临床检验基础尿液化学

1、尿液化学检验2常用尿液化学检验常用尿液化学检验 o酸碱度酸碱度o蛋白质蛋白质o葡萄糖葡萄糖o酮体酮体o亚硝酸盐亚硝酸盐o隐血隐血o白细胞白细胞o胆红素胆红素o尿胆原和尿胆素尿胆原和尿胆素o维生素维生素Co微量清蛋白微量清蛋白o本周蛋白本周蛋白o肌红蛋白肌红蛋白o1、2-微球蛋白微球蛋白o纤维蛋白降解产物纤维蛋白降解产物o尿含铁血红素尿含铁血红素o尿尿NAG酶酶o尿淀粉酶尿淀粉酶o人绒毛膜促性腺激素（人绒毛膜促性腺激素（HCG）o乳糜尿测定乳糜尿测定o其他其他尿液化学其他检验尿液化学其他检验 3常用尿液化学检验常用尿液化学检验 o 酸碱度酸碱度o 蛋白质蛋白质o 葡萄糖葡萄糖o 酮体酮体o 胆红

2、素胆红素o 尿胆原和尿胆素尿胆原和尿胆素o 隐血隐血o 亚硝酸盐亚硝酸盐o 白细胞白细胞o 维生素维生素C4一、尿液酸碱度（一、尿液酸碱度（PH） 反映肾脏调节体液酸碱平衡的能力反映肾脏调节体液酸碱平衡的能力尿液尿液PH值主要由肾小管泌值主要由肾小管泌H+、铵的形成、铵的形成、HCOHCO3 3- -的重吸的重吸收、酸性和碱性磷酸盐相对含量决定。收、酸性和碱性磷酸盐相对含量决定。【参考值参考值】 晨尿晨尿 5.5-6.55.5-6.5随机尿随机尿 4.5-8.04.5-8.0存放时间过长因细菌分解尿素可使存放时间过长因细菌分解尿素可使PHPH偏高偏高56尿液酸碱度（尿液酸碱度（PH）p指示剂法

3、指示剂法p滴定法滴定法p干化学试带法干化学试带法ppHpH计法计法采用甲基红（采用甲基红（pH4.66.2）与溴麝香草酚蓝）与溴麝香草酚蓝（pH6.07.6）适量配合制成）适量配合制成pH试纸试纸垫，是目前最广泛应用的筛查方法。以仪垫，是目前最广泛应用的筛查方法。以仪器自动化检测来反映尿器自动化检测来反映尿pH59的变异范的变异范围，基本满足临床需要。围，基本满足临床需要。酸碱指示剂原理如溴麝香草酚蓝溶液。酸碱指示剂原理如溴麝香草酚蓝溶液。酸碱中和反应原理。酸碱中和反应原理。7尿液酸碱度（尿液酸碱度（PH）采用甲基红（采用甲基红（pH4.66.2）与溴麝香草酚蓝（）与溴麝香草酚蓝（pH6.07

4、.6）适量配合）适量配合制成制成pH试纸垫，是目前最广泛应用的筛查方法。以仪器自动化检测试纸垫，是目前最广泛应用的筛查方法。以仪器自动化检测来反映尿来反映尿pH59的变异范围，基本满足临床需要。的变异范围，基本满足临床需要。89（一）生理变化（一）生理变化o 1. 1. 饮食种类的影响饮食种类的影响 蛋白质蛋白质， 尿尿PH 蔬菜水果蔬菜水果, ,尿尿PHo 2.2.碱潮碱潮 进食后尿进食后尿PHo 3.3.其他其他 如运动、饥饿等生理活动时体内酸性代如运动、饥饿等生理活动时体内酸性代谢产物增多可使尿谢产物增多可使尿PH；尿中有脓、血或细菌污尿中有脓、血或细菌污染等使尿液碱化。染等使尿液碱化。

5、药物的影响。药物的影响。【临床意义临床意义】10（二）病理变化（二）病理变化1尿尿pH：酸中毒、慢性肾小球肾炎、痛风、糖尿病、酸中毒、慢性肾小球肾炎、痛风、糖尿病、低血钾性碱中毒等排酸增加；呼吸性酸中毒。低血钾性碱中毒等排酸增加；呼吸性酸中毒。2尿尿pH：碱中毒、严重呕吐、尿路感染、肾小管性酸碱中毒、严重呕吐、尿路感染、肾小管性酸中毒。中毒。 （三）指导临床用药（三）指导临床用药 根据尿液根据尿液pHpH变化指导临床用药，预防肾结石的形成和复变化指导临床用药，预防肾结石的形成和复发。发。酸性尿也可预防细菌的生长，减少泌尿系统的感染。酸性尿也可预防细菌的生长，减少泌尿系统的感染。11（四）做尿干

6、化学分析的质控（四）做尿干化学分析的质控 o PH对尿蛋白和比重的影响对尿蛋白和比重的影响o 不同不同PHPH值尿液，尿蛋白结果值尿液，尿蛋白结果 PHPH 3.0 3.0 5.0 5.0 7.0 7.0 8.0 8.0 9.0 9.0 白蛋白白蛋白 7070 100 100 100 100 100 100 200 200 注：双缩脲法定值注：双缩脲法定值100mg/dL100mg/dLo 不同不同PHPH值尿液值尿液, ,尿液比重变化尿液比重变化PHPH 5.0 5.0 6.0 6.0 6.5 6.5 7.0 7.0 8.0 8.0 9.0 9.0 比重比重 1.0151.015 1.015

7、 1.015 1.015 1.015 1.011 1.011 1.010 1.010 1.009 1.00912二、尿液蛋白质检查二、尿液蛋白质检查o 正常人尿液浓缩后再经免疫电泳，可按蛋白质的相对正常人尿液浓缩后再经免疫电泳，可按蛋白质的相对分子量大小分分子量大小分3 3组：组：高相对分子量蛋白高相对分子量蛋白：分子量分子量9 9万，含量极微，包万，含量极微，包括括T-HT-H糖蛋白、分泌型糖蛋白、分泌型IgAIgA等；等；中相对分子量蛋白中相对分子量蛋白：分子量分子量4-94-9万，以白蛋白为主，万，以白蛋白为主，占尿蛋白总量的占尿蛋白总量的1/2-2/31/2-2/3；低相对分子量蛋白低

8、相对分子量蛋白：分子量分子量4 4万，绝大多数在肾万，绝大多数在肾小管重吸收，故尿中含量极少，如免疫球蛋白小管重吸收，故尿中含量极少，如免疫球蛋白F FC C片段、片段、游离轻链、微球蛋白等。游离轻链、微球蛋白等。13蛋白尿形成蛋白尿形成1415蛋白尿蛋白尿（proteinuriaproteinuria） 【定义定义】 当当尿蛋白排出量尿蛋白排出量150mg/24h150mg/24h或或尿中蛋尿中蛋白浓度白浓度100mg/L100mg/L时，时，常规化学定性常规化学定性试验呈阳性试验呈阳性，称为蛋白尿。，称为蛋白尿。16一、生理性蛋白尿一、生理性蛋白尿o 指在人体机能正常情况下出现的短暂性蛋白

9、尿，一指在人体机能正常情况下出现的短暂性蛋白尿，一般不具有病理意义，可分为般不具有病理意义，可分为1、功能性蛋白尿、功能性蛋白尿2、体位性蛋白尿、体位性蛋白尿3、其他（其他（摄入性、偶然性、老年性、妊娠性摄入性、偶然性、老年性、妊娠性）171、功能性蛋白尿、功能性蛋白尿o 指机体在剧烈运动、发热、精神紧张等造成肾血管指机体在剧烈运动、发热、精神紧张等造成肾血管痉挛或充血而使肾小球毛细血管壁的通透性增加所痉挛或充血而使肾小球毛细血管壁的通透性增加所致的暂时性、轻度的蛋白尿。致的暂时性、轻度的蛋白尿。o 定性一般不超过（定性一般不超过（+）o 多见于青少年，常为一过性，蛋白尿随诱发因素的多见于青少

10、年，常为一过性，蛋白尿随诱发因素的消失而消失。消失而消失。182、体位性蛋白尿、体位性蛋白尿又称直立性蛋白尿又称直立性蛋白尿o 可能与直立时前突的脊柱压迫肾可能与直立时前突的脊柱压迫肾静脉；或直立过久时肾脏下移，静脉；或直立过久时肾脏下移，肾静脉扭曲造成肾脏瘀血，淋巴、肾静脉扭曲造成肾脏瘀血，淋巴、血流受阻有关。血流受阻有关。o 卧位时尿蛋白阴性，起床活动或卧位时尿蛋白阴性，起床活动或站立过久后可出现阳性，而平卧站立过久后可出现阳性，而平卧后又转成阴性。常见于青少年，后又转成阴性。常见于青少年，可随年龄增长而消失。定性一般可随年龄增长而消失。定性一般+。特殊体位尿特殊体位尿清晨清晨起床后（不可

11、有任何起床后（不可有任何活动）立即留第一次活动）立即留第一次尿液，然后站立尿液，然后站立15min （双脚并拢，（双脚并拢，足跟离墙足跟离墙15cm，枕，枕部和双肩靠墙）部和双肩靠墙）,再立再立位位30-60min后留第后留第二次尿液二次尿液193、假性蛋白尿假性蛋白尿(false proteinuria)o 混有血、脓、粘液等，不伴随肾脏本身的损害，常混有血、脓、粘液等，不伴随肾脏本身的损害，常见于泌尿道炎症、出血及尿中混入生殖系统分泌物见于泌尿道炎症、出血及尿中混入生殖系统分泌物等，又称偶然性蛋白尿。等，又称偶然性蛋白尿。20二、病理性蛋白尿二、病理性蛋白尿1、肾小球性蛋白尿、肾小球性蛋白

12、尿（glomerular proteinuria）o 炎症、毒素等损害使肾小球毛细血管壁通透性增加炎症、毒素等损害使肾小球毛细血管壁通透性增加或电荷屏障作用受损，滤出较多的血浆蛋白，超过或电荷屏障作用受损，滤出较多的血浆蛋白，超过了肾小管重吸收能力形成蛋白尿。了肾小管重吸收能力形成蛋白尿。o 尿蛋白定性：尿蛋白定性：+ +什什 么么 是是 ？选择性蛋白尿选择性蛋白尿非选择性非选择性蛋白尿蛋白尿根据滤过膜损伤的程度和蛋白尿的组分分为根据滤过膜损伤的程度和蛋白尿的组分分为2种：种：21222、肾小管性蛋白尿、肾小管性蛋白尿(Tubular proteinuria) 近曲小管损伤，重吸收功能降低，产

13、生的蛋白尿。近曲小管损伤，重吸收功能降低，产生的蛋白尿。尿蛋白组分以小分子量蛋白（尿蛋白组分以小分子量蛋白（ 2-MG 、溶菌酶）为主。、溶菌酶）为主。尿蛋白定性尿蛋白定性“+”临床意义临床意义 间质性肾炎间质性肾炎 中毒性肾间质损害：重金属中毒性肾间质损害：重金属 有机溶剂有机溶剂 抗生素抗生素 器官移植排斥反应器官移植排斥反应233、混合性蛋白尿、混合性蛋白尿(mixed proteinuria)临床意义临床意义肾脏疾病同时累及肾小球和肾小管所产生的蛋白尿肾脏疾病同时累及肾小球和肾小管所产生的蛋白尿中分子量的清蛋白及低分子量的中分子量的清蛋白及低分子量的2-M同时增多为主同时增多为主 肾小

14、球肾炎晚期肾小球肾炎晚期 肾盂肾炎后期肾盂肾炎后期 全身性疾病侵犯肾小球和肾小管全身性疾病侵犯肾小球和肾小管4、溢出性蛋白尿、溢出性蛋白尿(overflow proteinuria)临床意义临床意义 多发性骨髓瘤、轻链病、原发性巨球蛋白血症多发性骨髓瘤、轻链病、原发性巨球蛋白血症 急性血管内溶血急性血管内溶血 急性肌肉损伤急性肌肉损伤血循环中出现本周蛋白、游离血红蛋白、肌红蛋白等血循环中出现本周蛋白、游离血红蛋白、肌红蛋白等尿蛋白定性：尿蛋白定性： + +，一般不伴有肾脏损伤，一般不伴有肾脏损伤245、组织性蛋白尿、组织性蛋白尿(histic proteinuria)l来源于肾小管代谢、组织破

15、坏、炎症或药物刺激泌尿系来源于肾小管代谢、组织破坏、炎症或药物刺激泌尿系统产生的蛋白质进入尿液形成统产生的蛋白质进入尿液形成l成分以成分以T-H蛋白为主，常见于尿路感染蛋白为主，常见于尿路感染l尿蛋白定性：尿蛋白定性： +25（二）尿蛋白测定方法：（二）尿蛋白测定方法：o尿蛋白定性试验尿蛋白定性试验 过筛试验过筛试验加热乙酸法加热乙酸法磺基水杨酸法磺基水杨酸法干化学试带法干化学试带法o尿蛋白定量试验尿蛋白定量试验沉淀法沉淀法比浊法比浊法比色法比色法染料结合法染料结合法免疫测定法免疫测定法 尿蛋白电泳法尿蛋白电泳法26尿蛋白定性试验尿蛋白定性试验1.加热乙酸法加热乙酸法-传统经典方法，蛋白定性的

16、确证实验传统经典方法，蛋白定性的确证实验【原理原理】 加热煮沸使蛋白变性凝固，加酸使尿加热煮沸使蛋白变性凝固，加酸使尿pH接近蛋接近蛋白质等电点（白质等电点（pH4.7），在含有适量无机盐状况下，蛋白），在含有适量无机盐状况下，蛋白质更易于变性下沉，同时可消除因加热引起的某些磷酸盐质更易于变性下沉，同时可消除因加热引起的某些磷酸盐和碳酸盐析出造成的浑浊干扰。和碳酸盐析出造成的浑浊干扰。【质量控制质量控制】1.尿液标本必须新鲜。混有生殖系统分泌物时尿液标本必须新鲜。混有生殖系统分泌物时可致假阳性。可致假阳性。2.如加酸过少、过多，致远离蛋白质等电点，可使阳性程度如加酸过少、过多，致远离蛋白质等电

17、点，可使阳性程度减弱。因此实验前需调整尿液减弱。因此实验前需调整尿液pH至至56。 3.如尿中盐类离子浓度过低，可致假阴性，限盐或无盐饮食如尿中盐类离子浓度过低，可致假阴性，限盐或无盐饮食的患者可加饱和氯化钠溶液的患者可加饱和氯化钠溶液12滴再检查。滴再检查。27尿蛋白定性试验尿蛋白定性试验2.磺基水杨酸法磺基水杨酸法(SSA) -过筛实验，干化学法检测尿蛋白的参考方法过筛实验，干化学法检测尿蛋白的参考方法【原理原理】在略低于蛋白质等电点的酸性环境中，尿蛋白氨基带正电荷，与在略低于蛋白质等电点的酸性环境中，尿蛋白氨基带正电荷，与带负电荷的磺基水杨酸根相结合，形成不溶性蛋白盐沉淀，沉淀生成带负电

18、荷的磺基水杨酸根相结合，形成不溶性蛋白盐沉淀，沉淀生成的程度可反映蛋白质含量。的程度可反映蛋白质含量。【质量控制质量控制】 1.尿液标本必须新鲜。混有生殖系统分泌物时可致假阳性。尿液标本必须新鲜。混有生殖系统分泌物时可致假阳性。2.应用青霉素钾盐、庆大霉素、磺胺、应用青霉素钾盐、庆大霉素、磺胺、PAS及含碘造影剂等，或高浓度尿及含碘造影剂等，或高浓度尿酸、草酸盐、粘蛋白等作用下可呈假阳性反应，但加热煮沸后消失。酸、草酸盐、粘蛋白等作用下可呈假阳性反应，但加热煮沸后消失。3.如如PH9或或3可致假阴性，需调整尿液可致假阴性，需调整尿液pH至至56。28【结果判断结果判断】o阴性（）：阴性（）：不

19、显混浊，尿液外观仍清晰透明。不显混浊，尿液外观仍清晰透明。o可疑（可疑（）：）：轻微混浊，隐约可见，含蛋白量约为轻微混浊，隐约可见，含蛋白量约为0.05-0.20g/L。o阳性（）：阳性（）：明显白色混浊，但无颗粒出现，含蛋白量约为明显白色混浊，但无颗粒出现，含蛋白量约为0.30g/L。o（2）：）：稀薄乳样混浊，出现颗粒，含蛋白量约为稀薄乳样混浊，出现颗粒，含蛋白量约为1.0g/L。o（3）：）：乳浊，有絮片状沉淀，含蛋白量约为乳浊，有絮片状沉淀，含蛋白量约为3.0g/L。o（4）：）：絮状混浊，有大凝块下沉，含蛋白量絮状混浊，有大凝块下沉，含蛋白量5.0g/L。29尿蛋白定性试验尿蛋白定性

20、试验3.干化学试带法干化学试带法-健康普查健康普查【原理原理】利用利用pHpH指示剂的蛋白质误差（指示剂的蛋白质误差（protein error）原理）原理在一在一定条件下（定条件下（pH 3.2pH 3.2），指示剂阴离子与蛋白质结合生成复合物，引起），指示剂阴离子与蛋白质结合生成复合物，引起指示剂的进一步电离，超过尿液的缓冲能力而发生颜色变化。颜色的指示剂的进一步电离，超过尿液的缓冲能力而发生颜色变化。颜色的变化与蛋白质含量成正比。变化与蛋白质含量成正比。【质量控制质量控制】1.尿液标本必须新鲜，变质的尿液会影响尿尿液标本必须新鲜，变质的尿液会影响尿pHpH；大剂量青霉素可呈假阴；大剂量青

21、霉素可呈假阴性；大剂量洗必泰可呈假阳性。性；大剂量洗必泰可呈假阳性。2.反应时间和标本量严格按照试带法的操作说明来进行，并强调使用标反应时间和标本量严格按照试带法的操作说明来进行，并强调使用标准化的试带。准化的试带。3.对清蛋白灵敏，对球蛋白的灵敏度仅为清蛋白的对清蛋白灵敏，对球蛋白的灵敏度仅为清蛋白的1/100-1/501/100-1/50，与血红，与血红蛋白、肌红蛋白、本周蛋白基本不反应。蛋白、肌红蛋白、本周蛋白基本不反应。30o 不同不同PHPH值尿液，尿蛋白结果值尿液，尿蛋白结果 PHPH 3.0 3.0 5.0 5.0 7.0 7.0 8.0 8.0 9.0 9.0 白蛋白白蛋白 7

22、070 100 100 100 100 100 100 200 200 注：双缩脲法定值注：双缩脲法定值100mg/dL100mg/dLo 尿液过酸（尿液过酸（PH4PH8PH8），超过），超过试纸缓冲能力，可出现假阴性或假阳性试纸缓冲能力，可出现假阴性或假阳性31青霉素对尿蛋白干化学法的干扰青霉素对尿蛋白干化学法的干扰32尿液蛋白质定性检验的方法学评价尿液蛋白质定性检验的方法学评价方法方法评价评价加热乙酸加热乙酸法法尿液蛋白质检验的经典方法。特异性高、干扰因素少，灵敏尿液蛋白质检验的经典方法。特异性高、干扰因素少，灵敏度较低为度较低为0.15g/L0.15g/L。能使所有蛋白质发生沉淀反应，

23、。能使所有蛋白质发生沉淀反应，虽操作繁虽操作繁琐，但结果准确。琐，但结果准确。常作为常作为确证试验确证试验磺基水杨磺基水杨酸法酸法操作简便、快速。与清蛋白、球蛋白、本周蛋白均可发生反操作简便、快速。与清蛋白、球蛋白、本周蛋白均可发生反应。灵敏度高，为应。灵敏度高，为0.05-0.10g/L0.05-0.10g/L，因而有一定的假阳性。作，因而有一定的假阳性。作为干化学法检测尿蛋白的参考方法，手工法尿蛋白定性试验为干化学法检测尿蛋白的参考方法，手工法尿蛋白定性试验的的过筛试验过筛试验干化学法干化学法本法既可肉眼观察，又可用于尿液自动分析仪。本法既可肉眼观察，又可用于尿液自动分析仪。对清蛋白灵敏，

24、对对清蛋白灵敏，对球蛋白的灵敏度仅为清蛋白的球蛋白的灵敏度仅为清蛋白的1/100-1/501/100-1/50，与血红蛋白、肌红蛋白、，与血红蛋白、肌红蛋白、本周蛋白基本不反应。本法快速、简便、易于标准化，适用于本周蛋白基本不反应。本法快速、简便、易于标准化，适用于健康健康普查普查，尤其是肾脏疾病的筛检，尤其是肾脏疾病的筛检，但不适用于其疗效观察和判断预后。但不适用于其疗效观察和判断预后。33341.比色法（双缩脲法）比色法（双缩脲法）o 钨酸可沉淀尿液中的蛋白质，后者复溶于双缩脲试钨酸可沉淀尿液中的蛋白质，后者复溶于双缩脲试剂中，其碱性的剂中，其碱性的Cu 2+与蛋白质的肽键形成紫色的复与蛋

25、白质的肽键形成紫色的复合物，呈色的深浅与尿蛋白的含量成正比。合物，呈色的深浅与尿蛋白的含量成正比。o 双缩脲法是测定尿蛋白总量的常规参考方法。显色双缩脲法是测定尿蛋白总量的常规参考方法。显色稳定、重复性好，对白、球蛋白的反应灵敏度较一稳定、重复性好，对白、球蛋白的反应灵敏度较一致（致（100150mg/l），但灵敏度低。），但灵敏度低。尿蛋白定量试验尿蛋白定量试验35尿蛋白定量试验尿蛋白定量试验2.沉淀法沉淀法利用蛋白质与生物碱试剂结合，在酸性条件利用蛋白质与生物碱试剂结合，在酸性条件下形成沉淀物，观察沉淀物的量，以估计蛋白质的含下形成沉淀物，观察沉淀物的量，以估计蛋白质的含量。量。费时、准确

26、性差，已淘汰费时、准确性差，已淘汰 。3.比浊法比浊法（磺基水杨酸磺基水杨酸-硫酸钠双浊法）硫酸钠双浊法）：虽操作简虽操作简便，但线性范围窄，受温度、便，但线性范围窄，受温度、pH、时间、混匀方式等、时间、混匀方式等多种因素影响，故重复性差。磺基水杨酸还可与药物多种因素影响，故重复性差。磺基水杨酸还可与药物（磺胺、青霉素、有机碘等）及多肽类物质结合导致（磺胺、青霉素、有机碘等）及多肽类物质结合导致假阳性，故目前已少用。假阳性，故目前已少用。364.染料结合法染料结合法（1）丽春红）丽春红S法法: :蛋白质和丽春红蛋白质和丽春红S S结合后，同时被结合后，同时被三氯乙酸沉淀，在碱性溶液中沉淀物溶

27、解呈紫色，三氯乙酸沉淀，在碱性溶液中沉淀物溶解呈紫色，呈色深浅与蛋白质含量成正比。呈色深浅与蛋白质含量成正比。（2）考马斯亮蓝法）考马斯亮蓝法 5.免疫测定法免疫测定法 6.尿蛋白电泳法尿蛋白电泳法尿蛋白定量试验尿蛋白定量试验37尿液蛋白质定量检验的方法学评价尿液蛋白质定量检验的方法学评价方法方法评价评价沉淀法沉淀法费时、准确性差，已淘汰费时、准确性差，已淘汰比浊法比浊法操作简便，对清蛋白、球蛋白有相同的灵敏度，但线性操作简便，对清蛋白、球蛋白有相同的灵敏度，但线性范围窄，影响因素多（温度、范围窄，影响因素多（温度、pHpH、时间、混匀方式等），、时间、混匀方式等），因而精密度低因而精密度低比

28、色法比色法双缩脲比色法双缩脲比色法为蛋白质定量测定的经典方法为蛋白质定量测定的经典方法染 料 结 合染 料 结 合法法考马斯亮蓝法和邻苯三酚红钼酸络合法灵敏度高、操作考马斯亮蓝法和邻苯三酚红钼酸络合法灵敏度高、操作简便快速、呈色稳定、干扰因素少，但易污染。丽春红简便快速、呈色稳定、干扰因素少，但易污染。丽春红S S法需用三氯乙酸沉淀，操作繁琐，离心沉淀不完全也法需用三氯乙酸沉淀，操作繁琐，离心沉淀不完全也影响结果影响结果免疫法及免疫法及电泳法电泳法具有更高的灵敏度和特异性，临床普遍采用的新技术具有更高的灵敏度和特异性，临床普遍采用的新技术381、生理性蛋白尿生理性蛋白尿： 功能性、直立性、摄入

29、性、偶然性、老年性、功能性、直立性、摄入性、偶然性、老年性、妊娠性蛋白尿妊娠性蛋白尿2病理性蛋白尿病理性蛋白尿：可分为肾前性、肾性及肾后性蛋白尿可分为肾前性、肾性及肾后性蛋白尿【临床意义临床意义】39【临床意义临床意义】（1）肾前性蛋白尿肾前性蛋白尿：尿蛋白种类尿蛋白种类病因病因常见疾病常见疾病本周蛋白本周蛋白浆细胞病浆细胞病多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、浆细胞白血病浆细胞白血病血红蛋白血红蛋白血管内溶血性疾病血管内溶血性疾病 阵发性血红蛋白尿阵发性血红蛋白尿肌红蛋白肌红蛋白大面积肌肉损伤大面积肌肉损伤挤压综合征、电灼伤、多发性挤压综合征、电灼伤、多发性肌炎、进行性肌

30、肉萎缩肌炎、进行性肌肉萎缩溶菌酶溶菌酶淀粉酶淀粉酶酶类增高酶类增高急性单核细胞白血病急性单核细胞白血病胰腺炎胰腺炎40（2）肾性蛋白尿肾性蛋白尿：o 肾小球性蛋白尿肾小球性蛋白尿o 肾小管性蛋白尿肾小管性蛋白尿【临床意义临床意义】41【临床意义临床意义】 肾小球性蛋白尿常见疾病肾小球性蛋白尿常见疾病类型类型病因病因尿蛋白类型尿蛋白类型定性试定性试验验定量试验定量试验（g/d）选择性选择性蛋白尿蛋白尿肾病综合肾病综合征征相对分子量相对分子量4-9万（清蛋白为主）万（清蛋白为主）+3.5 10非选择非选择性蛋白性蛋白尿尿原发性肾原发性肾小球疾病小球疾病急慢性肾炎急慢性肾炎膜性肾炎膜性肾炎肾功能衰竭

31、肾功能衰竭大中分子量蛋白大中分子量蛋白质同时存在（清质同时存在（清蛋白、免疫清蛋蛋白、免疫清蛋白）白）+0.5 3.0继发性肾继发性肾小球疾病小球疾病糖尿病肾病糖尿病肾病狼疮肾病狼疮肾病妊娠中毒症妊娠中毒症42【临床意义临床意义】肾小管性蛋白尿肾小管性蛋白尿o 肾小管间质病变：肾小管间质病变：如间质性肾炎、肾盂肾炎、如间质性肾炎、肾盂肾炎、Fanconi 综合征、肾小管性酸中毒综合征、肾小管性酸中毒o 重金属中毒：重金属中毒：汞、镉、铋、砷、铀汞、镉、铋、砷、铀o 药物中毒：药物中毒：抗生素类抗生素类 庆大霉素、卡那霉素、多粘菌素庆大霉素、卡那霉素、多粘菌素 中药中药 马兜铃、木通马兜铃、木通

32、o 器官移植排斥反应器官移植排斥反应43（3）肾后性蛋白尿肾后性蛋白尿：o 泌尿生殖系统炎症：泌尿生殖系统炎症：如膀胱炎、尿道炎、前列腺炎、如膀胱炎、尿道炎、前列腺炎、 精囊炎精囊炎o 泌尿系结石、结核、肿瘤泌尿系结石、结核、肿瘤o 泌尿系邻近器官疾病：泌尿系邻近器官疾病：如急性阑尾炎、慢性盆腔炎、如急性阑尾炎、慢性盆腔炎、 宫颈炎、盆腔肿瘤宫颈炎、盆腔肿瘤【临床意义临床意义】44o动态观察动态观察尿蛋白结果对上述疾病的诊断、尿蛋白结果对上述疾病的诊断、病情观察、判断疗效和及时了解是否出现病情观察、判断疗效和及时了解是否出现药物副作用等均有一定意义。药物副作用等均有一定意义。4546尿蛋白圆盘

33、电泳尿蛋白圆盘电泳(SDS(SDSPAGE)PAGE) 【检测原理检测原理】又称又称SDSSDS聚丙烯酰胺凝胶电泳。聚丙烯酰胺凝胶柱中各聚丙烯酰胺凝胶电泳。聚丙烯酰胺凝胶柱中各种蛋白质都向正极移动，按其分子量的大小顺序彼此种蛋白质都向正极移动，按其分子量的大小顺序彼此分离，分子量越大，泳动越慢；反之则越快。分离，分子量越大，泳动越慢；反之则越快。将病人尿蛋白定性试验阳将病人尿蛋白定性试验阳性的尿液进行圆盘电泳，性的尿液进行圆盘电泳，并与已知分子量的标准蛋并与已知分子量的标准蛋白质一起电泳，对照比较白质一起电泳，对照比较以判断蛋白尿组分的性质以判断蛋白尿组分的性质与分子量范围。与分子量范围。47

34、凝胶上主要的尿蛋白的电泳条带区域分析凝胶上主要的尿蛋白的电泳条带区域分析起源于肾小管的各类蛋白(分子量 67 kDa)白蛋白(分子量 : 67 kDa)a1-微球蛋白 (MW : 33 kDa)游离轻链 (MW 25 kDa)转铁蛋白 (MW : 80 kDa)Cystatin (MW : 11 kDda)b2-微球蛋白 (MW :12 kDa)溶菌酶 (MW : 15 kDa)视黄醇结合蛋白(MW : 21 kDa)游离轻链的二聚体(MW 50 kDa)Ig G (MW : 160 kDa)Ig A (MW : 165 kDa)结合珠蛋白加样位置a2-巨球蛋白 (MW :900 kDa)尿蛋

35、白电泳尿蛋白电泳4849 67 kDa 67 kDa肾小管损伤 67 kDa5051 67kDa 67kDa混合性损伤5253【临床意义临床意义】o判断蛋白质组分的性质与相对分子质量大小，从而了解尿蛋白的形成原判断蛋白质组分的性质与相对分子质量大小，从而了解尿蛋白的形成原因和病变部位。因和病变部位。o 中分子和大分子的蛋白尿中分子和大分子的蛋白尿白蛋白及白蛋白以上附近白蛋白及白蛋白以上附近肾肾小球损伤小球损伤； 如急性肾炎、肾病综合征、慢性肾炎早期等；如急性肾炎、肾病综合征、慢性肾炎早期等；o 小分子量蛋白尿小分子量蛋白尿白蛋白以下附近白蛋白以下附近肾小管及其间质病肾小管及其间质病变变； 如急

36、性和慢性肾盂肾炎、肾小管酸中毒、慢性间质性肾炎、重金属中毒如急性和慢性肾盂肾炎、肾小管酸中毒、慢性间质性肾炎、重金属中毒等；等；o 混合性蛋白尿混合性蛋白尿肾小管、肾小球和间质病变肾小管、肾小球和间质病变； 如慢性肾炎晚期、严重间质性肾炎、急性肾功能衰竭、尿毒症等。如慢性肾炎晚期、严重间质性肾炎、急性肾功能衰竭、尿毒症等。【注意注意】尿蛋白定性在尿蛋白定性在“+ +”以上才需测定。以上才需测定。54三、三、尿糖检查尿糖检查（diabetic urine，glucosuria）【定义定义】o 血糖浓度超过肾糖阈血糖浓度超过肾糖阈8.88mmol/L时，尿中开时，尿中开始出现葡萄糖，尿糖定性试验呈

37、阳性的尿液称为始出现葡萄糖，尿糖定性试验呈阳性的尿液称为糖尿糖尿。【形成机制形成机制】尿中是否出现葡萄糖取决于三个因素：尿中是否出现葡萄糖取决于三个因素：o 血糖浓度血糖浓度o肾血流量肾血流量o肾糖阈（肾糖阈（renal glucose thresholdrenal glucose threshold）：）：当血糖浓度超过当血糖浓度超过8.88mmol/L8.88mmol/L时，尿液中即开始出现葡萄糖，这时的血浆葡萄时，尿液中即开始出现葡萄糖，这时的血浆葡萄糖浓度水平称为肾糖阈。糖浓度水平称为肾糖阈。55 糖尿的原因及分类糖尿的原因及分类56尿糖测定方法尿糖测定方法（一）尿糖定性检验（一）尿糖

38、定性检验o 干化学法干化学法o 班氏定性法班氏定性法o 薄层层析法薄层层析法（二）尿糖定量检验（二）尿糖定量检验o 葡萄糖氧化酶法葡萄糖氧化酶法o 己糖激酶法己糖激酶法【标本要求标本要求】1.尿液标本不宜久置，以免细菌繁殖分解尿尿液标本不宜久置，以免细菌繁殖分解尿液中葡萄糖使结果偏低。液中葡萄糖使结果偏低。2.24小时尿糖定量时，应加甲苯防腐。小时尿糖定量时，应加甲苯防腐。3.检测糖尿病患者的尿糖，要求空腹或餐后检测糖尿病患者的尿糖，要求空腹或餐后2小时留取标本送检。小时留取标本送检。57（一）尿糖定性检验（一）尿糖定性检验1 1干化学试带法干化学试带法 【检测原理检测原理】尿液葡萄糖在试带中

39、葡萄糖氧化酶的催化尿液葡萄糖在试带中葡萄糖氧化酶的催化作用下，生成葡萄糖酸内酯和过氧化氢。在过氧化物作用下，生成葡萄糖酸内酯和过氧化氢。在过氧化物酶的催化下，过氧化氢使色原物氧化而呈色。酶的催化下，过氧化氢使色原物氧化而呈色。【方法学评价方法学评价】特异性强，灵敏度高，简便快速，定性特异性强，灵敏度高，简便快速，定性或半定量，可目测或用于尿自动分析仪。或半定量，可目测或用于尿自动分析仪。 58592 2班氏定性法班氏定性法【检测原理检测原理】葡萄糖或其他还原性糖类的醛基在热碱性溶液葡萄糖或其他还原性糖类的醛基在热碱性溶液中，能将班氏试剂中蓝色的中，能将班氏试剂中蓝色的CuSOCuSO4 4还原

40、为还原为CuCu2 2O O，出现黄色至，出现黄色至砖红色沉淀物。砖红色沉淀物。 【方法学评价方法学评价】敏感性较高，敏感性较高，特异性差，凡尿中其它糖类特异性差，凡尿中其它糖类（果糖、乳糖、戊糖等）及其它还原性物质（肌酐、尿酸、（果糖、乳糖、戊糖等）及其它还原性物质（肌酐、尿酸、VitCVitC等）可呈假阳性。等）可呈假阳性。 【质量控制质量控制】 VitCVitC、青霉素等还原性物质可使本法产生、青霉素等还原性物质可使本法产生假阳性，应停药假阳性，应停药3 3天，或煮沸除去天，或煮沸除去VitCVitC。大量铵盐及蛋白质（大量铵盐及蛋白质（0.5g/L0.5g/L）可妨碍）可妨碍CuCu2 2O O沉淀，应预先加沉淀，应预先加碱煮沸去氨后再检验或加热乙酸法去除蛋白质后，取滤液碱煮沸去氨后再检验或加热乙酸法去除蛋白质后，取滤液检验。检验。60班氏定性法的反应式班氏定性法的反应式61623 3薄层层析法薄层层析法 【检测原理检测原理】【方法学评价方法学评价】是鉴别、确保尿糖种类的特异、敏是鉴别、确保尿糖种类的特异、敏感的实验方法，但操作复杂，在临床或基础研究时感的实验方法，但操作复杂，在临床或基础研究时应用。应用。6