。正确读取电子天平的数值。 3 称量物品前先按归零键；称样时关上天平小门。称量物品前先按归零键；称样时关上天平小门。 4 称物品时，勿超过精密电子天平

28、的最大称量，且需将物品称物品时，勿超过精密电子天平的最大称量，且需将物品放于称盘中心，需轻拿轻放，不要冲击称盘。放于称盘中心，需轻拿轻放，不要冲击称盘。5 严禁有腐蚀性的称物直接接触称盘与天平面板。严禁有腐蚀性的称物直接接触称盘与天平面板。6 使用完毕后，要清理称盘、面板，保持仪器清洁。使用完毕后，要清理称盘、面板，保持仪器清洁。4) 计量系统计量系统-体积体积依称量需要选择适宜的器皿依称量需要选择适宜的器皿-各种量筒、移液管、容量瓶。各种量筒、移液管、容量瓶。 移液器：移液器：量程包括：量程包括：0.1-2.5 ul，0.5-10 ul，10-100 ul，20-200ul，100-1000

29、 ul，500-5000 ul。单道可调移液器、多道可调移液器、单道可调移液器、多道可调移液器、 电子调节电子调节/显示移液器。显示移液器。 Tip头头/吸头吸头/枪头：枪头：10 ul白，白，200 ul黄，黄， 1 000 ul蓝，蓝， 5 000 ul白。白。移液器使用方法及本卷须知移液器使用方法及本卷须知:1.设定移液体积设定移液体积 从小量程调节至大量程时，逆时针旋转刻度；从小量程调节至大量程时，逆时针旋转刻度； 应先调至超过设定体积刻度，再回调至设定体积，这样可以保应先调至超过设定体积刻度，再回调至设定体积，这样可以保证移液器的精确度。证移液器的精确度。2装配移液枪头装配移液枪头将

30、移液枪垂直插入吸头，左右旋转半圈，上紧即可。将移液枪垂直插入吸头，左右旋转半圈，上紧即可。忌忌用移液器撞击吸头的方法是非常不可取的，长期这样用移液器撞击吸头的方法是非常不可取的，长期这样 操作会导致移液器的零件因撞击而松散。操作会导致移液器的零件因撞击而松散。移液器使用方法及本卷须知移液器使用方法及本卷须知:3吸液及放液吸液及放液垂直吸液：吸液前排空气体，吸头尖端浸入液面垂直吸液：吸液前排空气体，吸头尖端浸入液面3mm以下慢吸慢以下慢吸慢放；放；放液时如果量很小那么应吸头尖端可靠容器内壁。放液时如果量很小那么应吸头尖端可靠容器内壁。绝不允许突然松开，以防溶液吸入过快而冲入移液器内腐蚀柱塞。绝不

31、允许突然松开，以防溶液吸入过快而冲入移液器内腐蚀柱塞。4吸有液体的移液枪不应平放，枪头内的液体很容易污染枪内部而可吸有液体的移液枪不应平放，枪头内的液体很容易污染枪内部而可能导致枪的弹簧生锈。能导致枪的弹簧生锈。5移液枪在每次实验后应将刻度调至最大，让弹簧回复原型以延移液枪在每次实验后应将刻度调至最大，让弹簧回复原型以延长移液枪的使用寿命。长移液枪的使用寿命。移液器使用方法及本卷须知移液器使用方法及本卷须知:6切忌切忌吸液时突然松开；吸液时突然松开；吸有液体的移液枪平放；吸有液体的移液枪平放；所设量程不在移液器量程范围内会卡住机械装置，损坏所设量程不在移液器量程范围内会卡住机械装置，损坏了移液

32、器；了移液器；严禁吸取有强挥发性、强腐蚀性的液体如浓酸、浓碱、严禁吸取有强挥发性、强腐蚀性的液体如浓酸、浓碱、有机物等；有机物等；使用完没有将刻度调至最大量程。使用完没有将刻度调至最大量程。分子生物学根本技术分子生物学根本技术 1) 温度控制系统温度控制系统 2) 实验用水处理系统实验用水处理系统 3) 消毒系统消毒系统 4) 计量系统计量系统 5) 离心设备离心设备 6) 电泳装置电泳装置 7) 凝胶成像系统凝胶成像系统 一般在低速离心时转速小一般在低速离心时转速小于于5000 r/min5000 r/min，离心力的大小，离心力的大小常用转速常用转速r/minr/minrpmrpm来表示，

33、来表示，而超速离心时那么用离心力而超速离心时那么用离心力g g或或g g来表示。来表示。 由于离心管从管口到旋转由于离心管从管口到旋转中心的距离是不同的，所以在中心的距离是不同的，所以在同样转速时，管口和管底所受同样转速时，管口和管底所受到的离心力也有差异。到的离心力也有差异。 科技文献中离心力的数据通科技文献中离心力的数据通常是指其平均值，即离心管中点常是指其平均值，即离心管中点的离心力。的离心力。旋转轴旋转轴34340 0rminravrmax5) 5) 离心设备离心设备 低速离心机低速离心机: :最大转速最大转速6000 rpm6000 rpm左右，最大相对离心左右，最大相对离心力近力近

34、60006000g g，通常不带冷冻系统。，通常不带冷冻系统。 超速离心机：大于超速离心机：大于303010 000 r/min10 000 r/min，最大离心力，最大离心力600,000g600,000g，有驱动和速度控制系统，温度控制系统，有驱动和速度控制系统，温度控制系统，真空系统减少摩擦。真空系统减少摩擦。 超速离心机的出现，使生物科学的研究领域有了超速离心机的出现，使生物科学的研究领域有了新的扩展，它能使过去仅仅在电子显微镜观察到的亚新的扩展，它能使过去仅仅在电子显微镜观察到的亚细胞器得到分级别离，还可以别离病毒、核酸、蛋白细胞器得到分级别离，还可以别离病毒、核酸、蛋白质和多糖等。

35、质和多糖等。5) 5) 离心设备离心设备 高速冷冻离心机：最大转速为高速冷冻离心机：最大转速为20 000-25 20 000-25 000rpm000rpmr/minr/min，最大相对离心力为，最大相对离心力为89 00089 000g g。 通常配有各种角式转头、荡平式转头、微孔板转头通常配有各种角式转头、荡平式转头、微孔板转头等，一般都有制冷系统，以消除高速旋转转头与空气之等，一般都有制冷系统，以消除高速旋转转头与空气之间摩擦而产生的热量，转速、温度和时间都可以严格准间摩擦而产生的热量，转速、温度和时间都可以严格准确地控制，并有数字显示。确地控制，并有数字显示。 一般分子实验室必备的设

36、备。一般分子实验室必备的设备。5) 5) 离心设备离心设备 角式转头是指离心管腔与转轴成一定倾角的转头。离心管腔的中角式转头是指离心管腔与转轴成一定倾角的转头。离心管腔的中心轴与旋转轴之间的角度在心轴与旋转轴之间的角度在20-4020-40度之间，角度越大别离效果越好。度之间，角度越大别离效果越好。 离心过程中，重心低，运转平衡，颗粒在沉降时先沿离心力方向撞向离心过程中，重心低，运转平衡，颗粒在沉降时先沿离心力方向撞向离心管壁，然后再沿管壁滑向管底，因此管的一侧就会出现颗粒沉积，此离心管壁，然后再沿管壁滑向管底，因此管的一侧就会出现颗粒沉积，此现象称为现象称为“壁效应。壁效应。 壁效应容易使沉

37、降颗粒受突然变速所产生的对流扰乱，影响别离效果。壁效应容易使沉降颗粒受突然变速所产生的对流扰乱，影响别离效果。角式转头角式转头荡平式转头：荡平式转头： 这种转头有这种转头有4 4或或6 6个自由活动的吊桶离心个自由活动的吊桶离心套管，当转头静止时，吊桶垂直悬挂，当转套管，当转头静止时，吊桶垂直悬挂，当转头转速到达每分钟头转速到达每分钟200200到到800800转时，吊桶荡至水转时，吊桶荡至水平位置。平位置。微孔板转头：微孔板转头： 这种转头可离心高达这种转头可离心高达 96 96孔微孔板、标准酶标板、孔微孔板、标准酶标板、PCRPCR板等。板等。 离心管主要用塑料和不锈钢制成：离心管主要用塑

38、料和不锈钢制成： 塑料离心管常用材料有聚乙烯塑料离心管常用材料有聚乙烯PEPE，聚碳酸酯，聚碳酸酯PCPC，聚丙烯，聚丙烯PPPP等，其中等，其中PPPP管性能较好。管性能较好。 塑料离心管的优点是透明或半透明，硬度小，可塑料离心管的优点是透明或半透明，硬度小，可用穿刺法取出梯度。缺点是易变形，抗有机溶剂腐蚀性差，用穿刺法取出梯度。缺点是易变形，抗有机溶剂腐蚀性差，使用寿命短。使用寿命短。 塑料离心管都有管盖，离心前管盖必须盖严，倒置不塑料离心管都有管盖，离心前管盖必须盖严，倒置不漏液。管盖有三种作用：防止样品外泄。用于有放射性漏液。管盖有三种作用：防止样品外泄。用于有放射性或强腐蚀性的样品时

39、，这点尤其重要。防止样品挥发。或强腐蚀性的样品时，这点尤其重要。防止样品挥发。支持离心管，防止离心管变形。支持离心管，防止离心管变形。5) 5) 离心设备耗材离心设备耗材- -离心管离心管5) 5) 离心设备离心设备- -使用本卷须知使用本卷须知 1. 1.离心机应放置在稳定的台面上，以防离心机滑动或离心机应放置在稳定的台面上，以防离心机滑动或振动，出现事故；振动，出现事故； 2. 2.离心前必须仔细检查转头各孔内有无异物、转头安装离心前必须仔细检查转头各孔内有无异物、转头安装是否紧固。是否紧固。 3. 3.样品的装载和平衡：使用离心机时，必须事先样品的装载和平衡：使用离心机时，必须事先在天平

40、上精密地平衡离心管和其内容物；当转头只是在天平上精密地平衡离心管和其内容物；当转头只是局部装载时，管子必须互相对称保证平衡地放在局部装载时，管子必须互相对称保证平衡地放在转头中，以便使负载均匀地分布在转头的周围。转头中，以便使负载均匀地分布在转头的周围。5) 5) 离心设备离心设备- -使用本卷须知使用本卷须知 4. 4.低温离心时，转头及离心机要预冷后再使用。低温离心时，转头及离心机要预冷后再使用。 5. 5.装载溶液时，要根据待离心液体的性质及体积选用装载溶液时，要根据待离心液体的性质及体积选用适合的离心管，液体不得装得过多，以防离心时甩出，适合的离心管，液体不得装得过多，以防离心时甩出，造成转头不平衡、