牛乳及乳制品中亚硝酸盐快速定性检测方法

1、亚硝酸盐常作为防腐剂被添加到牛乳中, 抑制微生物的繁 殖, 由亚硝酸盐引起食物中毒的机率较高, 食入 0.30.5克的亚 硝酸盐即可引起中毒甚至死亡, 所以亚硝酸盐常为乳及乳制品 常规的检测项目, 其检测方法也各式各异, 其中定性检测方法作 为一种快速的监控手段被广泛应用。基于日常检测经验总结, 发现在亚硝酸定性检测过程中如 果样品中有亚硝酸盐的存在, 可以根据样品与显色剂反应 2-10min 内观察颜色的变化作为牛奶亚硝酸盐的判定方法, 依据蒙 牛乳业亚硝酸盐定性检测方法及 GB5009.33-2010第三法, 验证 了 0.0mg/L(kg 、 0.1mg/L(kg 、 0.2mg/L(k

2、g 、 0.4mg/L(kg 4个浓 度点不同乳制品的定性检测情况, 根据不同时间观察样品颜色 的变化确定最佳观测时间, 并对检出限进行验证规定。1方法原理、 材料与实验1.1方法原理亚硝酸盐在酸性条件下与对氨基苯磺酸重氮化后再与 -萘 胺偶合成紫红色, 颜色深浅与亚硝酸盐含量多少相关。1.2材料1.2.1显色剂准确称取 0.1g -萘酚, 0.2g -萘胺, 0.6g 无水对氨基苯磺 酸, 先加入 200mL 煮沸冷却的蒸馏水溶解, 溶解后再加入 200 mL 冰乙酸, 充分混匀配制好后置 2-8 中保存; 实际操作过程中 可以先将 0.1g -萘酚, 0.2g -萘胺用 200mL 冰乙酸

3、溶解, 0.6g 无水对氨基苯磺酸用 200mL 蒸馏水溶解 (可以加热助溶 , 然后 将上述两种溶液混合后使用。1.2.2材料18×180cm 试管、 2mL 刻度吸管、 1mL 刻度吸管。1.3试样处理生鲜牛乳及无色液体乳制品直接取样检测即可;发酵乳:取适量样品置于 50mL 离心管中, 在高速离心机 4000r/min离心 30min (或高速冷冻离心机 10000r/min离心 15min ;乳粉:配制成 12%复原乳后进行检测;备注:如样品为粉色或红色应使用活性炭脱色处理后检测。1.4检测2mL 样品 +1mL 显色剂 混匀 2分钟后观察。1.5实验1.5.1实验方案分别取

4、含有亚硝酸盐浓度为 0.0mg/kg、 0.1mg/kg、 0.2mg/kg、 0.4mg/kg浓度的样品 2mL 加入到试管中, 加入 1mL 显示剂混匀 后, 分别在 1min 、 2min 、 3min 、 4min 、 5min 、 10min 进行观察样品颜 色的变化, 根据不同时间观察样品颜色的变化确定最佳观测时 间及检出限。1.5.2实验数据1.5.2.1液体乳制品样品及原料乳加标试验现象分别取亚硝酸盐含量为 0.0mg/kg、 0.1mg/kg、 0.2mg/kg、 0.4 mg/kg浓度的样品 2mL , 加入 1mL 显示剂混匀后, 平行实验检测 3组。实验结果表明:亚硝酸

5、盐含量为 0.0mg/kg样品颜色呈乳白 色 (原色不变 、 0.1mg/kg、 0.2mg/kg、 0.4mg/kg浓度的颜色在 1-10min 内变为微粉色、 淡粉色、 粉色 (见图 1 , 并且在 2min 后颜 色趋于稳定, 10min 内颜色无变化, 颜色基本稳定。所以该实验 可以确定检出限为 0.1mg/kg, 结果判定依次为阴性、 微量 (0.1 mg/kg-0.2mg/kg 、 中量 (0.2mg/kg-0.4mg/kg 、 大量 (0.4mg/kg及以上 , 如果亚硝酸含量再大, 颜色会逐步加深。1.5.2.2定性阳性样品与国标验证对比实验为了验证定性方法检测的准确性, 与

6、GB5009.33-2010第三 法进行结果比对 (表 1 , 通过数据可以看出, 原奶定性检测为微 量时, 定量结果均低于检出限 0.2mg/kg, 如果采用四舍五入估测 定量法结果, 均为 0.1mg/kg左右, 可以说明定性法的亚硝酸盐检2013年 2月轻工科技LIGHT INDUSTRY SCIENCE AND TECHNOLOGY牛乳及乳制品中亚硝酸盐快速定性检测方法 杜 晓 旭 , 徐 艳 伟 , 康 俊 巍 , 张 冬 , 李 慧 娟 , 赵 刚 (蒙牛乳业 (察北 有限公司, 河北 张家口 076481【 摘 要 】 在蒙牛乳业现行的 亚硝酸盐定性检测 方法的基础上, 研究了原

7、料乳、 乳粉及液体奶产品快速定性检测的适用性, 规范了检测注意细节及结果判定, 并对定量检测方法进行结果对比, 得出一定量的样品与显色剂充分混合后, 在 2-10min 内观察颜色 变化情况, 判定牛奶中亚硝酸盐的含量情况, 根据颜色的不同可判定为无、 微量、 中量、 大量, 方法的检出限为 0.1mg/kg, 高于乳及乳 制品中亚硝酸盐与硝酸盐的定量检测方法检出限 0.2mg/kg。此方法具有操作简单, 耗时短, 结果灵敏准确, 适用于乳品企业进行原 料乳、 乳粉及液体奶产品中亚硝酸盐的快速定性检测。【 关键词 】 牛乳及乳制品; 亚硝酸盐; 定性; 结果判定【 中图分类号 】 TS252【

8、 文献识别码 】 A 【 文章编号 】 2095-3518(2013 02-05-02【 作者简介 】 杜晓旭 (1984- , 女, 内蒙古呼和浩特人, 检验分析员, 从事食品检验分析工作。 5出限应该严于国标方法给定的检出限, 证明了此方法的检出限 可以定为 0.1mg/kg。表 1定性阳性样品与国标对比数据编号 1 2 3 4 5 6 定性实验微量微量微量微量微量微量国标实验0.0590.0740.0470.0600.0980.091结果报出<0.2mg/kg<0.2mg/kg<0.2mg/kg<0.2mg/kg<0.2mg/kg<0.2mg/kg编号

9、789101112定性实验微量微量微量微量微量微量国标实验0.0690.0940.0950.0970.0650.084结果报出 <0.2mg/kg <0.2mg/kg <0.2mg/kg <0.2mg/kg <0.2mg/kg <0.2mg/kg1.6注意事项(1 显色剂的配置可加热助溶, 配成的溶液如为粉色则需重 新配制。(2 本方法适用于生鲜牛乳、 发酵乳、 灭菌乳、 调制乳、 巴氏 杀菌乳、 含乳饮料亚硝酸盐的快速初筛检测, 不适用于样品、 乳 清液本身显粉色或红色的样品的检测, 如需要检测需要脱色处 理。(3 初次使用本方法时最好自行制作阳性标准色,

10、 结果判定 时, 应与标准比色卡进行对比。(4 本方法检测发酵乳、 灭菌乳、 调制乳、 巴氏杀菌乳、 乳粉 亚硝酸盐定性为阳性时, 需要使用仲裁方法进行检测, 出具定量 检测结果。 2结果与讨论2.1实验总结通过以上试验及数据表明, 样品中如有亚硝酸盐的存在, 其 颜色在 10min 内就不会褪色 (阳性样品有加深现象 , 所以可以 将 2-10min 作为结果判定时间; 检测乳制品时如果对检测结果 有疑意时可以对有颜色发生变化的样品重新验证; 另该方法在 添加量为 0.1mg/kg, 样品也会显示微粉色, 并且与定量法对比 中, 使用定性法检测阳性的样品, 定量法检测多数低于 0.1mg/

11、kg , 所以该方法也能检出亚硝酸盐含量在 0.1mg/kg左右的样品, 该方法的检出限为 0.1mg/kg。2.2结果判定样品与显色剂充分混匀后, 在 210min 内观察, 未发生颜色 变化的判定亚硝酸盐无, 当样品颜色变为微粉色, 判定亚硝酸盐 含量为微量; 颜色变为淡粉色, 判定亚硝酸盐含量为中量; 样品 颜色变为粉色, 判定亚硝酸盐含量为大量, 并且随着亚硝酸盐含 量增大颜色逐步加深。参考文献1GB5009.33-2010食品中亚硝酸盐检测 S.2010.2王丹慧 , 李梅 , 刘卫星 . 亚硝酸盐快速检验方法研究 P.2008-10-10. 3洪祥奇 . 食品中亚硝酸盐的定性分析方

12、法 J.中国卫生检验杂志 ,1997, (6:155.原因:两侧振动电机偏重块调正不一致。处理方法:按产品使用说明书调正。5.5.5磨粉机(1 振动、 声音异常原因:齿楔带和窄 V 带调正不当, 快慢辊不平行, 磨辊径向 跳动超差, 磨口轧距太小, 磨辊轴承安装不当, 轧距吸风道不畅。 处理方法:按要求正确调整, 调整平行度, 更换磨辊, 调整轧 距, 重新安装调整, 清理吸风量。(2 研磨效果不好原因:喂料不均匀, 快慢辊不平行, 快慢辊两端轧距不一致, 磨辊齿磨损。处理方法:调整喂料辊, 使其能够均匀喂料, 调整快慢辊两 端轧距, 使其一致, 必要时可能塞尺, 磨辊重新拉丝。(3 气压控制系统回路无动作, 动作缓慢、 不灵敏原因及处理方法:详见设备使用说明书。5.5.6高方筛(1 胚中含料太多原因:来料太多, 筛网堵塞。处理方法:调整来料量, 清理筛网。(2 糁中含胚过多原因:筛网破损, 磨粉机将部分胚芽研磨碎。处理方法:更换筛网, 调整磨粉机轧距。5.5.7其他情况(1 设备故障停机或突然断电停机后需将设备内的物料清 理干净, 防止因带料启动对设备造成损坏。(2 物料中含有铁质杂质。