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文档简介

1、细菌的染色与形态结构的观察细菌的染色与形态结构的观察生物工程系 龙中儿细菌染色法死菌正染色负染色荚膜染色法等简单染色法鉴别染色法革兰氏染色法抗酸性染色法芽孢染色法姬姆萨染色法活菌用美蓝或TTC（氧化三苯基四氮唑）等染色革兰氏染色丹麦医生Hans Christian Gram于1884年发明的一种鉴别不同类型细菌的染色方法。1用碱性染料结晶紫对菌液涂片进行初染用碱性染料结晶紫对菌液涂片进行初染2用碘溶液进行媒染用碘溶液进行媒染，其作用是提高染料和细，其作用是提高染料和细 胞间的相互作用从而使二者结合得更牢固。胞间的相互作用从而使二者结合得更牢固。3用乙醇或丙酮冲洗进行脱色。用乙醇或丙酮冲洗进行脱

2、色。在经历脱色后在经历脱色后 仍将结晶紫保留在细胞内的为革兰氏阳性细仍将结晶紫保留在细胞内的为革兰氏阳性细 菌，而革兰氏阴性细菌的结晶紫被洗掉，细菌，而革兰氏阴性细菌的结晶紫被洗掉，细 胞呈无色。胞呈无色。4用一种与结晶紫具有不同颜色的碱性染料对用一种与结晶紫具有不同颜色的碱性染料对 涂片进行复染。涂片进行复染。例如沙黄，它使原来无色的例如沙黄，它使原来无色的 革兰氏阴性细菌最后呈现桃红到红色，而革革兰氏阴性细菌最后呈现桃红到红色，而革 兰氏阳性细菌继续保持深紫色兰氏阳性细菌继续保持深紫色革兰氏染色（的过程）革兰氏染色一、实验目的 学习微生物涂片、染色的基本技术，掌握细菌的简单染色法和革兰氏染

3、色法的基本原理及其染色技术 认识微生物的基本形态 了解革兰氏染色法在细菌分类中的重要性 学习并掌握显微镜油镜的原理和使用方法二、实验方法1. 简单染色法涂片干燥固定染色水洗干燥镜检2. 革兰氏染色法二、实验方法涂片干燥固定初染水洗媒染水洗脱色水洗复染水洗镜检1min1min0.5min3. 显微镜油镜的使用二、实验方法3. 显微镜油镜的使用二、实验方法显微镜的安装光源调节目镜调节聚光器数值孔径的调节显微观察低倍镜观察高倍镜观察油镜观察显微镜用毕后的处理显微镜用毕后的处理： 上升镜筒，取下载玻片 用擦镜纸拭去镜头上的镜油 用蘸有少量二甲笨的擦镜纸擦去镜头上残留的油迹，然后再用干净的擦镜纸擦去残留

4、的二甲苯 用擦镜纸清洁其他物镜和目镜，用稠布清洁显微镜的金属部件 显微镜各部件还原三、实验内容 细菌的简单染色法染色 细菌的革兰氏染色法染色四、实验报告 结果报告：根据细菌革兰氏染色观察结果，绘出两种或两种以上细菌的形态图（说明各菌的形状、颜色和革兰氏染色反应，需要当场完成上交）。你认为制备细菌染色标本时，尤其应该注意哪些环节？为什么要求制片完全干燥后才能用油镜进行观察？如果你的涂片未经热固定，将会出现什么问题？如果加热温度过高、时间过长，又会怎么样呢？你认为哪些环节会影响革兰氏染色结果的正确性？其中最关键的环节是什么？进行革兰氏染色时，为什么特别强调菌龄不能太老，用老龄细菌染色会出现什么问题？请设计一实验方法验证你的革兰氏

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