用MacELISA法检测病毒性心肌炎患者血清中柯萨奇B组病毒IgM抗体

1、    用Mac ELISA法检测病毒性心肌炎患者 血清中柯萨奇B组病毒IgM抗体        【摘要】目的了解北京地区病毒性心肌炎的病毒感染状况。方法用IgM抗体捕捉ELISA(Mac ELISA)，检测193例临床诊断为病毒性心肌炎患者血清中的Cox B 16型病毒特异性IgM抗体。结果Cox B病毒IgM抗体阳性检出率为69.9%(135/193)，其中阳性检出率最高为B3型，占40%(54例)；其余依次为B2型，占29.6%(40例)；B4型占1

2、8.5%(25例)；B1型占7.4%(10例)；B5型占3.0%(4例)；B6型占1.5%(2例)。而181例同年龄组非心肌炎患者IgM抗体阳性检出率为20.4%(37/193)。病毒性心肌炎患者血清中的Cox B IgM抗体阳性检出率明显高于非心肌炎患者，两者差异有显著性，U9.56，P0.01。结论Cox B感染是病毒性心肌炎的主要病因。【主题词】柯萨奇病毒B组；心肌炎；酶联免疫吸附测定；IgM Detection of Coxsackie B virus IgM antibody in myocarditis patients by Mac ELISAZHU Hui, ZHANG Lib

3、i（Institute of Virology, Chinese Academy of Preventive Medicine,Beijing 100052, China）【Abstract】ObjectiveTo detect Coxsackie B virus type 1-6 IgM antibodies from 193 clinically diagnosed myocarditis cases. MethodsThe capture IgM ELISA (Mac ELISA) test wass used. ResultsThe total positive rate of Cox

4、sackie virus B 1-6 IgM antibody in myocarditis patients was 69.6% (135 cases), among which Cox B3 type was as high as 40% (54 cases) of the total positive patients. The others were 29.6% (40 cases),18.5% (25 cases),7.4%(10 cases),3.0% (4 cases), 1.5%(2 cases) of Cox B2,Cox B4,Cox B1,Cox B5 and Cox B

5、6 respectively. Meanwhile only 20.4% (37 cases) Cox B IgM positive cases could be detected in 181 non-myocarditis patients of same ages. The results showed that the positive rate of Cox B virus IgM antibody in clinically diagnosed myocarditis was significantly higher than that in control group (P0.0

6、1). ConclusionThe Cox B viruses may be the main agents causing viral myocarditis in Beijing cases. Mac ELISA is an easy， rapid，specific and sensitive method to detect Cox B virus IgM antibody for early and rapid diagnosis of myocarditis.【Key words】Coxsackie B viruses;Myocarditis;Enzyme-linked immuno

7、sorbent assay;IgM柯萨奇B组病毒(Cox B)隶属于小RNA病毒科，其感染可引起人类病毒性心肌炎、无菌性脑膜炎、新生儿全身性感染等多种疾病1。据近年来报道急性病毒性心肌炎和心包炎多数情况下是由柯萨奇B组病毒引起的。这类感染在免疫功能正常的患者最初临床症状易被忽视，一部分病例可以自愈，但也可能发展成严重的症状2。临床上主要靠检测特异性IgM抗体分析其可能病因。本文即报道了Cox B 16型IgM抗体的检测结果。1材料和方法1.1标本来源1996年1月至1998年10月于北京市儿童医院、北京医科大学附属第一医院、首都儿科研究所、铁路总医院、中日友好医院、北京友谊医院、中国中医研究院

8、北京广安门医院等北京市各医院送检的3至28岁临床诊断的病毒性心肌炎患者血清193例，其中男性95例、女性98例。同年龄组非心肌炎患者血清(临床诊断为发热待查、呼吸道感染、无菌性脑膜炎、腹泻、过敏性紫癜、Torch等)181例，其中男性81例、女性100例。1.2病原血清学检测193例临床诊断为病毒性心肌炎患者和181例非心肌炎患者静脉血分离血清，应用本实验室自行研制的检测Cox B 16分型IgM抗体的Mac ELISA法试剂盒在同等条件下进行检测。具体操作按参考文献3。2结果193例病毒性心肌炎患者中有135例的Cox B IgM抗体阳性，阳性检出率为69.9%(135/193)。其中B3型

9、为54例，占阳性病例的40%(54/135)；B2型为40例，占阳性病例的29.6%(40/135)；B4型为25例，占阳性病例的18.5%(25/135)；B1型为10例，占阳性病例的7.4%(10/135)；B5型为4例，占阳性病例的3.0%(4/135)；B6型为4例，占阳性病例的1.5%(2/135)。而181例同年龄组非心肌炎患者(临床诊断为：发热等查30例、呼吸道感染30例、无菌性脑膜炎30例、腹泻30例、过敏性紫癜30例、Torch 31例)Cox B IgM抗体阳性者共37例检出率为20.4%(37/181)，结果见表1。在非心肌炎患者中发热待查患者Cox B组病毒IgM抗体的

10、检出率最高占12.2%(22/181)。诊断为过敏性紫癜30例患者和Torch 31例患者均没有检出阳性，结果见表2。在病毒性心肌炎患者Cox B组病毒IgM抗体阳性病例中男性为69例、女性为66例；在非心肌炎患者Cox B组病毒IgM抗体阳性病例中男性为23例、女性为14例，两组患者Cox B组病毒IgM抗体检出率在性别上差异都无显著性。在同一年份心肌炎患者组和非心肌炎患者组Cox B组病毒各型别的IgM抗体检出率相差不大。北京地区心肌炎患者与非心肌炎患者历年检出的阳性率都以B3为主，其次为B2，B5、B6很少。心肌炎患者Cox B IgM抗体检出率均高于非心肌炎患者。在北京地区病毒性心肌炎

11、患者1996年至1998年期间各年份以及每年四季柯萨奇B组病毒感染患者均有发生，无明显年度间和季节间差异。青少年各年龄组病毒性心肌炎患者中都有Cox B组病毒IgM抗体的检出，其中检出率较高的是3至8岁这一年龄段。在成年人非心肌炎组19岁以上送检病例只有9份且无Cox B IgM抗体检出，这可能与标本量少和采集时间有关。见表3和表4。3讨论柯萨奇B组病毒是引起病毒性心肌炎的主要病原之一，现已被众人所关注。本次对北京地区临床诊断为病毒性心肌炎病人的检测结果Cox B IgM抗体阳性率高达69.9%。其临床表现多为胸闷、气短、胸痛、心悸、心慌、早搏、心率失常；心肌酶谱高于正常值；心电多为ST段变化

12、、T波倒置。病例分布较均匀，各年份以及每年四季均有散发。在病原型别上不论是心肌炎组和非心肌炎组均以Cox B 3最高，前者阳性检出率占心肌炎组阳性总数的40%(54/135)，后者为非心肌炎组Cox B IgM抗体检出总数的43.2%(16/37)。说明北京地区1996年至1998年由Cox B组病毒引起的疾病是以B3型为主。在性别上两组患者差异不明显。在年龄方面病毒性心肌炎组患者在3到8岁的Cox B阳性检出率高，表明北京地区儿童中病毒性心肌炎柯萨奇B组病毒感染是主要病因。但是在19至28岁这一年龄段的病毒性心肌炎患者中仍可检测到Cox B IgM抗体阳性，说明柯萨奇B组病毒仍是其重要病原之

13、一。本次的非心肌炎对照组患者是临床疑似柯萨奇B组病毒感染的病例，这与正常阴性对照组有所不同。因此，在非心肌炎组中相当一部分病人也检测到Cox B IgM抗体。在年龄上也以3至11岁为多，但其阳性率比心肌炎组为低。说明北京地区儿童时期感染Cox B 组病毒相当普遍，其中一部分表现为心肌炎。有人认为过敏性紫癜与Cox B组病毒感染有关4。但在本次检测过程中本对照组的过敏性紫癜病例30例均没有检出阳性。而Torch病主要是巨细胞病毒、风疹病毒、弓形体感染所致。本结果也显示31例Torch病人的Cox B 16 IgM抗体均为阴性。发热待查患者Cox B组病毒IgM抗体检出率占非心肌炎患者的59.4%

14、。为此如遇少年儿童的发热待查病例应考虑到有Cox B组病毒感染的可能，必要时可作血清学诊断。本实验室建立的检测Cox B组病毒IgM抗体Mac ELISA法具有特异性、敏感性且重复性好等特点。比中和实验、病毒分离和免疫酶染色法5敏感、简便、快速，结果判断也较客观。IgM抗体的检出代表近期感染对早期病原诊断有重要意义；对指导治疗有一定的帮助。表11996年至1998年心肌炎患者及非心肌炎患者Cox B组病毒IgM抗体检出情况Tab.1Detection of Cox B virus specific IgM antibody from 1996 to 1998 in myocarditis an

15、d non-myacarditis patients病例Patients年份Year检测数Detected cases阳性数Positive cases阳性率(%)Positive rateCox B IgM抗体阳性数Positive number for Cox B virus IgM antibodyB1B2B3B4B5B6心肌炎组1996644773.431519811Myocarditis1997654975.4416179211998643960.93918810非心肌炎组1996601220.0145110Non-myocarditis1997611321.314610119986

16、01220.0145110     表2非心肌炎患者Cox B IgM抗体阳性分布情况Tab.2Distribution of Cox B virus specific IgM antibody in non-myocarditis cases病名Clinical diagnosis例数CaseCox B IgM抗体阳性数Positive number for Cox B virus IgM antibody阳性数Positive cases阳性率(%)Positive rateB1B2B3B4B5B6发热待查Unknown fever300911110

17、2273.3呼吸道感染Respiratory infection30104000516.6无菌性脑膜炎Aseptic meningitis30000120413.3腹泻Diarrhea30230001620.0紫癜Allergic purpura3000000000Torch3100000000     表31996年至1998年心肌炎患者Cox B组病毒IgM抗体阳性病例各季节的分布情况Tab.3Distribution of Cox B virus induced myocarditisspecific IgM antibody in 1996 to

18、 1998年份Year春季Spring夏季Summer秋季Autumn冬季Winter小计Total19961210141046199711121511491998131215-40合计Total36344421135     表4不同年龄组Cox B组病毒IgM抗体阳性病例的分布情况Tab.4Distribution of Cox B virus specific IgM antibody in different age groups病例Patients35岁3-5 yrs.68岁6-8 yrs.911岁9-11 yrs.1214岁12-14 yrs.1518岁15-18 yrs.1923岁19-23 yrs.2328岁23-28 yrs.心肌炎组Myocarditis检测数No.detected53403220201810阳性数Positive no.46391714874阳性率(