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文档简介
1、分子生物学【生化部分】一、真题汇编:(一)名解:2000:移码突变、累积反馈抑制2001 :拓扑异构酶、启动子(促进子)、同义密码子(简并密码子)、蛋白质的后修饰作用、 操纵子2002 :内含子introns与外显子exons、基因突变、反向转录、阻遏、基因组、蛋白质组2003:拓扑异构酶、翻译的后修饰作用、增强子与沉默子、顺式作用元件、反式作用因子2004:内含子与外显子、启动子、三联体密码、增强子、基因重组、定点突变、正调控与负调控、结构基因、端粒酶2005:遗传密码、DNA半保留复制、启动子、RNA逆转录、单价反馈抑制、反义RNA( antisense)、 内含子、回文结构2006:伴娘
2、蛋白、核酶、DNA转化(作用)、移码突变、半保留复制2007:操纵子、转化(作用)、核酸分子杂交、外显子、 PCR端粒酶、重组、密码的通用性2009:反向重复序列、核酸分子杂交、复制叉、PCR ORF2010: Site-directed mutagenesis、Western blotting、Restriction endonuclease、Semiconservative replication 、 Operon2011 : Restriction map、Coding strand、Operon2012 : Western blot、Palindrome and reversed re
3、peat sequence of DNA 回文结构、PCR Semiconservative replication of DNA2013 : Northern blot、Polycistronic mRNA 多顺反子2014 : Human Genome Project ( HGP)、Probe2015 :分子伴侣(伴娘蛋白 chaperone)、退火(annealing)2016:(二)简答题20001、试论述乳糖操纵子的调节机理(10)2、试述半保留复制的机理(10)3、阐述DNA聚合酶I、II、III的作用机制(10)20021、以两种DNA作为模板进行 RNA合成,得到下列数据,请判
4、断是对称转录还是非对称转 录,为什么? ( 10)2003 1、试述大肠杆菌 DNA聚合酶I、II、III的作用特点(10)2、真核生物中的基因增强子(enhancer)和上游激活序列(upstream activation sequence )有何异同(5)3、DNA复制的方式有几种?它们各有何特点? (10)4、基因内含子是普遍存在于真核生物基因中的一段核甘酸序列,现已发现的基因内含子共有几种类型?每种类型的基因内含子有何种功能和特点?从进化的角度讲,你认为基因的内含子是从一开始就存在于基因中,还是在后来白进化过程中插入到基因中去的? (10)5、在原核和真核生物的基因组中都存在着各种转座
5、因子( transposable element),它们有 何重要的生物学意义(5)6、简述癌形成的分子生物学基础(10)7、如何解释人体结构的复杂性和基因数目较少之间的矛盾? (10)20041、简要说明分子遗传的中心法则(5)2、试述DNA的半保留复制与半不连续复制(10)3、原核生物的基因结构与真核生物的基因结构有何异同(10)4、简要叙述原核生物基因的表达调控机制(10)5、简要叙述原核生物和真核生物DNA复制的特点(10)6、原核生物的基因组中存在着的转座因子( transposable element)有哪几种?它们有何种 结构(10)7、简述克隆原核和真核生物基因的过程(10)2
6、0051、试述半保留复制的实验依据(10)2、从DNA的复制、转录、翻译过程论基因表达的忠实性(10)20061、简述端粒及端粒酶的作用机制(10)20071、多肽链合成后如何加工修饰(10)2、【同2002】以两种DNA作为模板进行 RNA合成,得到下列数据,请判断是对称转录还是非对称转录,为什么? (10)3、噬菌体T-DNA的相对分子质量为1.3X108(双链),假定全部核甘酸均用于编码氨基酸, 试问:(1) T-DNA可为多少氨基酸编码?618(2) T-DNA可为多少相对分子质量等于的不同蛋白质编码?(核甘酸相对分子质量按 计,氨基酸按120计)(10)20081、一种喋吟和喀咤的生
7、物合成抑制剂往往可以用作抗癌药或抗病毒药,为什么? (8)20091、试述真核细胞基因转录起点上游与基因表达调控有关的主要顺式作用元件有哪些?其主要作用是彳f么? ( 6)2、为什么说大肠杆菌的 DNA polymerase I是一个多功能酶? ( 6)2010 无20111、【同2009】大肠杆菌的DNA polymerase I的多功能体现在哪些方面? (10)20121、DNA的精确复制是如何实现的? (5)20131、试述蛋白质、核酸、脂肪、糖原人工合成(蛋白质与核酸)及生物合成(复制)的方向(10)2、试述真核mRNA的特征及其功能;如何利用其特点用于mRNA的分离纯化(10)201
8、41、简述密码子的简并性与变偶性的关系及其生物学意义(5)20151、请简要说明下列技术的原理及用途:Western blot、Northern blot、Southern blot、ELISA(10)2、试述在分子生物学研究中Oligo-dT或Oligo-U-Sepharose亲和层析的用途及其原理(5)(三)实验题2004:简述克隆原核和真核生物基因的过程(10)2012:分离制备真核 mRNA2015 :请简要说明下列技术的原理及用途:Western blot、Northern blot、Southern blot、ELISA(10)2016 :需要建立某种动物体内特定蛋白质的原核表达系
9、统,直接从该动物基因组中克隆编码该种蛋白的基因,再构建表达载体转入大肠杆菌中进行生产是否可行?说明原因。如何检测并判断大肠杆菌是否成功实现该蛋白表达?请说明详细过程。(8)(四)小题1、DNA-DNA、DNA-RNA碱基配对关系;碱基组成比例关系2、蛋白质生物合成:方向、氨基酸活化过程(活化形式、酶)、 mRNA读码方向、3、缩写:cAMP、DDDP、DDRR RDDR tRNAfMet、SSB pGp4、基因表达调控:诱导、阻遏、操纵子5、蛋白质工程包括:基因定点突变、蛋白质设计6、真核原核复制异同、复制酶、翻译异同(首个氨基酸)、翻译全过程、GTP在翻译中的作用7、真核mRNA结构、加工过
10、程8、各种DNA pol的活性9、DNA复制、转录、翻译方向10、没有密码子的氨基酸、遗传密码特点、密码子反密码子配对(摆动序列)11、反式作用因子:锌指与谁结合12、回文结构13、原核RNA聚合酶14、ORF SD信号肽、增强子(作用机制)15、反义 RNA、16、化合物对复制、转录、翻译的影响二、复习攻略(一)名词解释1、半不连续复制(semi-discontinuous replication ):DNA复制时,一条链(前导链)是连续 合成的,而另一条链(后随链)的合成却是不连续的。 双链DNA合成时5'-3'端是连续合成, 而3'-5'端则是不连续合成。
11、2、复制子(replicon):基因组能独立进行复制的单位称为复制子( replicon)。每个复制 子都含有控制复制起始的起点(origin),可能还有终止复制的终点(terminus)。3、点突变(point mutation ):指DNA分子上一个碱基的改变。4、诱变剂(mutagen):凡是能引起生物体遗传物质发生突然或根本的改变,使其基因突变或染色体畸变达到自然水平以上的物质,统称为诱变剂5、Holiday中间体(Holiday intermediate ):同源重组中连接两个DNA双链的交换中间物含有4股DNA链,在连接处为了转换配对所形成交叉链的连接点,这种结构称Holiday中
12、间体。6、转座子(transposon):可从一个染色体位点转移到另一个位点的分散的重复序列,含 两个反向重复序列、一个转座酶基因和其他基因(如抗生素抗性基因)。7、转座、转位(transposition ):是指 DNA的片段或基因从基因组的一个位置转移到另一个位置的现象。8、重组修复(recombination repair ):DNA复制时,损伤部位导致子链DNA合成障碍,形成空缺;此空缺诱导产生重组酶(重组蛋白RecA),该酶与空缺区结合,并催化子链空缺与对侧亲链进行重组交换;对侧亲链产生的空缺以互补的子链为模板,在DNA聚合酶和连接酶的催化下,重新修复缺口;亲链上的损伤部位继续保留或
13、以切除修复方式加以 修复。9、同源重组(homologous recombination ):发生在同源 DNA序列之间的重组称为同源重 组。10、接合(conjugation):当细胞与细胞相互接触时,DNA分子即从一个细胞向另一个细胞转移,这种遗传物质的转移方式称为接合作用( conjugation ) o11、不对称转录 (asymmetric transcription ):指以双链 DNA中的一条链作为模板进行转录, 从而将遗传信息由DNA传递给RNA。对于不同的基因来说,其转录信息可以存在于两条不同的DNA链上。能够转录 RNA的那条DNA链称为有意义链(模板链),而与之互补的另一
14、 条DNA链称为反意义链(编码链)。12、b因子(b factor):原核生物中与 RNA聚合酶核心酶相结合而特异性识别启动子选 择转录起始点的一个蛋白质亚基。13、Pribnow box:在原核生物中的启动子通常长约60bp ,存在两段带共性的顺序,即5'-TTGACA-3和5'-TATAATG-3'其中富含 TA的顺序被称为 Pribnow盒。14、Hogness box:真核生物的启动子中也存在一段富含TA的顺序,被称为Hogness盒或TATA盒。15、逆病毒(retrovirus ):逆转录病毒是 RNA病毒的一种,它们的遗传信息不是存录在脱 氧核糖核酸(DN
15、A),而是存录在核糖核酸(RNA)上的,此类病毒多具有逆转录聚合月每。16、端粒酶(telomerase):逆转录酶,由 RNA和蛋白质组成,RNA组分中含有一段短的模 板序列与端粒DNA的重复序列互补,而其蛋白质组分具有逆转录酶活性,以RNA为模板催化端粒DNA的合成,将其加到端粒的3'端,以维持端粒长度及功能。17、小 RNA (micro RNA):18、核酸酶(nuclease):作用核酸链的磷酸二酯键产生寡聚核甘酸和单核甘酸。19、 RNA编辑(RNA editing)20、假尿核音(pseudouridine )21、RNA 干扰(RNA interference )22、
16、核蛋白体循环(ribosomal cycle):活化氨基酸在核蛋白体上反复翻译 mRNA上的密码 并缩合生成多肽链的循环反应过程, 称为核蛋白体循环。由进位,成肽和转位3个步骤循环 进行,直至终止阶段。23、蛋白质投递(protein targeting )24、框移突变、移码突变(frameshift mutation ):基因突变导致 mRNA密码子碱基被置换, 引起突变点之后的氨基酸残基顺序全部发生改变。25、同义突变(synonymous mutation ):基因突变导致 mRNA密码子第三位碱基的改变但 不引起密码子意义的改变,其翻译产物中的氨基酸残基顺序不变。26、错义突变(mi
17、ssense mutation ):基因突变导致 mRNA密码子碱基被置换,其意义发生 改变,翻译产物中的氨基酸残基顺序发生改变。27、无义突变(nonsense mutation ):基因突变导致 mRNA密码子碱基被置换而改变成终止 暗码子,引起多肽链合成的终止。28、翻译后修饰(posttranslational modification ):见真题答案29、起始因子(initiation factor , IF):这是一些与多肽链合成起动有关的蛋白因子。原核生物中存在3种起动因子,分别称为IF1-3。在真核生物中存在 9种起动因子(eIF)。其作用主要是促进核蛋白体小亚基与起动tRNA
18、及模板mRNA结合。30、延伸因子(elongation factor , EF):原核生物中存在 3种延长因子(EFTU EFTS EFQ), 真核生物中存在2种(EF1, EF2)。其作用主要促使氨基酰tRNA进入核蛋白的受体,并可促进移位过程。31、释放因子(relaese factor, RF):原核生物中有 4种,在真核生物中只有1种。其主要作用是识别终止密码,协助多肽链的释放。32、第二遗传密码(second genetic code)33、tRNA 中反密码子稀有成分( anticodon rare ingredient in tRNA )34、碱基互补规律( principle
19、 of complementary base pairing ):自己写35、多核蛋白体、多聚核糖体(polyribosome、polysome):细胞内多个核蛋白体连接在同 一条mRNA分子上,进行蛋白质合成。这种聚合体称为多核蛋白体。36、抑制子 tRNA (suppressor RNA)37、泛素(ubiquitin )38、信号识别颗粒(signal recognition particle , SRB39、无义抑制子( nonsense suppressor)40、单核甘酸多态性(single nucleotide polymorphism , SNP)41、代谢调节(metabol
20、ic regulation )42、管家基因(housekeeping gene ): 组成性基因表达( constitutive gene expression ) 是指 在个体发育的任一阶段都能在大多数细胞中持续进行的基因表达。其基因表达产物通常是对生命过程必需的或必不可少的,且较少受环境因素的影响。这类基因通常被称为管家基因 (housekeeping gene)。43、结构基因(structural gene )44、弱化子、衰减子(attenuator )45、基因扩增(gene amplification )46、沉默子(silencer):能够对基因转录起阻遏作用的DNA片段,属
21、于负性调控元件。47、基因表达诱导(gene expression induction ):指在特定环境因素刺激下,基因被激活, 从而使基因的表达产物增加。这类基因称为可诱导基因。48、基因表达阻遏(gene expression repression):指在特定环境因素刺激下,基因被抑制,从而使基因的表达产物减少。这类基因称为可阻遏基因。49、安慰诱导物(gratuitous inducer )50、前馈(feedforward )51、能荷( energy charge)52、降解物阻遏(catabolite repression )53、严紧控制(stringent control )5
22、4、松弛控制(relaxed control)55、反义 RNA (antisense RNA)56、原癌基因(proto-oncogene )57、图位克隆( map-based cloning )58、亚克隆(subclone)59、基因克隆(gene clone)60、同尾酶(isocaudamer)61、转染(transfection):噬菌体常常可感染细菌并将其DNA注入细菌体内,也可引起细菌遗传性状的改变。通过感染方式将外来DNA引入宿主细胞,并导致宿主细胞遗传性状改变的过程称为转染(transfection)。转染是转化的一种特殊形式。62、双元载体(binary vector )63、蛋白质工程( protein engineering )64、转基因沉默(transgene silencing)65、同裂酶(isoschizomers)66、粘性末端(cohesive end)67、平末端(blunt end )68、Southern 杂交(Southern blotting )69、Western 杂交(Western blotting )70、 Northern 杂交(Northern blotting )71、基因组 DNA (
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