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文档简介

1、药物;sm4pamam20-40目。Pamarrit数对smz溶解度有影响,代数越高,越易溶解。疏水化合物的溶解度可能依赖于代数高低。聚合物内部空腔和叔胺数目随代数增加而增加,也就是说代数越高的pamarW更大的空间容纳包裹更多的药物。方法:smz溶于乙醇,再加入pamamS分振荡,使溶液达到饱和,37c机械振荡24小时,然后1000rpm离心,得到smz饱和溶液,再将饱和溶液蒸到一个合适的浓度。(质子化的程度取决于ph值,ph=7时,结合程度最大。)结果表明,在水溶液中磺胺甲嗯口坐的溶解度大约和树状浓度成正比(37摄氏度时,在10毫克/毫升代树状大分子中的溶解度相比于在蒸馏水中增加了四十倍)

2、浓度测定:溶于乙醇的smz最大吸光度在它的特征波长处紫外区域。用不同的smz浓度做smz校准曲线。分光光度计检验pamamt的药物含量。将刚刚溶解后的smz溶液测具浓度,再测振荡吸附后的溶液的浓度,算出吸附率。用相同的蒸储水对药物树枝状聚合物溶液进行稀释,由于聚合物在265处没有相应的吸收,所以在smz-树状聚合物溶液中测的吸光度全部来自smz,吸光度与校准曲线相关,由此可以测定smz的量。缓释:将smz溶解于树状溶液中并用蒸储水稀释到(4mg/ml)的终浓度。纯的smz被溶解到乙醇(4mg/ml)中作为对照。该溶液(1毫升的量)立即被转移到一个透析袋(M.W.切断)中。透析袋放在装有40ml

3、蒸储水的一个50ml烧杯中。外相不断搅拌。每隔一段时间(0h,0.5h,1h,1.5h;.),100ul的样品从外相撤出,外相再次补充100ul蒸馏水,用分光光度计测取出样品在265处的吸光度,对照曲线,即可测出smz在某个时间点在外相的浓度。校准曲线标定:精密称取干燥至恒重的SMZ200mg,在100ml量瓶中加0.05molL-1NaOH溶液至刻度,取1ml于100ml量瓶中加0.05molL-1NaOH溶液至刻度,分别准确吸取贮备液适量用乙醇稀释成0.5、1、2、4、8、12gml-1的标准溶液,以0.05molL-1NaOH溶液为空白,在257nm处测定吸光度,以吸光度对浓度回归,得标

4、准曲线回归方程为:A=0.0674C-0.0083,r=0.9992。分光光度计浏览次数:475次分光光度计是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度,对该物质进行定性和定量分析的测量仪。它主要由光源、单色器、样品室、检测器、信号处理器和显示与存储系统组成。目前,它已经成为现代分子生物实验室常规仪器,常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。目录分光光度计的特点分光光度计的原理分光光度计的配件分光光度计的使用方法分光光度计的技术参数分光光度计的特点1、采用高性能优质光栅,波长精度更高;2、采用进口鸨灯,发光效率高,使用寿命长,功耗降低;3、超大规模集成,T/A转换精度高,稳定性

5、高;4、微机系统的应用,使操作使用简单可靠。分光光度计的原理分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源,光源透过测试的样品后,部分光源被吸收,计算样品的吸光值,从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。分光光度计的配件比色杯是分光光度计的重要配件,比色杯按照材质大致分为石英杯、玻璃杯以及塑料杯。根据不同的测量体积,有比色杯和毛细比色杯等。一般测试核酸和紫外定量蛋白,均采用石英杯或者玻璃杯,但是不适合比色法测定。因为反应中的染料(如考马斯亮兰)能让石英和玻璃着色,所以必须采用一次性的塑料杯。而塑料杯一般不适合用于在紫外范围内测试样品。分光光度计

6、的使用方法以722型分光光度计为例,来介绍分光光度计的使用方法:(1)将灵敏度旋钮调整"1"档(放大倍率最小)。(2)开启电源,指示灯亮,仪器预热20分钟,选择开关置于"T"(3)打开试样室盖(光门自动关闭),调节"0%r旋钮,使数字显示为"00.0"。(4)将装有溶液的比色皿放置比色架中。(5)旋动仪器波长手轮,把测试所需的波长调节至刻度线处。(6)盖上样品室盖,将参比溶液比色皿置于光路,调节透过率"i00%r旋钮,使数字显示为"100.0T"(如果显示不到100%T则可适当增加灵敏度的档数,

7、同时应重复"3",调整仪器的"00.0")(7)将被测溶液置于光路中,数字表上直接读出被测溶液的透过率(T)值。(8)吸光度A的测量,参照"3""6"调整仪器的"00.0"和"100.0",将选择开关置于A旋动吸光度调零旋钮,使得数字显示为.000,然后移入被测溶液,显示值即为试样的吸光度A值。(9)浓度C的测量,选择开关由A旋至C,将已标定浓度的溶液移入光路,调节浓度按钮,使得数字显示为标定值,将被测溶液移入光路,即可读出相应的浓度值。(10)仪器在使用时,应常参照本操作方

8、法中"3""6"进行调"00.0"和"100.0"的工作。11)每台仪器所配套的比色皿不能与其它仪器上的比色皿单个调换。(12)本仪器数字显示后背部,带有外接插座,可输出模拟信号,插座1脚为正,2脚为负接地线。(13)如果大幅度改变测试波长时,需等数分钟后才能正常工作。(因波长由长波向短波或短波向长波移动时,光能量变化急剧,光电管受光后响应较慢,需一段光响应平衡时间。分光光度计的技术参数波长范围:320s1000nm光谱带宽:4nm杂散光:0.5%(在360nmM)波长准确度:优于±2nm透射比准确度:&

9、#177;1nmT1.紫外可见分光光度计基本工作原理科丰恒业紫外可见分光光度计和红外光谱仪相似,利用一定频率的紫外-可见光照射被分析的有机物质,引起分子中价电子的跃迁,它将有选择地被吸收。一组吸收随波长而变化的光谱,反映了试样的特征。在紫外可见光的范围内,对于一个特定的波长,吸收的程度正比于试样中该成分的浓度,因此测量光谱可以进行定性分析,而且根据吸收与已知浓度的标样的比较,还能进行定量分析。2.紫外分光光度计特点和主要用途紫外-可见光谱仪涉及的波长范围是0.20.8微米(对应波数50000-12500厘米-1),它在有机化学研究中得到广泛的应用。通常用作物质鉴定、纯度检查,有机分子结构的研究

10、。在定量方面,可测定结构比较复杂的化合物和混合物中各组分的含量,也可以测定物质的离解常数,络合物的稳定常数,物质分子量鉴别和微量滴定中指示终点以及在高效液相色谱中作检测器等。紫外分光光度计的工作波长在2001000nm之间,其波长范围涵盖紫外光(200400nm、可见光(400750nn)及近红外光(7501000nm。在紫外光区(200350n笛测定时必须用石英杯。3.分光光度计的基本原理及种类分光光度计是理化分析中最常用的仪器。它的基本原理是建立在光与物质相互作用的基础上,当光子和某一溶液中吸收辐射的物质分子相碰撞时,就发生吸收,测量其吸光度值的大小可反映某种物质存在的量的多少。光的吸收程

11、度与浓度有一定的比例关系,这就是著名的比直定律。该定律成立的必要条件是单色光(单一波长光)照射样品。为了使该定律具有良好的线性,对测量浓度有一定的范围要求。也就是吸光度值控制在0.20.7之间,并且要求单色光垂直照射样品,试样要均匀。一台性能优良的分光光度计,必须有一个高性能的光路系统即单色仪。单色仪有两类:一类是以玻璃三棱镜为色散元件组成;另一类是由光栅为色散元件组成。两种单色仪各有利弊,用石英玻璃做成的单色仪,在紫外光区有较高的色散率,波长精度较高,分辨率可达0.2nm,但在可见光区要大于2nm,波长精度不线性,像751G型分光光度计,是由光栅做成的单色仪,在全段波长(200nm800nm

12、后间具有相同的波长精度。但目前大部分光栅或分光光度计所用的光栅都是复制光栅,波长精度不太高,如754、722、752型分光光度计,波长精度在±2nmi如制药厂采用定波长测量,需要强吸收峰,这时就要采用波长精度较高的仪器,否则很难测准最大吸收值,所以仪器的选用要根据工作要求。近几年出现了不少带单片机的分光光度计数据处理和操作功能大大加强,但基本原理没有变。二日常维护做好仪器的日常维护保养工作,也是用好一台仪器的关键。分光光度计是一种高阻仪器,所以怕潮湿,过高的空气湿度将影响仪器的稳定性和电安全性,环境湿度一般控制在<85%。温度对仪器也有一定影响,因仪器灯源本身具有热量。当工作一

13、段时间后,仪器本身温度会增加,当环境温度过高时会严重影响仪器读数的稳定性和使用寿命。实验室的温度一般控制在10c25c之间。在日常维护工作中要定期更换仪器的硅胶,定期开机,这样才能保证仪器的正常使用和测量数据稳定可靠。三比色器的选用分光光度计的比色皿若选用不当也会给分析工作带来较大误差。一般紫外光区用石英比色皿可见光区用玻璃比色皿。石英比色皿可用在全波段,玻璃比色皿只能用于340nm以上波长,因为玻璃不透紫外光。使用中的比色皿会受污染,其配套性会变差。所以当发现配套性变差后要及时清洗,污染严重的要用重铬酸钾洗液清洗。当两个比色皿在检定配套性时其透射比之差小于0.5%透过率时,就要考虑重新配套或更换比色皿。另外,每次装入比色皿的溶液不要过满,一般装2/3即可,并在每次倒溶液时应小心操作,减少对进光面的擦洗次数,以防进光面磨损而影响透过率。分光光度计是计量仪器,必须定期检定或校准,若经修理后必须重新检定,经检定合格后方可使用。狭缝是指由一对隔板在光通路上形成的缝隙,用来调节入射单色光的纯度和强度,也直接影响分辩力。出射狭缝的宽度通常有两种表示方法:一为狭缝的实际宽度,以毫米(mm表示,另一种为光谱频带宽度,即指由出射狭缝射出光束

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