糖类测定方法大全

1、糖类测定方法大全(一) 测定方法概述,物理法(密度法.折光法，旋光法) 还原标法(高镭酸钾法、直接滴定法、 单糖蓝爱农法、斐林氏法、铁新化钾法、低聚糖二硝基水杨酸比色法)碘量法(测定醛糖) 色谱法气相色谱法液相色谱法 酶法 葡弱糖氧化酶一葡萄糖 P半乳糖脱氢前一半乳糖、乳糖淀粉 水解成单糖T测定，旋光法 多耕1果胶重量法，比色法、纤维重量法(二)可溶性糖类的提取和澄清1、提取液制备(1)常用提取剂-水、乙醇(2)提取液中含糖量控制 0.53.5mg/mL(3)含脂肪食品先脱脂，然后用水提取(4)含淀粉及糊精食品(乙醇沉淀淀粉等)用 7075%乙醇溶液提取(5)含乙醇及CO2液态食品，蒸发至1/

2、31/4原体积，以除去C2H50H及CO2(6)酸性食品应先中和防止低聚糖部分水解(7)提取固体样品有时需要加热，以提高提取效果。一般在4050C,防止多糖溶出(8)乙醇作提取剂加热时应安装回流装置2、提取液的澄清(1)影响测定的杂质色素、蛋白质、果胶、可溶性淀粉、有机酸、氨基酸、单宁，可影响颜色、浑浊、过滤困难。(2)澄清剂醋酸铅(中性)Pb (CH3C00 2 3H20,形成沉淀，吸附杂质，可除去蛋 白质、果胶、有机酸、单宁等。乙酸锌和亚铁氟化钾二者生成氟亚铁酸锌，吸附蛋白质等干扰物。硫酸铜和氢氧化钠Cu离子使蛋白质沉淀。(3)澄清剂用量用量适宜，以无新沉淀为准，如 2ml饱和醋酸铅(30

3、%)、（4）除铅剂由于铅影响还原糖的测定，生成铅糖化合物常用除铅剂有草酸钠、硫酸钠、磷酸氢二钠（三）蓝一爱农（Lane-Eynor） 法测定还原糖（国际上常用的定量糖的方法）1、原理斐林试剂甲液（CuS045H20）斐林试剂乙液（洒石酸钾钠+NaOH）甲、乙混合一酒石酸钾钠合铜酒石酸钾钠合铜+葡萄糖一葡萄糖酸+ Cu20；（红棕）终点的确定：葡萄糖+亚甲基蓝（氧化态） 一亚甲基蓝（还原态）过量 兰色无色（兰色消失）终点时的颜色为：兰色消失了的红棕色2、测定预测准确吸取斐林试剂甲液5.00mL、乙液5.00mL-锥形瓶中，至沸腾，再加入 亚甲基蓝指示剂，在加热的条件下，用样液滴至蓝色褪尽。（先快

4、后慢，要求很快达到终点，因为亚甲基蓝易被空气氧化为蓝色， 且要求在加热的情况下以除去 空气）测定甲液5mL、乙液5mg锥形瓶中，加入比上述预测量少0.51ml样液在2min 内沸腾，维持沸腾2min ,加入3滴亚甲基蓝指示剂，再在3min内滴定至蓝色褪3、计算X 100还原糖 =(V1/V ) x mm-样品质量，mg; V1-W定量mL; V-样液总mL;F-还原糖因素，10mL费林试剂，相当的还原糖量 mgF的求得有两种方法：A、用标准还原糖液用上面同样方法标定 10ml费林试剂求得。B、查蓝一爱农法专用 还原糖因数表”附表例若 V1=26 则 F=49.9（四）直接滴定法测定还原糖1、原

5、理（GB/T5009.7-1985）斐林试剂甲液（CuS045H2O+亚甲基蓝），斐林试剂乙液（洒石酸钾钠+NaOH+ 亚铁氟化钾，混合一酒石酸钾钠合铜，酒石酸钾钠合铜+W萄糖一葡萄糖酸+ Cu20；（红棕），亚铁氟化钾使 Cu20；（红棕）生成无色络合物 K2Cu2Fe（CN）6Cu2O + K4Fe（CN） 6 + H2O - K2Cu2ReCN） 6 + 2KOH红棕无色终点的确定：葡萄糖+亚甲基蓝（氧化态）一亚甲基蓝（还原态过量 兰色无色2、测定碱性洒石酸铜溶液的标定（乙液（内有亚铁氟化钾）取甲、乙液各5.00mL,加入99.5ml葡萄糖标准溶液（1mg/mL）, 2min内沸腾,准确

6、沸腾30s,滴至蓝色褪去，记下消耗葡萄糖 V1。F = CV1（F-10mL斐林试剂相当于葡萄糖质量，mg; C-徜萄糖7浓度mg/mL; V1-葡萄 糖液消耗体积） 预测： 吸取甲、乙液各5.00mL,加水10mL, 2min内至沸，准确沸腾30s, 用样液滴定至蓝色褪去，记录 V样液预测测定： 吸取甲、乙液各5.00mL,加入预测样液V少1mL样液，, 2min内 沸腾，准确沸腾30s,继续滴定至蓝色褪去，记下 V23、计算F还原糖 = X100（V2/V ） x mF- 10mL斐林试剂相当于葡萄糖质量，mgV2-W肖耗样液白体积，mlV-样液定溶的总体积，mlM-样品的质量，mg（五）

7、高钮酸钾法测定还原糖1、原理 （GB/T5009.7-1985）还原糖与洒石酸合钠反应生成 Cu2aCu2O + 2Fe3+ + 2H+ - 2Cu2+ + 2Fe2+ + H2O10Fe2+ + 2MnO4-+16H+ - 10Fe3+ + 2Mn2+ + 8H2O5mol Cu2O!当于 2molKMnO4由KMnO4耗量求出Cu2O量，再由Cu2O检索表得出相当的还原糖量。2、适用范围及特点适用于各类食品中还原糖的测定，有色样液不受限制，准确度高，重现性好，但 费时，需检索表。3、测定：吸取样液50ml于烧杯中，加费林试剂甲、乙各25mL,z , 4min内沸腾, 2min趁热在古氏地竭

8、中抽滤，60c热水洗涤去滤液。保留Cu20；,将培竭用硫 酸铁溶液50mL分数次将Cu2O溶解，滤入吸滤瓶中，热水洗涤，加入20mL2 mol/L H2SO4用KMnO4溶液滴至微红色，同时作空白试验（V0）。4、计算X=CMnO4-X （V-Vo） x）（5/2143.08（MCu2O）A还原糖（尸 X 100mX V2/V1 X 1000X-Cu2O量mg, A-由x查出还原糖量 mg, m-样品质量g,如：x=105.8 A=46.0, 也可以参考 P89 （5-2） m1 （ A） = 0.4388x-0.4805（六）蔗糖的测定1、原理：蔗糖经用HCl水解，使蔗糖转化为还原糖，然后按

9、还原糖测定方法， 分别测定水解前后样液中还原糖含量，两者之差即为由蔗糖水解产生的还原糖 量，乘以一个换算系数0.95即蔗糖2、测定：吸取样液2份各50ml,其中一份直接加入100ml容量瓶中，用水稀 释至刻度。另一份加入5ml 6M HCl,置6870c水浴加热15min冷后加入100ml容量瓶加2滴甲基红，用20%NaOH中和至中性，加水至刻度。然后用直接滴定法或高钮酸钾法测定还原糖含量。3、结果计算蔗糖（）=（转化后还原糖转化前还原糖）X0.950.95-蔗糖+ H2O =葡糖+果糖34218180180转化糖换成蔗糖系数=342/360 = 0.95（七）总糖分的测定食品中的总糖分包括还

10、原性糖（葡、果、孚L、麦芽糖）和蔗糖，反映的是可溶性单糖和低聚糖的总量，为常规分析项目是麦乳精、糕点、果蔬罐头、饮料质量指标。1、原理：同蔗糖的测定2、测定：按测定蔗糖的方法水解样品，再测定还原糖量3、计算m样品质量mgF10ml斐林试剂相当于葡萄糖质量，mg；V1、V2一样品总体积、消耗样品液体积50/100稀释比例（八）淀粉的测定1、酸水解法淀粉一盐酸水解一葡萄糖一测定还原糖2、酶水解法淀粉一酶水解一葡萄糖一测定还原糖3、旋光法(九)食物中不溶性膳食纤维的测定1、实验原理在中性洗涤剂的消化作用下，样品中的糖、淀粉、蛋白质、果胶等物质被溶 解去，不能消化的残渣为不溶性膳食纤维， 主要包括纤维

11、素、半纤维素、木质素、 角质和二氧化硅等，并包括不溶性灰分。2、测定步骤(1)取样1.00g,置高型无嘴烧杯中，如样品脂肪含量超过10%,需先去除脂肪， 即样品1.00g,用石油醴(30-60 C )提取3次，每次10mL(2)加2.5%a-淀粉酶溶液20mL,于37c (或者水浴锅)恒温箱中保温1小时。(3)加100mL中性洗涤剂溶液，再加0.5g无水亚硫酸钠。(4)电炉加热，5-10min内使其煮沸，移至电热板上，保持微沸1h。(5)将耐酸玻璃滤器洗净，移至烘箱内，110c4h,取出置干燥器中，冷至室温，称量，得m1 o(6)将煮沸后样品趁热倒入滤器中，用水泵抽滤。用 500mL热水(90

12、-100C), 分数次洗烧怀及滤器，抽滤至干。洗净滤器下部的液体和泡沫，塞上橡皮塞。(7)于滤器中加丙酮，液面需覆盖纤维，保持 5分钟，除去底部塞子，抽干， 再以丙酮洗2次。(8)将滤器置烘箱中，110C4h,取出，置干燥器中，冷至室温，称量，得 m2。 3、结果计算m2 m1X (%)=X 100m式中：X一样品中不溶性膳食纤维的含量 ;m1滤器的质量，g；m2一滤器及样品中纤维的质量，g ；m一样品质量，g。(十)果胶物质的测定常用测定方法：重量法、咔唾比色法1、重量法原理样品+ 70%L醇果胶J f分别用乙醇、乙醴洗涤( 除糖、脂肪、色素)-残渣-分别用水、酸提取 -提取液+NaOH-果胶酸钠+CH3COOH果胶酸+CaCl2累胶酸钙；-烘干-称重2、适用范围及特点：适用于各类食品，方法稳定可靠，但费时，易夹杂。3、测定样品处理A.新鲜样品切片+无水乙醇-沸水浴中回流15min-过滤-残渣-分别用乙醇、乙醴洗涤 - 残渣B.干燥样品研细过筛-称样+ 70%乙醇-过滤（反复） -残渣-分别用乙醇、乙醴洗涤-残 渣提取A水溶性果胶：残渣-水沸腾1h 却-定容-过滤（弃去粗滤液）-水溶性 果胶提取液。B总果胶：残渣+0.05mol/L HCl 沸水浴中回流1h （装冷凝管）-冷却 +0.05mol/LNaOH,中性红，中和-定容（250ml）-过滤（弃去粗滤液）-总