第二章生物药物的质量管理与控制(1)

1、第二章第二章生物药物的质量管理与控制生物药物的质量管理与控制生物药物质量的评价生物药物质量的评价药物的质量标准药物的质量标准生物药物常用的定量分析法生物药物常用的定量分析法基因工程药物质量控制基因工程药物质量控制 新药研究和开发的主要过程新药研究和开发的主要过程 本章要点本章要点生物药物与化学药物在质量控制上的差别？生物药物与化学药物在质量控制上的差别？1、生物药物多数为大分子药物，生物药物多数为大分子药物，化学结构不明确化学结构不明确，有的，有的相对分子质量不是定值，相对分子质量不是定值，稳定性差稳定性差。2、在在检查项目上也有不同检查项目上也有不同，生化药物均需作热源检查、，生化药物均需作

2、热源检查、过敏试验、异常毒性等。过敏试验、异常毒性等。3、对生物药物对生物药物有效成分有效成分的检验，除应用一般化学方法的检验，除应用一般化学方法外，更应根据制品的外，更应根据制品的特异生理效应或专一生化反应特异生理效应或专一生化反应拟定其拟定其生物活性检测方法。生物活性检测方法。4、在在定量方法定量方法上，除了常用的理化分析方法以外，生物上，除了常用的理化分析方法以外，生物药物还有电泳法、酶法、免疫法和生物检定法。药物还有电泳法、酶法、免疫法和生物检定法。木糖木糖重组木聚糖酶水解重组木聚糖酶水解Birchwood xylan产物分析产物分析 Native-PAGE电泳电泳第一节第一节 生物药

3、物质量的评价生物药物质量的评价性状、鉴别、纯度、含量、性状、鉴别、纯度、含量、生物转化与利用等。生物转化与利用等。1 1、生物药物质量检验的程序和方法、生物药物质量检验的程序和方法2 2、药物的、药物的ADMEADME生物药物质量检验的程序与方法生物药物质量检验的程序与方法生物药物检验工作的基本程序一般为：生物药物检验工作的基本程序一般为：安全性检查安全性检查含量测定含量测定取样取样鉴别试验鉴别试验杂质检查杂质检查检验报告检验报告1、药物的取样、药物的取样真实性真实性科学性科学性代表性代表性A、原料药用取样探子取样：应全批取样，分部位取样原料药用取样探子取样：应全批取样，分部位取样B、样品量应

4、至少供样品量应至少供1次检验使用次检验使用C、取样需填写记录取样需填写记录D、取样后应混合作为样品取样后应混合作为样品 原则：均匀、合理原则：均匀、合理2、药物的鉴别试验、药物的鉴别试验 鉴别鉴别就是依据生物药物的化学结构和理化性就是依据生物药物的化学结构和理化性质，采用质，采用化学法、物理法及生物学化学法、物理法及生物学方法进行某些特方法进行某些特殊反应，或测试某些专属的物理常数，如殊反应，或测试某些专属的物理常数，如UV、IR等等来来判断并确定生物药物及其制剂的真伪判断并确定生物药物及其制剂的真伪。常用鉴定方法常用鉴定方法化学反应法化学反应法紫外分光光度法紫外分光光度法色谱法色谱法酶法酶法

5、电泳法电泳法综合运用、全面评价综合运用、全面评价标准对照标准对照一组项目一组项目1、FeCl3反应反应水解后能产生酚羟基，加三氯化铁试液水解后能产生酚羟基，加三氯化铁试液1滴，即显紫色滴，即显紫色2、水解反应、水解反应醋酸臭气）水杨酸（白色醋酸钠水杨酸钠试液阿司匹林稀硫酸 CONa32COOHOCOCH3 药物的药物的杂质检查杂质检查主要针对主要针对生产中生产中引入的杂质，引入的杂质，按照药品质量标准规定的项目，根据生产药品的按照药品质量标准规定的项目，根据生产药品的原原料、制备方法、贮藏容器与贮藏过程料、制备方法、贮藏容器与贮藏过程可能发生的变可能发生的变化等情况，考虑可能存在的杂质，再根据

6、这些杂质化等情况，考虑可能存在的杂质，再根据这些杂质的毒性，经综合考虑进行检查。的毒性，经综合考虑进行检查。1 1有毒副作用的物质有毒副作用的物质2 2本身无毒副作用，但影响药物的稳定性和疗效的物质本身无毒副作用，但影响药物的稳定性和疗效的物质本身无毒副作用，也不影响药物的稳定性和疗效，但影本身无毒副作用，也不影响药物的稳定性和疗效，但影响药物的科学管理的物质。响药物的科学管理的物质。杂质包含的内容：杂质包含的内容：3、药物的杂质检查、药物的杂质检查特殊杂质检查特殊杂质检查：指从生产过指从生产过程中引入或原程中引入或原料中带入的对料中带入的对人体健康有潜人体健康有潜在影响的杂质在影响的杂质一般

7、杂质检查：一般杂质检查：如氯化物、硫酸如氯化物、硫酸盐、铁盐、重金盐、铁盐、重金属、砷盐、酸、属、砷盐、酸、碱、水分、易炭碱、水分、易炭化物、炽灼残渣化物、炽灼残渣药物的药物的杂质检查杂质检查一般情况下，需对杂质规定限量，超过规定的限量，既不合格。一般情况下，需对杂质规定限量，超过规定的限量，既不合格。 判断药品的纯度是否符合标准中的限量规定要求，也称判断药品的纯度是否符合标准中的限量规定要求，也称纯度检查纯度检查。药品不良反应信息通报药品不良反应信息通报 截止截止2003年第一季度，国家不良反应监年第一季度，国家不良反应监测中心数据库中有关新鱼腥草素钠注射液引测中心数据库中有关新鱼腥草素钠注

8、射液引起的不良反应病历报告共起的不良反应病历报告共272例，以过敏反例，以过敏反应和输液反应为主，其中严重不良反应有过应和输液反应为主，其中严重不良反应有过敏性休克和呼吸困难敏性休克和呼吸困难40例。例。05、06年不良反应年不良反应季度报告季度报告对病历报告进一步统计分析对病历报告进一步统计分析严重严重病例病例剂量剂量范围范围静脉：静脉：20-250mL肌内：肌内：2-10mL严重的药害事件严重的药害事件新鱼腥草素钠注射液新鱼腥草素钠注射液亮菌甲素注射液亮菌甲素注射液注射用甲氨喋啶注射用甲氨喋啶原因分析：原因分析： 新 鱼 腥 草 素新 鱼 腥 草 素钠注射液成分钠注射液成分复杂，用气相复杂

9、，用气相色谱色谱-质谱联用质谱联用方法鉴定本品方法鉴定本品有效成分，鉴有效成分，鉴定出定出48种化合种化合物。物。主要成分：主要成分：鱼腥草素鱼腥草素甲基正壬酮甲基正壬酮根本：根本： 鱼腥草素易分解、鱼腥草素易分解、氧化、脱氢后转化氧化、脱氢后转化为甲基正壬酮为甲基正壬酮过敏原？过敏原？（成分、杂质、降解产物？）（成分、杂质、降解产物？）实例一实例一实例二：亮菌甲素注射液实例二：亮菌甲素注射液事件背景：事件背景：2006年年4月底，广东中山月底，广东中山三院传染病科先后出现多例急性肾三院传染病科先后出现多例急性肾衰竭衰竭广东深药检所在亮菌甲素注射液中广东深药检所在亮菌甲素注射液中检出检出二甘醇

10、二甘醇急性肾衰竭急性肾衰竭4、药物的安全性检测、药物的安全性检测 药物的安全性检测药物的安全性检测过敏试验过敏试验热原检查热原检查无菌检测无菌检测异常毒性试验异常毒性试验降压物质检查降压物质检查药代动力学药代动力学毒理学毒理学5、药物的含量测定、药物的含量测定 含量测定含量测定是指采用是指采用化学分析方法或物理分析方化学分析方法或物理分析方法法，测定药品的有效成分的含量是否，测定药品的有效成分的含量是否符合规定符合规定的含的含量标准。可用于量标准。可用于判定判定药物的优劣。药物的优劣。1百分含量表示：百分含量表示：适用于结构明确的小分子药物或经水解后变成适用于结构明确的小分子药物或经水解后变成

11、小分子的药物小分子的药物2生物效价或酶活力单位表示：生物效价或酶活力单位表示：适用于多肽、蛋白质、酶类及生适用于多肽、蛋白质、酶类及生物制品等药物物制品等药物生物药物的含量表示方法：生物药物的含量表示方法：生物药物的判断标准生物药物的判断标准 判断一个药品的质量判断一个药品的质量是否符合是否符合药品质量标准的规药品质量标准的规定要求，必须全面考虑定要求，必须全面考虑鉴别鉴别、检查检查与与含量测定含量测定三个方三个方面的检验结果。只要有面的检验结果。只要有任何一项不符合任何一项不符合规定要求者，规定要求者，根据药品质量标准的规定，这个药品即为根据药品质量标准的规定，这个药品即为不合格品不合格品。

12、6、检验报告的书写、检验报告的书写 原始记录原始记录要求要求真实：真实：简明具体，笔色一致，简明具体，笔色一致， 不能随意涂改。不能随意涂改。完整：完整：没有缺页，损角。没有缺页，损角。清楚：清楚：用词规范，字迹清楚。用词规范，字迹清楚。 取样时间、取样量、外观、包装取样时间、取样量、外观、包装 内容内容样品名称、来源、批号、规格样品名称、来源、批号、规格 目的、项目、方法及依据目的、项目、方法及依据 检验现象、实验数据、计算公式检验现象、实验数据、计算公式 结论：处理意见。结论：处理意见。武汉马应龙药业集团股份有限公司武汉马应龙药业集团股份有限公司新新 药药 检检 验验 报报 告告 单单 样

13、品名称样品名称 乳酸乳酸左氧氟沙星胶囊左氧氟沙星胶囊 包装规格包装规格 100mg100mg1010粒粒 样品批号样品批号 991001 991001 送样单位送样单位 胶囊车间胶囊车间 送样日期送样日期 1999.10.15 1999.10.15 报告日期报告日期 1999.10.22 1999.10.22 检验依据检验依据 按按乳酸乳酸左氧氟沙星胶囊生产用药品质量标准草案检验左氧氟沙星胶囊生产用药品质量标准草案检验 检验项目检验项目 检测结果检测结果 标准规定标准规定 结结 论论 性性 状状 淡黄色颗粒淡黄色颗粒 应为类白色或应为类白色或淡黄色颗粒淡黄色颗粒 符合规定符合规定 鉴鉴 别别

14、(1).(1).显色反应显色反应 呈正反应呈正反应 应呈正反应应呈正反应 符合规定符合规定(2).(2).紫外最大吸收紫外最大吸收 在在293nm293nm有有最大吸收最大吸收 应在应在2932932nm2nm有最大吸收有最大吸收 符合规定符合规定(3).(3).左旋异构体左旋异构体 主峰主峰RtRt与对照品与对照品 主峰主峰RtRt应与对照品应与对照品 符合规定符合规定 左旋体峰一致左旋体峰一致 左旋体峰一致左旋体峰一致(4).(4).乳酸盐乳酸盐 阳性阳性 应为阳性应为阳性 符合规定符合规定 检检 查查 溶出度溶出度(%) 1 01.5 (%) 1 01.5 溶出度应溶出度应70 70 符

15、合规定符合规定装量差异装量差异 符合规定符合规定 应符合规定应符合规定 符合规定符合规定 含量测定含量测定 99.8% 99.8% 含乳酸左氧氟沙星应为含乳酸左氧氟沙星应为 符合规定符合规定 标示量的标示量的90.0%-110.0% 90.0%-110.0% 结论：本品按生产用药品质量标准草案检验，结果符合规定。结论：本品按生产用药品质量标准草案检验，结果符合规定。 负责人：负责人： 复核人：复核人： 检验者：检验者：药物的药物的ADME药物在体内的药物在体内的整个过程整个过程通常用通常用ADME表示。表示。D（distribution）：）：药物在生物体的药物在生物体的分布分布。M（meta

16、bolism）：）：药物在体内的药物在体内的代谢转化代谢转化。A（absorption）：）：药物在生物体的药物在生物体的吸收吸收。药物的代谢转化一般分为两类反应：药物的代谢转化一般分为两类反应：第一类反应：第一类反应：氧化、还原、水解、水合、脱硫乙酰化、异构氧化、还原、水解、水合、脱硫乙酰化、异构 化等化等 药物分子上药物分子上形成形成-COOH、-OH、-NH2等等第二类反应（结合反应）：第二类反应（结合反应）：葡萄糖醛酸化、硫酸酯化、乙酰葡萄糖醛酸化、硫酸酯化、乙酰 化、甲基化、氨基酸结合、脂肪酸结合以及缩合等化、甲基化、氨基酸结合、脂肪酸结合以及缩合等 形成形成极性更高、水溶性更大极性

17、更高、水溶性更大的代谢产物的代谢产物E（excretion）：）：药物及代谢产物自体内的药物及代谢产物自体内的排除。排除。第二节第二节 药物的质量标准药物的质量标准药品质量标准的定义：药品质量标准的定义：药品质量标准是国家对药品质量标准是国家对药品质量、规格及检验方法所做的药品质量、规格及检验方法所做的技术规定，技术规定，是药是药品生产、供应、使用、检验和药政管理部门共同遵品生产、供应、使用、检验和药政管理部门共同遵循的循的法定依据法定依据。药药品品标标准准一级标准：中华人民共和国药典（中国药典）一级标准：中华人民共和国药典（中国药典）二级标准：中华人民共和国卫生部药品标准（部颁标准）二级标准

18、：中华人民共和国卫生部药品标准（部颁标准）三级标准：地方各省、市、自治区的地方药品标准三级标准：地方各省、市、自治区的地方药品标准 中国药典中国药典企业企业标准标准国家国家标准标准使用非成熟使用非成熟( (非法定非法定) )方法方法标准规格高于法定标准标准规格高于法定标准药药品品标标准准临床研究用标准临床研究用标准(临床研究临床研究) 暂行标准暂行标准(试生产试生产)试行标准试行标准(正式生产初期正式生产初期)地方标准整理提高后的品种地方标准整理提高后的品种部局标准部局标准 （疗效确切、广泛应用、质量可控）（疗效确切、广泛应用、质量可控）中华人民共和国药品监督管理局标准（局颁标准或局标准）中华

19、人民共和国药品监督管理局标准（局颁标准或局标准）中华人民共和国卫生部药品标准（部颁标准或部标准）中华人民共和国卫生部药品标准（部颁标准或部标准）药典主要内容药典主要内容 药典的内容一般分为药典的内容一般分为凡例、正文、附录凡例、正文、附录和和索引索引四部分。四部分。 凡例凡例是解释和执行药典必须了解和遵循的是解释和执行药典必须了解和遵循的法则法则。解释和说明解释和说明中国药典中国药典概念概念，正确进行质量检验提，正确进行质量检验提供供指导原则指导原则。将正文、附录及质量检定有关的。将正文、附录及质量检定有关的共性问共性问题题加以规定，避免全书中重复说明。其内容同样具有加以规定，避免全书中重复说

20、明。其内容同样具有法定约束力法定约束力。 索引索引：中国药典采用：中国药典采用“汉语拼音索引汉语拼音索引和和“英文英文名称索引名称索引这两个索引与药典正文前的这两个索引与药典正文前的品名目次品名目次” 相相配合可快速查询有关药物品种。配合可快速查询有关药物品种。1.1.凡例凡例（1）药品的溶解度）药品的溶解度 1g 溶质（药品）溶质（药品） 温度温度 252 时间时间 30 min 振摇振摇 30 sec/5min（3）贮藏项下的规定）贮藏项下的规定冷处冷处 系指系指210凉暗处凉暗处 系指避光并不超过系指避光并不超过20阴凉处阴凉处 系指不超过系指不超过20 （2）温度以）温度以（摄氏度）表

21、示（摄氏度）表示水浴温度水浴温度 除另有规定外，均指除另有规定外，均指98100热水热水 系指系指7080室温室温 系指系指1030冷水冷水 系指系指210（4）溶液后记示的（）溶液后记示的（110）符号表示）符号表示1g或或1ml加溶剂加溶剂 使成使成10ml溶液溶液 正文部分正文部分的是指收载药物及其制剂的质量标准。的是指收载药物及其制剂的质量标准。性状性状 外观、（颜色）、臭、味、溶解度、外观、（颜色）、臭、味、溶解度、物理常数、熔点、比旋度、吸收系数等物理常数、熔点、比旋度、吸收系数等鉴别鉴别 理化性质理化性质检查检查 杂质检查，主要纯度杂质检查，主要纯度含量测定含量测定 用法与用量用

22、法与用量 贮藏方法贮藏方法 主主要要内内容容对乙对乙酰氨酰氨基酚基酚附录附录药药典典中中的的通通用用方方法法制剂通则：制剂通则：片剂、注射剂等片剂、注射剂等各种检测方法：各种检测方法：UV、IR、AAS、荧光、色、荧光、色 谱法、谱法、TLC、GC、HPLC 一般鉴别试验：一般鉴别试验：常见无机离子和有机酸盐常见无机离子和有机酸盐一般杂质检查方法：一般杂质检查方法：氯化物检查法、氯化物检查法、SO42-、 S2-、Se、F、Fe、重金属等检查法、重金属等检查法有关物理常数测定、试剂配制法有关物理常数测定、试剂配制法等等.中华人民共和国药典中华人民共和国药典1.9个版次个版次 1953 1963

23、 1977 1985 1990 1995 2000 2005 2010 20152.中国药典中国药典2010年年版版,本版药典分一部，二部和本版药典分一部，二部和三部，共收载三部，共收载4615种，新增种，新增1358种（约种（约16%） 。 缩写缩写 “ChP”一部一部收载药材及饮片、植物油脂和提取物、成方制剂和单味制剂等。收载药材及饮片、植物油脂和提取物、成方制剂和单味制剂等。二部二部收载化学药品、抗生素、生化药品、放射性药品以及药用辅料。收载化学药品、抗生素、生化药品、放射性药品以及药用辅料。三部三部收载生物制品，首次将收载生物制品，首次将中国生物制品规程中国生物制品规程并入药典。并入药

24、典。3.另有药品红外光谱集（另有药品红外光谱集（1990年开始）年开始）（二）其它国家药典（二）其它国家药典 世界上大约有世界上大约有38个国家有自己的药典，此外还个国家有自己的药典，此外还有国际和区域性药典。这些药典无疑对世界医药有国际和区域性药典。这些药典无疑对世界医药科学技术交流和国际贸易有极大促进作用。科学技术交流和国际贸易有极大促进作用。 现对主要药典加以介绍：现对主要药典加以介绍： 1、美国药典、美国药典 简称简称USP 最新版本：最新版本：USP 38-NF 33， 2015年年5月月1日生效日生效 2、英国药典、英国药典 简称简称BP 最新版本：最新版本：2015版版 副药典副

25、药典 简称简称BPC 3、日本药局方、日本药局方 简称简称JP 最新版本：第最新版本：第16版（版（2011年年） 4、欧洲药典、欧洲药典 简称简称EP8.8 由欧洲药典委员会编制、出版，为由欧洲药典委员会编制、出版，为27个成员国及欧共个成员国及欧共体所认可。体所认可。最新版本：最新版本：2013版版3月出版月出版, 2014年年1月生效月生效 5、国际药典、国际药典 简称简称Ph.Int 无法律约束力无法律约束力世界卫生组织（世界卫生组织（WHO）为了统一世界各国药品的质量）为了统一世界各国药品的质量标准和质量控制的方法而编纂的。标准和质量控制的方法而编纂的。 最新版本：第三版，分五卷最新

26、版本：第三版，分五卷123 药品与人的健康、疾病和生命有直接的关系，因此在药品与人的健康、疾病和生命有直接的关系，因此在生产和使用过程中，生产和使用过程中，不允许有不允许有“万一万一” 的错误。的错误。 药品从本质来说，对机体是一种异物，因此在使用药品从本质来说，对机体是一种异物，因此在使用方法上必须给予极大的关注。方法上必须给予极大的关注。显著特点显著特点 药品多数是给病人使用的，同正常人比较病人身体药品多数是给病人使用的，同正常人比较病人身体较弱，抵抗力不强，对药品的质量要求较高。较弱，抵抗力不强，对药品的质量要求较高。4 药品质量在多数情况下，不能通过外观进行判断，药品质量在多数情况下，

27、不能通过外观进行判断，这种属性决定了药品生产以至使用，必须加强质量上的这种属性决定了药品生产以至使用，必须加强质量上的管理。管理。第三节第三节 生物药物的科学管理生物药物的科学管理生物药物质量管理规范重要性？生物药物质量管理规范重要性？ 一个有科学依据、切合实际的药品质量的控制涉一个有科学依据、切合实际的药品质量的控制涉及药物的及药物的研制、生产、供应、临床以及检验研制、生产、供应、临床以及检验等诸多环等诸多环节节, 需要多方面、多学科的密切配合需要多方面、多学科的密切配合,我国陆续公布了我国陆续公布了以下具有指导性作用的法令文件。以下具有指导性作用的法令文件。 许多基因工程药物，特别是细胞因

28、子药物都可参与许多基因工程药物，特别是细胞因子药物都可参与人体机能的精细调节，在人体机能的精细调节，在极微量极微量的情况下就会产生显的情况下就会产生显著的效应，著的效应，任何性质或数量上的偏差任何性质或数量上的偏差都会都会贻误病情甚贻误病情甚至造成危害至造成危害，必须对生物药物及其产品进行严格的全，必须对生物药物及其产品进行严格的全面质量控制和科学管理。面质量控制和科学管理。5G药品临床试验管理规范药品临床试验管理规范药品生产质量管理规范药品生产质量管理规范药品经营质量管理规范药品经营质量管理规范药品非临床研究管理规范药品非临床研究管理规范中药材生产质量管理规范中药材生产质量管理规范GLPGC

29、PGMPGSPGAP一、药品生产质量管理规范（一、药品生产质量管理规范（GMP）GMP是是Good Manufacturing Practice的简称，即的简称，即药品生产质量管理规范。药品生产质量管理规范。系在药品系在药品生产过程生产过程中，运用科学、合理、规范化中，运用科学、合理、规范化的条件和方法保证生产优良药品的一整套科学管的条件和方法保证生产优良药品的一整套科学管理方法。理方法。GMP的实施，确保了制剂生产、管理的规范性的实施，确保了制剂生产、管理的规范性。 (一一) GMP总要求总要求 所有医药工业生产，在投产前，对所有医药工业生产，在投产前，对生产过程生产过程必须必须明确规定，所

30、有必要明确规定，所有必要设备设备必须经过检验，所有必须经过检验，所有人员人员必必须经过适当培训，要求符合规定的须经过适当培训，要求符合规定的厂房建筑及装备厂房建筑及装备，使用合格使用合格原料原料，采用经过批准的，采用经过批准的生产方法生产方法，而且还必，而且还必需具有符合条件的需具有符合条件的仓储及运输设施仓储及运输设施。 （二二）GMP的三大要素的三大要素 1）人为产生的错误减小到最低；人为产生的错误减小到最低； 2）防止对医药品的污染和低质量医药品的产生；防止对医药品的污染和低质量医药品的产生； 3）保证高质量产品的质量管理体系。保证高质量产品的质量管理体系。二、药品二、药品非临床研究管理

31、规范非临床研究管理规范（GLP） GLP是是Good Laboratory Practice的简称，即药品的简称，即药品安全试验规范安全试验规范。 主要内容主要内容是在规定试验条件下，进行毒性动物试是在规定试验条件下，进行毒性动物试验的准则：对急性，亚急性，慢性毒性试验，生验的准则：对急性，亚急性，慢性毒性试验，生殖试验，致癌，致畸，致突变以及其它毒性试验殖试验，致癌，致畸，致突变以及其它毒性试验等临床前安全试验作出规定，是保证药品安全有等临床前安全试验作出规定，是保证药品安全有效的法规。效的法规。 三、药物临床试验管理规范（三、药物临床试验管理规范（GCP） GCP是是Good Clinic

32、al Practice的简称，即药物临床试的简称，即药物临床试验管理规范。验管理规范。 药品临床试验是指在任何药品临床试验是指在任何人体人体（病人或健康的志愿者）（病人或健康的志愿者）进行的进行的药品系统性研究药品系统性研究，以，以证实或揭示证实或揭示试验用药品的试验用药品的作用及不良反应作用及不良反应等。等。 制定制定GCP的目的的目的：保证临床试验过程规范，结果科学：保证临床试验过程规范，结果科学可靠，保证受试者的权益并保障其安全。可靠，保证受试者的权益并保障其安全。四、中药材生产质量管理规范（四、中药材生产质量管理规范（GAP） GAP是是 Good Agricultural Pract

33、ice的简称。即中药材生产质的简称。即中药材生产质量管理规范。量管理规范。 是规范是规范药材生产过程药材生产过程，以保证药材质量稳定、可控的一套，以保证药材质量稳定、可控的一套科学管理方法。科学管理方法。 涉及到产出药材的药用植物和动物涉及到产出药材的药用植物和动物(暂不包括矿物暂不包括矿物)及其赖以及其赖以生存的环境、生态；影响药材质量、产量的各种因素（如生存的环境、生态；影响药材质量、产量的各种因素（如种质、生物个体、发育等内在因素，气候、土壤、环境、种质、生物个体、发育等内在因素，气候、土壤、环境、生物生物(包括人为干扰包括人为干扰)等外在因素；有空间变化，也有时间变等外在因素；有空间变

34、化，也有时间变化）化）五、药品经营质量管理规范（五、药品经营质量管理规范（GSP） GSP是是Good Supply Practice的简称，即药品经营质量的简称，即药品经营质量管理规范。管理规范。 是是控制医药商品流通环节控制医药商品流通环节所有可能发生质量事故的因所有可能发生质量事故的因素从而防止质量事故发生的一整套管理程序。素从而防止质量事故发生的一整套管理程序。 1992年年10月月1日起实施，实施日起实施，实施GSP必须确保医药商品必须确保医药商品在购进、验收、入库、贮存、养护、销售、出库、运在购进、验收、入库、贮存、养护、销售、出库、运输、售后服务等流通过程各环节的质量。输、售后服

35、务等流通过程各环节的质量。第四节第四节 生物药物常用的定量分析法生物药物常用的定量分析法酶法酶法电泳法电泳法理化测定理化测定生物检定生物检定1、酶、酶 法法酶活力测定法：酶活力测定法：以酶为以酶为分析对象分析对象，检测样品中某种，检测样品中某种 酶的含量或活性。酶的含量或活性。酶分析法：酶分析法：以酶为以酶为分析工具或分析试剂分析工具或分析试剂，检测样品，检测样品 以外的其他物质的含量。以外的其他物质的含量。木聚糖木聚糖木寡糖木寡糖内切木聚糖酶内切木聚糖酶木糖苷酶木糖苷酶外切木聚糖酶外切木聚糖酶木糖木糖乙酰木聚糖酯酶乙酰木聚糖酯酶阿魏酸酯酶阿魏酸酯酶阿拉伯呋喃糖苷酶等阿拉伯呋喃糖苷酶等 2、电

36、泳法、电泳法3、理化测定法、理化测定法 包括重量分析法、滴定分析法、分光光度法、高效包括重量分析法、滴定分析法、分光光度法、高效液相色谱法等。液相色谱法等。4、生物检定法、生物检定法 利用药物对生物体的作用以测定其效价或生物活利用药物对生物体的作用以测定其效价或生物活性的一种方法。性的一种方法。药物的效价测定药物的效价测定微量生理活性物质的测定微量生理活性物质的测定有些有害杂质的限度检测有些有害杂质的限度检测第五节第五节 基因工程药物质量控制基因工程药物质量控制 基因工程药物：基因工程药物：指采用新的指采用新的生物技术生物技术方法，利用方法，利用细菌、酵母或哺乳动物细胞作为活性宿主，进行生产细

37、菌、酵母或哺乳动物细胞作为活性宿主，进行生产的作为治疗、诊断等用途的的作为治疗、诊断等用途的多肽和蛋白质类药物多肽和蛋白质类药物。 基因工程药物除需要鉴定最终的产品外，还要从基因工程药物除需要鉴定最终的产品外，还要从基因的来源及确证、菌种的鉴定、原始细胞库基因的来源及确证、菌种的鉴定、原始细胞库等方面等方面提出质量控制的要求。对提出质量控制的要求。对培养、纯化等生产环节培养、纯化等生产环节严格严格控制，才能保证最终产品的有效性、安全性、均一性。控制，才能保证最终产品的有效性、安全性、均一性。 重组蛋白质或重组多肽药物重组蛋白质或重组多肽药物 细胞因子类：细胞因子类：rIFNrIFN、IL-2I

38、L-2、EPOEPO等；等； 抗细胞素治疗：抗细胞素治疗：CD4CD4可溶性受体等；可溶性受体等； 重组溶血栓类：重组溶血栓类：rSKrSK、rSAKrSAK等；等； 人源化单克隆抗体制剂；人源化单克隆抗体制剂； 重组疫苗和菌苗制剂。重组疫苗和菌苗制剂。重组重组DNA药物药物寡核苷酸药物：反义核酸等；寡核苷酸药物：反义核酸等；基因药物：腺病毒基因药物：腺病毒-IL-2-IL-2、腺相关病毒、腺相关病毒- -凝血凝血因子；腺病毒因子；腺病毒- P53- P53细胞治疗制剂：抗原致敏的人树突状细细胞治疗制剂：抗原致敏的人树突状细胞胞 DNADNA疫苗：治疗乙型肝炎、爱滋病的核酸疫苗：治疗乙型肝炎、

39、爱滋病的核酸疫苗等疫苗等。1983年年，美国，美国FDA制定了制定了“重组重组DNA生产的药品、生生产的药品、生 物制品的生产和检定要点物制品的生产和检定要点”；1987年年，欧共体制定了，欧共体制定了“基因重组技术医药产品的生基因重组技术医药产品的生 产和质量控制产和质量控制”；1990年年，我国卫生部颁发了，我国卫生部颁发了“人用重组人用重组DNA制品质量制品质量 控制要点控制要点”、“基因工程人基因工程人a a-干扰素制备及干扰素制备及质质 量控制要点量控制要点”；1991年年，WHO公布了公布了“重组重组DNA生产的药品生物制生产的药品生物制品品 的生产和检定要点的生产和检定要点”；2

40、000年年，中国执行，中国执行“中国生物制品规程中国生物制品规程”质量控制包括两个方面：质量控制包括两个方面：1、生产过程中质量控制、生产过程中质量控制GMP（硬件、软件硬件、软件）2、最终目标产品的质量控制（、最终目标产品的质量控制（方法学研究方法学研究）生物技术药物的质量控制生物技术药物的质量控制基因工程药物的质量控制要点基因工程药物的质量控制要点菌种筛选菌种筛选摇瓶试验摇瓶试验发酵罐中试发酵罐中试发酵生产发酵生产原材料的质量控制原材料的质量控制培养过程的质量控制培养过程的质量控制纯化工艺过程的质量控制纯化工艺过程的质量控制最终产品的质量控制最终产品的质量控制目的基因目的基因表达载体表达载

41、体宿主宿主保证基因的稳定性、保证基因的稳定性、一致性和不被污染一致性和不被污染去除微量去除微量DNA、糖类、糖类、Pr等杂质等杂质原材料的质量控制原材料的质量控制目的基因目的基因表达载体表达载体宿宿 主主来源和克隆的过程来源和克隆的过程加工过的基因：加工过的基因：code、peptidePCR技术：技术：primer、enzyme等等载体的生物学性质和来源载体的生物学性质和来源载体的结构、遗传特性载体的结构、遗传特性抗生素抗性标志、酶切图谱抗生素抗性标志、酶切图谱宿主的详细资料、载体整合的状态宿主的详细资料、载体整合的状态宿主和载体结合后的稳定遗传性资料宿主和载体结合后的稳定遗传性资料表达采用

42、的方法及水平表达采用的方法及水平培养过程的质量控制培养过程的质量控制12 3生产用细胞库生产用细胞库同一实验室工作区内，同一实验室工作区内，不得不得同时操作两种不同的细胞或菌种，同时操作两种不同的细胞或菌种，一个工作人员亦一个工作人员亦不得不得同时操作两种不同的细胞或菌株。同时操作两种不同的细胞或菌株。种子批种子批不应含有不应含有可能的致癌因子、污染细菌、病毒、霉菌和支可能的致癌因子、污染细菌、病毒、霉菌和支原体等外来因子。原体等外来因子。有限代次的生产有限代次的生产对用于培养和诱导基因产物的材料和方法进行详细记录。对用于培养和诱导基因产物的材料和方法进行详细记录。有灵敏的检测措施控制微生物污

43、染，能有灵敏的检测措施控制微生物污染，能确定最高细胞传代代次确定最高细胞传代代次。生产周期结束后，生产周期结束后，检测检测宿主宿主-载体系统的特性。载体系统的特性。连续培养过程连续培养过程要求要求测定测定被表达的基因的完整性及宿主细胞长期培养后的被表达的基因的完整性及宿主细胞长期培养后的表型表型和和基因型基因型特性。（质粒拷贝数，宿主细胞中表达载体存留程度，含特性。（质粒拷贝数，宿主细胞中表达载体存留程度，含插入基因载体的酶切图谱）插入基因载体的酶切图谱）纯化工艺过程的质量控制纯化工艺过程的质量控制分级沉淀、超滤、电泳、色谱等技术分级沉淀、超滤、电泳、色谱等技术去除去除DNA、糖类、糖类、Pr

44、、有害化学物质、致热源等、有害化学物质、致热源等色谱柱配置溶液用水一律用超纯水。色谱柱配置溶液用水一律用超纯水。尽量不加入对人体有害的物质；尽量不加入对人体有害的物质；在最终产品中检测残留量；在最终产品中检测残留量；考虑多次使用后的积累作用。考虑多次使用后的积累作用。最终产品的质量控制最终产品的质量控制1、生物学效价测定：、生物学效价测定：采用采用国际上通用国际上通用的方法，结果的方法，结果必须用国际或国家标准品进行校正，以国际单位表必须用国际或国家标准品进行校正，以国际单位表示或折算成国际标准单位。示或折算成国际标准单位。2、蛋白质纯度检查：、蛋白质纯度检查：必须用必须用HPLC和和非还原非

45、还原SDS-PAGE两种方法测定，纯度都应达到两种方法测定，纯度都应达到95%以上。以上。3、蛋白质药物的比活性：、蛋白质药物的比活性：比活性是比活性是每毫克每毫克蛋白质所蛋白质所具有的生物学活性，不仅是含量指标，也是具有的生物学活性，不仅是含量指标，也是纯度指纯度指标标。4、蛋白质性质的鉴定、蛋白质性质的鉴定（1）非特异性）非特异性鉴别：根据非还鉴别：根据非还原原SDS-PAGE的迁移率的迁移率和和HPLC的保留的保留时间和峰型分析时间和峰型分析（2）特异性鉴）特异性鉴别：免疫印迹实别：免疫印迹实验确定蛋白质的验确定蛋白质的抗原性抗原性（3）相对分子）相对分子质量测定：还原质量测定：还原性性

46、SDS-PAGE法测定，允许法测定，允许10%的误差的误差（4）等电点测）等电点测定：等电点聚焦定：等电点聚焦电泳法测定，批电泳法测定，批与批之间的电泳与批之间的电泳结果应该一致结果应该一致（5）肽图：经）肽图：经蛋白酶或蛋白酶或CNBr及其他试剂裂解及其他试剂裂解后用后用HPLC或或SDS-PAGE法法测定测定（6）吸收光谱：）吸收光谱：对某一重组蛋白对某一重组蛋白来说，最大吸收来说，最大吸收波长是固定的波长是固定的（7）氨基酸组）氨基酸组成分析：在试生成分析：在试生产的头三批或工产的头三批或工艺改变时必须做艺改变时必须做的检测的检测（8）氨基酸测）氨基酸测序：中试前三批序：中试前三批至少测

47、定至少测定N端端15个个aa，C端测定端测定1-3个个aa（9）免疫原性）免疫原性检查：表达时设检查：表达时设法去除法去除N端端Met5、杂质检测、杂质检测蛋白质杂质：蛋白质杂质：高灵敏度高灵敏度免疫分析法免疫分析法、电泳、电泳非蛋白质杂质：非蛋白质杂质：包括细菌、病毒包括细菌、病毒 过滤去除过滤去除 热原质热原质 家兔法家兔法和和鲎试剂法鲎试剂法检测检测 DNA 核酸杂交核酸杂交或或利用高亲和利用高亲和 力结合蛋白力结合蛋白检测检测6、安全性评价、安全性评价药代动力学和毒理学研究。药代动力学和毒理学研究。根据生物技术产品的结构特点，可以分为：根据生物技术产品的结构特点，可以分为：与人类自身生

48、理活性与人类自身生理活性物质完全物质完全相同的药品（相同的药品（）与人类自身生理活性物质与人类自身生理活性物质相似相似的药品（的药品（）与人类自身生理活性物质与人类自身生理活性物质完全不同完全不同药品（药品（）7、稳定性，产品一致性考查、稳定性，产品一致性考查实例实例-干扰素生产控制干扰素生产控制第六节第六节 新药研究和开发的主要过程新药研究和开发的主要过程确定研究计划确定研究计划准备化合物准备化合物药理筛选药理筛选化学试验化学试验临床前临床前期期临床前临床前期期期临床期临床售后检测售后检测注册申请上市注册申请上市期临床期临床期临床期临床2-3年年3-5年年原料药的研究原料药的研究 经济协作与

49、开发组织认为，在开始一个新化学经济协作与开发组织认为，在开始一个新化学物质毒性试验前，应取得被试物质的基础材料，包物质毒性试验前，应取得被试物质的基础材料，包括新药的括新药的化学结构、物理化学性质、分析鉴定、纯化学结构、物理化学性质、分析鉴定、纯度和稳定性度和稳定性几个方面。几个方面。1、化学结构、化学结构 新药研究最关键和最基础的资料新药研究最关键和最基础的资料COOHOCOCH3药物的晶型药物的晶型结晶水含量结晶水含量方法：方法：元素分析、官能团分析、光谱分析、元素分析、官能团分析、光谱分析、AA测序等测序等国外药物国外药物基基 团团 吸吸 收收 带带 数数 据据 r ， ， （ 反反 ）

50、 r r 活活泼泼氢氢不不饱饱和和氢氢饱饱和和氢氢三三键键双双键键伸伸缩缩振振动动变变形形振振动动含含氢氢化化学学键键特特征征吸吸收收带带（伸伸缩缩振振动动）指指纹纹吸吸收收带带伸伸缩缩振振动动变变形形振振动动 2、理化性质、理化性质3 13 2属性部分：鉴别纯净程度属性部分：鉴别纯净程度可能影响药物作用的有关性质可能影响药物作用的有关性质化学结构化学结构理化性质理化性质吸收、分布、排泄吸收、分布、排泄性状性状重要表征之一，可通过观察和相应的方法测定。重要表征之一，可通过观察和相应的方法测定。理化常数理化常数判断药物判断药物真伪、纯度、质量真伪、纯度、质量的重要依据之一。的重要依据之一。溶解性

51、能溶解性能亲水性和疏水性两方面反应。亲水性和疏水性两方面反应。X射线衍射图作为基础材料射线衍射图作为基础材料脂溶性脂溶性影响药物的影响药物的吸收吸收影响药物扩影响药物扩散并透过生散并透过生物膜物膜水溶性水溶性影响药物的影响药物的溶解和运输溶解和运输影响药物在影响药物在体液中的转体液中的转运运生物活性生物活性某些镇痛药某些镇痛药的作用强度的作用强度与油水分配与油水分配系数呈相关系数呈相关性性 指当药物在水相和油相达到指当药物在水相和油相达到平衡时平衡时，药物在非水相中的浓，药物在非水相中的浓度和在水相中的度和在水相中的浓度之比浓度之比。正辛醇正辛醇/ /水作为模拟系统，摇瓶法水作为模拟系统，摇瓶

52、法解离值解离值电导法和电位电导法和电位pH滴定法滴定法不同异构体与药理作用和毒性之间的关系不同异构体与药理作用和毒性之间的关系溶解速率、粒子大小等溶解速率、粒子大小等药物一般以药物一般以非离子型非离子型转运透过组织屏障，进入血液循环。转运透过组织屏障，进入血液循环。药物在体液中的药物在体液中的存在状态存在状态由由药物的药物的pKa值值和和吸收部位的吸收部位的pH值值决定。决定。小肠小肠是药物吸收的主要场所。是药物吸收的主要场所。对药物的对药物的生物活性生物活性有密切的关系。有密切的关系。磺胺类药物磺胺类药物pKa值在值在6.0-7.5之间抑菌作用最强，之间抑菌作用最强，胆碱酯酶重活化剂肟类胆碱

53、酯酶重活化剂肟类的的pKa值以值以7.5-8.5为宜。为宜。包括几何异构和光学异构。包括几何异构和光学异构。消旋体药物不能认为是消旋体药物不能认为是单一化合物单一化合物，也不能把其中的活性较，也不能把其中的活性较低或无活性对映体的存在，看作仅是低或无活性对映体的存在，看作仅是稀释了稀释了药物的生物活性。药物的生物活性。3、新药的鉴别、新药的鉴别对新药的对新药的定性试验定性试验，用以鉴别药物的真伪。，用以鉴别药物的真伪。实验方法要求实验方法要求专属性强，重现性好，灵敏度高和操作专属性强，重现性好，灵敏度高和操作简便、快速简便、快速等。等。专属性专属性是指鉴别方法要针对新药结构的特异性部分，是指鉴

54、别方法要针对新药结构的特异性部分，特别要能分辨具有相似结构的同类药物。特别要能分辨具有相似结构的同类药物。4、新药的纯度、新药的纯度药物含量不足会影响疗效，有害杂质存在会增加毒性。药物含量不足会影响疗效，有害杂质存在会增加毒性。对对未知杂质未知杂质，凡含量不小于，凡含量不小于0.1%的，均须判明其结的，均须判明其结构，生产构，生产设法避免设法避免该杂质的形成，或经纯化使之降低该杂质的形成，或经纯化使之降低至可接受的水平。至可接受的水平。5、新药稳定性研究、新药稳定性研究 有效性和安全性的研究有效性和安全性的研究 对新药进行稳定性研究是设计适当的制剂处方及对其制对新药进行稳定性研究是设计适当的制剂处方及对其制定必要的稳定性措施的定必要的稳定性措施的基础基础，是处方前研究的，是处方前研究的重要组成部分重要组成部分。物理稳定性：物理稳定性：药品因物理变化而引起的稳定性改变药品因物理变化而引起的稳定性改变微生物稳定性：微生物稳定性：因细菌、霉菌等微生物使药品变质而引因细菌、霉菌等微生物使药品变质而引 起的稳定性改变起