啤酒的质量和卫生标准以及检验方法

1、啤酒的质量和卫生标准检验方法前言:啤酒的原料主要有大麦、啤酒花等。它们里面含的蛋白质、碳水化合物、啤酒花苦味物质等在酿造过程中发生细微变化后，并作为复合体存留在啤酒中。这些成分决定着啤酒的香味、醇度和泡沫。也就是说，这些成分能增加啤酒的表面张力和粘度，使啤酒能生出更白、更细的泡沫。啤酒里一般含有大约0.5%的碳酸气体。这些碳酸气体在发酵过程中产生、并融入啤酒，但是融进啤酒的这些碳酸气的量约是在正常压力下的两倍，也就是说呈超饱和状态。所以，当打开啤酒拴时，里面的啤酒恢复到正常压力状态下，再加上倒酒时，碳酸气受到碰撞而恢复成气体，这样许多气泡浮到啤酒液面上，就形成泡沫。啤酒泡沫之所以呈白色奶油状，

2、是因为这些泡沫还带了啤酒成分形成的表面张力和粘度。下面是啤酒的所有成分：1 .谷物（Grains）出芽（Malting）就是把大麦浸泡在水中使其发芽。这个过程一般持续36-48个小时，使麦芽中休眠状态下的酶发育。酶在发酵过程中是非常关键的，它可以把淀粉转化成糖，而糖在酵母的作用下又分解成二氧化碳和酒精。在出芽过程中，大麦的味道变得有些甜。大麦在出芽后需要弄干，这个过程的不同使大麦麦芽的味道也有所不同。自然风干的麦芽色泽只有很小的变化，可以用来酿造金黄色泽的啤酒；而经过烘烤或烟熏的麦芽颜色变得很深，可以用来酿造色泽较重的啤酒；很多种啤酒都会使用不同品种的大麦，这样就可以使最终产品的味道更加复杂。

3、有些啤酒厂也使用其它类别的谷物来酿造啤酒或调味。黑麦可以使啤酒增添一种香辣、雄健的口味；小麦可以使啤酒增添一定的果香，啤酒泡沫更丰富；燕麦可以使啤酒显得油滑、浓重；水稻：可以使啤酒的色泽比较清淡；玉米大多使用于廉价啤酒种或作为味道的补充。2 .啤酒花（Hops）啤酒花又叫蛇麻草，英语是Hops。这是一种与*同一品系的植物，啤酒花实际上就是植物花蕊的一部分，它的调味属性体现在啤酒花中的精油和果酸上。啤酒花含有的这些物质可以使啤酒有一定的苦涩和芳香，平衡大麦麦芽中的糖分。啤酒花被采摘后需要烘干才能使用。酿造，而有些啤酒却使用多种啤酒花来达到酿酒大师要求的独特味道。3 .酵母（Yeast）酵母是一种

4、属于真菌类的非常微小的生物菌，在自然环境中几乎到处都有。啤酒在酿造过程中有三种方法加入酵母菌。啤酒的质量标准啤酒的检测标准，按照国家颁布的啤酒质量标准本标准适用于以麦芽（包括特种麦芽）为主要原料，加酒花，经酵母发酵酿制而成的、含有二氧化碳的、起泡的、低酒精度的各类熟、鲜啤酒。1、二氧化碳：指啤酒中溶解的二氧化碳含量，这些二氧化碳是在发酵过程中产生的，它有利于啤酒的起泡性，饮后赋予一种舒适的刺激感觉，即所谓的杀口力。特别是在15c左右饮用时，二氧化碳逐步放出，给人以清新、爽快的感觉，还能闻出啤酒特有的酒花香味。2、泡持性：通常，啤酒倒入干净的杯中即有泡沫升起，泡沫持久的程度即为泡持性。质量的啤酒

5、泡沫洁白细腻，持泡时间长、挂杯性好，给人赏心悦目的感觉。3、浊度：是以EBC浊度单位表示啤酒透明度的外观指标，好啤酒的浊度很低，在0.5EBC单位以下。差的啤酒可产生失光，甚至混浊，浊度数值就高。引起酒液混浊的原因有两方面，一是细菌总数超标引起的生物性混浊，这种酒已不能饮用，另一种是由于啤酒在贮存过程中，酒的蛋白质、多酚等物质遇冷或氧化产生的混浊，冷混浊在啤酒恢复到室温后可自行消失，这种混浊并不影响饮用，因此，建议消费者不要将酒冷藏的温度过低，一般在10c15c即可。4、酒精度及原麦汁浓度：酒精度指酒液中酒精的百分含量，可用体积百分数或质量百分数表示。原麦汁浓度是依据酒精度及啤酒中的真正浓度按

6、经验公式计算出的数值，用其来表述原料麦汁的多少。我们见到的标签标注的10。或11。等均是指酒的原麦汁浓度，它可读为10度或11度，今年颁布的新国标则标记为10°P或11°Po原麦汁浓度与酒精度不是一回事，通常情况下，原麦汁浓度高则酒中含酒精也越多，我们常饮用的11。啤酒其酒精度在4.5%(V/V)左右。虽然啤酒中酒精含量较低，但是由于二氧化碳能促进酒精在人体内吸收，因此一次大量饮用也会醉酒伤身。5、总酸：指啤酒发酵过程中产生的脂肪酸及其他有机酸的总量。啤酒中的酸包括挥发性及不挥发性的各种酸，如乙酸、低碳脂肪酸及乳酸等。适宜的总酸能赋予啤酒以柔和清爽的口感。如果总酸过高或酸味

7、明显，则是污染了杂菌的标志，这样的酒不宜饮用。6、双乙酰：是在啤酒主发酵期间酵母代谢的产物，是啤酒口味不成熟的标志。如其含量超过风味阈值，会给啤酒带来不愉快的便饭味，酵母菌种、原料和麦汁组成、发酵条件等均影响啤酒中双乙酰的含量。由于其风味阈值比较低，对于优质淡色啤酒而言，双乙酰含量在0.10m感官指标和理化指标表浓、黑国蛹的出脂标应符合表皿定项目1)11优级1一缀EU11二转1外现11无明显悬浮物和沉淀物111询显沂淀物1泡11形态1111泡沫细扇，挂杯1泡沫较细感，挂杯111范涛较粗1沫1泡持性，S111|孑210|801|孑12。色度1浓色11I15.0_40.0EEC11黑色11|>

8、;40,0香气和口味1V1具有明显的麦若香都翅眼的爱邦1气,口味纯正？X1香气，口味纯正？1口，酒体蒂厚，柔1较爽口，杀口，1够口，«tII1有麦芽香气，口1口，1表2漆色啤酒的0!指标应符合表N的规定透明度I清亮透明，无明显悬浮物和沉淀物尚清,校透明浊度.ERCIW2.0EBC泡持性1哂装号I14"210180=1805.011.012010412°I5,0(5.011.0|5.0_14.0香气和口味8。5.0_1N.OI具有明显的酒花香1有潮眼的酒花I有酒花香气，I气，爽I口IieHEiE,相I口.港体谐调.索【校爽口.谐调.I味I和无异香.异味I无异香、异&

9、#174;IHII表3理化要求应符合表3砒症项目1伏级I一级I二级_jt1总欧|18*16。W4.5|14DI<3.0mil00ml：1121F|<2.6|ior|争化碳%,m/m|>_4|±0.38|>0.35双ZSH淡色|&0.13|<0-15|<0,20m-L|浓色、黑色|<0,14|<0.16|<0,20I二、啤酒的卫生标准按照：中华人民共和国国家标准GB2758-2012食品安全国家标准发酵酒及其配制酒1.1 原料要求应符合相应的标准和有关规定。1.2 感官要求应符合相应产品标准的有关规定。1.3 理化指标理化指

10、标应符合表1的规定。表1:项目指标检验方法甲醛/(mg/L)<2.0GB/T5009.491.4污染物和真菌毒素限量1.4.1污染物限量应符合GB2762的规定。表2:项目指标检验方法铅&mg/Kg0.2GB5009.121.4.2真菌毒素限量应符合GB2761的规定。查阅后发现在啤酒中无真菌毒素限量1.5微生物限量微生物限量应符合表2的规定。表2:项目米样方案及限量检验方法ncm沙门氏菌500/25mLGB/T4789.25金黄色葡萄球菌500/25mLa样品的分析及处理按GB4789.1执行。1 食品添加剂食品添加剂的使用应符合GB2760的规定。项目指标焦糖色按生产需要适量

11、使用纳他霉素g/L0.01三氯蔗糖g/Kg0.65海藻酸内一醇酯g/Kg0.3啤酒质量指标检测方法1、啤酒原麦汁浓度的测定比重瓶法GB4928-91啤酒试验方法中第9条啤酒原麦汁浓度的试验方法1.0 1范围本方法采用比重瓶法测定啤酒的真正浓度结合采用其它方法所测得的啤酒洒精度通过计算获得啤酒的原麦汁浓度本方法适用于各种类型啤酒中原麦汁浓度的测定以原麦汁含量的质量百分数即m/m表示测定值保留一位小数(1) 原理啤酒经加热蒸发蒸去酒精后的残液用水恢复至原重然后用比重瓶测定20时残液的比重2020D经查比重与浸出物含量对照表即可得出试样中浸出物含量的质量百分数即为真正浓度啤酒的酒精度可用比重瓶测定法

12、或其它仪器分析方法测得原麦汁浓度则通过计算获得(1) 仪器1. 瓷蒸发皿1. 高精度恒温水浴20时精度为0.11. 附温度计比重瓶25mL1. 感量为0.1mg的分析天平1. 试样制备称取100.0g酒样于已知质量的瓷蒸发皿中于沸水浴上蒸发至原体积的1/3取下冷却加水恢复至残液原重100.0g混匀备用1. 操作步骤比重瓶空重的测定将比重瓶洗净干燥称量反复操作直至恒量记录比重瓶空重（m）比重瓶水重的测定将煮沸并冷却至15左右的蒸储水注满已恒量的比重瓶插上带温度计的瓶塞瓶中应无气泡立即浸于200.1的高精度恒温水浴中彳寺内容物温度达到20，并保持1520min不变后用滤纸吸去溢出支管的水，立即盖好

13、小帽取出比重瓶迅速擦干后称量记录比重瓶和水的质量（m1）酒样残液比重的测定用酒样残液冲洗比重瓶23次然后装满此样品按5.2同样操作记录比重瓶和酒样残液的质量并计算酒样残液的比重2020D经查比重与浸出物含量对照表即可得出试样中浸出物含量的质量百分数即真正浓度n结果计算1004-.4x1.0665式中X原麦汁浓度%m/mA酒精含量%m/mn真正浓度%m/m7精密度同一样品的两次测定值之差不得超过0.1%m/m2、啤酒酒精度的测定实验原理：用小火将啤酒中的酒精蒸储出来，收集储出液。用密度瓶测定储出液的密度，密度以相同温度下，同体积的溶液和纯水之间的质量比来表示。根据密度-酒精度对照表，可查得酒精含

14、量。实验仪器：电炉，调压变压器，铁架台，500mL园底烧瓶(锥形瓶)，冷凝管，100mL容量瓶，规格为25mL附有温度计并具有磨口帽小支管的密度瓶(见图)。实验步骤:.样品处理(1)在已精确称重至0.05g的500mL三角烧瓶中，称取100.0g除气啤酒，再加50mL水,(2)按上冷凝器，冷凝器下端用一已知重量的100mL容量瓶或量筒接收储出液。若室温较高，为了防止酒精蒸发，可将容量瓶浸于冷水或冰水中。(3)开始蒸储时用文火加热，沸腾后可加强火力，蒸储至储出液接近100mL时停止加热。(4)取下容量瓶，于普通天平上加蒸储水至储出液重100.0g,混匀。.储出液密度的测定(1)空瓶称重：将密度瓶

15、洗干净后，吹干或低温烘干(可用少量酒精或乙醛洗涤)，冷却至室温，精确称重至0.1mg。(2)称水重：将煮沸30分钟并冷却至1518c的蒸储水装满密度瓶(注意瓶内不要有气饱)。装上温度计。立即浸入20±0.1C的恒温水浴中，让瓶内温度计在20c下保持20分钟,取出密度瓶用滤纸吸去溢出支管外的水，立即盖上小帽，室温下平衡温度后，擦干瓶壁上的水，精确称重。(3)储出液称重：倒出蒸储水，用少量储出液洗涤后，加入冷却至1519c的微出液，按(2)测得微出液重量。(4)密度计算：密度瓶和储出液重一空瓶重储出液密度=密度瓶和蒸储水重一空瓶重.查密度和酒精对照表，求得酒精含量。3、啤酒浊度的检测原理

16、：EBC浊度计是利用光学原理测定啤酒，由于老化或受冷而引起的混浊，可直接测定出样品的浊度以EBC浊度单位表示。检验方法仪器浊度计浊度管操作按浊度计的仪器说明书，取除气但未经过过滤的酒样(发酵液和冷麦汁须要过滤)倒入玻璃管中，用EBC虫度计进行测定。直接读取结果。所得结果应表示至一位小数4、啤酒总酸的测定实验原理：根据酸碱中和原理。用氢氧化钠标准溶液直接滴定啤酒中的总酸，以pH=8.2为电位滴定终点，根据消耗氢氧化钠标准溶液的体积计算出啤酒中总酸的含量。实验试剂0.1mol/LNaOH标准溶液实验仪器酸度计、恒温水浴锅实验步骤校正仪器：用标准缓冲溶液校正仪器，用水清洗仪器，并用滤纸吸干附着在电极

17、上的液珠。测量样品：吸取除气的样品溶液50.0ml,于烧杯中。插入电极，开启电磁搅拌器，用0.1mol/LNaOH标准溶液滴定至pH=8.2为其终点，记录消耗NaOH准溶液的体积。消耗的NaOH标准溶液的体积记为VO困5、实验计算样品中的总酸量=2-C-VOh上式中：2一换算成100.0ml样品的系数C一标准NaOH溶液的浓度ol消耗标准NaOH溶液的体积5、啤酒中双乙酰的测定实验原理双乙酰(丁二酮)是赋予啤酒风味的重要物质。但含量过大，能使啤酒有一种便饭味。轻工部部颁标推规定成品啤酒中双乙酰含量v0.2Ppm。双乙酰的测定方法有气相色谱法、极谱法和比色法等等。邻苯二胺比色法是连二酮类都能发生

18、显色反应的方法，所以，此法测得之值为双乙酰与戊二酮的总量，结果偏高。但此法快速简便，是轻工部部颁标准规定的方法。用蒸汽将双乙酰从样品中蒸储出来，加邻苯二胺，形成2,3一二甲基唾喔琳，其盐酸盐在335nm波长下有一最大吸收峰，可进行定量测定。实验仪器与试剂(1)紫外分光光度计。(2)双乙酰蒸储装置双乙酰蒸储装置示意图1、夹套蒸储器2、蒸汽发生器3、冷凝器4、25mL容量瓶(或量筒)5、加样口6、电炉(1)4N盐酸(2)1%邻苯二胺精密称取分析Z邻苯二胺250.0mg,溶于4N盐酸中，并定容至25mL,贮于棕色瓶中，限当日使用。(3)消泡剂有机硅消泡剂或甘油聚醛。实验步骤(1)按上图把双乙酰蒸储器

19、安装好，把夹套蒸储器下端的排气夹子打开。(2)将内装2.5mL蒸储水的容量瓶(或量筒)放于冷凝器下，使出口尖端浸没在水面下，外加冰水冷却。(3)加热蒸汽发生器至沸，通汽加热夹套，备用。(4)于100mL量筒中加入24滴消泡剂，再注入5c左右未除气啤酒100mL。(5)待夹套蒸储器下端冒大汽时，打开进样口瓶塞，将啤酒迅速注入蒸储器内，再用约10mL蒸储水冲洗量筒，同时倒入，迅速盖好进样口塞子，用水封口。(6)待夹套蒸储器下端再次冒大汽时，将排气夹子夹住，开始蒸储，到储出液接近25mL时取下容量瓶，用水定容至25mL,摇匀(蒸储应在3分钟内完成)。(7)分别吸取储出液10mL于两支比色管中。一管作

20、为样品管加入0.5mL邻苯二胺溶液，另一管不加作空白，充分摇匀后，同时置于暗处放置2030分钟，然后于样品管中加2mL4N盐酸溶液，于空白管中加2.5mL4N盐酸溶掖，混匀。(8)在335nm波长处，用2cm比色皿以空白作对照测定样品吸光度。(9)计算：双乙酰(mg/L)=A335X1.2注意事项蒸储时加入试样要迅速，勿使双乙酰损失。蒸储要求在3分钟内完成。严格控制蒸汽量，勿使泡沫过高，被蒸汽带走而导致蒸储失败。显色反应在暗处进行，否则导致结果偏高。三、食品的卫生指标检测方法GB/T5009.49甲醛的测定1、甲醛的测定方法4.4甲醛原理中醛在过量乙酸铁的存在下，与乙酰内酮和氨离生成黄色的2.

21、6-二甲基-35二乙戢基】，4二氢毗咤化合物，在波长415nm处有蛉大吸收，在一定浓度范围，其吸光度值与甲姓含量成正比，与标准系列比较定量.试剂<4.2.1乙酰丙酮（GH,O”），分析纯.4.4.2.2乙酸饺GHyNO力：分析纯.4.4.2.3乙酸（GH,COQ：分析纯4.4.2.4甲醍（CH,O）：分析纯4.4.2.5硫代硫般钠（Na,工。5乩0）：基准物质。442.6碘（Hi分析钝4.4.2.7淀粉（C.T053指示剂4.4.2.8硫酸（H“SOJ：分析纯.4.4.2.9氢氧化钠（NaOH），分析纯.4.4.2.10磷酸（HjPOJ,分析纯。4.4.2.11乙酰丙能溶液：称取新蒸慵乙

22、帙丙胴04g和乙酸镀252乙酸3mL溶于水中，定容至200mL备用，用时配制.4.4.2.12甲酹：36%38%.4.4.2.13硫代硫酸钠标准溶液（0.1000mol/L）,见GB/T5009.12003的第B.15章.4.4.2.14碘标准溶液（0.1mol/L3见GB/T5009.1-2003的第B.13章.<4.2.15淀粉指示剂（5g/L）：称取0.5N可溶性淀粉,加入5mL水,搅匀后缓缓攸入100mL沸水中,随加丽搅拌,底沸2min放冷,备用.此指示剂应临用时现配.4.4.2.16硫酸溶液Qmd/L）,量取30mL硫酸,缓缓注入适量水中，冷却至室温后用水稀释至1000mL,摇

23、匀.44.2.17氢氧化结溶液（Imol/L）：吸取56mL澄清的氢气化的饱和溶液，加适尿斯煮沸过的冷水至1000mL.辎&1_4.4.2.18硝酸溶液（200g/L）：称取20g磷酸，加水稀群至100mL,混勾.4.4.2.19甲酹标准溶液的配制和标定.吸取36%38%甲酸溶液7.0mL,加入1n0.5mL,用水稀释至250mL.此液为标准溶液.吸取上述标准溶液10.0mL于100mL若水桶稀定容再吸10.0mL稀释溶液于250mL硬量瓶中，加水90mL.O.1mol/L碘溶/1mcl/L氢氧化的15mL，插匀，放置15min.再加入1mol/L硫酸溶液20mL酸化，用0.1硫代破酸

24、的标准溶液滴定至淡黄色，然后加约5g/L淀粉指示剂1mL,继续滴定至蓝色捷2同时做试剂空白试验甲醛标疵溶液的浓度按式（3）计算.X=（匕一匕）XcX15式中，X甲醍标准溶液的浓度，单位为亳克短塞开（mg/mL>sVi空白试验所消耗的硫代硫酸的标准溶液的体积,单位为至升（mL八V,滴定甲醛溶液所消耗的硫代硫酸钠标准溶液的体积,单位为亳升（eL）,硫代硫酸钠标准溶液的浓度，单位为摩尔每升（mol/L）,15与1.000mol/L硫代硫酸钠标准溶液1.0mL相当的甲醛的质融，单位为亳克（n用上述已标定甲酹浓度的溶液，用水配制成含甲解1XR/mL的甲酹标准使用液。4.4.3仪器<4.3.1

25、分光光度计。<4.3.2水蒸气蒸饵装置.4.<3.3500mL蒸饰瓶试样业理银取已除去二氧化碳的啤酒25eL移入500ibL塞蟠瓶中，加200f?/L硝酸溶液2。mL于蒸谭接水蒸气蒸慵锻置中蒸恒,收集慵出液于100mL容最瓶中（驹100mL）冷却后加水稀弗至刻度.4.4.4.?测定精密吸取1M«/mL的甲醛标准溶液各0.00mL、650mL.1.00mL.2.00mL,3.00n4,00mL.8h00mL于25mL比色管中，加水至10eL.吸取样品愉出液lamL移入25mL比色管中.标选系列和样跖的比色管中，各加入乙瓶丙雨/2O1L,摇匀后在沸水浴中加热10m括，取出冷却

26、，于分光卷度计被长415nni处第定唳光度，绘制标P线.从标准曲线上交出试样的含址.果计算试择中甲戢的含量按式（外计算.vm,XosV（式中：X成样中甲醛的含量，隼位为毫克每升（mWL）.游一从标准曲线上查出的相当的甲醍的腹酸,单位为微克印外；V测定样液中相当的试样体模，单位为毫升（mU.计算结果保留两5有效数字.2、铅的测定方法GB5009.12-2010食品中铅的测定：石墨炉原子吸收光谱法.1原理试样经灰化或酸消解后，注入原子吸收分光光度计石墨炉中，电热原子化后吸收283.3nm共振线，在一定浓度范围，其吸收值与铅含量成正比，与标准系列比较定量。2试剂和材料除非另有规定，本方法所使用试剂均

27、为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。硝酸：优级纯。过硫酸俊。过氧化氢（30%）。高氯酸：优级纯。硝酸（1+1）：取50mL硝酸慢慢加入50mL水中。硝酸（0.5mol/L）：取3.2mL硝酸加入50mL水中，稀释至100mL。硝酸（lmo1/L）：取6.4mL硝酸加入50mL水中，稀释至100mL。磷酸二氢钱溶液（20g/L）：称取2.0g磷酸二氢钱，以水溶解稀释至100mL。混合酸：硝酸十高氯酸（9+1）。取9份硝酸与1份高氯酸混合。铅标准储备液：准确称取1.000g金属铅（99.99%）,分次加少量硝酸（4.5）,加热溶解，总量不超过37mL,移入1000mL容量瓶，加水至刻度。混

28、匀。此溶液每毫升含1.0mg铅。铅标准使用液：每次吸取铅标准储备液1.0mL于100mL容量瓶中，加硝酸（4.6）至刻度。如此经多次稀释成每毫升含10.0ng,20.0ng,40.0ng,60.0ng,80.0ng铅的标准使用液。3仪器和设备原子吸收光谱仪，附石墨炉及铅空心阴极灯。马弗炉。天平：感量为1mg。干燥恒温箱。瓷塔蜗。压力消解器、压力消解罐或压力溶弹。可调式电热板、可调式电炉。.4分析步骤A试样预处理在采样和制备过程中，应注意不使试样污染。粮食、豆类去杂物后，磨碎，过20目筛，储于塑料瓶中，保存备用。蔬菜、水果、鱼类、肉类及蛋类等水分含量高的鲜样，用食品加工机或匀浆机打成匀浆，储于塑

29、料瓶中，保存备用。B试样消解（可根据实验室条件选用以下任何一种方法消解）压力消解罐消解法：称取1g2g试样（精确到0.001g,干样、含脂肪高白试样v1g,鲜样v2g或按压力消解罐使用说明书称取试样）于聚四氟乙烯内罐，加硝酸2mlr-4mL浸泡过夜。再加过氧化氢2mL3mL（总量不能超过罐容积的1/3）。盖好内盖，旋紧不锈钢外套，放入恒温干燥箱，120C140C保持3h4h,在箱内自然冷却至室温，用滴管将消化液洗入或过滤入（视消化后试样的盐分而定）10mL25mL容量瓶中，用水少量多次洗涤罐，洗液合并于容量瓶中并定容至刻度，混匀备用；同时作试剂空白。干法灰化：称取1g5g试样（精确到0.001

30、g,根据铅含量而定）于瓷塔期中，先小火在可调式电热板上炭化至无烟，移入马弗炉500c±25C灰化6h8h,冷却。若个别试样灰化不彻底，则加1mL混合酸在可调式电炉上小火加热，反复多次直到消化完全，放冷，用硝酸将灰分溶解，用滴管将试样消化液洗入或过滤入（视消化后试样的盐分而定）10mL-25mL容量瓶中，用水少量多次洗涤瓷塔期，洗液合并于容量瓶中并定容至刻度，混匀备用；同时作试剂空白。过硫酸镂灰化法：称取1g5g试样（精确到0.001g）于瓷塔期中，加2mL4mL硝酸浸泡1h以上，先小火炭化，冷却后加2.00g3.00g过硫酸镂盖于上面，继续炭化至不冒烟，转入马弗炉，500C±

31、;25C恒温2h,再升至800C,保持20min,冷却，加2mL3mL硝酸，用滴管将试样消化液洗入或过滤入（视消化后试样的盐分而定）10mL25mL容量瓶中，用水少量多次洗涤瓷塔期，洗液合并于容量瓶中并定容至刻度，混匀备用；同时作试剂空白。湿式消解法：称取试样1g5g（精确到0.001g）于锥形瓶或高脚烧杯中，放数粒玻璃珠，加10mL混合酸，加盖浸泡过夜，加一小漏斗于电炉上消解，若变棕黑色，再加混合酸，直至冒白烟，消化液呈无色透明或略带黄色，放冷，用滴管将试样消化液洗入或过滤入（视消化后试样的盐分而定）10mL25mL容量瓶中，用水少量多次洗涤锥形瓶或高脚烧杯，洗液合并于容量瓶中并定容至刻度，

32、混匀备用；同时作试剂空白。5测定A仪器条件根据各自仪器性能调至最佳状态。参考条件为波长283.3nm,狭缝0.2nm1.0nm,灯电流5mA-7mA干燥温度120C,20s；灰化温度450C,持续15s20s,原子化温度：1700C2300C,持续4s5s,背景校正为笊灯或塞曼效应。B标准曲线绘制吸取上面配制的铅标准使用液10.0ng/mL（或科g/L）,20.0ng/mL（或科g/L）,40.0ng/mL（或g/L）,60.0ng/mL（或科g/L）,80.0ng/mL（或g/L）各10科L,注入石墨炉，测得其吸光值并求得吸光值与浓度关系的一元线性回归方程。C试样测定分别吸取样液和试剂空白液

33、各10L,注入石墨炉，测得其吸光值，代入标准系列的一元线性回归方程中求得样液中铅含量。D基体改进剂的使用对有干扰试样，则注入适量的基体改进剂磷酸二氢钱溶液（一般为5科L或与试样同量）消除干扰。绘制铅标准曲线时也要加入与试样测定时等量的基体改进剂磷酸二氢钱溶液。6分析结果的表述试样中铅含量按式进行计算：X=（C1-C0）V1000m10001000式中：X试样中铅含量，单位为毫克每千克或毫克每升（mg/kg或mg/L）;c1测定样液中铅含量，单位为纳克每毫升（ng/mL）;C0空白液中铅含量，单位为纳克每毫升（ng/mL）;V试样消化液定量总体积，单位为毫升（mD;m试样质量或体积，单位为克或毫

34、升（g或mD。以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留两位有效数字。3、沙门氏菌的检验GB/T4789.25沙门氏菌检验。A前增菌称取25g（ml.）样品放入盛有225mLBPW的无菌均质杯中，以8000r/min10000r/min均质1min2min,或置于盛有225mLBPW的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1min2min。若样品为液态，不需要均质，振荡混匀。如需测定pH值，用1mol/mL无菌NaOH或HCl调pH至6.8±0.2。无菌操作将样品转至500mL锥形瓶中，如使用均质袋，可直接进行培养，于36±1C培养8h18h。如为冷冻产品，应

35、在45C以下不超过15min,或2C5C不超过18h解冻。B增菌轻轻摇动培养过的样品混合物，移取1mL,转种于10mLTTB内，于42C±1C培养18h24h。同时，另取1mL,转种于10mLSC内，于36±1C培养18h24h。C分离分别用接种环取增菌液1环，划线接种于一个BS琼脂平板和一个XLD琼脂平板（或HE琼脂平板或沙门氏菌属显色培养基平板）。于36c±1C分别培养18h24h（XLD琼脂平板、HE琼脂平板、沙门氏菌属显色培养基平板）或40h48h（BS琼脂平板），观察各个平板上生长的菌落，各个平板上的菌落特征见表5。表5沙门氏菌属在不同选择性琼脂平板上的

36、菌落特征选择性琼脂平板沙门氏菌BS琼脂菌落为黑色有金属光泽、棕褐色或灰色，菌落周围培养基可呈黑色或棕色；有些菌株形成灰绿色的菌落，周围培养基不变。HE琼脂蓝绿色或蓝色，多数菌落中心黑色或几乎全黑色；有些菌株为黄色，中心黑色或几乎全黑色.XLD琼脂菌落呈粉红色，带或不带黑色中心，有些菌株可呈现大的带光泽的黑色中心，或呈现全部黑色的菌落；后些菌株为黄色菌落，带或不带黑色中心。沙门氏菌属显色培加基按照显色培养基的说明进行判定D生化试验自选择性琼脂平板上分别挑取2个以上典型或可疑菌落，接种三糖铁琼脂，先在斜面划线，再于底层穿刺；接种针不要灭菌，直接接种赖氨酸脱竣酶试验培养基和营养琼脂平板，于36C&#

37、177;1C培养18h24h,必要时可延长至48h。在三糖铁琼脂和赖氨酸脱竣酶试验培养基内，沙门氏菌属的反应结果见表6。表6沙门氏菌属在三糖铁琼脂和赖氨酸脱竣酶试验培养基内的反应结果三糖铁琼脂赖氨酸脱竣酶试验培养基初步判断斜面底层产气硫化氢KA十（一）十（一）十可疑沙门氏菌属KA十（一）十（一）一可疑沙门氏菌属AA十（一）十（一）十可疑沙门氏菌属AA+/一+/一一非沙门氏菌KK+/一+/一+/一非沙门氏菌注：K：产碱，A产酸；+:阳性，一：阴性；+（一）:多数阳性，少数阴性；+/:阳性或阴性。接种三糖铁琼脂和赖氨酸脱竣酶试验培养基的同时，可直接接种蛋白月东水（供做靛基质试验）、尿素琼脂（pH7

38、.2）、氧化钾（KCN培养基，也可在初步判断结果后从营养琼脂平板上挑取可疑菌落接种。于36c±1C培养18h24h,必要时可延长至48h,按表7判定结果。将已挑菌落的平板储存于2c5C或室温至少保留24h,以备必要时复查。表7沙门氏菌属生化反应初步鉴别表反应序号硫化氢（H2S）靛基质pH7.2尿素氧化钾赖氨酸脱竣酶A1十一一一十A2+十一一十A3一一一一+/一注：+阳性；一阴性；+/阳性或阴性。反应序号A1:典型反应判定为沙门氏菌属。如尿素、KCN和赖氨酸脱竣酶3项中有1项异常，按表8可判定为沙门氏菌。如有2项异常为非沙门氏菌。表8沙门氏菌属生化反应初步鉴别表pH7.2尿素氧化钾（K

39、CN赖氨酸脱竣酶判定结果一一一甲型副伤寒沙门氏菌（要求血清学鉴定结果）一十十沙门氏菌IV或V（要求符合本群生化特性）十一十沙门氏菌个别变体（要求血清学鉴定结果）注：+表示阳性；+表示阴性。反应序号A2:补做甘露醇和山梨醇试验，沙门氏菌靛基质阳性变体两项试验结果均为阳性，但需要结合血清学鉴定结果进行判定。反应序号A3:补做ONPGONPG阴性为沙门氏菌，同时赖氨酸脱竣酶阳性,甲型副伤寒沙门氏菌为赖氨酸脱竣酶阴性。如选择生化鉴定试剂盒或全自动微生物生化鉴定系统，可根据初步判断结果，从营养琼脂平板上挑取可疑菌落，用生理盐水制备成浊度适当的菌悬液，使用生化鉴定试剂盒或全自动微生物生化鉴定系统进行鉴定。

40、E血清学鉴定抗原的准备：一般采用1.2%1.5%琼脂培养物作为玻片凝集试验用的抗原。O血清不凝集时，将菌株接种在琼脂量较高的（如2%3%）培养基上再检查；如果是由于Vi抗原的存在而阻止了O凝集反应时，可挑取菌苔于1mL生理盐水中做成浓菌液，于酒精灯火焰上煮沸后再检查。H抗原发育不良时，将菌株接种在0.55%-0.65%半固体琼脂平板的中央，俟菌落蔓延生长时，在其边缘部分取菌检查；或将菌株通过装有0.3%0.4%半固体琼脂的小玻管1次2次，自远端取菌培养后再检查。多价菌体抗原（O）鉴定：在玻片上划出2个约1cmX2cm的区域，挑取1环待测菌，各放1/2环于玻片上的每一区域上部，在其中一个区域下部

41、加1滴多价菌体（O）抗血清，在另一区域下部加入1滴生理盐水，作为对照。再用无菌的接种环或针分别将两个区域内的菌落研成乳状液。将玻片倾斜摇动混合1min,并对着黑暗背景进行观察，任何程度的凝集现象皆为阳性反应。多价鞭毛抗原（H）鉴定：同多价菌体抗原（。鉴定。F结果与报告综合以上生化试验和血清学鉴定的结果，报告25g（mD样品中检出或未检出沙门氏菌4、金黄色葡萄球菌的检验GB/T4789.10金黄色葡萄球菌检验。A样品的处理称取25g样品至盛有225mL7.5%氯化钠肉汤或10%氯化钠胰酪月东大豆肉汤的无菌均质杯内，8000r/min10000r/min均质1min2min,或放入盛有225mL7

42、.5%氯化钠肉汤或10%氯化钠胰酪月东大豆肉汤的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1min2min。若样品为液态，吸取25mL样品至盛有225mL7.5%氯化钠肉汤或10%氯化钠胰酪月东大豆肉汤的无菌锥形瓶（瓶内可预置适当数量的无菌玻璃珠）中，振荡混匀。B增菌和分离培养将上述样品匀液于36C±1C培养18h24h。金黄色葡萄球菌在7.5%氯化钠肉汤中呈混浊生长，污染严重时在10%氯化钠胰酪月东大豆肉汤内呈混浊生长。将上述培养物，分别划线接种到Baird-Parker平板和血平板，血平板36±1C培养18h24h。Baird-Parker平板36C±1C培养18h24

43、h或45h48h。金黄色葡萄球菌在Baird-Parker平板上，菌落直径为2mm-3mm,颜色呈灰色到黑色，边缘为淡色，周围为一混浊带，在其外层有一透明圈。用接种针接触菌落有似奶油至树胶样的硬度，偶然会遇到非脂肪溶解的类似菌落；但无混浊带及透明圈。长期保存的冷冻或干燥食品中所分离的菌落比典型菌落所产生的黑色较淡些，外观可能粗糙并干燥。在血平板上，形成菌落较大，圆形、光滑凸起、湿润、金黄色（有时为白色），菌落周围可见完全透明溶血圈。挑取上述菌落进行革兰氏染色镜检及血浆凝固酶试验。C鉴定染色镜检：金黄色葡萄球菌为革兰氏阳性球菌，排列呈葡萄球状，无芽胞，无荚膜，直径约为0.5m-1ni血浆凝固酶试

44、验：挑取、Baird-Parker平板或血平板上可疑菌落1个或以上，分别接种到5mLBHI和营养琼脂小斜面，36±1C培养18h24h。取新鲜配置兔血浆0.5mL,放入小试管中，再加入BHI培养物0.2mL0.3mL,振荡摇匀，置36C±1C温箱或水浴箱内，每半小时观察一次，观察6h,如呈现凝固（即将试管倾斜或倒置时，呈现凝块）或凝固体积大于原体积的一半，被判定为阳性结果。同时以血浆凝固酶试验阳性和阴性葡萄球菌菌株的肉汤培养物作为对照。也可用商品化的试剂，按说明书操作，进行血浆凝固酶试验。结果如可疑，挑取营养琼脂小斜面的菌落到5mLBHI,36C±1C培养18h4

45、8h,重复试验。D葡萄球菌肠毒素的检验可疑食物中毒样品或产生葡萄球菌肠毒素的金黄色葡萄球菌菌株的鉴定，应按附录B佥测葡萄球菌肠毒素。E结果与报告结果判定：符合上述鉴定，可判定为金黄色葡萄球菌。结果报告：在25g（ml.）样品中检出或未检出金黄色葡萄球菌。5、纳他霉素的测定GBT21915-2008食品中纳他霉素的测定液相色谱法本标准规定了食品中纳他霉素的液相色谱测定方法.本标准适用于食品中纳他霄素的测定.本标准定量检出限为0.5mg/kg（固体和半固体样品）,0.5mg/L（液体样品）.2原理样品经甲醇提取,采用加水冷冻去除样品中的脂肪成分或离心的方式净化，反相液相色谱-紫外检测器测定,外标法

46、定量.3试剂和材料水去离子水或相当纯度的水.甲静:分析纯、色谱纯.3纳他霉索（natamycin）1纯度295%.标准储备液：准确称取适量的纳他霍素标准品（精确至0.1mg）,用甲醇溶解，配成浓度为100Rg/mL的标准储备液.冰乙酸:优级纯.0.45Dm、0.22'm针头式过滤器（水性）.4仪舞高效液相色谱仪:配紫外检测器.超声波清洗器.电子天平:感量0.1mg.注射器,一次性,10mL.漏斗:直径大约7cm.冰箱：-20C-15,C.<7离心机.5样品制备s2果汗饮料棒品掂地量取果汁饮料祥晶】0.匚mL,加入30mL用尊招料崔取30;而提取液依次过0,45um和5*re升头式

47、近湮器.收集滤液妁2nL上机副定.柳汁祥晶回收率图参见图A.6.5色调规定61色翳柱iC,”柱净Mn3tSmmXlSQmm（或相当暨号色港柱兀6.2海勃相r甲辞一水+乙酸/G+E+5）.6.3漉速工0niL/min.6.4根霭眨袋：制5f.5,5萨祥信JQ产L.><安式口）开算而体、于|噌购（乳酪、我点、火褪J14国2申纳他海素电量，按式（2）计算液体样品中型他霜素的含XVXI000式中rX一就祥中£由吊准y一样品麻Q%体积，单力为毒#向二、二弟：|m_祥品为克计算结果保&则用效数字.l3V.jx试样中解套黑的含置：单位为微克年睾q-6g/mL）；：/£

48、市桁花曲线时图产品溶步中纳他毒素的含再,单位为微克每型开4.nlj；%样品溶液上赛长,单傍!为享手/稼!/匕一样品量取悔奘卷曾某mLJ.，/计算结果保留三位痴炊家/6、焦糖色的测定GB8817-2001食品添加剂-焦糖色的测定4试峡方法法验中所用试剂和仪器设备除特别注明外，均采用分析纯试剂、蒸憎水或去离干水及实验室常用仪器设备.4.1感官检腺4JJ色泽和外观形态将样品（液状、.粉状）分别吸入或倒入无色玻璃烧杯中，观察其色泽和外观形状。4L2气味泗样品腌释成5g/L-20口/L的水溶液，嗔其气味"4.1.3澄明度将样品稀释成2r/L-4e/L的水擀液,普人50aL比色管中，在明亮处由上

49、到下观痕&42吸光度的测定称取样品0.3孤精确至。,O02g）,用水定容于500mL容鼠根中,用1cm出色UL,在610nm处用分光光度计测定其吸光度.4.3干廉失章的测定43.1测定方诙用已恒重过的歙量瓶称取样品2妙准确至&0002g）,于1加C干爆2人冷却，称重°4.32分析结果的表述式中：出干蝶失重,%:此一“拱干前称童版和样品的质量，J的1一雄干后称2瓶和样品的质置噌;M样品版量日7、三氯蔗糖的测定GBT22255-2008食品中三氯蔗糖（蔗糖素）的测定试样的制备'-低曲,无谓及非青色类试样的制备1.11准确称取均匀试样】其精】。.0。1g）,置于5QmL的离心管中，加入5mL蒸愉水.漩济振荡器上振荡3min后加入15mL甲薛，继续振荡30的超声波提取2。min后，以3000r/min离心5而n,仔期将上清液移入50mL玻璃蒸发皿内.