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1、2022-3-191实验三：根系活力的测定 （一）实验目的及意义（一）实验目的及意义 （二）实验原理（二）实验原理 （三）实验步骤（三）实验步骤 （四）（四）实验报告实验报告2022-3-192实验目的和意义实验目的和意义 掌握根系活力测定的方法2022-3-193实验原理实验原理 氯化三苯基四氮唑（ TTC ）是标准氧化电位为 80 mV 的氧化还原色素，溶于水中成为无色溶液，但还原后即生成红色而不溶于水的三苯甲 （ TTF ）生成的三苯甲 （ TTF ）比较稳定，不会被空气中的氧自动氧化，所以 TTC 被广泛用作酶试验的氢受体，植物根系中脱氢酶所引起的 TTC 还原，可因加入琥珀酸、延胡索

2、酸、苹果酸得到增强，而被丙二酸、碘乙酸所抑制。所以 TTC 还原量能表示脱氢酶活性，并作为根系活力的指标。2022-3-194实验材料和器材实验材料和器材 试剂 乙酸乙酯、石英砂、硫代硫酸钠粉末、1TTC、1/15mol/LpH7.0磷酸缓冲液、1mol/L硫酸 实验材料 蒜根 器材 分光光度计、分析天平、恒温水浴锅、研钵、漏斗个、移液管、比色管、10ml容量瓶、50ml烧杯2022-3-195实验步骤实验步骤（ 2 ）称取根尖样品 0.5 g ，放入小烧杯中，加入 0.4 TTC 溶液和磷酸缓冲液（ pH7.0 ）各 5 mL ，使根充分浸没在溶液内，在 37 下暗保温 1 2 h ，此后立

3、即加入 1 mol/L 硫酸 2 mL ，以停止反应。（与此同时做一空白实验，先加硫酸，再加根样品， 37 下暗保温后不加硫酸，其溶液浓度、操作步骤同上）。 （ 1 ） TTC 标准曲线的制作 取 0.4 TTC 溶液 0.2 mL 放入大试管中，加 9.8 mL 乙酸乙酯，再加少许 Na 2 S 2 O 4 粉末摇匀，则立即产生红色的 TTF 。此溶液浓度为每毫升含有 TTF 80 g 。分别取此溶液 0.25 mL 、 0.50 mL 、 1.00 mL 、 1.50 mL 、 2.00 mL 置 10 mL 刻度试管中，用乙酸乙酯定容至刻度，即得到含 TTF 20 g 、 40 g 、 80 g 、 120 g 、 160 g 的系列标准溶液，以乙酸乙酯作参比，在 485 nm 波长下测定吸光度，绘制标准曲线。2022-3-196实验步骤实验步骤 （ 3 ）把根取出，用滤纸吸干水分，放入研钵中，加乙酸乙酯 3 4 mL ，充分研磨，以提出 TTF 。把红色提取液移入刻度试管，并用少量乙酸乙酯把残渣洗涤 2 3 次，皆移入刻度试管，最后加乙酸乙酯使总量为 10 mL ，用分光光度计在波长 485 nm 下比色，以空白试验作参比测出

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