安全防护知识

1、第一节 生物安全的定义一、生物安全的定义1.狭义 ：避免危险生物因子对人、环境和社会造成的危害或潜在危害而采取的防护设施（硬件）和管理措施（软件），达到对人、环境和社会的安全防护的目的。 2.广义 l 针对由现代生物技术的开发和应用可能产生的负面影响所采取的有效预防和控制措施。 中国环境报2000-9-6 是国家安全的组成部分。 是指生物的正常生存和发展以及人类的生命和健康不受人类的生物技术活动和其他开发利用活动侵害和损害的状态。 -政法大学环境资源法研究所所长王灿发教授 二、实验室生物安全 Laboratory Biosafety 1.概述 2.微生物危险度分级和生物安全防护 3.生物安全管

2、理 4.生物安全和基因工程 实验室常见危险和LAI的直接原因 为什么要重视实验室生物安全？l1.针对生物危害提出实验室生物安全 l2.当前世界存在两类生物危害： 1）.各类传染病：新发/再现/高致病性/抗原变异/多重耐药/全球传播 2）.生物恐怖/生物武器 l3.实验室感染贯穿了整个微生物学的发展历史实验室常见危险和LAI的直接原因 溢出和泼洒1.吸入危险2.食入危险 3.眼结膜接触 锐器损伤针头、注射器 碎玻璃动物或动物寄生虫抓、咬伤处理血液及有潜在病理学危害的材料烧伤、冻伤、腐蚀伤不明原因 82 ！气溶胶生物气溶胶（bioaerosol）气溶胶 l悬浮于气体中、直径0.001100m，固态

3、或液态微粒。 l含微生物的气溶胶则称为生物气溶胶。 l>100mm快速沉降 <50mm飞沫0.4s内扩散，> 100 m l>5mm飞沫被呼吸道粘膜捕获 <5mm 吸入后直接达到肺泡 气溶胶产生的实验途径 轻度（<10个） 玻片凝集实验 倾倒菌液 火焰烧灼接种环 接种鸡胚和抽取培养液中度（11100个） 动物实验 细菌接种 菌液混悬或滴洒 摔碎含菌培养皿重度（100个） 离心管破裂 打碎（开）干燥菌种安瓿 注射器针头脱落使菌液喷出 混合震荡 超声粉碎生物气溶胶的特点l1.无色无味、无孔不入，不知不觉被感染。 l2.与自然感染相比，症状不典型，病程复杂，难以及

4、时诊治，影响预后。 l3.现有常规疫苗（非呼吸道免疫途径）的预防效果不理想，如肺炭疽。 l4.容易在人与人、人与动物、动物与动物之间传播。 l5.可以远距离或较远距离传播。 6.气溶胶导致实验室感染的威力超乎想象! 三、实验室生物安全的目的：使实验室在处理或保存感染性材料时，保证安全四、实验室生物安全与防护的重要性1.建立病原微生物研究的安全平台 2.医院感染控制 3.传染病预防与控制 4.动物防疫 5.出入境检验检疫 6.生物防护（国防）-美国RODS 7.GOARN（global outbreak alert and response network 全球疾病、战争爆发预警和应急网络）微生

5、物的危险度分级危险等级分级要素主要的传染因子中国WHO41没有或极低的个体和群体危险。 已知不太可能引起健康成年人或动物患病。正常微生物群/条件致病菌32中度个体危险，低度群体危险。 能引起人或动物疾病。 实验室暴露可能引起严重感染，但具有有效地预防和治疗措施，传播危险有限。含病原微生物的临床标本23高度个体危险，低度群体危险。 引起人或动物的严重疾病或致死，潜在的气溶胶传播；一般不会由个体之间传播，具有有效地预防和治疗措施。大量培养和研究的病原微生物、朊粒等14高度个体、群体危险。 引起人或动物非常严重的疾病和危及生命的实验室感染；尚未发现或已宣布消灭的病原；极易发生个体之间传播（气溶胶或传

6、播途径不明），没有有效地预防和治疗措施主要是病毒，如出血热病毒、脑炎病毒、天花病毒等名录涉及的病原微生物包括： 1.法定报告传染病所涉及的病原微生物（38种疾病） 2.法定报告传染病以外常见传染病的病原微生物 3.国外新发现和已消灭传染病的病原微生物 五、生物安全防护 （bio-safety containment）: 避免发生实验室相关感染及生物因子对环境的污染而采取的防范意识和措施一级屏障（primary barriers） l生物安全柜（BSC） l个人防护装备（PPE）二级屏障（secondary barriers） l实验室建筑设计和设施。生物安全柜 （Biological safe

7、ty cabinets，BSCs） 直接操作具有传染性生物病原时所使用的箱形安全设备。 根据结构、气流流速和方式、排风系统的不同分为：I级 可保护操作者和环境，不能保护操作对象。lII级（A1、A2、B1、B2和B3） 在I级BSC的基础上，增加了保护实验对象。III级 将所有的危险性实验材料都封闭在完全密闭的通风柜内，对实验室工作人员、实验对象和环境提供最大限度地保护。定向负压式气流HEPA滤器 高效空气过滤器：是指在额定风量、有效滤过面积和气流阻力在245Pa以下时，可将空气中99.97、直径0.3 mm的粒子有效捕获的空气过滤器。 II-A型BSC 的气流流向 1 流入：气流流入操作台面

8、下的前方的隔栅内，而不进入工作区域避免了污染。 2 气流路径：入流顺操作台后向上，和后隔栅进入的向下流动气流相遇，混合流入回风腔，然后在进入风机入口前形成负压包围正压。 3 风机顶部产生正压如有泄漏，将被负压环绕避免泄漏. 4 约35%气体从上方HEPA 滤器排出，滤掉污染物。65%气体流入下方HEPA 滤器，产生再循环洁净气流避免柜内产品污染。 生物安全柜的使用 1.定期检测，运行正常时才能使用 2.在使用中不能打开玻璃观察挡板 3.时刻注意气流稳定 4.消毒 5.在浸有消毒剂的湿毛巾上进行操作，以吸收可能溅出的液滴。 6.在BSC内操作时不能进行文字工作。 个人防护装备 （PPE， Per

9、sonal Protective Equipment） 实验服、隔离衣、连体衣、正压防护服 手套、鞋袜 塑料围裙 护目镜、安全眼镜 面罩、防毒面具 l生物安全防护水平 （bio-safety level, BSL） 根据操作不同危险度等级微生物所需、按照一级屏障和二级屏障的不同组合，构建成具有不同防护级别的实验室（BSL 14） 规范的实验室设计+安全设备配置+PPE+严格遵守SOP。 P1P4 ( Physical protection )，BSL-1BSL-4 ( Biosafety level ) lBSL-1/2： 基础实验室 BSL-3： 生物安全防护实验室 lBSL-4: 高度生物

10、防护实验室 BSL-2注意：.一般无须使用生物安全柜等专用安全设备 2.工作人员在实验室应穿工作服，带防护眼镜 3.工作人员手上有皮肤破损或皮疹时应戴手套 注意：1.操作对人或环境具有中等潜在危害的微生物。 l2.麻疹病毒、乙型肝炎病毒、 HIV 血清学检测、志贺菌、沙门菌、衣原体等。BSL-3 四大防护措施： 负压密闭、空气过滤、人员消毒、生物安全柜 生物安全防护水平（BSL14） 危害 等级 防护 级别实验室 用途 操作规则 一级屏障 (BSCPPE ) 二级屏障 （安全设施） 实验室 用途 1级 BSL-1 GMT 工作服 洗手池，开放实验台 GMT 工作服 2级 BSL-2 BSL-1

11、加：限制进入 生物危害警示标志 废弃物净化处理 生物安全手册 I型或II型BSC、 实验服、手套、帽子、口罩 BSL-1加： 高压灭菌设备 BSL-1加：限制进入 生物危害警示标志 废弃物净化处理 生物安全手册 I型或II型BSC、 实验服、手套、帽子、口罩 3级 BSL-3 BSL-2加： 所有废弃物和实验服的净化处理 I型或II型BSC 双层防护服和手套、专业防护口罩、呼吸防护装置 BSL-2加： 走廊和实验室隔离 自动关闭双门 气流定向、无再循环 BSL-2加： 所有废弃物和实验服的净化处理 I型或II型BSC 双层防护服和手套、专业防护口罩、呼吸防护装置 4级 BSL-4 BSL-3加

12、： 进入前更换防护服 离开前淋浴 任何物品无害化处理 型BSC或II型BSC 外加全身正压防护服 BSL-3加： 独立建筑或单独隔离区、双门直通式高压灭菌器（穿过墙壁） BSL-3加： 进入前更换防护服 离开前淋浴 任何物品无害化处理 型BSC或II型BSC 外加全身正压防护服 生物安全管理1.硬件（防护设施）1级屏障安全设备、个人防护装置； 2级屏障实验室设施 2.软件（管理措施）法律法规、技术标准的制定和执行 生物安全实验室建设 实验室生物安全管理保障体系建设 实验室生物安全管理文件的制定 l物质安全数据单 （Material Safety Data Sheets，MSDS） 人员意识、素

13、质提高及培训 监督检查及执法 责任制及责任追究 实验室生物安全保障管理体系建设 l1.强化生物安全意识，强调责任心 l2.建立规范化、法制化和日常化的管理体系和制度 组织保障制度保障监督、检查生物安全委员会 生物安全管理责任制管理责任、个人责任生物安全相关政策、法规 生物安全手册 生物安全制度标准操作程序( Standard Operation Procedure , SOP ）生物安全制度 1.人员培训制度 2.实验室准入制度 3.安全计划审核制度 4.安全检查制度 5.事件、伤害、事故和职业性疾病报告制度 6.危险标识制度 7.记录制度 SOP SOPStandard Operation

14、Procedure 1.感染性材料的安全操作 2.个人防护用品使用规范 3.锐器的安全操作 4.BSC和其他仪器设备的安全使用 5.意外事故应对方案和应急预案 6.消毒、灭菌 7.废弃物处理 8.感染性物质的储存、运输及管理 BSL-1、2实验室安全管理规定进入规定1.限制进入 未经批准人员 儿童 与实验室无关动物2.生物危害警告标志BSL-2以上级别实验室3.实验室的门应保持关闭4.进入动物房应经过特别批准人员防护规定 1.在实验室工作时必须穿工作服或防护服。 2.可能直接或意外接触血液、体液及其他潜在感染性材料或感染性动物时，应戴上合适的手套。手套用后应先消毒再摘除，随后必须洗手。 3.处

15、理完感染性实验材料和动物及离开实验室工作区域前，必须洗手。 4.严禁穿着实验室防护服、戴着手套离开实验室（包括去卫生间）。 5.一次性手套不得清洗和再次使用。 6.为了防止眼睛或面部受到泼溅物、碰撞物或人工紫外线辐射的伤害，必须戴安全眼镜、面罩（面具）或其他防护设备。 7.不得在实验室内穿露脚趾的鞋子。 8.禁止在实验室工作区域进食、饮水、吸烟、化妆、处理隐形眼镜、触摸皮肤。 9.禁止在实验室工作区域储存食品和饮料。 10.在实验室内用过的防护服不得和日常服装放在同一柜子内。 基本操作规范 1.严禁口吸移液管。严禁将实验材料置于口内。严禁舔标签。 2.所有操作要按尽量减少气溶胶和微小液滴形成的

16、方式进行。 3.应限制使用皮下注射针头和注射器。 l除了进行肠道外注射或抽取实验动物体液 l皮下注射针头和注射器不能用于替代移液管或用作其他用途 4.必须制订并执行溢出物处理的标准操作程序。 l出现溢出、事故及明显或可能暴露于感染性物质时，必须向实验室主管报告 l实验室应如实记录并保存暴露和处理记录 5.污染液体在排放到生活污水管道前必须清除污染。 l根据所处理微生物因子的危险度评估结果准备污水处理系统。 6.文件纸张必须保证在实验室内没有受到污染才可带出实验室。 减少气溶胶的操作 1.最好使用一次性接种环。 d 2-3mm ，闭环，柄长度小于6cm 以减小抖动。 微型电加热器灭菌，或在酒精灯

17、内焰中燃烧。 2.直接涂抹的痰液标本在干燥前严禁对载玻片加热。 3.禁止向空气中直接排放注射器的气泡 l要将多余的液体或气泡推入用抗感染材料浸湿的脱脂棉或有脱脂棉的小瓶中。 移液操作 1.应使用移液辅助器，严禁用口吸取。 2.所有移液管应带有棉塞。 3.不能向含有感染性物质的溶液中吹入气体。4.感染性物质不能使用移液管反复吹吸混合。 5.不能将液体从移液管内用力吹出。 6.污染的移液管应该完全浸泡在盛有适当消毒液的防碎容器中。移液管应当在消毒剂中浸泡适当时间后再进行处理。 7.盛放废弃移液管的容器应当放在生物安全柜内。 8.有固定皮下注射针头的注射器不能用于移液。 9.工作台面应当放置一块浸有

18、消毒液的布或吸有消毒液的纸，使用后将其按感染性废弃物处理。 防锐器刺、割伤操作 1.使用塑料器材代替玻璃器材。 2.禁止用手处理破碎的玻璃器具。 3.用过的针头禁止折弯、剪断、折断、重新盖帽，禁止用手直接从注射器取下。 4.用过的针头必须直接放入防穿透的容器中。 5.非一次性利器必须放入厚壁容器中并运送到特定区域消毒，最好进行高压灭菌。 6.从胶塞瓶中拔出针头前，要用适当的抗感染材料浸湿的脱脂棉包裹针头和塞子。 7.动物接种需固定。滴鼻、口腔接种时，使用钝的针头或套管，在BSC中操作。 感染性标本的安全操作1.标本容器 l最好使用塑料制品，盖好无泄漏。 l正确粘贴标签。 l标本的要求或说明书不

19、能卷在容器外面，要分开放置，最好放在防水袋里。2.标本在设施内的传递 l应使用二级容器 金属或塑料制品 耐高压灭菌或耐化学消毒剂，定期清除污染。 l盛标本容器应固定、直立。 3.标本的接收、外包装打开 l应在安全柜中进行，备好消毒液。血清的分离操作 1.只有经过严格培训的人员才能进行这项工作。 2.血液和血清应当小心吸取，而不能倾倒。严禁口吸。 3.操作时应戴手套以及眼睛和黏膜的保护装置。 4.移液管使用后应完全浸入适当的消毒液中并浸泡适当的时间，然后再丢弃或灭菌清洗后重复使用。 5.带有血凝块等的废弃标本管，在加盖后应当放在适当的防漏容器内高压灭菌和或焚烧。 6.应备有适当的消毒剂来清洗喷溅

20、和溢出标本。 最常用的实验室设备最易导致实验室感染发生的设备离心管破裂预防措施l1.推荐使用有螺旋口盖子的试管。 2.使用塑料试管。 l3.定期检查离心机和试管。 4.使用可封闭的离心桶。 冰箱与冰柜的使用1.定期除霜和清洁 2.标注清楚3.应当保存一份冻存物品的清单。4.非防爆冰箱内禁放易燃溶液 清理出所有在储存过程中破碎的安瓿和试管等物品。 清理时应戴厚橡胶手套并进行面部防护。 清理后要对内表面进行消毒。储存在冰箱内的所有容器应当清楚地标明内装物品的科学名称、储存日期和储存者的姓名。 未标明的或废旧物品应当高压灭菌后丢弃。冰箱门上应注明用途。消毒灭菌 洗手 ：普通肥皂、流水冲洗。脚控、肘控

21、水龙头。 工作台面 ：每天至少消毒一次，活性物质溅出后要随时消毒。 所有培养物、组织、体液及其它具有潜在危险性的废弃物 ：在运出实验室前必须灭活（最好高压）。 工作服 :应先在实验室中消毒，然后统一洗涤。 实验设备 :在运出修理或维护前必须进行消毒。 文件、纸张等 清理破碎物的簸箕、抹布、纸巾等 菌毒种及样本的管理： 专人负责、严格的制度、应急措施、报告制度。 菌（毒）种及样本的运输 1.按规定申报，分类包装，三层密封 2.生物危险标识、警告、提示用语 3.双人接收、清点，建立接受档案 菌（毒）种及样本保藏和销毁 1.保藏机构需符合资质 2.编号、登记、记录清晰、 3.保藏条件：双层包装、真空

22、冷冻干燥、液氮螺口塑料管 4.销毁：审批、复核、高压蒸汽灭菌 实验室工作区的管理规定 1.保持清洁整齐，严禁摆放和实验无关物品。 2.清除污染 每天工作结束后必须清除工作台面的污染。 l 发生具有潜在危害性材料溢出应立即清除污染。 l所有受到污染的材料、标本和培养物在废弃或清洁再利用之前，必须清除污染。 3.如果开窗，应安装纱窗防止节肢动物进入。 生物安全管理内容 l实验室主任、主管： 1.制定生物安全管理计划、安全手册或操作手册。 2.常规的实验室安全培训，建立培训、考核制度。 3.将特殊危害告知实验室人员，要求他们阅读生物安全或操作手册，并遵循标准的操作和规程，确保所有实验室人员都了解这些

23、要求，并监督其执行。 4.实验室感染的控制及应急处理。 5.适宜的医学评估、监测、治疗和记录。 健康和医学监测 BSL1实验室工作人员的监测BSL2实验室工作人员的监测1.安全意识和规范的实验室操作技术的重要性。 2.上岗前的体检，并记录其病史。 3.疾病和实验室意外事故应迅速报告。1.必须有录用前或上岗前的体检。记录个人病史，并进行一次有目的的职业健康评估。 2.实验室管理人员要保存工作人员的疾病和缺勤记录。 3.禁止高度易感人群（如孕妇或免疫损伤人员）在高危险实验室中工作 急救箱药箱内备有： l1.医用酒精 2.创口贴 3.烫伤油膏(或万花油) 4.鱼肝油 l5.1硼酸溶液或2醋酸溶液、1

24、碳酸氢钠溶液 l6.20硫代硫酸钠溶液 7.医用镊子和剪刀、纱布、药棉、棉签、绷带等。 实验室感染的控制与事故记录与报告1.有专门部门或人员负责实验室感染控制 2.有疾控系统指定的医疗救治单位3.有免疫计划并进行相应的免疫接种和记录 l保证实验室内的通讯畅通！ （电话、网络、传真）1.发现与实验病原微生物所致疾病相关症状如：发热、咳嗽、腹泻等，向生物安全负责人报告； 2.到定点医院就诊； 3.涉及高致病性病原微生物的应做好隔离防护； 4.密切接触者应同样做好隔离防护。生物安全和基因工程基因工程包括 l利用载体系统的重组体DNA 技术 l利用物理或化学方法把异源DNA直接导入有机体的技术。不包括

25、 l细胞融合技术，原生质体融合技术； l传统杂交繁殖技术； l诱变技术，体外受精技术，细胞培养或者胚胎培养技术。DNA 的发现和重组 重组DNA技术 l不同来源的遗传信息组合 l创造遗传修饰生物体（genetically modified organisms，GMOs） 基因工程的应用 1.改造农作物的特性，如抗除草剂、抗病虫害等。 2.利用PCR与分子杂交标记技术，快速准确地检测宿主细胞中携带的HIV基因片断。 l美国通过基因工程将人的基因植入牛的体内，由转基因公牛授精的母牛产下5头健壮的牛犊，每头都含有一个人类的基因。 基因工程的危险性 l“超级动物”已非异想天开 “跨类生物”后果不堪设想

26、 l环境安全 基因工程食品对人的影响 l基因组计划对人权的威胁 种族主义可能复活 应遵循以下原则（在正式法规公布前）： 1.严禁两个不同病原体之间进行完整基因组的重组； 2.对于对人类致病的病毒，如存在疫苗株，只允许用疫苗株为外源基因表达载体，如脊髓灰质炎病毒、麻疹病毒、乙型脑炎病毒等； 3.对于一般情况下即具有复制能力的重组活病毒，其操作时的防护条件应不低于其母本病毒；对于条件复制型或复制缺陷型病毒可降低防护条件，但不得低于BSL-2的防护条件，例如来源于HIV的慢病毒载体，为双基因缺失载体，可在BSL-2实验室操作； 4.对于病毒作为表达载体，其防护水平总体上应根据其母本病毒的危害等级及防

27、护要求进行操作，但是将高致病性病毒的基因重组入具有复制能力的同科低致病性病毒载体时，原则上应根据高致病性病原体的危害等级和防护条件进行操作，在证明重组体无危害后，可视情降低防护等级； 5.对于复制型重组病毒的制作事先要进行危险性评估，并得到所在单位生物安全委员会批准。对于高致病性病原体重组体或有可能制造出高致病性病原体的操作应经国家病原微生物实验室生物安全专家委员会论证。 使用人类病原微生物的重组体 （包括对病毒基因的敲除、插入、突变、作为外源基因的表达载体等） 基因工程工作的安全等级 安全等级 ：该类基因工程工作对人类健康和生态环境尚不存在危险； 安全等级 ：该类基因工程工作对人娄健康和生态

28、环境具有低度危险； 安全等级 ：该类基因工程工作对人类健康和生态环境具有中度危险； 安全等级 ：该类基因工程工作对人类健康和生态环境具有高度危险。 构建或使用GMOs实验的生物安全评估 l生物表达系统的生物安全考虑生物表达系统：载体(质粒pUC18)宿主细胞(E.coli.K12) l当插入的外源DNA表达产物不要求更高级别的BSL，可以在 BSL1按常规遗传工程实验进行。 l下列情况需要较高的BSL 1.来源于病原生物的DNA序列,其表达可能增加GMO毒性; 2.插入的DNA序列性质不确定，如制备病原微生物基因组DNA库 3.基因产物具有潜在药理学活性 4.毒素基因 用于基因转移的病毒载体l

29、病毒载体 腺病毒载体 l缺陷病毒，不能复制 l污染 与繁殖细胞株中的野毒株自发性重组，可以复制 操作时应采用与腺病毒相同的生物安全水平（BSL-2），动物实验（ ABSL-3） 转基因动物 l转基因动物应当在适合外源性基因产物特性的防护水平下进行操作 l每一种新的转基因动物，应详细研究确定 感染途径、感染所需病毒接种量 感染动物传播病毒范围 采取一切措施确保转基因动物的严密防护 第二节 化学安全 CHEMICAL SAFETY 内容：l1.危险化学品分类、标志与危害 2.医学实验室常用危险化学品 l 3.化学品的安全控制 一、常用危险化学品分类与标志 （GB1369092） 1.爆炸品 2.压

30、缩气体和液化气体 3.易燃液体 4.易燃固体、自燃物品和遇湿易燃物品 5.氧化剂和有机过氧化物 6.有毒品 7.放射性物品 8.腐蚀品化学品的危害性 1.化学品暴露途径 ：吸入、接触、食入、针刺、通过破损皮肤 2.化学品的毒性作用 操作或吸入蒸气 l1）影响健康（呼吸系统、血液、肺、肝脏、肾脏和胃肠道系统以及其他器官和组织造成不良影响或严重损害 l2）致癌性或致畸性 l3）不能被立即识别的对人体健康的损伤，如协调性差、嗜睡及类似的症状，并使出现事故的可能性增大。 长期反复接触许多液态有机溶剂 ：可能造成皮肤损害（去脂效果）、过敏和腐蚀症状。 医学实验室常用危险试剂 易燃有毒品腐蚀品1.乙醛 2

31、.甲醇 3.乙醇 4.丙酮 5.氯仿 6.异戊醇 7.二硝基水杨酸 8.甲酰胺 9.异丙醇 10.二甲基甲酰胺1.甲醛刺激性、致癌。 2.苯、联苯胺致癌。 3.氯乙烯致癌。 4.苯甲基磺酰氟（PMSF）神经毒性。 5.焦碳酸二乙酯（DEPC）与氨水溶液混合产生致癌物。 6.氯仿神经毒、肝肾损伤、致癌、致畸。 7.溴化乙锭强诱变剂，高致癌性。 8.硝酸银突变、生殖毒。 9.苯酚腐蚀，神经、肝肾、生殖毒，致畸。 10.丙稀酰胺、联苯胺衍生染料2A类致癌物。1.盐酸 2.苯酚 3.三氯乙酸（TCA ） 4.碘乙酸 5.浓氨水 6.重铬酸钾化学品的安全控制 l物质安全数据单 （Material Saf

32、ety Data Sheets，MSDS） 作为安全手册或操作手册的一部分，可方便查阅 1.所有化学品储存点都应有一份MSDS文档 2.每个实验操作者都应有一份MSDS的硬盘拷贝 3.在实验室应有透明胶粘贴的、让每个使用者都明白、易懂、清楚的标识 化学品的安全控制物质安全数据单 （Material Safety Data Sheets，MSDS）化学实验室安全设施作为安全手册或操作手册的一部分，可方便查阅: 1.所有化学品储存点都应有一份MSDS文档 2.每个实验操作者都应有一MSDS的硬盘拷贝 3.在实验室应有透明胶粘贴的、让每个使用者都明白、易懂、清楚的标识通风橱和I级生物安全柜 应有流量

33、指示仪显示适当的流量 化学通风橱面对操作者处的流量速率至少应达到0.5m/s（或根据仪器制造商的使用说明）。 通风厨每6个月检查一次 l列入定期预防性维修计划 l保存维修记录 l所有用于排除化学污染物的排风罩都应定期检查和校验化学品的储存原则 l1.应考虑温度、燃点控制、通风、相容性、标识辨认。 l2.化学品不应按字母顺序存放 同类属放在一起，不相容的不应储存在一起 l3.标识: 橱柜必须有明确的化学品标识 容器应有清楚的标签，标签应标记化学品规范的名称、危害类型、防范 措施、紧急情况的处理等 l4.危险化学品 实验室只储存满足日常使用的最小量 大量危险化学品应储存在经消防队特许认可的危险品储

34、存地 致癌性或高毒性化学品应储存在具有双层防护、带锁的橱柜中 易燃液体必须储存在防爆冰箱或冷库 l5.剩余化学品必须处理或转移 不相容化学品表：关于不相容化学品的一般原则化学物质类别不相容化学品碱金属（钠、钾、铯、锂）二氧化碳、氯代烃、水卤素氨、乙炔、烃醋酸、硫化氢、苯胺、烃、硫酸氧化剂（如铬酸、硝酸、过氧化物、高锰酸盐）压缩气体和液化气体贮存要求固定 ：如铁链锁在墙上或坚固的实验台，以确保钢瓶不会因为自然灾害而移动 运输 ：用手推车，必须戴好盖帽 大储量钢瓶 ：应存放在与实验室有一定距离的适当设施内 l 存放地点应上锁并适当标识 防火防爆 ：不应放置在散热器、明火或其他热源或会产生电火花的电

35、器附近，也 不应置于阳光直晒 化学药品的安全操作 1.进实验室必须穿实验服，必要时戴手套、防溅面罩。实验服和手套不得在非 实验室地区穿戴。 2.实验室内禁止吸烟、进食和饮水。 3.盛试剂容器必须贴标签，注明其内容及有效时间。 4.化学药品必须经实验负责人许可才可以存放在实验室中，并注意其储藏条件。 5.在使用任何化学药品之前，一定要熟知该化学药品的危险性（查阅MSDS)。 6.打开危险化学药品时，一定要在有保护的通风厨内进行，并使用防溅面罩。 7.酸 (碱) 瓶外部不得有酸 (碱) 液残留，要用毛巾擦拭，事后毛巾以水洗净 方可丢弃。 有机溶剂操作规程 1.严禁在开口容器和密闭体系中用明火加热有

36、机溶剂，只能使用加热套或水浴加热。 2.不得在烘箱内存放、干燥、烘焙有机物。 3.在有明火的实验台面上不允许放置开口的有机溶剂或倾倒有机溶剂。 4.废有机溶剂不得倒入废物桶，只能倒入回收瓶，以后再集中处理。量少时用水稀释后排入下水道。 废弃物处理 1.医疗废弃物定义 :疗卫生机构在医疗、预防、保健以及其他相关活动中（包括医学科研、教学、尸体检查和其他相关活动）产生的直接或间接感染性、毒性以及其他危害性废物。 2.分类 感染性、病理性、损伤性、药物性、化学性 3.五有原则： 1）.有专用包装袋和盛装容器。 -标签 双层包装 从严处理 2）.有分类收集示意图或文字说明。 3）.有专职管理人员的培训

37、。 4).有PPE、定期体检、预防接种 5).有记录（至少保存3年） 废弃物处理 感染性、病理性废弃物处理损伤性（锐器）废弃物处理药物性、化学性废弃物处理所有培养物、组织、体液及其它具有潜在危险性的废弃物须放在防漏的容器中储存、运输及消毒、灭菌（高压）。 一次性注射器用过后必须直接放入防穿透的容器中。 l非一次性注射器必须放入厚壁容器中并运送到特定区域消毒，最好进行高压灭菌。1.禁止将使用过的溶剂再倒回原来容器。 2.应分类收集在专门的收集容器内。 l任何含氯溶剂放在专为含氯溶剂的容器中。 l其它溶剂则收藏在不含氯容器中。 3.储放废弃溶剂桶处一定要具有通风设备。 4.废弃溶剂应集中处理。锐器

38、刺伤 l1.感染案例： 1).生物安全柜中鉴定结核杆菌接种物手套划破，皮肤擦伤立即用70酒精清洗伤口3周后局部出现红肿硬结六周后证实感染结核。 2）.某分子生物研究所人员对感染了EBOV的豚鼠进行实验，针头误刺左手掌，立即隔离治疗，注射免疫血清，仍不治身亡。 2.处理程序： 1）.立即停止工作 2).伤口挤血，水或消毒剂冲洗消毒。 3).脱下污染防护服并进行消毒处理。 4).观察和必要的预防治疗。 5）.要记录受伤原因和相关的病原微生物，并保留医疗记录。 感染性物质溢出、泼洒 溢出清除程序 1.戴手套，穿防护服，必要时需进行脸和眼睛防护。 2.用布或纸巾覆盖并吸收溢出物。 3.向纸巾上倾倒适当

39、的消毒剂，并立即覆盖周围区域（常用5%漂白剂溶液)。 4.使用消毒剂时，从溢出区域的外围开始，朝向中心进行处理。 5.作用30 min，将所处理物质清理掉。如含有碎玻璃或其他锐器，要使用簸箕或硬的厚纸板收集并置于可防刺透的容器中6.对溢出区域再次清洁并消毒（如有必要，重复第25步）。 7.将污染材料置于防漏、防穿透的废弃物处理容器中。 8.通知主管部门报告处理过程并保存记录。 皮肤污染眼部污染食入潜在感染性物质1.立即局部消毒。 2.手部消毒。 3.脱掉防护服并进行消毒。 4.换上防护服并对现场进行消毒。 5.对空气污染的应该对实验室进行紫外线消毒后通风。感染案例：脸部和工作服溅洒脱工作服洗消

40、毒感染1.某实验员沙眼衣原体感染鸡胚针头脱落菌液喷射到脸部（自觉未喷到眼睛） 仅对脸部进行消毒清洗6天后眼部出现沙眼症状。 2.某实验员注射器接种淋球菌针头脱落含菌物污染脸部和左眼立即用自来水冲洗眼睛 13天后出现眼结膜化脓。 3.3实验员腺病毒免疫兔子吸管破裂污染眼睛立即用自来水冲洗眼睛 3人均出现角膜结膜炎。感染案例： 某实验员在大肠杆菌O157实验室工作后3天出现出血性结肠炎。 某研究幽门螺杆菌人员将菌株接种细胞培养48小时后，将接触过滤器的手指放入口中。30个小时后出现胃绞痛，证实感染。正确处理程序： 1.停止工作 2.消毒皮肤污染部位 2碘酒、75酒精棉球涂抹。或适当浓度的消毒液浸泡

41、手5min后用肥皂流水清洗， 3.流水冲洗 4.对污染环境进行消毒处理 5.暴露人员隔离观察处理程序： 停止工作 立即用清水冲洗眼睛。 密切观察、预防性抗生素、抗病毒药物治疗。 记录。菌液误入口或溅洒 1.立即将菌液吐于消毒容器内，1:1000高锰酸钾或3%双氧水漱口。 2.停止工作。 3.脱下防护服并进行消毒灭菌处理。 4.观察和必要的预防治疗。 5.报告食入材料的鉴定和事故发生的细节，保留完整适当的医疗记录。化学品溢出 l将溢出处理示意图张贴在实验室中显著位置 l配备下列物品： 1.化学品溢出处理工具盒 2.防护服，耐用橡胶手套、套鞋或橡胶靴、防毒面具 3.铲子和簸箕 4.用于夹取碎玻璃的

42、镊子 5.拖把、擦拭用的布和纸 6.桶 7.用于中和酸及腐蚀性化学品的苏打（碳酸钠或碳酸氢钠 8.沙子（用于覆盖碱性溢出物） 9.不可燃的清洁剂 大量化学品溢出 1、通知有关的安全官员 2、疏散现场闲杂人员 3、密切关注可能受到污染的人员 4、易燃性溢出物 应熄灭所有明火 关闭该房间中以及相邻区域的煤气 打开窗户（可能时） 关闭可能产生电火花的电器 5、避免吸入溢出物品所产生的蒸气 6、如果安全允许，启动排风设备 7、提供清理溢出物的必要物品 通风厨内的化学品溢出 l 通风厨内的化学品溢出通风橱外的化学品溢出溶剂酸溶剂酸和碱1.避免点火及可引起火花的任何动作。 2.用无纤维毛巾擦拭溢出物，用过

43、的毛巾装入塑料袋中绑紧袋口弃之1.在工作台处抽气； 2.喷洒去离子水； 3.将离子水抽干、擦干； 4.重复2、3； 5.将所用毛巾置塑料袋绑紧再弃之。1.避免点火及可引起火花的任何动作； 2.在最近处取喷洒吸收溶剂的干粉，由外向内喷洒至溶剂溢出处； 3.用铲子将吸收剂清理干净。 1.在最近处取中和剂，由外向内喷洒； 2.用试纸测试； 3.清理中和剂； 4.用肥皂及水清理溢出处。 化学品腐蚀伤 皮肤眼睛1.除去污染衣服。 2.流水冲洗至少15分钟。 3.给予伤者医药处理，就医1.提起眼睑，流动清水洗涤至少15分钟。 2.就医液氮冻伤: 切忌烘烤，应立即脱去鞋袜，把受伤部位放在4045的温水浴中浸

44、泡。酒精灯芯塞子爆出引起烧伤: 伤得不严重可局部涂抹烫伤油膏，严重者就医火警险情 1.干烤箱着火应立即关闭箱门、切断电源和气源。 2.酒精、乙醚等有机溶剂起火应采用干粉灭火器、1211或1301灭火器。使用时， 先拔保险插销，然后压握手把，将喷射筒对准燃烧物。 实验室火灾的通常原因1.超负荷用电 2.电器保养不良、电缆绝缘层破旧或损坏 3.供气管或电线过长 4.仪器设备在不使用时未关闭电源 5.使用不是专为实验室环境设计的仪器设备 6.供气管老化锈蚀 7.易燃、易爆品处理、保存不当 8.不相容化学品没有正确隔离 9.在易燃物品和蒸气附近有能产生火花的设备10.通风系统不当或不充分 防火控制 l

45、标志 在每个房间、走廊以及过道中应设置显著的火警、说明以及紧急通道标志 l消防器材 应放置在靠近实验室的门边，走廊和过道的适当位置。 器材应包括 1）桶（用于装水和沙子）以及灭火器。2）器要定期进行检查和维 护，注意有效期。 灭火器的类型和用途种类可应用于 不能应用于 水 纸、木质纤维 电路和电器火灾、易燃液体、燃烧金属 CO2 气体灭火器 易燃液体和气体、电火灾 碱金属、纸 干粉 易燃液体和气体、碱金属、电路和电器火灾 可重复使用的仪器和设备，因为其残渣难以清除干净 泡沫 易燃液体 电火灾 其他实验室危害-电离辐射(Radiation) 一、电离辐射伤害 严重影响 癌症，如白血病、骨癌、肺癌

46、以及皮肤癌，并可能在辐射暴露后许多年才发生 轻微影响 :轻度的皮肤损伤、脱发、贫血、胃肠系统损伤以及白内障 遗传影响 1).在暴露人员的后代中观察到症状 2).生殖腺辐射暴露 染色体损害或基因突变 生殖细胞死亡，生育能力损害 女性月经改变 发育期胎儿（特别是815周龄胎儿）暴露增加先天性畸型的危险或增加以后发 生精神损害或辐射诱发的癌症的危险 电离辐射保护原则 控制使用放射性同位素，并遵守相应的国家标准。 l辐射防护的管理需要遵循以下四项原则： 1.尽可能减少辐射暴露时间 2.尽可能增大与辐射源之间的距离 3.隔离辐射源 4.用非放射测量技术来取代放射性核素。 放射性核素工作安全操作规范 1.

47、限制 :限定区域、人员、用量 2.辐射标志： 1）处、辐射容器 2）核素种类、活性及检测日期 3.个体防护装备：工作服、安全眼镜、一次性手套 4.防溢出 :使用溢出盘，内衬一次性吸收材料。 5.监测 :工作结束后，用辐射计测量工作区域、防护服和手的辐射情况 6.废弃物清除 1）器应有适当保护作用 2）从工作区域清除放射性废弃物 眼睛、皮肤防护 1.戴安全眼镜(普通玻璃镜片亦可)。 2.无菌室入口处应标示紫外灯是否在使用中。 3.确定紫外灯关闭后再进入无菌室。 4.紫外灯的开关应有标识并说明危害。放射卫生防护知识 第一部分 放射防护基础一、 同位素 一种元素所有原子都有相等数目的质子， 但其中子

48、数不尽相同，也就是说，一种元素可以有多种类型的原子。例如元素氢 （H）的原子序数为1，原子核中只有一个质子，但氢原子核有三种不同类型： 三种不同类型“氢” 元素名称 Z 核内质子数 核内中子数 原子量A 氢1 1 1 0 1 氢2 1 1 1 2 氢3 1 1 2 3 氢1(氢), 氢2 (氘), 氢3 (氚)定义： 这些质子数相同、中子数不同、属于 同一种元素的原子，具有相同的化学性 质，在化学元素周期表上排在同一位 置，称之为同位素。二、核素 具有一定质量数、质子数和核能量状态的一类 原子称为 核素。用符号 表示。 其中，X：元素符号 A：质量数 Z：原子序数（质子数） 例如: , 也可简

49、写成 , 三、放射性衰变 定义：放射性核素放出粒子后变成其它类型的新核素，其放射性随着时间增加而减少， 称这种现象为放射性衰变。 放射性衰变的速率与温度、压力及化学过程无关。四、放射性衰变种类 衰变 射线（粒子）实际上就是带有两个正电荷的氦的原子核 （氦核流）。 原子核发生衰变的一般过程可以写成： 其中 称为母体核素 称为子体核素；Q为衰变能， 如： 衰变 射线是高速电子流，这些电子是从衰变核中发射出来的，衰变可以看成是母核内一个中子衰变成一个质子，放出一个电子和一个称为反中微子的过程。衰变的一般衰变式是： 式中D代表反中微子是比电子的质量还小得多（仅为电子的1/200）的中性基本粒子，穿透性

50、极强，一般探测器不能测到。 发生原因母核中子或质子过多 衰变（同质异能跃迁） 原子核发生或衰变时，所产生的子核常常 处于较高的能量状态或叫做核激发状态，在退回到 基态时以光子的形式释出多余的能量，此过程称 为衰变或跃迁。衰变特点： 1.从原子核中发射出光子 l2.常常在a 或b 衰变后核子从激发态退 激时发生 l3.产生的射线能量离散 l4.可以通过测量光子能量来区分母体的核素类别五、半衰期 定义：在单一的放射性衰变过程中，原子 核数减少至原有值一半时所需要的时间称为 半衰期（T1/2）。常见放射性核素半衰期：六、放射性活度及其单位 活度是指一定量的放射性核素，在一个很短的时 间间隔内发生的衰

51、变数与该时间间隔的比值。定义：单位时间内核的衰变量称为放射性活度。活度单位：贝可，符号 ：Bq 贝可定义：每妙一次核衰变， 即： 1Bq = 1s-1 原（旧）单位： 1 居里（Ci） =3.7×1010核衰变 / 秒 1毫居里（mCi）=3.7×107核衰变 / 秒 1微居里 (Ci) =3.7×104核衰变 / 秒 贝可与居里的换算关系如下: 1Bq =1s-1 = 2.703×10-11Ci 1Ci=3.7×1010Bq 1mCi=3.7×107Bq 1Ci=3.7×104Bq七、X射线 X射线的产生的条件： 1.电子源产生电子（灯丝）； 2.高电压场高