第4章 药物含量测定方法与验证

1、第四章 药物的含量测定方法主讲主讲: 朱金芳朱金芳药物的药物的含量含量指指药物中所含的药物中所含的主成分主成分的量，是的量，是评价药物质量的重要指标。评价药物质量的重要指标。定定义义基基础础目目标标基于化学或基于化学或物理学原理物理学原理的的含量测定含量测定药物的含量测定药物的含量测定基于生物学基于生物学原理的原理的效价效价测定测定本章的本章的目标目标含量测定含量测定生物检定法生物检定法，微生物检，微生物检定法，酶法定法，酶法药物的含量测定药物的含量测定三种三种分析分析方法方法特点特点特点特点特点特点适用于准确适用于准确度与精确度度与精确度要求较高的要求较高的样品测定样品测定容量分容量分析法析

2、法光谱分光谱分析法析法色谱分色谱分析法析法操作简单、结操作简单、结果准确，耐用果准确，耐用性高，但专属性高，但专属性差性差简便快速、灵简便快速、灵敏度高，有一敏度高，有一定的准确度，定的准确度，但专属性稍差但专属性稍差灵敏度与专属性灵敏度与专属性都高，有一定的都高，有一定的准确度，但结果准确度，但结果需要对照品需要对照品适用于灵敏适用于灵敏度要求较高，度要求较高，样本量较大样本量较大的分析项目的分析项目适用于专属适用于专属性和灵敏度性和灵敏度要求较高的要求较高的复杂样品复杂样品第一节第一节 定量分析方法的分类与特点定量分析方法的分类与特点一、容量一、容量分析法分析法定义定义亦称亦称特点特点适用

3、适用范围范围滴定法滴定法将已知浓度的滴定液（标准物质溶液），由滴定管滴加到将已知浓度的滴定液（标准物质溶液），由滴定管滴加到被测药物的溶液中，直至滴定液与被测药物反应完全（被测药物的溶液中，直至滴定液与被测药物反应完全（通通过过适当方法适当方法指示指示），然后根据滴定液消耗的浓度和被消耗），然后根据滴定液消耗的浓度和被消耗的体积，按化学计量关系式计算出被测药物的含量。的体积，按化学计量关系式计算出被测药物的含量。通过通过指示剂颜色指示剂颜色变化，或者电子变化，或者电子设备的电位或电设备的电位或电流突变来指示滴流突变来指示滴定终点定终点1、方法简便易行：所用仪器价廉易得，操、方法简便易行：所用仪

4、器价廉易得，操作简便快速作简便快速2、方法耐用性高：影响测定的试验条件与、方法耐用性高：影响测定的试验条件与环境因素环境因素少少3、测定结果准确：误差低于、测定结果准确：误差低于0.2%，满足准，满足准确度高确度高样品样品4、方法专属性差：对相近杂质干扰缺少选、方法专属性差：对相近杂质干扰缺少选择，适用于主成分含量较高的样品择，适用于主成分含量较高的样品分析分析广泛应用于广泛应用于化学原料化学原料的的测定，较少应用于药物测定，较少应用于药物制剂的制剂的测定。测定。容量分析法有容量分析法有关计算关计算滴定度滴定度：每1ml规定浓度的滴定液所相当的被测药物质量。中国药典用毫克（mg）表示。例如：用

5、例如：用碘量法测定维生素碘量法测定维生素C的的含量时，含量时，中国药典中国药典规定：每规定：每1ml碘滴定液（碘滴定液（0.05mol/L）相当）相当于于8.806mg的维生素的维生素C（C2H8O6）第一节第一节 定量分析方法的分类与特点定量分析方法的分类与特点dDcCbBaA被测药物被测药物 滴定液滴定液滴定度计算滴定度计算WAWBaMAbMB=滴定液反应的质量滴定液反应的质量被测药物反应的质量被测药物反应的质量被测药物的摩尔质量被测药物的摩尔质量滴定液的摩尔质量滴定液的摩尔质量第一节第一节 定量分析方法的分类与特点定量分析方法的分类与特点容量分析法容量分析法有关计算有关计算ABABBAM

6、banMbMWWABBMbaVm示例一 计算Vc的滴定度T碘量法测定Vc含量M(C6H6O6)=176.13，C(I2)=0.05mol/LHI2OHCIOHC6662686Mbam)ml/mg(TT =mbaM=0.0511176.13=8.806(mg/ml)Mb=0.05mol/L11MA=176.13示例二 异烟肼的滴定度溴酸钾法测定异烟肼含量M(C6H7N3O)=137.14，C溴酸钾溴酸钾=0.01667mol/LOH3KBr2N3NOHC3KBrO2ONHC3222563376Mbam)ml/mg(TT =mbaM=0.0166732137.14=3.429(mg/ml)ab%1

7、00(%)WTV含量含量计算方法直接滴定法直接滴定法间接滴定法间接滴定法在实际工作中，滴定液的浓度可能与药典规定的浓度并不一在实际工作中，滴定液的浓度可能与药典规定的浓度并不一致，所以应该进行校正致，所以应该进行校正规定摩尔浓度实际摩尔浓度F直接滴定法直接滴定法 规定摩尔浓度F实际摩尔浓度%100(%)WFTV含量直接读取直接读取药典规定药典规定自己标定自己标定取样量取样量直接滴定法直接滴定法的的含量含量计算方法计算方法第一节第一节 定量分析方法的分类与特点定量分析方法的分类与特点容量分析法容量分析法定义定义亦称亦称特点特点适用适用范围范围滴定法滴定法将已知浓度的滴定液（标准物质溶液），由滴定

8、管滴加到将已知浓度的滴定液（标准物质溶液），由滴定管滴加到被测药物的溶液中，直至滴定液与被测药物反应完全（被测药物的溶液中，直至滴定液与被测药物反应完全（通通过过适当方法适当方法指示指示），然后根据滴定液消耗的浓度和被消耗），然后根据滴定液消耗的浓度和被消耗的体积，按化学计量关系式计算出被测药物的含量。的体积，按化学计量关系式计算出被测药物的含量。通过通过指示剂颜色指示剂颜色变化，或者电子变化，或者电子设备的电位或电设备的电位或电流突变来指示滴流突变来指示滴定终点定终点1、方法简便易行：所用仪器价廉易得，操、方法简便易行：所用仪器价廉易得，操作简便快速作简便快速2、方法耐用性高：影响测定的试验

9、条件与、方法耐用性高：影响测定的试验条件与环境因素环境因素少少3、测定结果准确：误差低于、测定结果准确：误差低于0.2%，满足准，满足准确度高确度高样品样品4、方法专属性差：对相近杂质干扰缺少选、方法专属性差：对相近杂质干扰缺少选择，适用于主成分含量较高的样品择，适用于主成分含量较高的样品分析分析广泛应用于广泛应用于化学原料化学原料的的测定，较少应用于药物测定，较少应用于药物制剂的制剂的测定。测定。生成物生成物滴定法滴定法间接滴定法间接滴定法剩余剩余量量滴定法滴定法被测药物与化合物被测药物与化合物A作作用生成用生成 化合物化合物B，再用，再用滴定液滴定化合物滴定液滴定化合物B也称也称回滴法回滴

10、法，本法先加入定量过量滴定，本法先加入定量过量滴定液液A与药物作用，再用滴定液与药物作用，再用滴定液B与剩余与剩余的滴定液的滴定液A反应，然后再进行含量计算反应，然后再进行含量计算%100(%)WFTV含量Mbam)ml/mg(T先计算先计算T间接间接滴定法的滴定法的生成物滴定法生成物滴定法注意滴定度注意滴定度T的计算的计算正确求正确求a和和b再计算含量再计算含量示例三 葡萄糖酸锑钠的含量测定0.3g供试品供试品水水100ml盐酸盐酸15ml碘化钾试液碘化钾试液10ml密塞，振摇后暗处放置密塞，振摇后暗处放置10min碘量法碘量法2642322235OSI2OS2IISbI2SbSb5+2S2

11、O32-本法先用葡萄糖酸锑钠与碘离子反应生成碘，再用碘与硫代本法先用葡萄糖酸锑钠与碘离子反应生成碘，再用碘与硫代硫酸钠反应生成碘离子，相当于是用硫代硫酸钠反应生成碘离子，相当于是用硫代硫酸钠滴定硫酸钠滴定葡萄糖葡萄糖酸锑钠，因此要找出它们两者的量反应关系，也就是酸锑钠，因此要找出它们两者的量反应关系，也就是a和和b%100(%)WFTV含量)/(088. 676.121211 . 0)/(mlmgMbammlmgT请读取请读取请校正请校正%100)(%)WTFVFVABBAA含量间接滴定法的间接滴定法的剩余量滴定法剩余量滴定法也称回滴法也称回滴法，先，先加入定量过加入定量过量滴定液量滴定液A与

12、药物作用，再用与药物作用，再用滴定液滴定液B与剩余的滴定液与剩余的滴定液A反反应，然后再进行含量计算应，然后再进行含量计算计算的关键在于求出滴定液计算的关键在于求出滴定液A应用于药物反应的应用于药物反应的实际量实际量计算的关键在于求出滴定液计算的关键在于求出滴定液A应用于药物反应的应用于药物反应的实际量实际量间接滴定法间接滴定法的剩余的剩余量滴定法量滴定法常涉及化学反应、加热、常涉及化学反应、加热、分取等操作等步骤，使分取等操作等步骤，使测定误差显著增加测定误差显著增加空白试验校正空白试验校正没有药物存在时的滴定，方没有药物存在时的滴定，方法步骤与有药物存在时相同法步骤与有药物存在时相同计算公

13、式相应修正如下：计算公式相应修正如下：%100)(%)0WTFVVABSBB含量没有药物存在时，滴定液没有药物存在时，滴定液A全部与滴定液全部与滴定液B反应反应浓度校正作用浓度校正作用药物存在时，剩余滴定液药物存在时，剩余滴定液A全部与滴定液全部与滴定液B反应反应示例四 司可巴比妥钠的含量测定 取本品约取本品约0.1g，精密称定精密称定，置，置250ml碘瓶中，加水碘瓶中，加水10ml，振摇使溶解，振摇使溶解，精密加溴滴定液精密加溴滴定液( (0.05mol/L) ) 25ml，再加盐酸，再加盐酸5ml，立即密塞，并振摇，立即密塞，并振摇1min，在暗，在暗处放置处放置15min后，注意微开瓶

14、塞，加碘化钾试液后，注意微开瓶塞，加碘化钾试液10ml，立即密塞，摇匀后，用立即密塞，摇匀后，用硫代硫酸钠硫代硫酸钠滴定液滴定液( (0.1mol/L) )滴定，至终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消滴定，至终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定得的结果用空白试验校正。失，并将滴定得的结果用空白试验校正。本法用溴与司可巴比妥钠反应，再用硫代硫酸钠反滴定本法用溴与司可巴比妥钠反应，再用硫代硫酸钠反滴定溴，属反滴定法，并用空白试验校正溴，属反滴定法，并用空白试验校正,滴定液滴定液A为溴，为溴，B为硫代硫酸钠，含量计算只需先求溴滴定度，再求出硫为硫代硫酸钠，含量计算只需先求溴滴定度，再

15、求出硫代硫酸钠空白试验代硫酸钠空白试验V0体积与样品测定体积体积与样品测定体积Vs示例四 司可巴比妥钠的含量测定已知：已知：司可巴比妥钠司可巴比妥钠M=260.23;司可巴比妥钠与溴反应摩尔司可巴比妥钠与溴反应摩尔=1:1； W=0.1022 g； 硫代硫酸钠浓度校正因子硫代硫酸钠浓度校正因子=1.038 ； 供试品滴定供试品滴定Vs=15.73ml ;空白试验滴定空白试验滴定V0 =23.21ml;)/(01.1327.2601105. 0)/(mlmgMbammlmgT%100)(%)0WTFVVABSBB含量%100)(%)0WTFVVABSBB含量%100)(%)WTFVFVABBAA

16、含量间接滴定法间接滴定法的剩余的剩余量滴定法量滴定法本公式适用于本公式适用于空白校正情形空白校正情形见上例见上例本公式适用于没有本公式适用于没有做空白校正情形做空白校正情形见见下下例例示例五 剩余碘量法测定异烟肼含量 异烟肼在弱碱性溶液中，加定量过量的碘滴定液异烟肼在弱碱性溶液中，加定量过量的碘滴定液(0.05mol/L)氧化，反应完成后，酸化，剩余碘滴定液用硫代硫酸钠滴定液氧化，反应完成后，酸化，剩余碘滴定液用硫代硫酸钠滴定液(0.1mol/L)滴定滴定( (以淀粉为指示剂以淀粉为指示剂) )。NCONHNH2+2I2+5NaHCO3COOH+N2+ 4NaI+ 5CO2+4H2OI2 +

17、2Na2S2O3+ 2NaINa2S4O6100WT)V-F(V%(mg/ml)858. 614.134210.1T 12: 2322322222IOSNaOSNaIII2FI含量：异烟肼习题 非那西丁含量测定 精密称取本品精密称取本品0.3630g加稀盐酸回流加稀盐酸回流1小时后，放冷，小时后，放冷，用亚硝酸钠液用亚硝酸钠液（0.1010mol/L）滴定，用去滴定，用去20.00ml。每每1ml1ml亚硝酸钠液亚硝酸钠液（0.1mol/L）相当于相当于17.92mg的的C10H13O2N，请计算非那西丁的含量。，请计算非那西丁的含量。药典药典收载收载红外分光红外分光度法度法本章本章讲叙讲叙第

18、一节第一节 定量分析方法的分类与特点定量分析方法的分类与特点二二、光谱分析法光谱分析法火焰光度火焰光度法法紫外可见紫外可见分光度法分光度法荧光分析荧光分析法法原子吸收分原子吸收分光光度法光光度法紫外可见紫外可见分光度法分光度法荧光分析荧光分析法法EclTA1lg%11)100/(cmEAmlgc紫外可见分光度法紫外可见分光度法基于物质对紫外区基于物质对紫外区(200400nm)和可见光区和可见光区(400760nm)的单色光辐射的单色光辐射建立起来的光谱分析法建立起来的光谱分析法基基础础朗伯朗伯-比尔定律比尔定律紫外可见分光度法紫外可见分光度法特点特点本法紫外区须选用石英比色皿，比色本法紫外区

19、须选用石英比色皿，比色皿一般为皿一般为1cm，吸光度在，吸光度在0.30.7之之间为宜，选用间为宜，选用最大最大吸收光波长。吸收光波长。1、简便易行：使用、简便易行：使用的仪器价格比较低廉，的仪器价格比较低廉，操作简单，易于普及操作简单，易于普及2、灵敏度高：本法灵敏度可达、灵敏度高：本法灵敏度可达10-710-4 g/ml，适用于低浓度试样分析，适用于低浓度试样分析3、准确度较高、准确度较高：误差：误差在在2%5%之间，适用之间，适用于对测定结果的准确度要求较高的样品于对测定结果的准确度要求较高的样品4、专属性较差：本法通常不受一般杂质的、专属性较差：本法通常不受一般杂质的干扰，但对结构相近

20、的有关物质缺乏选择性。干扰，但对结构相近的有关物质缺乏选择性。较少应用于原料药的含较少应用于原料药的含量测定，可用于量测定，可用于制剂的制剂的含量测定含量测定，更多的应用，更多的应用于药物于药物制剂制剂的定量检查的定量检查适用适用范围范围有机溶剂通常均具有很强的末端吸收。以空气为空白（空白光路中不置任何物质）测定溶剂的吸光度溶剂的吸光度在220240nm范围内不超过0.4，在,41250nm范围内不超过0.2，在251300nm范围内不超过0.1，在300nm以上不超过0.05。%1cm%1cm%1cm%1cm紫外可见分光度法紫外可见分光度法对溶剂的要求对溶剂的要求 紫外可见分光度紫外可见分光

21、度法法4种方法种方法含量测定方法含量测定方法;,;对应吸光度对照品溶液浓度供试品溶液浓度RxRxRRxxAACCACAC紫外可见分光度法含量测定方法紫外可见分光度法含量测定方法对照品比较法对照品比较法分别配制供试品溶液和对照品溶液分别配制供试品溶液和对照品溶液,对照品对照品溶液中溶液中所含被测药物的量应为供试品溶液中被测成分规定所含被测药物的量应为供试品溶液中被测成分规定量的量的10010%,所用溶剂量两者相同所用溶剂量两者相同,在规定的波长在规定的波长下测定下测定吸光度吸光度。按下按下式计算结果式计算结果;:;:;:%100%100(%):供试品的量稀释体积供试品浓度称样量测得量含量对原料药

22、WDCWDCxx紫外可见分光度法含量测定方法紫外可见分光度法含量测定方法对照品比较法对照品比较法;:);(:%100(%):制剂的标示量装量制剂平均重量标示量对于固体制剂BWBWWDCx1.317=M 3H2O/M=375.85/285.34示例示例1：取盐酸吗啡片：取盐酸吗啡片20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于盐酸吗啡盐酸吗啡10mg)置置100ml量瓶中，加水溶解至刻度，摇匀，滤过，精密量量瓶中，加水溶解至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液取续滤液15ml，置，置50ml量瓶中，加量瓶中，加0.2mol/L氢氧化钠氢氧化钠25ml，用水稀

23、释至，用水稀释至刻度，摇匀，刻度，摇匀，UV法测定。另取吗啡对照品适量，精密称定，用法测定。另取吗啡对照品适量，精密称定，用0.2mol/L氢氧化钠稀释至每氢氧化钠稀释至每ml中约含中约含20g的溶液，同法测定。计算，结果乘以的溶液，同法测定。计算，结果乘以1.317，即得，即得C17H19NO3HCl3H2O的的含量。含量。(规格规格5mg)A样20/1000100 50/15 1.317 片重 A对称样量5100%标示量（%）=紫外可见分光度法含量测定方法紫外可见分光度法含量测定方法吸收系数法吸收系数法%1001001000(%)%11BVEVDAcm标示量%1001001000(%)%1

24、1BWEWDAcm标示量g/mlmg转化转化单位单位100EAC%1cm1xxE值的大小反映了药物对某一波长光的吸收能力，也反映了测定反应的灵敏度。采用E法测定含量时，一般取三位有效数字表示，E值小于100100的一般不宜采用。100EAC%1cm1xx双波长分光光度法（复方磺胺类药物的测定）三点校正法（维生素A的）解线性方程组法等使用时应注意，当在吸收曲线的陡然上升或下降的部位测定吸光度时，波长的微小变化可对测定结果造成显著影响。 紫外可见分光度法含量测定方法紫外可见分光度法含量测定方法计算分光光度法计算分光光度法在药物分析中应用的比色法：酸性染料比色法（含氮碱性药物如：硫酸阿托品片、氢溴酸

25、东莨菪碱片的测定）四氮唑比色法、异烟肼比色法蛋白质的双缩脲反应（硫酸软骨素的测定）总黄酮、总生物碱的测定（中药制剂） 紫外可见分光度法含量测定方法紫外可见分光度法含量测定方法比色法比色法药典药典收载收载红外分光红外分光度法度法本章本章讲叙讲叙第一节第一节 定量分析方法的分类与特点定量分析方法的分类与特点二二、光谱分析法光谱分析法火焰光度火焰光度法法紫外可见紫外可见分光度法分光度法荧光分析荧光分析法法原子吸收分原子吸收分光光度法光光度法紫外可见紫外可见分光度法分光度法荧光分析荧光分析法法特点： 灵敏度高：可达10-1010-12g/ml 荧光自熄灭：要求低浓度下测定 易受干扰：须做空白试验 荧光

26、弱的药物可衍生化后测定rbrrxbxxCRRRRC荧光分析法荧光分析法荧光法测定的是物质分子的发射光谱。在一定条件下，物质的浓度与其荧光（也称发射光）强度成正比关系。荧光分析中，药物的浓度与相应的荧光读数之间的线性范围较窄，故(RxRxb)/(RrRrb)应在0.50.52 2，如超出此范围，应调节溶液浓度后再测定。第一节第一节 定量分析方法的分类与特点定量分析方法的分类与特点三、三、色谱分析色谱分析法法HPLC 高灵敏度：最低检出浓度可达10-1510-12g/ml 高专属性 高效能与高速度特特点点HPLCNP-HPLC Normal phase high performance liqui

27、d chromatography据固定相据固定相与与流流动相极性动相极性RP-HPLC Reversed high performance liquid chromatography HPLC色谱柱：色谱柱：十八烷基硅烷键十八烷基硅烷键合硅胶、合硅胶、C8柱、氨基柱、柱、氨基柱、氰基柱氰基柱等。等。流动相：流动相：甲醇甲醇-水（或缓冲水（或缓冲盐）、乙腈盐）、乙腈-水（或缓冲水（或缓冲盐）、四氢呋喃盐）、四氢呋喃-水（或缓水（或缓冲冲盐）。盐）。洗脱力强弱依次为洗脱力强弱依次为四氢呋四氢呋喃喃乙腈乙腈甲醇甲醇水水 色谱柱色谱柱：硅胶硅胶柱柱流动相：流动相：正正己烷己烷-异丙醇；异丙醇；正己烷正

28、己烷-乙醇；正己烷乙醇；正己烷-二二氯甲烷氯甲烷等。等。洗脱力强弱依次为洗脱力强弱依次为乙醇乙醇 异丙醇异丙醇二二氯氯甲烷甲烷正正己己烷烷色谱柱与流动相色谱柱与流动相RP-HPLCNP-HPLC化学键合固定相适用pH2 8的流动相；C18 链在水相环境中不易保持伸展状态，故流动相中有机溶剂有机溶剂的比例应不低于不低于5%，否则将造成色谱系统不稳定。 选择性检测器紫外包括二极管阵列（DAD）、荧光、电化学响应值与待测液浓度有关，还与化合物结构有关通用型检测器示差折光、蒸发光散射检测器对所有的化合物均有响应更专属、更灵敏的检测器质谱HPLC检测器检测器柱效分离度拖尾因子重复性 取对照溶液，连续进样

29、5次，测得峰面积相对标准差RSD应小于2.0%105. 02dWTh)(70. 1)(22/,22/, 112hhRRWWttRWWttRRR21)(212HPLC系统适用性试验系统适用性试验内标法 RRssC/AC/Af 校正因子HPLC测定法测定法SSxxC/AAf)C(含量外标法 第二节第二节 定量分析样品的前处理方法定量分析样品的前处理方法不经有机破坏经有机破坏直接测定配位滴定法氧化还原滴定法水解后测定酸水解碱水解经还原分解后测定湿法破坏凯氏定氮法干法破坏高温灼烧法氧瓶燃烧法 葡萄糖酸钙葡萄糖酸钙 EDTAEDTA配位滴定配位滴定 富马酸亚铁富马酸亚铁 邻二氮菲邻二氮菲- -硫酸铈滴定

30、硫酸铈滴定 葡萄酸锑钠葡萄酸锑钠 间接碘量法间接碘量法适用范围：金属原子不直接与碳原子相连的含金属的有机药物。不经有机不经有机破坏的前处理方法破坏的前处理方法直接测定法直接测定法1 1、酸水解法酸水解法十一烯酸氯化锌十一烯酸锌稀盐酸EDTA配位滴定经水解后测定法经水解后测定法2 2、碱水解法碱水解法344332334)(NONHAgSCNSCNNHAgNO NaNOAgClAgNONaCl O2HHCOONa3NaClCO)(CHNaOHOHCHCCCl3223 回回流流三氯叔丁醇银量法返滴定适用范围：含卤素有机药物结构中卤素原子结合不牢固的药物。经水解后测定法经水解后测定法适用范围：碘原子直

31、接与芳环连接的含碘有机化合物。经还原分解后测定法经还原分解后测定法适用范围：含氮、硫、硫柳汞、氯化钠的生物制品，含氮有机药物分析的前处理和生物制品中金属元素测定时生物基质的去除。u H2SO4-HNO3u H2SO4-HClO4u H2SO4-SO42-u HNO3-KMnO4分解剂/消化剂辅助分解剂凯氏定氮法测定含有氨基和酰胺结测定含有氨基和酰胺结构的构的药物药物经经有机有机破坏的前处理方法破坏的前处理方法湿法破坏湿法破坏 将含氮药物与硫酸在凯氏烧瓶中共热，药物分子将含氮药物与硫酸在凯氏烧瓶中共热，药物分子中有机结构被中有机结构被“消化消化”成成COCO2 2和和H H2 2O O，有机结合

32、的氮转，有机结合的氮转化为无机氮，与过量的硫酸结合为硫酸氢铵和硫酸铵，化为无机氮，与过量的硫酸结合为硫酸氢铵和硫酸铵，经碱化经碱化后后释放出氨气，随水蒸气馏出，用硼酸溶液或释放出氨气，随水蒸气馏出，用硼酸溶液或定量的酸滴定液吸收后，再用酸或碱滴定液滴定。定量的酸滴定液吸收后，再用酸或碱滴定液滴定。n 常量法含氮量 2530mgn 半微量法含氮量 1.02.0mg凯氏定氮法原理凯氏烧瓶K2SO4( (提高消解温度提高消解温度) )CuSO4( (加快消解速度加快消解速度) )硫酸硫酸碱液碱液硼酸硼酸( (吸收液吸收液) )甲基红甲基红- -溴甲酚绿指示剂溴甲酚绿指示剂硫酸滴定空白校正先用强先用强

33、酸水解酸水解再用含碱硫代硫再用含碱硫代硫酸钠中和酸钠中和最后用碱释放出氨最后用碱释放出氨气气 ，并蒸馏，并蒸馏出来出来1、高温高温灼烧法灼烧法用于含卤素、含磷药物和药物中砷盐的检查。常加入无水碳酸钠、硝酸镁、氢氧化钙、氧化锌等辅助灰化。2、氧瓶燃烧法氧瓶燃烧法 系系指将含有待测元素的有机药物置于充满氧气的密闭的密闭指将含有待测元素的有机药物置于充满氧气的密闭的密闭的燃烧瓶中充分燃烧，使有机结构部分彻底分解为的燃烧瓶中充分燃烧，使有机结构部分彻底分解为COCO2 2和和H H2 2O O，待测元素根据电负性的不同转化为不同价态的氧化物，被吸待测元素根据电负性的不同转化为不同价态的氧化物，被吸收于

34、适当的吸收液中，再根据其性质和存在方式选择方法进收于适当的吸收液中，再根据其性质和存在方式选择方法进行分析。行分析。干法破坏干法破坏燃烧时待测物转化成不同价态燃烧时待测物转化成不同价态的无机物以供测定的无机物以供测定 滤纸包滤纸包装样品装样品第三节第三节 药品分析方法的验证药品分析方法的验证中国药典附录：药物质量研究指导原则目的：证明证明所采用的分析方法适合于相应的检测要求所采用的分析方法适合于相应的检测要求需验证的项目：鉴别鉴别试验，杂质定量或限度检查，原试验，杂质定量或限度检查，原料药或制剂中有效成分含量测定，以及制剂中其他成分的测料药或制剂中有效成分含量测定，以及制剂中其他成分的测定。药物溶出度、释放