片溶出试验方法学验证

1、×××片溶出度试验方法学验证1、 溶出度 依据国家食品药品监督管理局国家药品标准新药转正标准第二十八册×××片溶出度试验方法、中国药典2010年版二部溶出度测定法（附录 C）的有关要求，并参照文献进行本品的溶出度研究。（1）溶出介质及介质体积的选择溶出介质应根据制剂的特性选用水、0.010.1mol/L盐酸溶液或适宜的缓冲液（pH值一般不超过7.6），应临用新制并经脱气处理。对于极难溶出的品种，可加适量表面活性剂，如十二烷基硫酸钠（0.5以下），如确需使用有机溶剂，可加适量，如异丙醇、乙醇等（通常浓度在5以下），但应有依据，并尽量选用

2、低浓度。溶出介质的体积一般应符合漏槽条件。×××在水中微溶，且本品为小规格品种（规格为2.5mg），根据以上溶出介质选择的原则及已有国家标准的方法，选择已有国家标准中采用的溶出介质及体积：0.1mol/L盐酸溶液盐酸溶液（91000）200ml。 （2）溶出方法及其转速的选择方法的选择一般可参照下列原则：对于非崩解型药物，宜采用转篮法。对于崩解型药物，在进行转篮法的整个试验过程中，确保转篮网孔的通透性尤为重要，对于处方中主药或辅料（如胶性物质）影响转篮通透性的固体制剂，一般应采用桨法。制剂中含有难以溶解、扩散的成分，一般应采用桨法。对飘浮于液面的制剂，一般应选用转

3、篮法。如辅料堵塞网孔则选用桨法，将供试品放入沉降篮中，并在正文中加以规定。采用小杯法时不能使用沉降篮。小杯法主要用于在转篮法和桨法条件下，溶出液的浓度过稀，即使采用较灵敏的方法仍难以进行定量测定的品种。转速选择的原则：在质量研究的基础上，尽量选择低转速，转篮法推荐100转/分，最低不得低于50转/分；桨法推荐50转/分，最高不超过75转/分；小杯法推荐35转/分，最高不超过50转/分。×××在水中微溶，且本品为小规格品种（规格为2.5mg），根据以上溶出方法选择的原则、转速选择的原则及已有国家标准的方法，选择已有国家标准中采用的溶出方法及转速：小杯法，50转每分钟

4、。 （3）溶出量测定方法的验证 线性关系考察与标准曲线的制备精密称取×××对照品14.6mg，置50ml量瓶中，加甲醇2ml溶解后，加盐酸溶液（91000）稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液。分别量取该对照品贮备液1、2、4、6、8、10、12ml，置100ml量瓶，分别加盐酸溶液（91000）稀释至刻度，摇匀。取上述各溶液，照紫外-可见分光光度法（中国药典2010年版二部附录 A），在238nm波长处分别测定吸收光度。以×××对照品浓度（µg/ml）为横坐标、吸光度（A）为纵坐标，绘制标准曲线，并对测得的数据进行回归分析，

5、回归方程为y=0.039x+0.0018，相关系数R2=0.9991，R=0.99955，结果表明，×××浓度在1.96230123.547612µg/ml范围内与吸光度呈良好的线性关系，结果见表9。表9 ×××线性关系考察试验数据浓度（µg/ml）X1.9623 3.9246 7.8492 11.7738 15.6984 19.6230 23.5476吸光度（Y） 0.078 0.157 0.309 0.471 0.595 0.768 0.929线性回归方程y=0.039x+0.0018相关系数R=0.99955

6、精密度试验避光操作。取本品（批号为20100904），照溶出度测定法（中国药典2010年版二部附录 C第三法），以盐酸溶液（91000）200ml为溶剂，转数为每分钟50转，依法操作，经30分钟时，取溶液适量，滤过，取续滤液作为供试品溶液。在同一溶出杯中，连续取样6份，照紫外-可见分光光度法（中国药典2010年版二部附录 A），在238nm波长处分别测定吸光度。6份样品吸光度测定值的平均值为0.481，RSD为 0.95%。试验数据见表10。表10 精密度试验数据试验号1 2 3 4 5 6吸光度（A） 0.479 0.485 0.476 0.478 0.488 0.480 平均值0.481R

7、SD（%）0.95干扰性试验按本品处方1000片处方为：×××（以×××计）2.5g、预胶化淀粉g、微晶纤维素g、羧甲淀粉钠g、硬脂酸镁g、乙醇ml比例称取除×××外的其余各辅料，照制备工艺项下的方法制备空白片。取空白片、样品，照溶出度测定法（中国药典2010年版二部附录 C第三法），以盐酸溶液（91000）200ml为溶剂，转数为每分钟50转，依法操作，经30分钟时，取溶液适量，滤过，取续滤液作为供试品溶液。另取×××对照品17mg，精密称定，置100ml量瓶中，加甲醇2m

8、l溶解后，加盐酸溶液（91000）稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置50ml量瓶中，加盐酸溶液（91000）稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。取上述三种溶液，照紫外-可见分光光度法（中国药典2010年版二部附录 A），在238nm波长处分别测定吸光度，计算溶出量。结果见表11。表11 专属性试验结果类别123456平均吸光度平均溶出量（%）相对于标示量的百分率（%）干扰样品0.4860.4710.4820.4890.4690.4850.48095.5995.59空白片0.0070.0050.0070.0090.0080.0060.0071.391.39无干扰对照品0.4730.473由以上试

9、验结果可知，本品辅料对溶出度测定的干扰小于2%，根据中国药典2010年版的有关规定，可忽略不计，即本品辅料对溶出度的测定无干扰。稳定性试验取精密度试验的溶出液适量，以30分钟溶出液的吸光度为起点（0时），照紫外-可见分光光度法（中国药典2010年版二部附录 A），在238nm波长处于0、1、2、4、8、12小时分别测定吸光度。吸光度测定值的平均值为0.477，RSD为1.78%。试验数据见表12。表12 稳定性试验数据时间（h）吸光度（A）吸光度平均值RSD（%）00.4860.4771.7810.48220.47940.48080.473120.462重复性试验避光操作。取本品（批号为201

10、00904），每次6片，共测定6次，照溶出度测定法（中国药典2010年版二部附录 C第三法），以盐酸溶液（91000）200ml为溶剂，转数为每分钟50转，依法操作，经30分钟时，取溶液适量，滤过，取续滤液作为供试品溶液。另取×××对照品17mg，精密称定，置100ml量瓶中，加甲醇2ml溶解后，加盐酸溶液（91000）稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置50ml量瓶中，加盐酸溶液（91000）稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。取上述两种溶液，照紫外-可见分光光度法（中国药典2010年版二部附录 A），在238nm波长处分别测定吸光度，计算出每片的溶出量。6次测定

11、溶出量的平均值为95.56，RSD为0.73%。试验数据见表13。表13 重复性试验数据试验号123456溶出量平均值溶出量平均值RSD195.3993.2092.6097.7894.7995.7994.9295.560.73296.7994.7997.9896.1995.3994.3995.92395.1996.3995.3993.7997.3896.5995.79495.7993.0091.2094.3996.9896.3994.62596.5995.3992.8096.7994.5997.3895.59695.5998.1897.7896.1995.1996.3996.55注：表中“列”

12、为片号，“行”为测定次数；数据的单位为“%”。回收率试验精密称取×××对照品24.1mg，置100ml量瓶中，按处方比例加入其它各辅料，先用2ml甲醇溶解，再加盐酸溶液（91000）稀释至刻度，摇匀，精密量取5m，置25ml量瓶中，用盐酸溶液（91000）稀释至刻度，摇匀，分别精密量取该溶液5、8、10ml，各3份，分别置25ml量瓶中，用盐酸溶液（91000）稀释至刻度，摇匀（分别为溶出50%、80%、100%时的紫外测定浓度），照紫外-可见分光光度法（中国药典2010年版二部附录 A），在238nm波长处分别测定吸光度。另取“重复性试验”项下×

13、15;×对照品溶液，同法测定。计算，平均回收率为98.57%，RSD为1.02%。试验数据如表14。表14 回收率试验数据试验号样品吸光度对照品吸光度测得量（mg）×××对照品加入量（mg）回收率（%）平均回收率（%）RSD（%）10.2560.47415.897416.195798.1698.571.0220.2620.47416.270016.1957100.4630.2600.47416.145816.195799.6940.4070.47415.796516.195797.5450.4130.47416.029316.195798.9760.41

14、00.47415.912916.195798.2570.5080.47415.773216.195797.3980.5150.47415.990516.195798.7390.5110.47415.866316.195797.97（4）溶出度均一性试验（批内）避光操作。取本品6片（批号为20100904），照溶出度测定法（中国药典2010年版二部附录 C第三法），以盐酸溶液（91000）200ml为溶剂，转数为每分钟50转，依法操作，在2、5、10、15、30、45、60分钟时，取5ml（同时补加同体积同温度的介质），用0.45µm微孔滤膜过滤，取续滤液作为供试品溶液。另取×

15、;××对照品17mg，精密称定，置100ml量瓶中，加甲醇2ml溶解后，加盐酸溶液（91000）稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置50ml量瓶中，加盐酸溶液（91000）稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。取上述两种溶液，照紫外-可见分光光度法（中国药典2010年版二部附录 A），在238nm波长处分别测定吸光度，计算出每片在不同时间的溶出量。试验数据见表15。表15 溶出度均一性试验数据批号片号2（分钟）5（分钟）10（分钟）15（分钟）30（分钟）45（分钟）60（分钟）20100904141.2573.5791.6297.9695.9897.7696.57239.66

16、71.9890.2396.5796.7795.1897.17342.4474.3694.7998.1696.1894.7995.38441.6472.3893.2096.3798.1696.3794.59540.2670.7989.4398.3698.5796.5796.18640.6573.1792.8097.9697.3696.9795.58平均40.9872.7192.0197.5697.1796.2795.91RSD2.441.742.160.881.081.160.96注：上表中数据的单位为“%”结果表明，自制品制剂中×××的溶出度均一性较好。（5）重现

17、性试验（批间）取本品3个批号样品（批号为20100904、20100905、20100906），按上述“溶出度均一性试验（批内）”的方法进行试验，试验结果见表16。表16 重现性试验数据批号片号2（分钟）5（分钟）10（分钟）15（分钟）30（分钟）45（分钟）60（分钟）20100904140.7475.1293.6097.1796.7896.3895.38243.1274.9290.8196.5896.5897.9796.58340.3476.3191.6196.5896.7895.9896.18442.5273.1394.9997.7796.3895.5895.78542.5273.72

18、93.2096.9897.1795.7896.38641.7374.1292.6096.1895.1896.7894.59平均41.8374.5592.8096.8896.4896.4195.8220100905139.5871.6391.6296.9696.3795.7895.18237.6073.8191.8297.5695.7895.1894.19339.9770.2590.4395.7895.1896.3793.80438.9869.2688.8595.7897.5695.1893.00538.3968.6693.6097.5696.3795.7895.78639.7870.2591.

19、2297.3695.7896.3794.39平均39.0570.6491.2696.8396.1795.7894.3920100906140.6273.4890.2194.7995.7894.9994.59241.2272.8888.6295.7894.7994.5994.19340.6273.6888.0296.3893.7995.3993.60441.0274.4891.0095.5895.1994.3993.40540.0371.2990.8194.3996.1893.7995.19638.0472.4988.8294.9995.7894.7992.80平均40.2673.0589.58

20、95.3295.2594.6693.963批样品平均40.3872.7591.2196.3495.9795.6294.72RSD3.452.711.770.920.670.931.03注：上表中数据的单位为“%”结果表明，自制品制剂中×××的溶出度重现性较好。（6）滤膜吸附的验证按上述“重复性试验”的方法进行试验，取样后一份不过滤，直接采用高速离心，取上清液测定；另一份采用过滤法，取所得的续滤液测定，考察两者间测定数据的差异。试验结果见表17。表17 滤膜吸附验证试验数据方法吸光度相对平均偏差（%）离心法0.4530.55过滤法0.448由试验结果可知，溶出液采用离心法与过滤法无显著差异，故用0.45µm微孔滤膜过滤对测定结果无影响。（7）溶出度测定取自制3批样品（批号为20100904、20100905、20100906）及1批参比制剂（批号为100107）进行溶出度测定。按中国药典2010